一个Bw亚型家系的血型分子机制及临床输血分析

目的 对1个Bw亚型血型家系的分子机制进行研究,并探讨该亚型的临床输血情况.方法 对1名ABO血型正反定型不符的无偿献血者及其家人的血型进行血清学鉴定,并应用聚合酶链反应-序列特异性引物法、ABO基因直接测序、TA克隆单倍型分析及相关软件对该突变引起的酶结构及功能变化进行分析等方法,同时对该献血者以往3次所献的血样的临床输血情况进行回顾.结果 在该家系中发现了3例较为罕见的Bw亚型.该亚型是由于ABO基因第7外显子存在721C/T杂合,导致R241W氨基酸改变所致.临床回顾提示3次输血均未发现明显异常.结论 ABO基因721C＞T突变是导致Bw亚型的分子遗传基础之一,该亚型在临床输血中的意义尚需进一步探讨.     

ABO血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法

目的:探讨引起患者ABO血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法,确保输血安全.方法:应用血型血清学检测方法对ABO血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本进行正反定型、不规则抗体筛选及特异性鉴定、吸收放散试验、唾液血型物质测定等系列检测,分析引起血型正反定型不符及交叉配血不合的原因,为患者选择同型及交叉配血相合的血液进行输注.结果:在输血前的血型血清学检测中发现ABO血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本468例,其中自身冷抗体132例(28.2%),血型不规则抗体96例(20.5%),血型抗原性减弱68例(14.5%),血型抗体效价减弱60例(12.8%),自身抗体阳性54例(11.5%),血浆蛋白异常18例(3.8%),实验方法学原因16例(3.4%),ABO血型不合的干细胞移植13例(2.8%),肝素影响9例(1.9%),血标本污染2例(0.4%).结论:ABO血型正反定型不符及交叉配血不合的原因大多数是由自身抗体,不规则抗体,血型抗原抗体减弱及血浆蛋白异常等引起的.因此对ABO血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本,应采用多种血型血清学检测方法进行互相验证,以保证血型鉴定及交叉配血无误,确保临床输血安全.     

全自动血型仪检测ABO血型正反定型不符原因分析及处理策略

目的 探讨在鉴定ABO血型中全自动血型仪正反定型不符的原因,并探寻解决对策。方法 对2017年10月~2018年8月遂宁市中心医院血型仪检测的298例ABO血型正反定不符的标本进行分析,同时结合试管法、抗人球蛋白实验、吸收放散实验、不规则抗体鉴定结果及病史资料分析定型不符的原因并进行归类。结果 298例正反定型不符标本准确鉴定后归纳分为4类:可被纠正类型（标本、人员操作、试剂和仪器原因）占24.16%;抗原原因占7.38 %,其中包括抗原减弱以及ABO亚型;抗体减弱占31.88%,包括抗体合成不足（如婴幼儿）,抗体缺失（如老年人和肿瘤患者）,意外抗体等;其他原因占36.58%,主要包括自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合症、高球蛋白血症等。结论 鉴定血型前标本质量控制、仪器定期的保养维护以及试剂红细胞的更换可以有效减少正反定型不符,抗体合成不足、自身免疫性疾病以及冷凝集素综合症是导致ABO正反定型不符的主要原因。建议院方根据可能原因进行相关确认实验,准确鉴定ABO血型从而保证患者输血安全。     

