抗补体5a受体抗体对变应性鼻炎大鼠Treg/Th17免疫失衡的调控作用

目的 探究抗补体5a受体(C5aR)抗体对变应性鼻炎(AR)大鼠调节性T细胞(Treg)/辅助T淋巴细胞17(Th17)免疫失衡的调控作用及机制初探。方法 60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、抗C5aR抗体组、抗C5aR抗体+Jagged1组,每组15只,除对照组外,其余各组大鼠均用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)₃]致敏法建立AR模型。造模成功后,抗C5aR抗体组腹腔注射10 mg/kg抗C5aR抗体,抗C5aR抗体+Jagged1组腹腔注射10 mg/kg抗C5aR抗体和5μL的10μg/mL Jagged1钛,对照组和模型组注射等体积的生理盐水,每周注射1次,持续4周。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白E(IgE)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-6、IL-10和IL-17水平,HE染色和PAS染色观察鼻腔黏膜组织嗜酸性粒细胞与杯状细胞数目,免疫组织化学染色检测Notch1表达,Western blot检测RORγt、Foxp3、Notch1及Jagged1蛋白表达,流式细胞术检测外周血Treg和Th17亚...     

补体C5a 及受体对人肾间质成纤维细胞增殖的影响及机制研究

目的 探讨补体C5a 及受体(C5aR)对人肾间质成纤维细胞(human renal interstitial fibroblasts,hRIFs)增殖及纤维化相关因子表达的影响。方法 原代培养hRIFs 细胞,对细胞进行鉴定后,检测C5aR 表达情况;同用C5a和C5aR 拮抗剂分别对hRIFs 处理后检测细胞增殖、细胞外基质蛋白(fibronectin,Collagen-I)以及转化生长因子-β1(TGF-β1)的蛋白表达情况。结果 hRIFs 细胞vimentin 蛋白表达阳性,desmin 蛋白表达阴性,C5aR 表达于hRIFs细胞表面。MTS 实验结果显示:与对照组相比,C5a 纯品(浓度分别为10,15,20nmol/L)刺激后第2h,8h 的A 值差异无统计学意义 (P>0.05),刺激后第24h 的A 值(0.217±0.037 vs 0.613±0.016, 0.793±0.041, 0.887±0.039) 显著升高,差异有统计学意义(t=4.891,4.211,8.408,均P ＜ 0.05)。与C5a 纯品组相比,C5a 纯品+C5aR 拮抗剂组的A 值明显降低(0.887±0.039 vs 0.424±0.016),差异有统计学意义(t=8.657,P ＜ 0.05)。Western-Blot 结果显示,与对照组相比,补体C5a(20nmol/L)刺激后第24h,fibronectin(26 091±128 vs 15 400±105), Collagen-I(31 229±129 vs 24 823±136)以及TGF-β1(27 855±161 vs 20 326±152) 蛋白表达水平都有明显增加,差异具有统计学意义(t=4.891,5.820, 2.311,均P ＜ 0.05)。与C5a 纯品组相比,C5a 纯品+C5aR 拮抗剂组fibronectin(22 188±132 vs 26 091±128) ,Collagen-I(27181±113 vs 31 229±129) 以及TGF-β1(25 013±139 vs 27 855±161) 蛋白表达水平显著降低,差异具有统计学意义(t=2.349,1.618,3.774,均P ＜ 0.05)。结论 补体C5a-C5aR 相互作用可导致hRIFs 细胞增殖、促纤因子TGF-β1表达升高及细胞外基质蛋白生成增加,对肾间质纤维化具有重要意义。     

肝细胞生长因子与肾脏

肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor,HGF）发现至今已20年,是一种对多种器官具多效性的多肽细胞因子.HGF与其受体C-met酪氨酸激酶有促有丝分裂、促运动、促形态形成和抗凋亡作用.它不仅在肝脏再生、肝硬化、肺纤维化、肿瘤发生等中起着重要作用,也与肾脏有密切关系.研究表明HGF与肾脏发生有关,能促进肾脏再生和修复,对肾间质纤维化的发生及发展具有调节作用.     

