肺癌细胞中RASSF4的高表达抑制肺癌细胞的增殖和侵袭能力

目的:探讨RASSF4在肺癌中的增殖和侵袭能力。方法:向肺癌细胞系H460和A549中导入RASSF4的cDNA质粒后,通过MTT、克隆形成实验、基质胶侵袭实验、流式细胞术等方法检测肺癌细胞的生长和侵袭能力。结果:RASSF4能够通过下调MMP2、MMP9和cyclinD1的表达,抑制肺癌细胞的侵袭、增殖及克隆形成能力。结论:RASSF4在肺癌细胞中通过抑制细胞生长及侵袭能力发挥重要的肿瘤抑制功能。     

HMGB1/TLR4通路参与Fibulin-5对肺癌细胞增殖和转移的抑制作用

背景与目的：Fibulin-5在肺癌组织中低表达,具有抑癌作用。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在肺癌中高表达,能够促进肿瘤的侵袭转移。该研究旨在探讨Fibulin-5抑制肺癌细胞增殖和转移的分子机制。方法：该研究首先检测了肺上皮细胞和肺癌细胞中Fibulin-5和HMGB1的表达,然后利用转染试剂将Fibulin-5过表达质粒和HMGB1的siRNA转染人A549细胞。实现Fibulin-5过表达和HMGB1低表达后,采用MTT实验检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力。本研究采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测A549细胞中HMGB1 mRNA表达变化,采用酶联免疫吸附剂测定实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELisa)检测HMGB1蛋白的分泌;采用蛋白［质］印迹法(Western blot)检测HMGB1、cyclin D1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)和TLR4/NF-κB通路相关蛋白的表达变化。结果：在肺癌细胞A549中,Fibulin-5低表达,HMGB1高表达。过表达Fibulin-5和低表达HMGB1后,HMGB1、cyclin D1、MMP2、MMP7和MMP9的表达均明显降低,A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显减弱(P<0.05);此外,过表达Fibulin-5下调了TLR4、MyD88、p-p65的表达,上调了IκBα的表达(P<0.05)。结论：Fibulin-5可能是通过抑制HMGB1的表达以及其下游的TLR4/NF-κB通路,抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移的过程。     

shRNA沉默环指蛋白146基因对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及其相关蛋白表达的影响

目的：shRNA沉默环指蛋白146（RNF146）基因,观察非小细胞肺癌细胞中RNF146沉默对肺癌细胞迁移和侵袭及其相关蛋白表达的影响。方法：逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR）和Western blot方法用于筛选RNF146高表达肺癌细胞系。构建shRNA-RNF146真核表达载体,瞬时转染A549和H1299肺癌细胞,West-ern blot检测转染效率。划痕实验评价肺癌细胞体外迁移能力;Buyden小室实验检测肺癌细胞体外侵袭能力。Western blot检测肺癌细胞中迁移和侵袭相关蛋白的表达。结果：RT-PCR和Western blot方法筛选RNF146高表达肺癌细胞系,显示 A549和 H1299细胞中 RNF146蛋白均高于其它细胞系。shRNA -RNF146转染A549和H1299细胞系后,划痕实验显示转染组细胞24小时迁移率明显低于空载体组和未转染组（ P＜0.01）。Buyden小室实验结果表明转染组比空载体组和未转染组穿膜细胞数目明显减少（ P＜0.05）。West-ern blot检测与细胞迁移和侵袭相关的调控蛋白（ MMP2、MMP7、MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等）的表达情况,结果显示干扰 RNF146后 A549细胞中 MMP2和 MMP7表达明显减少,而 MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等蛋白的表达变化不明显。结论：RNF146可能通过调控MMP2和MMP7的蛋白水平促进肺癌细胞迁移和侵袭。     

