大肠杆菌O157:H7对消毒剂抗力与质粒pO157关系的研究

用高温-SDS法消除大肠杆菌O157:H7的质粒pO157,并将质粒pO157转化到大肠杆菌JM109,对比质粒pO157消除和转化前后试验菌对4种消毒剂的抵抗力。结果,质粒pO157消除后,试验菌对季铵盐的抵抗力有明显降低,对碘伏的抵抗力有明显的增强,对二氯异氰尿酸钠、醋酸氯己定的抵抗力无变化;将pO157转化到大肠杆菌JM109后,阳性转化菌对4种消毒剂的抵抗力均有不同程度增强,其中对季铵盐的抵抗力增加近60倍。结果提示,质粒pO157上可能带有抵抗季铵盐的基因而未携带抗碘伏的基因;消除质粒pO157后的试验菌对碘伏的抗性增加却说明pO157与试验菌对碘伏的抵抗力有间接关系。     

大肠杆菌O157:H7对季铵盐连续消毒的抵抗力变化及其与pO157关系的研究

用季铵盐连续消毒处理6株大肠杆菌O157:H7 10代培养物,观察处理后试验菌对该消毒剂抵抗力的变化及其与质粒的关系。结果表明,连续消毒处理10代后,试验菌对季铵盐的抵抗力增加;试验菌的质粒图谱无明显变化,质粒pO157的ClaI酶切图谱与连续消毒前不同;消除连续消毒前、后试验菌的质粒后,试验菌对季铵盐的抵抗力降低。结果提示,连续消毒会使试验菌对季铵盐的抵抗力增加,抵抗力增加的原因可能与质粒pO157有关。     

连续消毒中大肠杆菌O157:H7对消毒剂抗力变化与DNA关系的研究

为了解50代连续消毒中大肠杆菌O157:H7对4种消毒剂抗力的变化以及抗力与染色体DNA的关系,用4种消毒剂连续消毒大肠杆菌O157:H750代,用XbaⅠ酶切试验菌染色体DNA,对比消毒前后试验菌对4种消毒剂的抗力及染色体DNA的变化。结果,连续消毒50代后,试验菌对二氯异氰尿酸钠、碘伏、季铵盐的抗力增加,细菌染色体DNAXbaⅠPFGE酶切图谱均发生一定的改变;试验菌对洗必泰的抗力不变,细菌染色体DNAXbaⅠPFGE酶切图谱不变。结论,细菌染色体上携带有抵抗二氯异氰尿酸钠、碘伏、季铵盐的抗力的基因,连续消毒会使试验菌对此3种消毒剂的抗力增加,抗力增加的原因可能与细菌染色体DNA结构的改变相关。     

我国大肠埃希菌O157:H7分离株大质粒pO157变异性研究

目的 分析我国分离的大肠埃希菌O157:H7菌株中大质粒pO157的变异情况。 方法 采用限制性内切酶酶切法分析质粒酶切图谱,而后采用嵌套引物进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增,并用Southern blot进行验证,最后测序。 结果 根据酶切图谱将60株大肠埃希菌O157:H7分为A~E 5个群,而进一步研究表明造成A群与C群HindⅢ 酶切图谱的不同是由C群中的一个小质粒造成的。PCR结果显示A群与C群中的引物对5和25,B群中的引物对25得到的PCR条带与pO157出发菌株不同,其他均相同。测序结果显示造成引物对25在A~C群中与致病性大质粒pO157不同的原因是IS1310序列的插入。 结论 我国大肠埃希菌O157:H7分离株致病性大质粒pO157相对保守,部分菌株中存在插入序列如IS1310,这也是造成我国大肠埃希菌O157:H7 pO157质粒变异的主要原因。     

医院常用消毒剂对肠出血性大肠杆菌O157:H7杀灭效果试验观察

为了解医院常用消毒剂对肠出血性大肠杆菌O157:H7的杀灭效果及抗力变化,采用悬液定量杀菌试验进行了实验观察。结果,医院常用10种消毒剂在产品说明书规定的使用浓度下,对肠出血性大肠杆菌O157:H7杀灭率达到99.99%以上所需最短时间为5 m in,每次试验都可以达到合格要求;作用2 m in,则有部分试验杀灭率达不到99.9%。结论,10种常用消毒剂在常用浓度下对大肠杆菌O157:H7作用5 m in均可达到有效消毒效果,未发生明显抗力变化。     

