斑点免疫渗滤法检测结核杆菌抗体试剂盒的研制

介绍斑点免疫渗滤法检测结核杆菌抗体（ＴＢ－Ａｂ）试剂盒的研制方法，该法是以酶联免疫吸附试验原理和亲和层析原理为基础，采用硝酸纤维素薄膜（ＮＣ膜）作为固相载全而建立一种简便（三步），快速（５～１０ｍｉｎ），特异性强，灵敏度高（ｎｇ水平）的新方法，该法的逐步完善将在流行病学调查和临床医学检查中得到广泛应用。     

斑点免疫金渗滤法检测血清抗结核分枝杆菌抗体

目的探讨斑点免疫金渗滤法(DIGFA)检测血清抗结核分枝杆菌抗体及其临床意义。方法用DIGFA检测73例结核病患者和50例非结核病患者血清中的抗结核分枝杆菌抗体,并同时进行痰涂片抗酸染色查结核分枝杆菌,分析比较两者的检出结果。结果DIGFA检测血清抗结核分枝杆菌抗体阳性率为82.2%,痰涂片抗酸染色查结核杆菌阳性率为24.7%,两法比较差异显著(P<0.005)。结论DIGFA操作简单,检测迅速,检出率高,不需要贵重仪器设备,能快速测定抗结核抗体,是一种较为理想的临床结核病辅助诊断方法。     

斑点金免疫渗滤法快速检测乙肝表面抗原

目的：建立斑点金免疫渗滤法检测乙肝表面抗原的快速方法。方法：将兔抗乙肝表面抗原的抗体点子硝酸纤维素薄膜上,用来捕获血清中的乙肝表面抗原,通过胶体金标记的抗表面抗原单克隆抗体来直接显色。     

用快速斑点免疫金渗滤法检测抗双链DNA抗体

目的为了提供一种简便、快速、可靠的检测抗双链ＤＮＡ（ｄｓ－ＤＮＡ）抗体的新方法。方法将生物素化的质粒ｄｓ－ＤＮＡ结合于包被了亲和素的硝酸纤维素（ＮＣ）膜上，以胶体金标记的葡萄球菌蛋白Ａ（ＳＰＡ）作为显示剂，建立了一种检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的快速斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。结果ＤＩＧＦＡ对未经选择的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）和活动性ＳＬＥ的阳性率分别为６７．２％和９５．９％；对非ＳＬＥ的自身免疫病患者的阳性率仅为２．９％；正常人未见假阳性。与短膜虫免疫荧光法（ＣＬ．ＩＦＡ）、放射免疫法（Ｆａｒ）、酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫结合法（ＤＩＢＡ）四种方法比较，ＤＩＧＦＡ的敏感性优于ＣＬ．ＩＦＡ、ＥＬＩＳＡ和ＤＩＢＡ，特异性优于Ｆａｒ和ＥＬＩＳＡ。结论ＤＩＧＦＡ快速、简便，整个检测过程只需２分钟，不需特殊设备，是一种值得推广的检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的常规方法。     

点免疫金渗滤法检测结核杆菌特异性抗体

目的：探索检测结核病人血清中结核抗体的新方法。方法：采用结核菌素纯蛋白衍化物（ＰＰＤ）和金标记蛋白探针，根据免疫渗滤原理建立的点免疫金渗滤法（ｄｏｔｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｓｓａｙ）。结果：点免疫金渗滤法与ＥＬＩＳＡ法比较，特异性为９３．２％，敏感性为９５．５％，二法符合率为９７．６％。结论：点免疫金渗滤法筛查和诊断结核病具有简便、快速、准确等优点和重要的应用价值。     

应用快速斑点免疫金渗滤法检测MP-IgM抗体及临床意义

肺炎支原体（mycoplasma pneumania，MP）是小儿急性呼吸道感染常见的病原体之一。其感染的临床症状多种多样，通过呼吸道传播，发热、咳嗽是较突出的症状，严重时可引起全身多脏器损害，有肺炎支原体肺炎合并心肌损害、肝脏损害等并发症的报道，仅依据临床表现常常难与病毒、细菌及结核感染鉴别，如何早发现、早治疗、尽量减少并发症是一个亟待解决的问题。而原有的鉴别手段如培养、PCR、ELISA等方法费时、操作繁琐又需专门仪器，一方面延误了最佳治疗时间，     

斑点酶免疫渗滤法抗体检测对结核性脑膜炎诊断价值的评估

脑脊液(CSF)检查有助于准确诊断结核性脑膜炎(TBM).我们将CSF涂片找抗酸杆菌、PCR扩增结核杆菌DNA和金标抗体试剂盒检测IgG设为对照,评价用重组结核分支杆菌38000蛋白作抗原所建立的斑点酶免疫渗滤法(DIEFA)快速检测CSF抗体的价值,报告如下.     

