维生素C对脂多糖急性肺损伤大鼠的保护作用

目的 观察维生素C对大鼠脂多糖性急性肺损伤的保护作用及其机制。方法 健康成年Sprague—Dawley（SD）大鼠24只,雌雄不拘,体重180—200g,随机分成三组：0．9％氯化钠注射液组（NS组）、脂多糖组（LPS组）和维生素C治疗组（VitC组）,每组8只大鼠。三组大鼠分别在脂多糖或0．9％氯化钠注射液注入后4h放血处死,测定肺组织丙二醛含量、髓过氧化物酶活性（myeloperoxiase,MPO）及肺湿干重比值（W／D）,留少许肺标本固定切片观察病理变化。结果 与NS组比较,LPS组肺组织MDA含量显著增加、MPO活性显著升高,W／D显著增加（t分别=0．01、6．54、6．19,P均〈0．05）;与LPS组比较,VitC组肺组织MDA含量减少、MPO活性明显降低、W／D显著下降（t分别=0．02、7．73、4．61,P均〈0．05）。LPS组肺组织病理切片可见明显急性肺损伤病理改变,维生素C治疗组显示损伤较轻。讨论 大剂量维生素C对脂多糖所致的大鼠急性肺损伤具有保护作用。     

失血性休克并发急性肺损伤大鼠蛋白激酶C的表达

目的 探讨蛋白激酶C（PKC）在失血性休克并发急性肺损伤动物体内的变化与意义.方法 健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为对照组,失血性休克组和失血性休克＋内毒素组,以大鼠失血性休克时LPS所致ALI为模型,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清TNF-α、IL-1β及IL-6,Westernblot检测肺组织TLR4与PKC的蛋白表达,EMSA检测NF-κB活性变化,观察肺脏含水量、肺脏病理变化.结果 失血性休克早期即可发生肺血管通透性增高,肺脏含水量上升,组织学检查显示肺脏出现明显的病理损害,肺组织PKC与NF-κB DNA活性、TLR4同步增强,尤以内毒素作用后为著.结论 PKC的活化参与了失血性休克时ALI的发病,即TLRs/NF-κB信号通路的活化.     

重症胰腺炎并急性肺损伤大鼠肺组织蛋白激酶C与细胞外信号调节激酶的表达

目的探讨重症胰腺炎并急性肺损伤大鼠肺组织蛋白激酶C（PKC）与细胞外信号调节激酶（ERK）的表达及意义。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为对照组（n=8）与胰腺炎组,胰腺炎组再按6、12、24、48h分（B1、B2、B3、B4）亚组。以大鼠重症胰腺炎所致ALI为模型,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清TNF-α、IL-1β及IE-6,Western blot检测肺组织PKC与ERK的蛋白表达,EMSA检测NF-κB活性变化,观察肺脏含水量、肺脏病理变化。结果内毒素致重症胰腺炎并发急性肺损伤早期即发生肺血管通透性增高,肺脏含水量上升,组织学显示肺脏出现明显的病理损害,血清TNF-α、IL-1β及IL-6增高,肺组织PKC、ERK与NF-κB DNA活性同步增强。结论PKC与ERK的活化参与了重症胰腺炎时ALI的发病,即ERK／NF-κB信号通路的活化。     

巨噬细胞炎症蛋白—2在内毒素性急性肺损伤中的作用

目的：探讨巨噬细胞炎症蛋白２（ＭＩＰ２）在内毒素性急性肺损伤（ＡＬＩ）中的可能作用。方法：采用斑点杂交及原位杂交技术对ＡＬＩ大鼠肺组织中ＭＩＰ２ｍＲＮＡ的表达进行定量和定位研究。结果：内毒素性ＡＬＩ时大鼠各时点肺组织ＭＩＰ２ｍＲＮＡ表达量显著高于对照组，且与血浆及肺组织匀浆髓过氧化酶（ＭＰＯ）活性呈正相关（ｒ＝０．７２９，０．８８５，Ｐ均＜０．０５）。原位杂交发现，在ＡＬＩ早期，肺内巨噬细胞是ＭＩＰ２的主要分泌细胞。结论：在ＡＬＩ早期，巨噬细胞释放的ＭＩＰ２可能是ＡＬＩ时多形核白细胞（ＰＭＮ）在肺内大量浸润并激活的原因之一。     