慢病毒载体Venus在HL-60细胞应用的可行性研究

随着对急性髓系白血病(AML)发生、发展的基因机制深入研究,构建转染效率高且对细胞无毒性作用的载体变得十分重要。为了研究补体C3a的受体蛋白C3aR1(complement component 3a receptor 1)在AML中的作用,构建了携带C3aR1的第三代慢病毒载体Venus。本研究主要观察Venus慢病毒载体在急性髓系白血病中应用的可行性。采用磷酸钙沉淀法将重组载体Venus-C3aR1转染包装细胞293T细胞,产生慢病毒颗粒,感染HL-60细胞,通过检测绿色荧光蛋白(GFP)观察感染效率,用RT-PCR和流式细胞术鉴定感染后HL-60细胞C3aR1的表达情况。用CCK8法绘制细胞生长曲线、观察细胞诱导分化能力来判断慢病毒载体的细胞毒性作用。结果显示,流式细胞仪(FCM)检测慢病毒感染率>95%,感染后HL-60细胞上C3aR1表达明显增加,病毒包装成功。慢病毒感染前后细胞生长曲线及诱导分化能力无明显变化,说明慢病毒载体不影响HL-60细胞的一般生物学特性,无明显的细胞毒性作用。结论:Venus慢病毒载体对AML细胞株HL-60的感染效率高,能够整合到细胞基因组中实现目的基因的稳定表达。慢病毒感染对细胞无明显的细胞毒性作用,不会干扰靶基因在细胞株中功能,因此慢病毒载体可以为白血病细胞的研究提供可靠的技术支持。     

C5a抑制剂改善烧伤引起的心肌功能障碍

以往研究发现，脓毒症时心肌细胞内的过敏毒素C5a与其受体（C5aR）结合可导致心肌功能障碍。烧伤引起的炎症反应同样会使C5a表达增加。本实验研究了C5a抑制剂对烧伤引起的心肌功能障碍的影响。实验通过复制大鼠标准深度烧伤模型，然后监测左心室压力；并测定离体心肌细胞收缩力。结果显示：烧伤后左心室压力和离体心肌细胞收缩力均显著降低。     

OX40L在C57BL/6与BALB/c小鼠组织的差异性表达及分析

背景:有研究发现C57BL/6小鼠对动脉粥样硬化易感,而BALB/c小鼠却对动脉粥样硬化不易感.OX40L的表达情况与动脉粥样硬化的狭窄程度和心肌梗死的严重度相关,其在两种品系小鼠中是否存在表达差异?目的:分析0X40L在BALB/c和C57BU6小鼠心脏、大脑、肾脏、骨骼肌和脾脏组织的表达差异.方法:取C57BL/6和BALB/c小鼠心脏、大脑、肾脏、骨骼肌和脾脏组织,以Trizol提取总RNA, RIPA Buffer提取组织总蛋白.采用RT-PCR和Westem Blot方法检测两种品系小鼠心脏、脑、肾脏、脾脏和骨骼肌的OX40LmRNA和蛋白的表达.OX40L在两种品系小鼠不同器官间的表达差异.结果与结论:RT-PCR结果显示,C57BL/6小鼠心脏OX40LmRNA表达显著高于BALB/c小鼠(P＜0.05),脾脏OX40LmRNA表达明显低于BALB/c小鼠(P＜0.05),两种品系小鼠大脑、肾脏及骨骼肌OX40LmRNA表达差异无显著性意义;Western Blot结果显示,两种品系小鼠OX40L的蛋白表达均在心脏最高;C57BL/6小鼠心、脑及肾OX40L蛋白表达均显著高于BALB/c小鼠(P＜0.05),两种品系小鼠骨骼肌和脾脏OX40L蛋白表达差异无显著性意义.两个品系小鼠OX40L mRNA的表达水平与蛋白表达水平不完全一致.C57BL/6小鼠心脏中OX40L mRNA转录水平较BALB/c高,但在脾脏中表达量较后者低;C57BL/6小鼠心脏、大脑和肾脏OX40L蛋白水平均较BALB/c小鼠高;两种品系小鼠之间的表达差异提示OX40L可能与C57BL/6小鼠易感动脉粥样硬化有关.     