一例ABO疑难血型基因分析

目的对一例血型血清学鉴定困难的患者进行相关基因分析,鉴定血型并分析引起血型鉴定困难的原因。方法采用微柱凝胶法和试管法进行血清学血型鉴定、抗球蛋白试验和抗体筛查,PCR扩增患者ABO基因第6、7外显子区及其侧翼序列并进行Sanger测序、克隆测序,寻找突变位点进行血型鉴定。结果患者血清学血型鉴定正反结果不符,其红细胞与单克隆抗A、B、H抗体反应均呈阴性(-);血清与A、B、O型红细胞均无凝集;患者直接及间接抗球蛋白试验均为阴性;血清抗体筛查为阴性。测序发现,患者ABO血型相关基因存在多个变异位点。其中第6外显子区存在c.261delG,第7外显子区存在c.467CCT、c.526CCG、c.657CT、c.703GGA、c.796CCA、c.803GG。以A101基因作为标准序列进行比较,对照Blood Group Antigen Gene Mutation Database进行ABO等位基因突变分析,判断患者血型为A102/B101。结论患者红细胞上抗原减弱是血型鉴定正反不符的主要原因,DNA基因测序第6、7外显子七个点突变导致了红细胞上抗原减弱。     

ABO血型抗体缺乏分析及临床输血

目的 探讨ABO血型抗体缺乏的血清学特点、临床分析、临床安全输血.方法 对4例血型抗体缺乏患者采用血型血清学方法进行ABO血型鉴定、吸收放散试验、唾液中血型物质测定.结果 4例患者均为分泌型,抗-A缺乏2例,抗-B缺乏1例,抗-A、抗-B均缺乏1例.结论 正常人抗体缺乏见于免疫耐受现象,在紧急输血时以O型洗涤红细胞为宜.     

ABO血型基因分型及应用

目的 :研究ABO血型基因分型的意义。方法 :采用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)基因定型方法对ABO血型基因定型并观察其基因多态性分布特征和疑难血型检定。结果 :对已知ABO基因的DNA标本进行基因定型 ,证实文中的ABO基因定型方法可靠 ;对 10 4例健康、无血源关系的汉族个体ABO血型基因定型 ,结果与血清学所定表型完全符合 ;并用ABO基因分型技术解决临床输血前血型鉴定、产前胎儿血型鉴定、亲权试验及血清学亚型的正确性验证。结论 :ABO血型基因分型技术可以正确判定ABO血型疑难样本     

疑难ABO血型标本的表型与相应等位基因检测在临床中的应用

目的探究疑难ABO血型标本的表型与相应等位基因检测在临床中的应用。方法本次研究选取2015年5月-2016年3月期间我院各科室送检的临床病人和献血者的45份血液样本。通过试管法检测45例患者及献血者的血清表型,同时采用sanger双碱基DNA分子测序的方法检测ABO等位基因。结果血清学检测的45例血液样本中,出现了A抗原减弱12例(Aw6例,A3 1例,Ael,5例);B型减弱6例(Bw);AB抗原减弱9例(AB表型);Cis AB:12例;B(A):6例;存在A101、A102、A311、Ae L02、Ax02、Ax13、Bl01,Bw,O01、O02、B(A)04、Cis AB01、Cis AB08等基因亚型。结论常规的血清学方法对疑难ABO血型,尤其是ABO血型的亚型鉴定存在一定的局限性,血型基因测序分析的方法可以较好地区分血清学定型模糊的结果。     

部分血液系统疾病对血型血清学检测的影响及鉴定结果分析

目的探讨部分血液系统疾病血型抗原抗体减弱和血浆蛋白异常变化对血型血清学检测的影响及其鉴定方法。方法采用正反定型、吸收放散试验、抗体筛选、抗体特异性鉴定及抗人球蛋白试验进行鉴定分析。结果 56例血液系统疾病患者中正反定型不符由血型抗原抗体减弱引起20例(35.7%),由冷凝集素和血浆球蛋白增高及抗M引起抗体筛选阳性及交叉配血不合36例(64.3%)。正定型不符16例中,由A抗原减弱引起10例,B抗原减弱引起6例;反定型不符40例中,由抗A减弱引起3例,抗B减弱引起1例,由冷凝集素引起21例,由血浆球蛋白增高引起12例,由抗M特异性抗体引起3例。36例抗体筛选阳性中由冷凝集素引起21例(58.4%),由血浆球蛋白增高引起12例(33.3%),由抗M引起3例(8.3%)。交叉配血中,主侧配血不合36例,次侧配血不合33例,经37℃孵育及4℃吸收冷凝集素,用间接抗人球蛋白试验交叉配血,36例中主侧配血不合3例,次侧配血不合33例(直接抗人球蛋白试验阳性)。结论采用正反定型、吸收放散试验、抗体筛选、抗体特异性鉴定及抗人蛋白试验,可准确鉴定部分血液系统疾病患者的ABO血型,输血时应以输注同型血液制剂为原则。     