Clara细胞分泌蛋白对创伤性休克肺损伤的保护作用

目的：探讨Clara细胞分泌蛋白（CC16）对创伤性休克大鼠模型继发性肺损伤的保护作用及其机制。方法：选择30只成年雄性SD大鼠,随机分为3组：假手术组、对照组、CC16处理组。采用创伤性休克动物模型,假手术组均完成所有手术操作,但不放血和复苏;对照组放血后在液体复苏前雾化吸入与CC16处理组等容量的生理盐水;CC16处理组在复苏前给予雾化吸入0.1μg/ml的重组人Clara细胞分泌蛋白（rh-CCSP）。实验结束后监测动脉血气分析及肺湿/干重比等指标变化,并测定肺组织中丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）及肺组织病理学的改变。结果：与对照组相比,CC16处理组的pH、PaO2值明显升高,BE值降低（P〈0.05）,肺湿/干重比减少（P〈0.05）;CC16处理组与假手术组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）;与对照组比较CC16处理组的MDA、MP0含量明显降低,肺组织病理学形态也有明显改善。结论：雾化吸入rh-CCSP可减轻创伤性休克大鼠继发性肺损伤的炎症反应,对肺组织具有保护作用。     

褪黑素抑制大鼠急性肺损伤时磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶的表达

目的 探讨褪黑素(MT)对大鼠急性肺损伤(ALI)时肺脏的保护作用及可能机制.方法 将72只SD大鼠按随机数字表法均分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS+MT处理组.LPS组、LPS+MT组动物经气道内滴注LPS 1 ml/kg(200 μg/200 μl)染毒.LPS+MT组给药前后30 min分别经腹腔注射10 mg/kg MT;对照组、LPS组给予1 ml/kg乙醇-生理盐水溶剂.给药后3、6和10 h处死动物取肺组织,检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;用免疫组化法检测磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶(p-p38MAPK)在肺组织的表达.结果 LPS组SOD活性(U/mg)较对照组明显降低(3 h:73.78±3.62比112.69±3.26,6 h:66.07±2.31比117.85±1.96,10 h:55.13±5.26比118.27±2.16,均P<0.01),而NO(μmol/mg)与MDA(nmol/mg)含量以及p-p38MAPK表达量(A值)显著升高(NO 3 h:8.19±0.48比2.32±0.20,6 h:11.71±0.27比2.08±0.15,10 h:16.53±0.60比2.76±0.21;MDA 3 h:11.43±0.68比2.86±0.21,6 h:19.63±1.29比2.85±0.19,10 h:26.63±2.00比2.84±0.28;p-p38MAPK 3 h:0.340±0.020比0.238±0.019,6 h:0.410±0.016比0.218±0.024,10 h:0.578±0.066比0.238±0.036,均P<0.01);应用MT能显著缓解上述变化[3、6、10 h SOD(U/mg)为86.02±2.81、80.87±3.40、94.46±5.03,NO(μmol/mg)为3.80±0.28、5.32±0.22、7.24±0.52,MDA(nmol/mg)为8.18±0.84、7.84±0.78、6.43±1.06,p-p38MAPK(A值)为0.311±0.018、0.312±0.019、0.314±0.021,P<0.05或P<0.01].结论 MT对ALI时肺脏的保护作用可能与MT的抗氧化作用及抑制p-p38MAPK的过度表达有关.     