GSDMD对肺癌A549细胞增殖和侵袭的生物学作用

目的:探讨GSDMD对肺癌细胞A549生物学表型的影响。方法:利用肺癌组织芯片,通过免疫组化的方法检测了肺癌组织中GSDMD的蛋白表达;利用慢病毒转染技术,分别下调和上调了A549细胞中GSDMD的表达,并通过一系列体外功能试验,探索了GSDMD下调和上调对肺癌细胞A549生物学表型的影响。结果:免疫组化结果提示:GSDMD在肺癌组织中的高表达高于癌旁正常组织,且其主要定位于肺癌的细胞质。利用慢病毒转染技术,构建了稳定下调和上调GSDMD的细胞系A549-siGSDMD和A549-LV-GSDMD。BrdU细胞增殖及CCK8实验表明:下调GSDMD的表达抑制了A549细胞的增殖能力,反之亦然;高内涵细胞运动试验证实:下调GSDMD的表达抑制了A549细胞的运动能力,反之亦然;Transwell迁移和侵袭试验表明:下调GSDMD的表达,抑制了A549细胞的迁移和侵袭能力,而上调GSDMD的表达,则得到了相反的结果。结论:GSDMD促进了肺癌细胞A549的增殖、迁移和侵袭能力。     

沉默泛素结合酶E2O对人非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

  目的  研究泛素结合酶E2O（ubiquitin-conjugating enzyme E2O,UBE2O）蛋白在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用。  方法  通过慢病毒介导的shRNA靶向抑制人NSCLC细胞株A549中UBE2O基因的表达,应用CCK-8法、流式细胞术分别检测UBE2O对A549细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,应用Transwell实验检测下调UBE2O表达后对A549细胞迁移、侵袭能力的影响,应用Western blot检测细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）两种标志分子E-cadherin蛋白、N-cadherin蛋白和PI3K-Akt信号通路相关蛋白表达量的变化。  结果  下调UBE2O表达后,A549细胞UBE2O mRNA和蛋白表达均下调（均P < 0.01）,CCK-8实验结果显示沉默UBE2O可以抑制A549的增殖（P < 0.001）,Transwell实验显示下调UBE2O的表达能够抑制A549细胞的迁移、侵袭（均P < 0.001）。Western blot结果表明下调UBE2O的表达可使A549细胞中的E-cadherin蛋白表达水平升高、p-Akt蛋白表达水平下降。  结论  UBE2O蛋白能够促进NSCLC细胞侵袭和迁移,作用机制可能是通过诱导肺癌细胞发生EMT和促进pI3K-Akt信号通路的激活。      

非小细胞肺癌中PAX6表达及其对肿瘤细胞增殖与侵袭作用机制研究

背景与目的：转录因子PAX6主要表达于胚胎期,不同肿瘤中PAX6呈现高表达,通过不同的信号通路发挥肿瘤抑制或促进作用。检测PAX6在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,通过RNAi下调其表达,研究PAX6对肿瘤细胞侵袭和增殖力以及cyclin E、p38表达水平的影响。方法：应用蛋白印记检测86例NSCLC肿瘤组织及癌旁配对组织以及2例细胞系中PAX6的表达情况。应用PAX6特异性siRNA序列,转染NSCLC细胞系A549,MTT法、Transwell小室、划痕实验检测转染前后细胞增殖、侵袭和迁移能力的对比。蛋白质印记法(Western blot)检测转染前后cyclin E及p38表达情况。结果：对比癌旁组织及正常人支气管上皮细胞16HBE,PAX6在NSCLC组织及A549细胞系中显著高表达。选取高效siRNA序列转染细胞系后,PAX6表达的下调抑制了肿瘤细胞的增殖及集落形成,G1期细胞比例增加,细胞侵袭及迁移力均下降。PAX6基因敲低细胞cyclin E及p38活性受到抑制,表达下调。结论：PAX6通过调控MAPK通路及cyclin E的表达加速肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移,是潜在的NSCLC诊疗靶点。     