1例B(A)亚型血型鉴定及分析

目的:对1例献血者ABO血型检测与初筛血型检测不符样本进行血清学及分子生物学鉴定并分析其原因。方法:纸片法初筛血型,应用PK7300血型仪进行ABO血型鉴定,试管法进行血型血清学复测ABO血型,使用测序技术对献血者ABO基因进行测序并比对测序结果。结果:纸片法血型鉴定为AB型,PK7300血型仪正反鉴定一致为B型,试管法血型检测该献血者为B(A)型,测序分析证实ABO基因型:B(A).02/O.01.02,在700位有CG杂合突变,测序结果与试管法血型血清学检测一致,证实该献血员为B(A)亚型。结论:PK7300血型仪鉴定血型存在亚型漏检,试管法ABO血型鉴定是实验室全自动血型检测方法很好的补充。     

一种新的B3变异型相关的B糖基转移酶基因M142T突变研究

目的 研究中国人个体ABO血型系统中具有混合外观凝集特征的B3变异型的分子遗传背景.方法 血型血清学方法鉴定2例ABO血型疑难样本的红细胞表型,应用连续凝集方法和13个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点检测法,排除外源性或内源性DNA嵌合的可能.对ABO基因第6、7外显子和部分内含子进行聚合酶链反应和DNA序列分析,并进一步通过克隆测序法鉴定2个样本的ABO基因单倍型.结果 2个无关个体红细胞与抗-B和抗-AB发生混合外观凝集,连续凝集法和STR检测排除了样本的外源性DNA污染和内源性遗传嵌合子,根据血清学特征确定这2个个体红细胞均为A183血型.单倍型序列分析发现2个样本为A1B杂合子,其中B等位基因与B101相比,差异仅在第7外显子的425T>C错义突变,导致B糖基转移酶多肽链M142T替换.结论 在中国人群中发现一种新的可能导致B3变异型的ABO等位基因.     

α-1,3- N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因新变异的家系研究

目的通过对一例ABO亚型家系血清学和基因序列分析,研究该家系中α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因新变异位点的特征。方法收集先证者及其3名家系成员血液标本,血清学方法进行ABO表型检测,荧光PCR进行ABO血型基因分型。通过对先证者ABO基因全编码区直接测序及第6、7外显子克隆测序方法进行基因序列及单体型分析。结果先证者血型为AxB亚型,ABO血型基因分型为A/B。克隆测序结果显示A新等位基因在ABO*A1.02序列基础上存在第7外显子c.797_798 insT变异。家系调查发现,先证者及其姐姐新变异均遗传自其父亲。c.797_798insT新变异序列已注册基因数据库(MK125137)。结论α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因第7外显子c.797_798insT新变异为可遗传变异,可导致A抗原表达减弱。     

浅谈新生儿溶血病

由于与其他新生儿常见病相比致死率较高,且容易造成新生儿终身与疾病相伴,所以新生儿溶血病一直以来都受到妇儿医疗学界的重视,而近年来随着医学技术的发展,新生儿溶血病的检测和临床治疗手段有了很大的进步,其痊愈率也在不断上升,关于对新生儿溶血病的认识和分析,本文将从发病机理、临床表现及检查、治疗这三个方面为切入点进行.     