乌司他丁对肝缺血-再灌注后急性肺损伤的保护作用

目的 :观察肝缺血再灌注后急性肺损伤的发病机制及乌司他丁的干预作用。方法 :建立大鼠部分肝缺血再灌注模型 ,随机分为手术对照组 (对照组 ) ,肝缺血 90 min组 (缺血组 ) ,肝缺血 90 m in、再灌注 12 0 m in组 (再灌注组 ) ,缺血前 30 m in静脉注射乌司他丁 +肝缺血 90 min、再灌注 12 0 min组 (乌司他丁组 )。检测支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中总蛋白含量、肺组织干 /湿质量比 (D/ W)、肺组织髓过氧化物酶 (MPO)含量及血浆中丙二醛 (MDA)含量。结果 :1与对照组比较 ,肝缺血再灌注损伤后各组大鼠 BAL F中总蛋白含量均明显升高(P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,再灌注组总蛋白升高更为明显 ,乌司他丁能干预其升高 ;肺 D/ W则均明显降低(P均 <0 .0 1) ,乌司他丁能干预其降低程度。 2随着肝缺血再灌注的发生 ,肺组织 MPO与血浆 MDA含量均逐渐升高 ,以再灌注组升高更明显 (P均 <0 .0 1) ,乌司他丁能干预 MDA和 MPO的升高。结论 :肝缺血再灌注后急性肺损伤的主要病理生理过程是氧化抗氧化系统的失衡 ,中性粒细胞是肺组织急性损伤的主要炎性细胞 ;乌司他丁通过抑制中性粒细胞在肺组织中的渗出及其抗氧化作用显著减轻急性肺损伤的程度。     

亚低温对急性肺损伤大鼠肺泡表面活性蛋白A含量的影响

目的 探讨亚低温对内毒素脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡表面活性蛋白A(SP-A)含量的影响.方法 按随机数字表法将40只雄性Wistar大鼠分组.采用气管内滴入LPS制备ALI动物模型;对照组气管内只滴人生理盐水.模型组和对照组分别于术后1 h和8 h处死8只大鼠;亚低温组于滴入LPS 1 h后将体温降低并维持在32.5～33.0℃,8 h后处死8只大鼠.各组分别于术前及术后1 h、8 h测定动脉血气,并计算氧合指数(PaO2/FiO2);采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中SP-A含量;光镜下观察肺组织形态结构的变化.结果 气管内滴入LPS 1 h后,大鼠PaO2/FiO2均达到ALI的诊断标准.与对照1 h组比较,模型1 h组BALF中SP-A含量(μg/L)明显降低(53.27±1.95比74.81±6.55,P＜0.01);模型8 h组和亚低温8 h组SP-A含量(4.35±2.76和51.36±2.33)均较对照8 h组(70.81±5.01)明显降低,但亚低温8 h组SP-A含量较模型8 h组明显增高(均P＜0.01).光镜下观察,对照1 h和8 h组肺泡结构基本正常;模型8 h组肺组织炎症反应最重;模型1 h组和亚低温8 h组肺组织炎症反应较模型8 h组有所减轻.结论 亚低温能延缓内毒素诱导的ALI大鼠早期肺泡内SP-A含量下降的程度,在一定程度上可减轻肺损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effect of hypothermia (HT) on the concentration of surfactant protein A (SP-A) during lipopolysaccharide (LPS) induced acute lung injury (ALI) in rats.Methods Forty male Wistar rats were randomly divided into three groups. The ALI model was reproduced by LPS intratracheal instillation; only saline was instilled intratracheally for control group. Rats in both model group and control group were sacrificed respectively at 1 hour and 8 hours (each n= 8). In HT group the body temperature was lowered to 32. 5 - 33.0 ℃ 1 hour after LPS instillation, and 8 rats were sacrificed st 8 hours. The arterial blood gas was determined in all the groups before and 1 hour and 8 hours after instillation of saline or LPS, and the oxygenation index (PaO2/FiO2) was calculated. The concentration of SP-A in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was determined by enzyme linked immunosorbent assay. The morphological changes in lung tissue of rats were observed under light microscope. Results At 1 hour after intratracheal instillation of LPS, the PaO2/FiO2 of each group reached the diagnostic criterion of ALI.Compared with control 1-hour group, the SP-A (μg/L) in BALF of model 1-hour group was decreased (53. 27±1.95 vs. 74. 81±6. 55, P＜0. 01); the SP-A in model 8-hour group and HT 8-hour group (4.35±2. 76 and 51.36±2. 33) was both obviously decreased compared with control 8-hour group (70. 81±-5. 01,both P＜0. 01). Compared with model 8-hour group, the SP-A of HT 8-hour group was obviously increased (P＜0. 01). Results of light microscopic examination, it was revealed that the alveolar structure of control 1-hour group and control 8-hour group was almost normal. Inflammatory response in lung tissues in model 8-hour group was found to be most serious; compared with model 8-hour group, inflammatory response in lung tissues in model 1-hour group and HT 8-hour group was reduced in certain degree. Conclusion A certain extent of HT may reduce lung injury of early endotoxin-induced ALI rats by delaying lowering of alveolar SP-A levels.     