RACK1通过影响MCM7磷酸化促进肺癌细胞的增殖

目的:研究蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,RACK1)基因沉默或过表达对大细胞肺癌细胞系H460及肺腺癌细胞系A549细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:采用脂质体转染法分别将针对RACK1基因的RACK1 siRNA和重组质粒pCMV-sport6-RACK1转入H460和A549细胞中.采用MTT法和集落形成实验分析RACK1基因对细胞增殖的影响,FCM检测其对细胞周期的影响;采用酵母双杂交法、免疫共沉淀法、激光共聚焦显微术及磷酸化蛋白免疫共沉淀法检测RACK1表达与肺癌细胞增殖之间的关系.结果:转染RACK1 siRNA后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显下调,细胞的增殖能力和集落生成数明显降低,S期细胞所占比例明显下降(P＜0.01);转染pCMV-sport6-RACK1后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显上调,细胞的增殖能力增强,倍增时间增加,集落生成数明显增多,S期细胞所占比例明显升高(P＜0.01).采用酵母双杂交法和免疫共沉淀法检测发现,RACK1与MCM7存在直接作用.RACK1进入细胞核内,与微小染色体维持蛋白7 (minichromosome maintenance protein 7,MCM7)特异性结合,促进MCM7蛋白磷酸化.结论:RACK1通过直接与MCM7结合促进MCM7蛋白磷酸化途径,继而促进肺癌细胞增殖.     

siRNA沉默STMN1基因抑制肺癌细胞增殖与侵袭的机制探讨

目的:观察下调肺癌细胞中STMN1基因的表达对癌细胞增殖、侵袭及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:以人正常肺细胞MRC-5作为对照,通过Western bloting检测人肺癌A549、SPC-A1和H322细胞中STMN1的蛋白表达;STMN1的siRNA转染A549细胞为实验组,另设空白组和阴性组,转染48 h后,Western bloting检测转染效果;CCK8法及Transwell小室分别检测细胞的增殖及侵袭能力;Western bloting检测增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化的丝氨酸苏氨酸激酶（p-AKT）的蛋白表达。结果:STMN1在肺癌A549、SPC-A1和H322细胞中的蛋白表达均显著高于在MRC-5细胞中的表达（P<0.05）,选择A549细胞为研究对象。转染STMN1 siRNA的A549细胞STMN1的蛋白表达显著低于空白组（P<0.05）。与空白组比较,实验组细胞增殖及侵袭能力均显著降低,PCNA、MMP-2、PI3K、p-AKT蛋白表达均显著降低（P<0.05）。结论:siRNA沉默STMN1的表达通过下调PI3K/AKT信号通路降低肺癌细胞增殖及侵袭能力。     

DDX17基因表达下调对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨 DDX17基因在非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的中的作用。方法：采用慢病毒介导的 shRNA,下调非小细胞肺癌 A549细胞中 DDX17的表达,实时荧光定量 PCR 和 Western blot 验证下调效果。CCK －8和平板克隆实验检测细胞增殖能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell 实验检测细胞侵袭能力变化。结果：DDX17－shRNA 可有效下调非小细胞肺癌 A549细胞中 DDX17蛋白和 mRNA 的表达。DDX17表达下调后,A549细胞的增殖受到抑制,24、48、72小时细胞增殖能力较对照组分别降低23％、42％和59％。细胞克隆形成数目较对照组明显减少,两组细胞克隆数目分别为75±9和30±6。细胞迁移速率较对照组降低,两组迁移率分别为（49．4±7．4）％和（17．8±3．7）％。细胞侵袭数目较对照组明显减少,两组细胞24小时侵袭数目分别为89．7±13．2和30．0±5．7。结论：DDX17表达下调可显著抑制非小细胞肺癌 A549的增殖、迁移和侵袭。     