肠出血性大肠埃希菌O157 ∶ H7质粒 pO157 上毒力因子的研究进展

肠出血性大肠埃希菌O157 ∶ H7是一种重要的致病菌,可以引起不同程度人类疾病。目前已知的O157 ∶ H7的致病因子有3个,志贺毒素、粘附抹平效应毒力岛和特异性质粒pO157。其中pO157在致病过程中的作用并不十分清楚。本文结合近年来的研究进展,介绍了pO157上与细菌致病性有关的毒力因子。     

espP基因在O157∶H7大肠埃希菌分离株中的分布

目的了解espP基因在中国部分地区产志贺毒素O157大肠埃希菌分离株中的分布情况及特点。方法根据O157∶H7的溶血素基因hlyA和细胞外分泌蛋白基因espP设计特异性引物,对113株O157大肠埃希菌分离株进行PCR检测。结果 hlyA的阳性率为99.1%,espP的阳性率为72.5%,且只在有大质粒pO157的菌株中检测到espP。结论 espP存在于携带pO157大质粒的O157∶H7大肠埃希菌中,其分布与菌株来源、志贺毒素携带情况等没有相关性。     

三种消毒剂对ESBL阳性和阴性大肠杆菌杀灭效果的观察

产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是医院内常见耐药菌株,为了解其对常用消毒剂的抗力,采用悬液定量试验对戊二醛、碘伏、含氯消毒剂(921消毒剂)杀灭ESBL阳性和阴性大肠杆菌的效果进行了比较。结果,用含有效碘500mg/L碘伏作用3min对ESBL阴性大肠杆菌杀灭率为99.95％,含3000mg/L戊二醛和1:100倍稀释的921消毒剂作用3min对ESBL阴性大肠杆菌杀灭率达100％;用同样含量和作用时间,三种消毒剂对ESBL阳性大肠杆菌杀灭率依次分别为82.75％、100％和91.46％;但将作用时间延长至5min,上述剂量的三种消毒剂对两种菌杀灭率均可达到100％,对表面擦拭3遍消毒亦得到同样的效果。结果说明,ESSL阳性大肠杆菌对碘伏和含氯消毒剂抗力比ESBL阴性者强;二者对戊二醛抗力基本一致。     

灭菌灵消毒剂性能的试验观察

灭菌灵消毒剂为含二氯异氰尿酸钠、三聚磷酸钠的含氯复方消毒剂。悬液定量杀菌试验表明 ,对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌用其 10 0mg/L有效氯溶液 ,对枯草杆菌黑色变种芽胞用其 10 0 0mg/L有效氯溶液 ,作用 15min的杀灭率均达 10 0 %。以其 50mg/L有效氯溶液擦实验台面后作用 10min ,对自然菌灭除率为 99 4 2 %。其 2 50mg/L有效氯溶液浸泡染HBsAg不锈钢片 2 0min ,可将HBsAg抗原性破坏。该消毒剂放置 54℃ 14d ,有效氯下降率为 4 51%。其溶液对小白鼠经口LD50 为 3 6 9g/kg     

过滤冲洗法去除残余消毒剂效果的研究

目的研究过滤冲洗法在评价化学消毒剂杀菌效果的试验中去除残余消毒剂的效果。方法采用悬液定量杀菌试验方法对过滤冲洗试验法与化学中和法进行了平行比较试验。结果过滤冲洗法和化学中和法均能有效去除有效氯为250mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的残留作用,也可有效去除有效氯为400mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液对白色念珠菌的残留作用。采用两种鉴定方法,以含有效氯250mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液,对悬液中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌作用5min,杀灭对数值均>5.00;有效氯400mg/L,对白色念珠菌作用5min,杀灭对数值>4.00;且两组试验结果经统计学处理,结果无显著差异。结论采用过滤冲洗试验法鉴定消毒剂杀菌效果是一种较快速、准确的评价化学消毒剂杀菌效果的方法。     