Direct anticoagulant activity of protein S-C4b binding protein complex in Heerlen heterozygotes and normals.

BACKGROUND: Plasma protein S normally circulates free (40%) or complexed with C4b-binding protein (PS-C4BP); only free protein S is a cofactor for activated protein C during factor (F) Va inactivation. Protein S-Heerlen lacks a carbohydrate group, leading to low plasma free protein S levels, but normal levels of PS-C4BP. OBJECTIVES: Because protein S-Heerlen is not associated with thrombosis, we investigated whether PS-C4BP is directly anticoagulant in plasma and whether PS-Heerlen-C4BP has enhanced direct anticoagulant activity. METHODS: An assay for protein S direct activity was applied to Heerlen-heterozygous plasmas. Free and complexed protein S were repeatedly isolated from normal and Heerlen-heterozygous plasmas and tested for direct anticoagulant activity in prothrombinase assays and in plasma. RESULTS: Heerlen-heterozygous plasmas were deficient in free and total protein S antigen but had normal to high protein S direct anticoagulant activity. Purified Heerlen-heterozygous PS-C4BP was 7-fold more potent than normal PS-C4BP in inhibiting full prothrombinase activity, and 22-fold more potent in inhibiting prothrombin activation in the absence of FVa; it also specifically prolonged plasma clotting times 14-fold more than normal PS-C4BP. Heerlen-heterozygous PS-C4BP did not compete for limiting phospholipids any better than normal PS-C4BP. However, ligand blots and surface plasmon resonance studies showed that Heerlen-heterozygous PS-C4BP bound more avidly to FXa than did normal PS-C4BP (apparent Kd = 4.3 nm vs. 82 nm). CONCLUSIONS: Plasma-derived PS-C4BP has direct anticoagulant activity in plasma and in purified systems. Enhanced direct activity of PS-Heerlen-C4BP may compensate for low free protein S levels and low cofactor activity in individuals with protein S-Heerlen.     

急性肺损伤患者血清肺表面活性物质蛋白A的变化及其意义

目的;动态观测急性肺损伤虱血清肺表面活性物质蛋白Ａ（ＳＰ－Ａ）的变化,并探讨其临床意义。方法：选择符合ＡＬＩ诊断标准并已给予机械通气治疗的患者２０例,于入组时和出组时抽取静脉血,多数患者在观察期间病情有明显变化时重复抽血,共收集静脉血标本７１例次;并同时记录动脉血气测值和呼吸机参数,计算动脉血氧分压与吸入气氧浓度比值和静态总呼吸顺应性。     