miR-216a-5p通过下调MMP16表达抑制肺癌细胞的侵袭

背景与目的：微小RNA(microRNA,miRNA)是一类存在于真核生物体内只有19~39 bp大小的内源性非编码RNA,它能在转录和翻译水平调控基因的表达,在细胞的增殖分化、新陈代谢、免疫调控和凋亡等方面起着重要的作用。本研究检测miR-216a-5p在肺癌组织和肺癌细胞系的表达并探讨其对肺癌细胞侵袭能力的影响及其调控机制。方法：使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测55例肺癌患者的肺癌组织和7种肺癌细胞系中miR-216a-5p的表达情况;miR-216a-5p瞬时转染A549、95D和H460 3种肺癌细胞系,使用Transwell侵袭实验检测miR-216a-5p对肺癌细胞系侵袭能力的影响;预测并构建miR-216a-5p的候选靶基因基质金属蛋白酶16(matrix metalloproteinase 16,MMP16)基因的双荧光素酶报告基因表达质粒,使用qRT-PCR和蛋白［质］印迹法(Western blot)检测miR-216a-5p对靶基因MMP16的mRNA和蛋白表达的影响;小干扰RNA(siRNA)干扰MMP16与上调miR-216a-5p对比检测其对肺癌细胞侵袭能力的影响。结果：90.91%(50/55)的肺癌患者肿瘤组织中miR-216a-5p表达明显低于对应的癌旁组织(P<0.05)。7种肺癌细胞系中miR-216a-5p的表达量仅为对照组的7.00%~32.00%(P<0.05)。上调miR-216a-5p的表达能够抑制肺癌细胞的侵袭;siRNA干扰MMP16与转染上调miR-216a-5p都能够抑制肺癌细胞中MMP16的表达,并抑制肺癌细胞侵袭。结论：miR-216a-5p可以作为临床肺癌诊断的候选标志物之一,并且其能够通过下调MMP16的表达从而抑制肺癌细胞的侵袭。     

miR-424对非小细胞肺癌A549细胞生长和侵袭的影响及分子机制

背景与目的已有的研究表明miR-424可抑制肾癌细胞增殖,抑制宫颈鳞癌细胞的迁移和侵袭能力,而其对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）细胞的影响目前尚无系统研究。本研究探讨miR-424对NSCLC A549细胞生长和侵袭迁移能力的影响并进一步研讨其分子机制。方法应用CCK8检测过表达及抑制miR-424的表达对A549细胞增殖的影响。应用Transwell检测过表达及抑制miR-424的表达对A549细胞侵袭能力的影响。应用Western blot检测过表达及抑制miR-424的表达对A549细胞中MMP9和MMP2蛋白水平的影响。构建E2F63’UTR区的荧光素酶报告载体,验证miR-424对E2F6的靶向作用。采用Western blot检测过表达及抑制miR-424的表达后,A549细胞中E2F6的表达。结果过表达miR-424后,A549的生长和侵袭能力显著降低。过表达miR-424后,A549细胞的MMP-2和MMP-9表达下降。荧光素酶活性检测表明miR-424能够抑制E2F6的荧光素酶活性。过表达miR-424后,细胞内E2F6的表达降低。结论 miR-424能够通过调控E2F6而抑制A549的生长和侵袭能力。     

RNA干扰c-Met基因表达对非小细胞肺癌侵袭和迁移及顺铂敏感性的影响

[目的]研究c-Met基因干扰后对肺癌细胞株95D侵袭、迁移能力和化疗药物敏感性的影响。[方法]分别采用免疫组化SP法和WesternBlot技术检测肺癌组织及不同肺癌细胞株中Met蛋白的表达情况。将c-MetshRNA质粒转染人肺癌细胞株95D．通过WestemBlot检测转染效率;Transwell小室和划痕愈合实验测定细胞体外侵袭和迁移能力：四甲基偶氮唑法（Mar法）检测细胞的增殖情况及顺铂敏感性。[结果]Met蛋白在NSCLC组织中的表达明显高于癌旁正常组织,同时高侵袭性的肺癌细胞株（95D、801D）中Met蛋白的表达也较高。c-Met基因干扰能明显降低95D细胞的侵袭和迁移能力,并显著提高其对顺铂的敏感性。[结论]c-Met基因可作为一个重要的靶点应用于非小细胞肺癌治疗。     

