烧伤大鼠肾脏p38激酶活化和TNF-α含量变化

目的探讨严重烧伤大鼠休克期肾脏组织p38MAKP活化水平以及血浆和肾组织TNF-α含量水平变化。方法清洁级成年雄性Wistar大鼠88只,随机分为对照组,烫伤组和SB组(烫伤+SB203580组,SB203580为p38MAPK特异性抑制剂),正常对照组(0h)8只;烫伤组和SB两组各48只,后两组又分为1、3、6、12、24h五个时相点,用Westernblotting方法检测肾脏组织p38MAKP的活化水平,放射免疫法检测血浆及肾脏组织TNF-α的含量变化。结果烫伤组伤后1h肾组织p38活化水平明显增多,3h达峰值(与对照组比较,P<0.05),6h后活化量明显减少,血浆和肾脏组织TNF-α含量在伤后6h开始增加,12h达峰值(与对照组比较,P<0.05),24h仍较高、未恢复正常,SB组上述指标要比烫伤组显著减少(P<0.05)。结论大鼠严重烫伤后1h肾组织p38MAPK活化明显增加、3h活化水平达峰值,从伤后6h开始血浆和肾脏组织TNF-α的含量水平增加明显、12h为最高,说明p38的活化在肾脏损伤中起到十分重要的作用。     

严重烫伤大鼠早期心肌p38MAPK,TNF-α和超微结构变化及川芎嗪对其的影响

目的　研究川芎嗪下调 p3 8MAKP表达与活化对严重烫伤大鼠早期心肌产生保护作用。 方法　清洁级成年雄性Wistar大鼠 10 8只 ,随机分为假烫组 (A) ,烫伤对照组 (B)和烫伤 +川芎嗪组 (C) ,A组 8只 ;B、C两组各 48只 ,又分为 1、3、6、12、2 4、48h六个时相点 ,观察和检测心肌组织 p3 8MAKP的表达情况、TNF -α的含量 ,血清CK -MB含量和心肌细胞的超微结构变化。结果　烫伤对照组和烫伤 +川芎嗪组伤后 1小时心肌细胞内p3 8MAPK大量活化及核转位 ,3小时达高峰 ,6小时明显减弱 ,心肌组织TNF -α在伤后 6小时开始增加 ,12小时达高峰 ,48小时仍较高 ,而反映心肌细胞损伤指标CK -MB和超微结构异常变化基本上也是从伤后 6小时开始 ,12小时达峰值 ,烫伤 +川芎嗪组上述指标要比烫伤对照组明显下降和减轻。结论　心肌p3 8MAPK和TNF -α的含量、血清CK -MB含量和心肌细胞的超微结构异常变化 ,在时间上呈现数小时的时间差 ,从而得出 p3 8MAPK的活化在烧伤早期诱发心肌损伤过程中起到非常重要的作用 ,川芎嗪对严重烧伤早期心肌的保护作用可能是通过下调 p3 8MAKP表达、活化来实现的。     

中药川芎嗪对烫伤豚鼠肾脏保护作用的实验研究

目的　探讨中药川芎嗪对烫伤豚鼠肾脏的保护作用方法　复制 30% TBSAⅢ°烫伤豚鼠 78只,并随机分成川芎嗪 复苏(治疗组)和复苏 (对照组 ),每组均在烫伤后 2、48、12、24、48h6个时相点,分别采血 2~3ml,用放免法测血浆肾上腺髓质素 (ADM)、内皮素 (ET)数值;同时在伤后 412、24、48h4个时相点切取肾脏标本,用电镜观察肾脏超微结构改变;另设正常组。结果　①血浆ADM:伤后两组各时相点差异均有显著性 (P<0 05), 8h达峰值,两组比较对照组低于治疗组,在 8、12、48h各时相点差异有显著性 (P<0 05或P<0 01)。②血浆ET:两组各时相点均显著升高(P<0 01),治疗组升高明显低于对照组,在 8h内差异有显著性(P<0 05)。③肾脏电镜观察:两组伤后 4h即出现明显病理改变, 12h最严重, 48h后减轻。治疗组损害明显轻于对照组。结论　ADM与ET含量变化参与了烧伤休克的发病过程,中药川芎嗪可减轻严重烫伤后肾脏的损害,提高ADM与ET的比值,对烫伤动物豚鼠肾脏有保护作用,ADM有协同作用。     