斑点金免疫渗滤法检测结核分枝杆菌抗体在肺结核诊断中的应用

目的：探讨利用斑点金免疫渗滤试验（DIFGA）检测结核分枝杆菌抗体对肺结核临床诊断的应用价值。方法：应用斑点金免疫渗滤法检测了正常人和各类肺部疾病患者共313例血清中结核分枝杆菌抗体，并与痰液涂片法、结核菌培养法和PCR法进行方法学比较。结果：结核分枝杆菌抗体检测肺结核患者阳性率为80．77％．非结核性肺病患者阳性率为7．64％，正常人阳性率为3．08％。结论：斑点金免疫渗滤法检测结核分枝杆菌抗体对肺结核的诊断敏感性高，特异性好，对肺结核诊断有较高的应用价值，并且操作简便、快速，与涂片法、培养法和PCR相比，有明显优势。     

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体

建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体。     

斑点免疫金渗滤法的改进

目的：改进斑点免疫金渗滤法的渗滤装置，降低成本，使之更适用于现场操作。方法：用自制的圆形渗片替代塑料渗滤盒，并比较二者的效果。结果：自制的渗滤片体积更小，成本更低，为一次性使用材料；检测抗体的效果与塑料渗滤盒法一致。结论：自制的渗滤片优于常用的塑料渗滤盒。     

应用斑点免疫金渗滤法检测胸腔积液抗结核分枝杆菌抗体

结核性胸膜炎是临床较常见的疾病 ,过去对其诊断主要依据症状、胸腔积液常规与生化、细菌学检查等。我院于 1998年3月开展了斑点免疫金渗滤法快速检测结核分枝杆菌抗体 ,本文对其在胸腔积液检测中的应用及待检样本的处理进行研究 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　一般资料 :①结核性胸腔积液 5 7例 ,按中华医学会结核病学分会关于“肺结核诊断和治疗指南”[1] 而确诊。②非结核性胸腔积液 43例 ,其中恶性胸腔积液 2 9例 ,一般细菌感染 14例 ,均被病理学、细菌学证实。1 2　待检样本的处理 :新鲜胸腔积液待凝固后 ,经 30 0 0转 /分 ,离…     

斑点免疫渗滤法检测丙肝IgG抗体试剂盒的研制

用基因工程重组的丙肝抗原包被于硝酸纤维索膜，建立了检测丙肝ＩｇＧ抗体的斑点免疫渗滤法。与ＥＬＩＳＡ试剂盒进行双盲式同步测定，二法检验结果差异无显著性。渗滤法简便快速，适用于各级医院，有很强的推广价值。     

斑点免疫金渗滤法检测抗荚膜组织胞浆菌抗体的研究

目的 研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法.方法 荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体以及其他真菌免疫血清中抗体.结果 DIGFA检测20份HC小鼠免疫血清,结果全为阳性,与ELISA检测结果一致,敏感性为100%.检测8份正常小鼠血清出现1份假阳性,特异性为87.5%.检测其他真菌免疫血清结果为:念珠菌属和马尔尼菲青霉菌免疫血清结果全为阴性;8份皮炎芽生菌血清出现1份阳性,9份副球孢子菌血清出现2份阳性.结论 斑点免疫金渗滤法检测抗HC抗体有较高的敏感性和特异性,快速简便.经临床标本扩大验证后将对荚膜组织胞浆菌病的快速诊断有应用价值.     

斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体

目的：建立一种快速测定抗子宫内膜抗体（antiendometrial antibody,EMAb）的新方法。方法：采用经抗人血清抗体－Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原（endometrium antigen ,EMAg)，以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体，根据免疫渗滤原理，建立斑点金免疫渗滤法（Dot-immunogold filtration assay,DIGFA）检测人血清 EMAb。共检测586份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验（ELISA）作对比研究。结果：纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应，8min内即可直接观察结果。在586份血清的检测中，阳性率为36．8％，与ELISA的结果基本一致（x^2＝3．45，P＞0．05），符合率95．0％。特异性为94．7％，敏感性为95．6％。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论：DIGFA可测定EMAb，具有推广使用的价值。     

斑点免疫渗滤技术ICS金标法快速测试试剂盒使用评估分析

目的 探讨斑点免疫渗滤技术(dot immunofiltration assay，DIFA)在临床上推广应用的可行性。方法 用华美和ORTHO ELISA试剂盒及快速测试试剂盒分别检测卫生部抗-HCV血清盘和本中心的无偿献血样本。结果 试剂盒对血清盘测试的结果特异性和符合率达90％以上；灵敏度、特异性和符合率同华美试剂完全一致，灵敏度略低于ORTHO试剂。结论 该试剂同ELISA国产和进口试剂盒相比均具有较高的灵敏度、特异性和符合率，可以在临床上推广应用。     

斑点免疫渗滤法检测HBsAg和HBsAb试剂盒的研制

本文介绍斑点免疫渗滤法检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢｓＡｂ试剂盒的研制方法。该法是以酶联免疫吸附试验原理和亲和层析原理为基础，采用硝酸纤维素薄膜（ＮＣ膜）作为固相载体而建立的一种简便、快速、特异性强、灵敏度高的新方法。该法的逐步完善将在流行病学调查和临床医学检查中得到广泛应用。     

斑点免疫金渗滤法检测结核抗体在老年肺结核诊断中的应用价值

目的探讨斑点免疫金渗滤法（DIGFA）检测血清抗结核分枝杆菌抗体在老年肺结核诊断中的临床应用价值。方法用DIGFA法检测60例老年肺结核患者（结核组）和52例老年非结核呼吸道疾病患者（对照组）的抗结核分枝杆菌抗体,并同时进行痰涂片抗酸染色查结核分枝杆菌,分析比较两者的检出结果。结果DIGFA法检测阳性率为83.3%（50/60）,显著高于痰涂片阳性率的12.0%（7/60）,两者比较差异有统计学意义（P〈0.001）。对照组DIGFA阳性率仅为3.8%。结论DIGFA法操作简单、快捷,检出率高,在老年肺结核辅助诊断中具有非常重要的临床应用价值。