ID1对非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的影响

背景与目的非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）是当今世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,而表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors, EG-FR-TKI）整体有效率为30%-40%,无进展生存期（progression-free survival, PFS）为12个月。但EGFR-TKI在临床中的耐药现象也很普遍,严重影响了其抑瘤作用。因此,克服耐药、寻找一种新的与肺癌耐药相关的预后因子势在必行。本研究旨在通过体内外实验探讨DNA结合抑制因子1（differentiation inhibitory factor 1, ID1）与NSCLCEGFR-TKI耐药之间的关系,看其是否有统计学意义,并初步探讨其机制。方法免疫组化（immunohistochemistry, IHC）检测手术标本（肺癌组织和癌旁组织）1D1的表达;qRT-PCR、Western-blot检测并比较肺癌细胞敏感株与耐药株中ID1的表达变化;MTT检测吉非替尼对ID1慢病毒载体处理肺癌细胞的细胞增殖情况,将肺癌细胞接种至裸鼠腋下,待肿瘤生长至一定体积使用吉非替尼治疗,估算肿瘤体积。结果 ID1在肺癌组织中的表达明显高于正常组织（P<0.05）;ID1的表达与NSCLC EGFR-TKI耐药呈正相关（P<0.05）。结论 ID1在NSCLC中高表达,并且参与了NSCLC EGFR-TKI的耐药,其机制可能与STAT3磷酸化程度增加有关。     

Pivotal role of epithelial cell adhesion molecule in the survival of lung cancer cells

Epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) is overexpressed in a wide variety of human cancers including lung cancer, and its contribution to increased proliferation through upregulation of cell cycle accelerators such as cyclins A and E has been well established in breast and gastric cancers. Nevertheless, very little is known about its role in supporting the survival of cancer cells. In addition, the functional role of EpCAM in the pathogenesis of lung cancer remains to be explored. In this study, we show that RNAi-mediated knockdown of EpCAM suppresses proliferation and clonogenic growth of three EpCAM-expressing lung cancer cell lines (H3255, H358, and HCC827), but does not induce cell cycle arrest in any of these. In addition, EpCAM knockdown inhibits invasion in the highly invasive H358 but not in less invasive H3255 cells in a Transwell assay. Of note, the EpCAM knockdown induces massive apoptosis in the three cell lines as well as in another EpCAM-expressing lung cancer cell line, HCC2279, but to a much lesser extent in a cdk4/hTERT immortalized normal human bronchial epithelial cell line, HBEC4, suggesting that EpCAM could be a therapeutic target for lung cancer. Finally, EpCAM knockdown partially restores contact inhibition in HCC827, in association with p27(Kip1) upregulation. These results indicate that EpCAM could contribute substantially to the pathogenesis of lung cancer, especially cancer cell survival, and suggest that EpCAM targeted therapy for lung cancer may have potential.     

LRRC3B对食管癌细胞Eca109迁移、侵袭及PI3K/Akt信号通路的影响

背景与目的:先前的研究已经证实富含亮氨酸重复序列3B蛋白(leucine-rich repeat-containing 3B,LRRC3B)在多种癌症中低表达,并且与癌细胞的迁移侵袭密切相关.该研究旨在探讨LRRC3B在食管癌发展中的作用机制.方法:免疫组织化学染色检测LRRC3B在60例食管癌组织及60例癌旁组织中的表达情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测食管癌细胞Eca109和食管正常上皮细胞系HEEC中LRRC3B的mRNA和蛋白表达.处理食管癌细胞Eca109并分3组:正常对照组、阴性对照组(转染对照空pCMV6质粒)和过表达LRRC3B组(转染pCMV6-LRRC3B过表达质粒).采用Transwell法检测各组Eca109细胞迁移和侵袭的变化.采用Western blot检测各组细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达以及p-Akt蛋白水平.结果:LRRC3B在食管癌组织和细胞中的表达明显低于癌旁组织和食管正常上皮细胞.过表达LRRC3B明显抑制Eca109细胞的迁移和侵袭能力,上调上皮因子E-cadherin表达,抑制间质标志物N-cadherin和Vimentin表达,同时降低细胞内p-Akt水平.结论:LRRC3B在食管癌中低表达,上调LRRC3B能够抑制食管癌细胞的EMT过程,可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关.     