Lower incidence of de novo donor-specific antibodies against HLA-DR in ABO-incompatible renal transplantation

Recently, in vitro experiments have demonstrated that anti-blood group A/B antibody binding to endothelial cells induce a protective effect against antibody-mediated injury. This study aimed to clarify the potential clinical benefit of ABO incompatibility in donor-specific HLA antibody (DSA)-induced chronic antibody-mediated rejection (ABMR). We enrolled 215 ABO-incompatible renal transplant (ABO-I) and 467 ABO-identical/compatible renal transplant recipients (ABO-Id/C). The prevalence of de novo DSA production and incidence of biopsy-proven chronic ABMR were compared between the two groups. The incidence of DR-associated de novo DSA was significantly lower in ABO-I than in ABO-Id/C (P = 0.028). Diagnostic biopsy for ABMR was conducted in 54 patients (11 ABO-I and 43 ABO-Id/C). Biopsy-proven chronic ABMR was lower in ABO-I than in ABO-Id/C (27.3% [3/11] vs. 44.2% [19/43]) patients. Our findings suggest that ABO incompatibility may cause low production of DR-associated de novo DSA, possibly resulting in a reduced incidence of chronic ABMR.     

一例ABO血型重组等位基因的分子特性

目的分析一例ABO血型重组等位基因的分子特性。方法ABO表型鉴定采用试管法。ABO基因和FUT1基因编码区序列检测采用PCR测序法。利用等位基因特异性引物扩增测序技术鉴别先证者ABO等位基因。先证者及其母亲ABO基因全长序列测定采用二代测序方法。结果先证者红细胞与抗H不凝集,FUT1基因为c.551_552del AG纯合,判定先证者为类孟买型。先证者ABO基因双链测序结果为c.261G/del、467C>T、c.526C>G、c.657C>T、c.703G>A、c.796C>A、c.803G>C、c.930G>A杂合。单链测序结果显示先证者有一个ABO*A1.02等位基因,另一个为ABO*O.01.01和ABO*B.01重组形成的等位基因。二代测序数据显示可能重组的位置在核苷酸c.375-269到c.526之间,家系分析显示先证者重组等位基因遗传自母亲。结论ABO血型等位基因存在重组现象。发现了1例ABO*O.01.01和ABO*B.01重组形成的新等位基因。     

ABO incompatible renal transplants and decreased likelihood for developing immune responses to HLA and kidney self-antigens

Immune responses to HLA and tissue-restricted self-antigens (SAgs) have been proposed to play a role in the pathogenesis of renal allograft (KTx) rejection. However, ABO incompatible (ABOi) KTx recipients (KTxR) following depletion of antibodies (Abs) to blood group antigens had fewer rejections. To determine the mechanisms, pre- and post-transplant sera from ABOi (n = 18) and ABO-compatible (ABOc) (n = 45) KTxR were analyzed for Abs against HLA class I and II by LABScreen single antigen assay. The development of Abs to SAgs was measured by ELISA. Immunity to Collagen IV (Col-IV) and cytokines induced were measured by ELISPOT. While 8/45 (18%) ABOc KTxR developed new donor specific antibodies to HLA (DSA) following transplantation, 0/18 ABOi KTxR developed DSA. ABOi KTxR failed to develop Abs to kidney SAgs (Col-IV and fibronectin (FN)). In contrast, 7 ABOc KTxR developed Abs to both Col-IV and FN. Col-IV stimulation of lymphocytes from ABOc KTxR demonstrated increased IFNγ, IL-17 and decreased IL-10. In contrast ABOi recipients following stimulation with antigens resulted in more IL10 and reduced IFN-γ and IL17 production. At one year, the GFR in ABOi KTxR were significantly better (p < 0.04) than ABOc KTxR. De novo DSA and immune responses to SAgs are reduced or absent in ABOi KTxR which we propose leads to less acute rejection and better long term function following ABOi KTx.     