前列腺素与造血调节

近20年来,研究者们发现前列腺素(PG)尤其是前列腺素E(PGE)在正常及缺氧、感染等异常情况下对造血都有重要调节作用.PGE能在骨髓、脾脏、肾脏等主要造血相关器官中合成,促进造血干细胞的增殖,促进红系祖细胞的增殖和分化,抑制粒单系尤其是单核细胞系的增殖和分化;这些作用受造血细胞表面Ia抗原的表达及细胞增殖状态、造血调节细胞、造血调节因子的相互作用等许多因素影响;且有证据表明,PGE是通过膜受体——cAMP系统将信息传递进细胞内的.PG在造血相关器官中的合成     

胎儿5种器官凝血因子Ⅷ:C、Ⅸ:C和vWF:Ag测定的初步观察

为了确定凝血因子Ⅶ:C、Ⅸ:C 和 vWF:Ag 在胎儿期的发生部位,本文就用水囊引产法获得胎龄18～23周的胎儿,分别测定其肾、肝、脾、骨髓和胸腺等5种脏器中凝血因子Ⅷ:C、Ⅸ:C 及 vWF:Ag 的水平。并比较了肾组织培养前后凝血因子水平的变化。结果表明,肾脏组织凝血因子Ⅷ:C、Ⅸ:C 的水平明显高于其他组织。随着培养后细胞数的增殖,Ⅷ:C 和Ⅸ:C 的水平也有了提高。因此,初步认定胎儿肾脏组织可能是合成或贮存凝血因子Ⅷ:C 和Ⅸ:C 的器官之一。     

急性肾损伤时水通道蛋白2及钠钾泵的表达

目的 探讨水通道蛋白2的表达及钠-钾-三磷酸腺苷酶在多器官功能障碍肾损伤发病机制中的作用,研究大鼠多器官功能障碍肾损伤与水通道蛋白2及钠-钾-三磷酸腺苷酶的表达.方法 选取健康大鼠72只,随机(随机数字法)分为对照组24只,脂多糖组48只,采用大鼠腹腔注射脂多糖5 mg/kg造成内毒素致多器官功能障碍动物模型,对照组仅作假手术处理.造模成功后6h、12h、24 h、2d、3d、5d分别处死动物,留取血液、尿量进行生化检测,并应用免疫组化法和RT-PCR技术检测肾组织内水通道蛋白2 mRNA及蛋白的表达水平.应用试剂盒测定钠-钾-三磷酸腺苷酶的含量及活性.结果 造模成功后致伤组大鼠尿量迅速减少,48 h后尿量增多.尿素氮、肌酐逐渐增高,48 h达高峰,此后逐渐下降.水通道蛋白2 mRNA及蛋白表达迅速减少,48 h降至最低,此后逐渐增多.钠-钾-三磷酸腺苷酶含量差异无统计学意义,但其活性在造模成功后明显降低,此后逐渐增高,但仍低于对照组.结论 大鼠多器官功能障碍综合征肾损伤模型中,水通道蛋白2是肾脏重吸收功能恢复的结构基础,钠-钾-三磷酸腺苷酶则直接参与或间接反映肾脏的能量代谢状态,只有在水通道蛋白2及能量代谢恢复后,大鼠的肾脏功能才能逐渐好转.     

糖尿病大鼠肾脏XBP1的表达及普罗布考的干预研究

目的通过观察糖尿病大鼠肾脏中X盒结合蛋白1(XBP1)的表达,评价肾脏的内质网应激水平,并通过观察普罗布考对XBP1表达的影响,探讨其肾脏保护作用。方法 80只大鼠随机分为健康对照组(C组n=25)及造模组(n=55),造模组给予链脲佐菌素(STZ)60mg/kg一次性腹腔注射构建1型糖尿病大鼠模型,将造模成功的糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(D组n=28),普罗布考组(P组n=27)。P组给予普罗布考110mg/kg.d灌胃,D组及C组给予同体积蒸馏水灌胃。分别检测4周,8周及12周24h尿蛋白,血清胆固醇、甘油三脂、尿素氮及肌酐。光镜下观察肾脏病理变化,免疫组化观察肾组织XBP1的表达情况,western-blot测定XBP1的表达情况。结果 C组24h尿蛋白、血清尿素氮、肌酐、甘油三酯及胆固醇4周,8周及12周均处于正常范围,D组以上指标在4周、8周及12周逐渐升高,明显高于同时间的C组,差别有统计学意义(P0.05),P组以上指标亦逐渐升高,但明显低于同时间的D组,差别有统计学意义(P0.05);C组大鼠肾脏在4周、8周及12周均显示正常肾脏结构,D组大鼠表现出明显的节段性硬化等糖尿病肾病的病理改变,P组大鼠病理改变较D组明显减轻;免疫组化显示D组大鼠肾脏中XBP1的表达在4周、8周及12周逐渐升高,明显高于同时间C组,P组大鼠肾脏中XBP1的表达较D组明显减少,免疫组化积分均有统计学差异(P0.05);Westernblot结果与免疫组化相符。结论糖尿病大鼠肾脏中XBP1的表达增多,说明糖尿病大鼠肾脏中内质网应激水平升高,普罗布考可以通过降低内质网应激,下调XBP1的表达起到肾脏保护作用。     