乙型肝炎表面抗原包被聚苯乙烯珠消毒试验法的研究

以二氯异氰尿酸钠等７种消毒剂对聚苯乙烯包被珠上的ＨＢｓＡｇ抗力进行研究。结果表明，包被珠上ＨＢｓＡｇ量与所用ＨＢｓＡｇ悬液浓度相关；ＨＢｓＡｇ悬液浓度以２μｇ／ｍｌ为宜，其试验结果与１０μｇ／ｍｌＨＢｓＡｇ悬液消毒试验法相同。ＨＢｓＡｇ包被牢固性强，方法简便，可用冲洗法去除残留消毒剂。     

四种消毒剂对仙台病毒的灭活效果

目的观察4种化学消毒剂对仙台病毒的灭活效果。方法采用Klein-Defors悬浮灭活与感染试验方法进行了实验室研究。结果用含有效碘30mg/L的碘伏消毒液,2000mg/L过氧乙酸溶液,含有效氯30mg/L的复方二氯异氰尿酸钠以及含1000mg/L苯扎溴铵消毒液对悬液内仙台病毒作用5min以上,杀灭率均可达到100%。结论上述4种常用化学消毒剂在较低浓度条件下,可以快速灭活仙台病毒,为使用化学消毒剂对环境中污染仙台病毒进行消毒提供了参考依据。     

四种常用消毒剂对猪副粘病毒的灭活效果研究

目的观察4种化学消毒剂对猪副粘病毒的灭活效果,以便为畜牧业消毒提供参考。方法采用悬液定量杀菌试验与鸡胚感染检测方法对含碘、含氯、过氧乙酸和苯扎溴铵等4种消毒剂灭活猪副粘病毒的效果进行了实验室研究。结果以含有效碘30 mg/L的碘伏溶液,2000 mg/L过氧乙酸溶液,含有效氯25 mg/L的复方二氯异氰尿酸钠溶液以及含1000 mg/L苯扎溴铵消毒液对悬液内猪副粘病毒作用5 min以上,均可达到完全灭活。结论本试验4种常用化学消毒剂在较低浓度条件下,可以快速灭活猪副粘病毒,可用于对环境消毒和防止猪副粘病毒的传播。     

五株金黄色葡萄球菌对消毒剂及热抗力的比较

本试验采用试管法测定了5株金黄色葡萄球菌对几种化学消毒剂的抗力和热抗力。结果,醋酸氯己定、碘伏和乙醇对临床分离的4株金黄色葡萄球菌和消毒试验标准菌株的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)基本一致。5株试验菌对热抗力也基本相同。但标准株对碘伏最小杀菌浓度略高于临床分离株。     

有机物对化学消毒效果的影响

试验测定血清等有机物对化学消毒剂的消耗率,发现血清对消毒剂有效成分消耗严重,碱性条件更使消耗量有所增加。磷酸钠可增强卤素消毒剂在有机物干扰下的杀菌作用。增加消毒剂用量,在有机物存在下亦可提高消毒效果。测定消毒剂有效成分余留浓度有可能作为判断消毒效果的间接指标。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对消毒剂抗性的观察

目的了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对消毒剂的抗力水平,以指导医院消毒。方法采用悬液定量杀菌试验方法进行检测,同时与金黄色葡萄球菌标准株作平行比较。结果20株MRSA对戊二醛、碘伏、乙醇等三种常用消毒剂的抗性率分别为15%、15%、5%,对上述三种消毒剂中一种以上具有抗性的抗性率为25%,多重抗性率为10%。结论MRSA存在抗消毒剂菌株,提示在医院消毒工作中要合理使用消毒剂,防止MRSA感染的传播和流行。     

用于阴道黏膜消毒产品的毒理学安全性评价

目的了解用于阴道黏膜消毒产品的毒性,以评价其使用安全性。方法采用动物试验方法,对41种用于黏膜消毒产品的毒性进行了评价。结果主要成分为碘伏类、醋酸洗必泰、季铵盐类、中草药和其他类的41个消毒产品,在急性经口毒性试验观察期内,均未发现试验动物有明显中毒反应,试验动物解剖未发现组织和脏器有异常病变。所试验的41种用于黏膜消毒的产品小鼠急性经口LD50均>5000 mg/kg体重,属实际无毒级。阴道黏膜刺激试验,碘伏类产品通过率为86.7%;醋酸氯己定类产品通过率为72.7%;季铵盐类产品通过率为83.3%;含中草药的产品通过率为80.0%;其他类产品通过率为75.0%。结论大部分用于阴道黏膜的产品属实际无毒级,较为安全。