A prospective observational study to compare transfusion outcomes in ABO identical versus ABO non-identical single donor platelet concentrates: An experience from a tertiary healthcare center in India

ABO incompatible single donor platelet concentrates (SDPC) have a concern about unsatisfactory increments as well as possibility of hemolytic transfusion reaction. But from Indian population no study has commented on the clinical and laboratory outcome of ABO mismatched platelet transfusion. The aim of study was to compare transfusion outcomes in ABO identical versus ABO non-identical single donor platelet concentrates. In this prospective observational study, 400 SDPC transfusions among different patients were included. In group A (n = 200), ABO identical SDPC transfusions and in group B (n = 200) ABO non-identical SDPC transfusions were added. Corrective count increment (CCI), absolute count increment (ACI), percent platelet recovery (PPR) were calculated and incidents of hemolytic transfusion reactions were noted. In group A mean ± SD of ACI, CCI and PPR were as 30.78 ± 12.51, 15.10 ± 6.677, 39,948.9 ± 20,099.392. In group B, mean ± SD of ACI, CCI and PPR were – 25.4 ± 15.65, 12.509 ± 5.906, 33,559.2 ± 22,150.304. And when CCI, ACI, PPR were compared with group A and group B, statistically significant differences were noted (P < 0.05). There was statistically significant difference in CCI, ACI and PPR in oncology patients and other prophylactic recipients except patients with dengue and other infectious disease. But there was no hemolytic transfusion reaction noted in any group. Our study clearly establish the potential benefits of ABO-identical PLT transfusion. It also points out that in emergency conditions or when there is a paucity in inventory, ABO non-identical SDPC transfusion may be lifesaving and clinically significant.     

Molecular genetic analysis for a novel Ael allele of the ABO blood group system

The ABO blood group is the most important system in clinical transfusion medicine. Previous studies on the genetic base of the common ABO group and some rare ABO subgroups have suggested that the molecular genetic background of the ABO gene in the Chinese population has specific character. In this study, we carried out a molecular genetic analysis of a family with an individual diagnosed as Ael subgroup by serological tests. A novel allele was identified in our A subgroup cases.     

一种新的B3变异型相关的B糖基转移酶基因M142T突变研究

目的 研究中国人个体ABO血型系统中具有混合外观凝集特征的B3变异型的分子遗传背景.方法 血型血清学方法鉴定2例ABO血型疑难样本的红细胞表型,应用连续凝集方法和13个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点检测法,排除外源性或内源性DNA嵌合的可能.对ABO基因第6、7外显子和部分内含子进行聚合酶链反应和DNA序列分析,并进一步通过克隆测序法鉴定2个样本的ABO基因单倍型.结果 2个无关个体红细胞与抗-B和抗-AB发生混合外观凝集,连续凝集法和STR检测排除了样本的外源性DNA污染和内源性遗传嵌合子,根据血清学特征确定这2个个体红细胞均为A183血型.单倍型序列分析发现2个样本为A1B杂合子,其中B等位基因与B101相比,差异仅在第7外显子的425T>C错义突变,导致B糖基转移酶多肽链M142T替换.结论 在中国人群中发现一种新的可能导致B3变异型的ABO等位基因.     

一种新的B3变异型相关的B糖基转移酶基因M142T突变研究

目的 研究中国人个体ABO血型系统中具有混合外观凝集特征的B3变异型的分子遗传背景.方法 血型血清学方法鉴定2例ABO血型疑难样本的红细胞表型,应用连续凝集方法和13个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点检测法,排除外源性或内源性DNA嵌合的可能.对ABO基因第6、7外显子和部分内含子进行聚合酶链反应和DNA序列分析,并进一步通过克隆测序法鉴定2个样本的ABO基因单倍型.结果 2个无关个体红细胞与抗-B和抗-AB发生混合外观凝集,连续凝集法和STR检测排除了样本的外源性DNA污染和内源性遗传嵌合子,根据血清学特征确定这2个个体红细胞均为A183血型.单倍型序列分析发现2个样本为A1B杂合子,其中B等位基因与B101相比,差异仅在第7外显子的425T>C错义突变,导致B糖基转移酶多肽链M142T替换.结论 在中国人群中发现一种新的可能导致B3变异型的ABO等位基因.