Numblike regulates proliferation, apoptosis, and invasion of lung cancer cell

Numblike (Numbl), a conserved homolog of Drosophila Numb, has been proved to be implicated in early development of the nervous system. A recent study also showed that Numbl played an important role in tumorigenesis and invasion by suppressing NF-κB activation. However, the biological role of Numbl remains unknown in lung cancer up to now. To address the expression of Numbl in the lung cancer cell, four lung cancer cell lines (metastatic cell lines NCI-H292, 95-D, and non-metastatic cell lines A549, HCC827) and non-cancerous human bronchial epithelial cells were used to detect the protein expression of Numbl by western blotting. The results in this study indicated that the expression of Numbl was downregulated in human lung cancer cell lines, especially in metastatic cell lines. To investigate the role of Numbl in lung cancer cell proliferation, apoptosis, and invasion, we generated human lung cancer 95-D cell lines in which Numbl was either overexpressed or depleted. Subsequently, the effects of Numbl on the cell viability, cycle, apoptosis, and invasion properties in 95-D cells were determined with MTT [3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide] assay, flow cytometry analysis, and Transwell invasion assays. The results indicated that Numbl could decrease cell viability, suppress cell proliferation and invasion, and promote cell apoptosis. In addition, we investigated the effects of Numbl on the expression of the following proteins: TRAF6 (tumor necrosis factor receptor-associated factor 6), p-p65 (phosphor-NF-κB), cyclin D1, caspase-3, and matrix metalloproteinase 9 (MMP9). Results showed that Numbl could decrease the expression of TRAF6, p-p65, cyclin D1, and MMP9 and increase the expression of caspase-3. All these results suggested that Numbl might be involved in the inhibition of growth, proliferation, and invasion of 95-D cells, as well as the potentiation of apoptosis of 95-D cells by abrogating TRAF6-induced activation of NF-κB.     

miR-374 a对肺腺癌细胞增殖与侵袭迁移的影响

目的 探究分析miR-374a对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移等生物学行为能力的影响.方法 采用RT-PCR检测miR-374a在正常肺上皮细胞CCD-8L及非小细胞肺癌细胞A549、H1975中的表达情况.采用miR-374a mimic和miR-374a inhibitor转染非小细胞肺癌细胞A549、H1975...     

NRP-1过表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231、SK-BR-3生物学行为的影响

目的 通过上调乳腺癌细胞MDA-MB-231、SK-BR-3中NRP-1的表达,观察NRP-1对细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法 构建pcDNA3.1-NRP-1表达载体,脂质体介导NRP-1 表达质粒转染MDA-MB-231、SK-BR-3细胞,用G418筛选出稳定转染的乳腺癌细胞株。利用RTqPCR、Western blot法分别检测NRP-1基因mRNA及其蛋白表达;CCK-8法、AnnexinⅤ-APC/7-AAD法、Transwell小室分别检测转染细胞增殖率、凋亡率及侵袭、迁移能力。结果 成功构建pcDNA3.1- NRP-1表达载体,转染MDA-MB-231、SK-BR-3细胞并筛选稳定表达系。与对照组相比,过表达组细胞的NRP-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高（均P<0.05）;NRP-1过表达组的细胞较对照组增殖率增加、凋亡率降低、侵袭及迁移能力增强（均P<0.05)。结论 NRP-1在乳腺癌发展、浸润、转移中起着一定的作用,它可促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡。