基于拉曼光谱的成团泛菌快速鉴别

目的 对药品中存在的成团泛菌进行纯化与鉴定,建立应用共聚焦显微拉曼光谱仪快速准确判定药品微生物限度成团泛菌的方法.方法 药品进行微生物限度检测,对需要检测的微生物范围之外的可疑菌落,对可疑菌落进行培养,分离纯化.然后进行种属鉴别,蛋白质鉴别和拉曼光谱鉴别.结果 在木糖赖氨酸脱氧胆酸钠培养基(xylose lysine ...     

用gap基因和MALDI-TOF MS技术对临床常见凝固酶阴性葡萄球菌快速分子鉴定

目的 研究旨在通过对比gap基因和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)蛋白质质谱鉴定,建立对临床常见凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase negative staphylococcus,CNS）的快速分子学鉴定。方法 用gap基因对临床常见CNS进行扩增和测序,获得序列在GenBank中进行比对,构建进化树进行同源分析,同时与MALDI-TOF MS蛋白质质谱鉴定比较。结果 Gap基因相似率为39%～98%,有足够序列差异区分CNS。进化树同源分析显示,CNS分类具有较高的可信度（大于77%）;MALDI-TOF MS蛋白质质谱鉴定与gap基因鉴定符合率为100%。结论 MALDI-TOF MS蛋白质质谱鉴定可以用于CNS的快速、准确鉴定,比传统方法和分子方法具有优势。     

改进的质谱兼容的胶内酶切方法

目的：改善胶内酶切的肽段回收率，提高蛋白质的有效鉴定率。方法：将改进的胶内酶切“四步提取法”，应用到96个双向电泳蛋白质斑点分析。结果：该方法提高了胶内蛋白质酶切肽段的回收率，改善了质谱图谱的质量。蛋白质的有效鉴定率达89．6％，其中，数据库检索得分80分以上者达82％。另外，证实了酶解原液直接用于质谱分析可获得较好信噪比的谱图。结论：应用“四步提取法”使得酶解肽段提取率和蛋白质的有效鉴定率明显提高。     

随机扩增多态性DNA和同工酶分析鉴别金银花品系

目的 采用多态基因研究新鉴定金银花品系，方法 用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术和过氧化物酶同工酶（POD）电泳分析技术对大毛花忍冬和鸡瓜花忍冬两品系进行鉴别。结果 大毛花忍冬花扩增DNA谱带24条，鸡瓜花忍冬共扩增DNA谱带26条，POD的变带数目分别为5条和2条。结论 两品系DNA指纹图谱和POD指纹图谱具有明显差异。     

三黄颗粒HPLC指纹图谱与化学模式识别分析

目的建立三黄颗粒HPLC指纹图谱,通过化学模式识别方法全面评价其内在质量。方法采用HPLC方法,确定了19个批次三黄颗粒指纹图谱的31个共有峰,明确鉴定了其中7个共有峰的化学成分,采用指纹图谱相似度评价,结合主成分分析和聚类分析对解放军202医院生产的19批三黄颗粒的质量进行评价。结果 19批三黄颗粒样品图谱与对照图谱比较,除4个样品外,其他样品相似度均大于0.75。主成分分析与聚类分析均可将该检验的19批三黄颗粒很好的分为3类,且分类结果一致。结论所建立的HPLC指纹分析方法高效、稳定,结合化学模式识别研究可有助于三黄颗粒整体质量控制,同时为其质量评价提供一种有效手段。     

痕量微生物快速检测技术

痕量微生物快速检测技术结合流式细胞术和图像细胞术的功能,能够实现细胞微生物的快速检测、荧光信号量化与微生物形态的可视化,其对微生物的快速准确计数,在食品、饮用水等的质量安全检测中可以发挥重要作用,对于保证居民日常生活及身体健康具有重要实际意义。该文介绍了当前几种常用的微生物检测方法,重点阐述了痕量微生物快速检测技术的应用及优缺点,并对该技术在微生物检测方面的应用前景及发展趋势进行了展望。     

酸枣仁与其混淆品及伪品的RAPD分析

目的 对酸枣仁及其混淆品和伪品进行DNA指纹图谱的鉴别研究,并对分子生物学在中药材鉴别中存在的一些问题进行探讨。方法 应用随机扩增DNA多态性技术对酸枣仁及其易混淆品、伪品进行DNA指纹图谱多态性的比较。结果 DNA指纹图谱显示,各样品间具有不同的遗传关系,根据这些差别成功地进行了酸枣仁及其易混淆品、伪品的鉴别。结论 RAPD可以有效地鉴别酸枣仁与其混淆品及伪品。同时对RAPD中存在的问题进行了讨论。     