缺血后处理改善肾脏缺血-再灌注损伤的分子机制

随着外科技术的不断进步,肾脏外科手术范围也在逐步扩大,包括肾移植术、肾切开取石术、肾动脉分流术或肾实质损伤及肾部分切除术等在内的多种手术均需要阻断肾动脉,这时肾脏就不可避免地要经历缺血-再灌注损伤（ischemia reperfusion injury,IRI）.肾脏IRI是导致急性肾衰竭和移植肾功能紊乱的最主要原因,是决定肾脏功能的重要因素.因此,寻找有效防治肾脏IRI的措施已成为肾脏外科研究的热点问题.缺血后处理（ischemic p ostconditioning,IPoC）是指在组织、器官缺血恢复血供之前,给予的短暂、数次的再灌注-缺血的处理过程,能够有效改善组织器官发生IRI,由Zhao等于2003年首次利用犬心肌梗死模型实验发现.     

热休克蛋白72的表达对肾移植缺血再灌注损伤的保护及评价意义

目的通过借助Histidine Tryptophan Ketoglutarate（HTK）保护液在肾移植模型中的器官保护作用，研究肾移植缺血再灌注对热休克蛋白（HSP）72表达的影响。方法18只实验用Sprague Dawley（SD）大鼠随机分为2组，分别进行肾移植。单纯冷藏组（C组）：供体肾脏摘除后，在4℃温度下置于普通Ringer solution中保存10h后进行肾移植；HTK组（H组）：供体肾脏摘除后，在4℃温度下置于HTK solution中保存10h后进行肾移植；肾移植缺血再灌后6h，测定血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（Cr）、乳酸脱氢酶（LDH）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）；组织样本用于HSP72表达指数（HI）的测定，以了解热休克蛋白表达对肾移植中缺血再灌注损伤的评价作用。结果H组血清BUN、Cr、LDH、AST明显低于C组（P〈0．05）；HSP72的表达H组明显高于C组（P〈0．01）。结论HTK保护液对肾脏有明显的保护作用；缺血再灌注后热休克蛋白的表达标志着细胞的再生，并具有一定程度的内源性保护作用。     

肝细胞生长因子与急性肾损伤

肝细胞生长因子（HGF）属于可溶性细胞因子家族，是一种多效性因子，肾脏是HGF表达水平最高的器官。近年来研究发现在急性肾损伤（AKI）时，血清及肾脏局部HGF浓度有显著变化，提示HGF与AKI之间有着紧密联系。     

医院营养与饮食护理（8）

肾脏病的营养和饮食护理肾脏是机体的主要器官之一,具有形成尿液,调节体内水和渗透压,调节电解质.调节酸碱平衡和血压等重要作用,肾脏疾病与营养饮食关系密切。随着医学的进步,近二十多年来,肾脏病的饮食治疗也有了较大的发展。正确及时的膳食处理在肾脏病的     

肾小球肾炎的发病与微循环障碍

肾炎是一种免疫性疾病,以肾脏微循环障碍为基本病理变化。肾脏是排泄机体可溶性终末代谢产物、维持内环境稳定的重要器官。全身血液每5分钟即可流经肾脏一次。因此,血液中的毒素、免疫复合物等都可能引起肾脏的损害。肾脏血液循环有良好的自动调节功能。这种调节功能可能属于肌原性的,调节部位可能在肾小球输入细动脉,但也有人认为这种调节与致密斑和前列腺素有关。     