急性肺损伤兔血浆颗粒膜蛋白140的改变

目的：观察实验兔急性肺损伤（ＡＬＩ）时血浆颗粒膜蛋白 １４０（ＧＭＰ １４０）的变化并探讨其诊断价值。方法：同种骨髓提取液（ＢＭＥ）经兔颈静脉缓慢恒流注入复制骨髓型ＡＬＩ模型,多时间点检测血中循环内皮细胞（ＣＥＣ）、ＧＭＰ １４０、内皮素 １（ＥＴ １）、血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）以及肺组织ＧＭＰ １４０含量。结果：致伤后０．５小时,血中ＣＥＣ、ＧＭＰ １４０、ＥＴ １、ＡＣＥ均显著升高并持续６ 小时,而肺组织ＧＭＰ １４０ 含量降低。血浆ＧＭＰ １４０ 早期升高,幅度较大〔伤后０．５ 小时为（５２．５７±１０．２５）μｇ／Ｌ,较伤前（１６．１８±４．３３）μｇ／Ｌ 高（＞ ３ 倍）,伤后１ 小时达峰值（５６．３２±１２．４３）μｇ／Ｌ〕,与其他指标有较好的相关性。结论：血浆ＧＭＰ １４０可作为临床ＡＬＩ的早期诊断、病情监测和评估的有用指标。     

高容量血液滤过对内毒素诱导急性肺损伤犬肺表面活性蛋白的影响

目的观察高容量血液滤过（HVHF）对内毒素诱导急性肺损伤（ALI）犬肺表面活性蛋白（SP）的影响。方法采用中心静脉注入脂多糖（LPS）制备犬ALI模型。随机将16条健康犬分为两组，模型组动物制模后采用单纯机械通气治疗；治疗组制模后采用机械通气＋HVHF治疗。监测两组动物基础值、成模时以及HVHF治疗1、2和4h的动脉血气及呼吸力学指标变化。采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）测定肺组织匀浆内SP—B含量的变化。结果注入LPS后动物动脉血氧分压（PaO2）和氧合指数（PaO2／FiO2）均下降（P均＜0．05），成模时PaO2／FiO2＜300mmHg（1mmHg：0．133kPa）；HVHF治疗后4hPaO2、Pa02／FiO2均明显高于模型组（P均＜0．01）。模型组动物治疗后吸气阻力（Raw）、气道峰压（PIP）均保持稳定，治疗4h时肺动态顺应性（Cdyn）、肺总顺应性（Ctot）均下降，呼吸功（WOBvent）上升（P均＜0．01）；HVHF治疗后各指标均保持稳定，治疗4h后Cdyn和Ctot均较模型组差异有显著性（P＜0．01和P＜0．05）。治疗组肺组织匀浆SP—B的含量明显高于模型组（P＜0．01）。结论HVHF能有效地提高ALI犬肺组织SP—B的含量，达到阻止ALI呼吸力学恶化、改善氧合的目的。     

槲皮素对内毒素急性肺损伤的保护作用

目的　探讨槲皮素 (quercetin)对内毒素急性肺损伤 (ALI)的保护作用。方法　 2 4只SD大鼠 ,随机分成ALI模型组、槲皮素干预组、正常对照组 (n =8只 )。各组大鼠均于注射LPS或生理盐水 6h后测定PaO2 、pH值、PaCO2 ,血清TNF α、IL 8、P 选择素浓度和肺组织匀浆髓过氧化物酶 (MPO)含量及TNF α、IL 8、P 选择素浓度 ;观察肺病理改变、肺湿 /干重比 (W /D)。结果　与ALI模型组比较 ,槲皮素干预组的肺水肿病理改变明显减轻 ,PaO2 改善 ,MPO、P 选择素及TNF α、IL 8降低 (P <0 0 1)。结论　槲皮素能改善ALI大鼠的气体交换功能 ,抑制炎性介质的释放 ,对内毒素诱导的ALI有保护作用     