NanoUPLC-nano-ESI-MS/MS鉴定二维凝胶银染后蛋白质点的方法

目的提高银染色后二维凝胶电泳图谱中蛋白质斑点的鉴定率。方法采用欧洲分子生物学实验室（EMBL）银染色方法结合改进后的质谱兼容胶内酶切方法并应用超高效纳升液相色谱-电喷雾串联质谱（NanoUPLC-nano-ESI-MS/MS）对二维凝胶电泳上的蛋白质斑点进行分析。结果二维凝胶上50个蛋白质斑点中46个点得到鉴定,共鉴定出74个有意义的蛋白质,其中一个蛋白斑点鉴定出6个有意义的蛋白质。结论该方法获得的样品经质谱检测和网上数据库比对,蛋白鉴定率高达90%以上,与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）和串联飞行时间质谱（MALDI-TOF/TOF-MS）方法相比,蛋白质的鉴定率明显提高,表明该方法适合鉴定复合蛋白质斑点,是鉴定银染后二维凝胶蛋白质的一种强有力的分析手段。     

九如天宝液毛细管电泳指纹图谱研究

目的　建立中成药九如天宝液毛细管电泳指纹图谱 ,为鉴别该药物的真伪提供科学依据。方法　在缓冲液为 2 5mmol·L-1硼砂 ,运行电压 2 4kV ,温度 2 5℃条件下进行电泳实验。结果　含雌蛾、雄蛾、交配蛾及蛹的九如天宝液指纹图谱特征明显。结论　以毛细管电泳法绘制中成药九如天宝液的指纹图谱快速、简便、分离效率高、专属性强     

小鼠小肠上皮细胞经γ射线照射后蛋白质组差异分析

目的　分析γ射线照射后 ,在辐射损伤期和修复期小鼠肠上皮细胞蛋白质组的改变 ,以探讨肠上皮细胞损伤与修复的分子机理。方法　采用 9Gy全身照射BALB c小鼠 ,分别于照射后3h和 72h取小肠制备卷肠切片 ,染色并观察小肠形态。分离未照射小鼠及照射后 3h和 72h小鼠的肠上皮细胞 ,制备蛋白样品 ,采用双向电泳技术分离样品 ,PDQuest软件处理双向电泳图谱 ;并对差异的蛋白质点进行肽质量指纹分析。结果　小鼠肠上皮在照射后 3h以损伤性改变为主 ,72h后出现明显再生修复。采用双向电泳技术在正常对照组、照射后 3h组以及照射后 72h组分别检测到(6 38± 39)、(5 6 6± 32 )和 (5 91± 2 9)个蛋白质点。对其中 2 8个差异蛋白质点进行了肽质量指纹分析 ,经数据库检索 ,初步鉴定为一些与代谢、过氧化应急、信号转导相关的蛋白质。结论　电离辐射能诱导小鼠肠上皮细胞蛋白表达的改变 ,双向电泳技术对从整体方面揭示辐射损伤的分子机理有重要价值。     

夏天无高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立夏天无药材的高效液相指纹图谱,为夏天无的鉴别及质量控制提供依据.方法 采用高效液相色谱法,对不同产地的夏天无药材中的成分进行指纹图谱研究.结果 高效液相色谱指纹图谱中多数组分可以达到较好的分离,共得到11个共有峰,13批样品的相似度较好.结论 本方法具有较好的稳定性,精密度和重复性,所建立的指纹图谱可用于夏天...     

去感热注射液指纹图谱进样方式的研究

目的建立去感热注射液挥发性成分指纹图谱的进样方式。方法采用直接进样、固相微萃取、有机溶剂提取、吹扫捕集和顶空进样等进样方式进行比较。结果选定顶空进样为指纹图谱研究的进样方式。结论本方法为去感热注射液的挥发性成分的指纹图谱研究提供了可靠的进样方式。     

中药指纹图谱的研究概述

综述中药指纹图谱在控制中药材及中成药质量方面的作用和特点,介绍光谱法(紫外和红外光谱);色谱法(薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱、高效逆流色谱)、高效毛细管电泳法、分子生物学方法等指纹图谱的建立和应用;指出了指纹图谱法可在尚不完全清楚其化学成分的情况下,得到全部药材组分的图谱,从而,可作为可控指标。提出了构建指纹图谱中的问题以及今后发展的方向。当前,国内外认可和研究较多的为高效液相色谱指纹图谱,其它指纹图谱技术的发展,也将对中药质量控制有深远的意义。     

药材质量对茵陈注射液指纹图谱的影响

目的建立从药材到半成品再到成品的全程指纹图谱控制方法,根据药材-半成品-成品三者指纹图谱间的相关性,对中药药材和半成品质量进行评判和预测。方法本文建立了茵陈注射液的系列指纹图谱,初步验证了药材-半成品-成品三者指纹图谱间的相关性,以系统聚类分析方法研究了不同来源样品的成分差异性,制订了色谱图中所指示的各成分对质量一致性的权重。结果本文建立的方法能更加准确地预测和控制茵陈注射剂生产过程每步的工艺产品质量。结论本文初步验证了根据药材-半成品-成品三者指纹图谱间的相关性及序贯控制产品质量理念的可行性与必要性。     