慢性肾脏病中脂联素及脂联素受体的变化及其意义

脂联素是脂肪细胞分泌的一种特异性蛋白质,具有改善胰岛素抵抗、抗炎、抗动脉粥样硬化等作用。研究发现脂联素与肾脏疾病关系密切,脂联素在肾脏中具有抗炎、抗纤维化、抗氧化及改善血管内皮细胞功能等作用。有研究显示尿脂联素可能具有一定的肾脏保护作用。脂联素是通过其受体发挥作用的,人脂联素受体AdipoR1/R2在组织中广泛表达,AdipoR1/R2在肾脏疾病的发生发展中具有重要作用。研究脂联素及脂联素受体在肾脏疾病病中的作用,有助于慢性肾脏疾病的防治。     

有关肾脏的基本知识

肾脏—泌尿系统的“心脏”两个起作用的肾脏,这是给每个人的正常分配。有时一个肾脏功能衰竭或捐献给另一人,即使如此,生命照常进行,因为剩下的一只肾脏容易地取代它丢失了的伙伴的工作。首先,它的工作是滤过身体的血液,提取代谢废物,以尿的形式排泄出去。另外,肾脏调节身体内细胞外液中的钠,氯化物,磷酸盐,氢及其他离子的浓度,最近研究发现,肾脏也产生影响组织活性物质如肾素,红细胞生成素(erythrogenin)及前列腺素E_2(prostaglanclin E_2)等。肾,这一对豆形的器官,位于腰部脊椎两旁,左肾略高于右肾,每个肾脏约10cm 长,5cm 宽,2.5cm 厚。     

辛伐他汀保护糖尿病大鼠肾损害及对肾组织MCP-1表达的影响

目的 观察辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏组织的保护作用及其对尿单核细胞趋化蛋白-1(UMCP-1)排泄和肾组织 MCP-1mRNA表达的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为正常对照(C组,n=8)、糖尿病组(D组,n=8)、辛伐他汀治疗组(S组,n=8).糖尿病大鼠模型建立一周后,S组以辛伐他汀(20mg·kg-1·d-1)灌胃,D组和C组灌以相应量的生理盐水.第2,4,8周检测各组大鼠尾外周血糖,第8周时测12小时尿白蛋白排泄率(UAER)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)和UMCP-1排泄率,处死大鼠留取肾脏标本用于病理学检查及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR).结果 ①与C组比较,D、S组第2,4,8周血糖及糖化血红蛋白(HbAle)水平较明显升高,而后两组间差异无统计学意义;②第8周,D,S组UAER及URBP、UMCP-1排泄率和肾脏肥大指数均高于C组(P＜0.01),S组上述四项指标较D组明显降低(P＜0.01),UMCP-1排泄率与UAER、URBP排泄率及肾脏肥大指数呈正相关;③电镜下S组肾小球病变较D组明显减轻,同C组相比仅有少量病变;④与C组相比,D组大鼠肾脏MCP-1mRNA表达明显上调(P＜0.01),S组MCP-1mRNA表达也增加(P＜0.05)但明显低于D组(P＜0.05).结论 辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏有确切保护作用,其机制可能部分与抑制肾脏MCP-1过度表达有关.     

小儿泌尿系统疾病(12)药物对泌尿系统的损害

任何药物均有双重性，有治病的良性效果，也有对组织和器官的负性影响。全身各个系统和器官均可受药物的损伤，其中以肝、肾受损的机会更多。肝脏是解毒器官，而肾脏是排泄器官，在泌尿系统中，首当其冲者为肾脏。肾脏易发生药物性损害有其解剖生理特点，肾血流旺盛，     

Klotho在慢性肾病和血管钙化中的作用

Klotho基因是KURO-O等于1997年发现的基因,Klotho敲除小鼠表现出早衰的表型,而Klotho过表达小鼠则具有更长的寿命,提示Klotho基因在衰老和衰老相关疾病的发生中起着重要作用。Klotho的主要表达器官是肾脏、脑部和甲状旁腺。Klotho在体内分为膜型和分泌型2种形式,并发挥不同的生理学作用。本文主要综述了Klotho与慢性肾病(CKD)和血管钙化的关系,并对Klotho相关研究提出了展望。