重组白细胞介素-10/Fc融合蛋白对内毒素诱导急性肺损伤小鼠的实验干预作用

目的 探讨重组白细胞介素-10(rIL-10)/Fc融合蛋白对内毒素诱导的急性肺损伤(ALl)小鼠炎症调控作用及其机制.方法 向气管内注射脂多糖(LPS)制成ALl动物模型;rIL-10/Fc融合蛋白采用腹腔内给药方式.132只小鼠被随机均分为正常对照组、rIL-10/Fc对照组、ALl模型组、rIL-10/Fc治疗组.每组选择25只小鼠观察24 h存活率;其余用于检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中自细胞数量,肿瘤坏死因子-a(TNF-a)和IL-1β水平,以及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、肺组织湿/干重(W/D)比值;光镜下观察肺组织病理学改变.结果 注射LPS后4 h可引起BALF中TNF-a和IL-1β显著升高(P均＜0.01),rIL-10/Fc治疗组较ALI模型组有所降低,但差异无统计学意义;但在8 h和12 h,rIL-10/Fc融合蛋白能显著抑制BALF中TNF-a产生,在12 h抑制IL-1β产生;并明显改善LPS注射24 h后实验动物的存活率(P＜0.01).rIL-10/Fc对LPS诱导的ALI小鼠BALF中白细胞数量、肺组织MPO活性、肺组织W/D比值无显著改变.注射LPS 24 h后,肺组织出现了明显的炎性改变,但在rlL-10/Fc融合蛋白干预后没有出现显著的差异.结论 rIL-10/Fc融合蛋白能显著抑制LPS诱导的ALI小鼠肺促炎细胞因子产生,改善预后.     

急性肺损伤环氧合酶同工酶mRNA表达的变化及地塞米松的影响

目的 探讨急性肺损伤（ＡＬＩ）环氧合酶（ＣＯＸ）同工酶的变化及地塞米松（ＤＥＸ）的影响。方法 用内毒素（ＬＰＳ）复制ＡＬＩ模型,用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）测定ＣＯＸ－１和ＣＯＸ－２的ｍＲＮＡ表达。结果 ＣＯＸ－１ｍＲＮＡ表达在对照组、ＬＰＳ组、ＤＥＸ组之间无显著差别（Ｐ〉０．０５）,而ＣＯＸ－２ｍＲＮＡ表达ＬＰＳ组显著高于对照组（３倍）（Ｐ〈０．０１）,ＤＥＸ干预组显著低ＬＰＳ组（Ｐ〈０     

肺特异性蛋白与肺损伤

多种致病因素（如感染、炎症、创伤和毒物等）均可导致急、慢性肺损伤,肺损伤的典型病理生理学改变为肺泡毛细血管屏障通透性的改变和肺泡上皮细胞的损伤,是影响病情发展和预后的重要因素,其明确诊断和监测对疾病的治疗和预后有重要意义。目前肺部疾病的诊断主要依赖影像学方法,如x线平片或电子计算机X射线断层扫描技术（CT）。但肺损伤的早期微观改变无法通过影像学检查显示,只有损伤达到一定程度或一定的时间才会有所表现,并且存在放射损害、     

巨噬细胞在急性肺损伤中的作用

目的 通过观察急性肺损伤中炎细胞的变化规律。阐明炎细胞在急性肺损伤中的作用。方法 采用20%Ⅲ度体表烧伤复合一次性腹腔内毒素（1mg/kg)注射为实验动物模型。并分别以单纯烧伤，单纯内毒素注射，生理盐水注射为对照组，观察伤后肺组织的病理变化，支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数及中性粒细胞（PMN）分类计数。结果 单烧组和单注组BALF细胞总数明显高于正常对照组，主要是巨噬细胞（Mφ）增加，而烧注组BALF细胞总数除1.5h外无明显升高，1.5h时PMN比例却明显增加，烧注组肺病理改变比单烧组，单烧组明显加重，以伤后1.5h最为显著，结论 PMN是内毒素血症急性肺损伤的主要效应细胞，而Mφ则对急性肺损伤可能有某种保护作用。