尾叶香茶菜的高效液相指纹图谱研究

目的采用反相高效液相色谱法建立尾叶香茶菜的指纹图谱。方法采用Diamonsil C18色谱柱（5μm,250mm×4．6mm）;流动相为乙腈-水（23：77）;流速1．0ml／min;柱温为25℃;检测波长为230nm。结果建立了尾叶香茶菜的高效液相色谱指纹图谱。8批尾叶香茶菜指纹图谱相似度≥0．9435。结论采用HPLC指纹图谱检测技术可有效控制尾叶香茶菜的质量。     

某潜艇舱室微生物本底调查和污染现状分析

目的 跟踪监测全封闭续航期间某型潜艇舱室微生物数量和种类,并评价其潜艇舱室微生物污染水平.方法 LWC-1型空气微生物采样器采样,选择性培养基筛查嗜肺军团菌,VITKE2微生物自动鉴定系统检测微生物种类.结果 续航期间各监测点空气微生物平均浓度明显高于码头封舱时采样,最高达10倍;潜艇续航过程中各监测点微生物浓度超过国家适居评价标准的1～2倍;分离鉴定的微生物种类以人源性条件致病菌为主.结论 全部封闭续航期间潜艇舱室空气微生物平均浓度超过国家普通微生物污染评价标准,对工作人员存在潜在致病风险.     

不同来源板蓝根药材乙酸乙酯提取物HPLC指纹图谱分析

目的建立不同来源板蓝根药材乙酸乙酯提取物特征指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法，ODS-C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm．），流动相为甲醇-0．2％磷酸水溶液系统，线性梯度洗脱，检测波长230nm，进样量为10μl。实验测定了10批药材并记录了指纹图谱，不同样品之间的相似度采用国家药典委员会开发的中药指纹图谱相似度评价系统（2004A）计算。结果建立了板蓝根药材乙酸乙酯提取物HPLC指纹图谱，以峰形较好、峰面积较高的3号峰为参照峰，确立了板蓝根药材乙酸乙酯提取物指纹图谱的14个特征共有峰，但特征峰的相对含量差异较大，导致指纹概貌差异。结论所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重现性和稳定性，为深入研究板蓝根的质量标准提供了实验基础。     

病理状态下单体氨基酸的核磁共振(氢)谱分析及定性定位的提示

目的 研究人体病理状态时的体液单体氨基酸的核磁共振(氢)波谱的表达特征,并在平等条件下与正常体检健康人体的体液单体氨基酸进行对比分析,寻找差异,并推导图谱信息与疾病的相关关系,建立监测疾病的发生、发展与转归的实验诊断方法学,为临床诊断提供全新的检验指标。方法 对55例临床各系统疾病、33例健康对照者的体液(血清、血浆、胸水、脑脊液、精浆)进行分析。结果 指纹区信息提示:结核患者的体液中均出现4.60～4.62ppm(无量纲单位)的化学移氨基酸,化学官能团为>CH=CH_2,统计学处理r>0.999,P<0.001,在对照组中仅1例出现该特征峰谱,相关十分显著。结论 主要应用于核物理研究的NMR设备,其功能拓展为医学检验分析人体异常蛋白质提供了全新的检测技术手段,具有灵敏准确的优点。     

新疆昌吉地区某奶牛场临床型乳房炎防治

奶牛乳房炎作为一种多因素疾病,除了易感牛、病原微生物与环境三者间相互影响外．其复杂性还表现在致病菌的多样性,从而给防治工作带来极大困难。本文对新疆昌吉地区某奶牛场乳房炎发病情况进行分析,进行了病原分离鉴定,实施针对性治疗用药,并进行临床应用．确定分级治疗方案。治疗结果,表明,病原分离、针对性选择用药、中西兽医结合治疗等方法的联合应用。对于奶牛临床型乳房炎具有明显效果。在日常兽医临诊实践中临床型乳房炎治疗可以结合症状进行简易诊断。大致确定病原菌,选用喹诺酮类、大环内酯类等敏感抗生素进行防治,也可达到较好的防治效果。     

DNA指纹图谱在炎症性肠病肠道菌群分析中的价值

目的利用DNA指纹图谱分析肠道菌群变化与炎症性肠病的关系。方法研究对象分为正常组和病例组,每组各6例,分离结肠黏膜组织,提取黏膜细菌组DNA,应用细菌16 S rDNA的PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对肠道菌落进行初步鉴定,并对其组成结构进行分析,留取部分远端结肠进行菌群定植数量分析。结果病例组和正常组的所有样本分别进行3次以上的PCR-SSCP指纹图谱分析,得到了稳定可重复的图谱。病例组同正常组比较,菌群多样性明显减少。肠球菌和肠杆菌数量增多(P<0.05),乳酸杆菌和双歧杆菌数量明显减少(P<0.05)。两组比较主要是不可培养细菌的差异。结论炎症性肠病患者肠道菌群菌属多样性减少,各肠道菌属间存在比例失调,肠道微生态失调可能参与炎症性肠病的产生或加重过程。