大鼠肾脏缺血再灌注后IL -6和TNF-α变化与时间的关系

目的：通过观察大鼠肾脏缺血再灌注（I－R）的不同时间IL－6和TNF－α的变化，探索细胞因子在肾脏I－R损伤中的作用。方法：采用大鼠肾脏I－R损伤模型，分别在缺血和再灌注1、4和24h时取血和肾组织，用双抗体夹心ELISA法测定IL－6和TNF－α的含量。结果：缺血组及再灌注4h(R4h)和24h(R24h)组IL－6含量均低于对照组（P＜0．05）；而再灌注1h组与对照组相当，但显著高于缺血组（P＜0．01）。IL－6含量的动态变化在肾组织和血液中呈直线正相关（P＜0．05）。肾组织中TNF－α含量在缺血和再灌注1h组均高于对照组（P＜0．05），血液中TNF－α与对照组无显著性差异。结论：大鼠肾脏I－R时肾组织和血液中IL－6含量随时间的推迟而降低，而肾组织中TNF－α含量在早期增加。     

川芎嗪对兔肾缺血再灌注损伤时血栓素A2/前列环素失衡的调控作用

目的 观察兔肾缺血再灌注损伤时血栓素A2（TXA2）/前列环素（PGl2）的变化,探讨JII芎嗪的保护作用及其机制.方法 将30只日本大耳白兔随机分为3组：假手术对照组（对照组）、缺血再灌注组（再灌注组）、缺血再灌注＋川芎嗪注射液组（川芎嗪组）,同时予再灌注组和川芎嗪组复制兔肾缺血再灌注损伤动物模型,并在缺血前、缺血1h、再灌注5 h时分别经颈总动脉抽血检测TXA2和PGl2降解后的代谢产物TXB2和6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）含量,计算其比值;实验结束时检测肾组织TXB2和6-keto-PGF1α含量与比值,并观察超微结构变化,作对比分析.结果 再灌注组缺血后各时点的血浆TXB2水平均较对照组明显增高（均P〈0.01）,川芎嗪组缺血后各时点的血浆TXB2含量均较再灌注组和对照组明显降低（均P〈0.01）;川芎嗪组血浆和肾组织TXB2/6-keto-PGF1α水平均较再灌注组明显降低（均P〈0.01）;再灌注组肾小球毛细血管和内皮细胞及近曲小管上皮细胞超微结构均严重受损,而川芎嗪组虽大部分肾组织上述部位均存在不同程度损伤性改变,但均较再灌注组明显减轻.结论 川芎嗪可抑制血小板释放TXA2,调控TXA2/PGl2的平衡,遏制无复流现象,对肾缺血再灌注损伤具有防治作用.     

5/6肾切除大鼠早期模型中p38MAPK的动态变化

目的：研究5/6肾切除大鼠模型中p38MAPK磷酸化的动态表达情况。方法：82只雄性SD大鼠分为两组：5/6肾切除模型组72只,假手术对照组10只。模型组造模完成后,分别于肾切除早期（术后1/2h、1h、3h、6h、12h、1d、2d、4d）相应时间点处死,每组9只,假手术组于术后12h处死,称量各组体重及残余肾重,计算肥大指数;下腔静脉取血留取血清测定血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;以Western blotting免疫印迹法检测肾皮质磷酸化p38MAPK活性的表达情况;以病理光镜和电镜观察肾小球、肾小管及肾间质组织形态学及超微结构的变化。结果：模型组与对照组相比,肾脏呈代偿性肥大,肥大指数增高（P〈0.05）,Scr和BUN升高（P均〈0.01）。免疫印迹法显示5/6肾切除术后1/2h、1h、3h、6h、12h磷酸化p38信号呈递增趋势,尤以12h信号最强,之后信号减弱,2d时几乎不可见,4d有较弱的信号,假手术组未见明显信号。光镜下,发现肾小球有轻度系膜细胞增生,基质增宽不明显,肾小管偶有轻度变性,间质偶有炎性细胞浸润。电镜下,偶见足突局灶融合。结论：5/6肾切除大鼠在造模完成后12h时磷酸化p38MAPK表达最强。     

严重烧伤大鼠早期心肌酶心肌组织Ca2+水平和超微结构变化及川芎嗪对其影响

目的研究严重烧伤大鼠早期心肌酶、心肌组织Ca2＋水平和超微结构变化及川芎嗪的调节作用。方法清洁级成年SD大鼠104只,随机分成正常组（n=8）,烫伤组（n=48）,川芎嗪治疗组（n=48）,观察检测伤后1、3、6、12、24、48 h 6个时相点心肌酶（AST、LDH）的变化,以及心肌组织Ca2＋水平和心肌组织的超微结构变化。结果与正常组织相比烫伤组和川芎嗪治疗组的心肌酶在烧伤12 h后达顶峰（P〈0.01）,以后心肌酶逐渐下降;心肌组织Ca2＋水平在伤后12 h达最高（P〈0.01）,以后逐渐下降,到48 h接近正常组;心肌超微结构变化最明显也是在伤后12 h出现的。而川芎嗪治疗组的上述指标要比烫伤组明显减轻。结论烧伤早期血中心肌酶活性升高及心肌超微结构的变化与心肌组织Ca2＋水平升高呈现大致的时间一致性,认为心肌损害可能与心肌组织Ca2＋水平有一定联系。川芎嗪能减轻严重烧伤后心肌组织Ca2＋浓度,及其心肌损害,对心肌有一定的保护作用,具有一定的临床意义。     

造影剂对大鼠肾脏氧化应激状态的影响及可能意义

目的探讨不同造影剂对大鼠肾脏氧化应激状态的影响及可能意义。方法将24只雌性SD大鼠分为正常对照组（c组）及造影剂肾病（CIN）模型组[高渗离子型造影剂复方泛影葡胺组（HOCM组）、低渗非离子型造影剂优维显组（LOCM组）和等渗非离子型造影剂碘克沙醇组（IOCM组）]。所有大鼠均在注射造影剂后24h杀检。采用常规病理组织检查观察肾脏病理改变,TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡。同时检测肾脏氧化应激指标丙二醛（MDA）、过氧化氢（H2O2）、超氧阴离子歧化酶（SOD）、总抗氧化活性（TAOC）、过氧化氢酶（CAT）。结果建模后24h与C组比较,HOCM、LOCM和IOCM组肾小管坏死、肾小管上皮细胞凋亡、肾髓质瘀血均显著升高（P〈0．05）,但肾脏病理改变以HOCM组最为显著,IOCM组最轻。与C组相比,HOCM、LOCM和IOCM组肾MDA显著升高（P〈0．05）,而HOCM、LOCM组肾TAOC显著降低（P〈0．05）;与IOCM组相比,HOCM、LOCM组肾MDA明显升高（P〈0．05）;HOCM组肾H2O2分别较C组、LOCM和IOCM组显著升高（P〈0．05）;但SOD、CAT在各组大鼠差异无统计学意义（P〉0．05）。结论大鼠造影剂肾病时肾脏氧化应激显著增强,氧化应激可能参与CIN发病,造影剂肾毒性大小可能与其对肾脏氧化应激影响程度有关。     

丹参注射液和川芎嗪防治肾缺血-再灌注损伤的对比研究

目的:比较丹参注射液和川芎嗪对肾缺血-再灌注损伤(IRI)的防治效果。方法:40只SD雄性大鼠随机分成丹参组、川芎嗪组、模型组和假手术组。药物干预组分别注射丹参注射液、川芎嗪,模型组与假手术组均注射生理盐水,3d后建立肾缺血-再灌注损伤(IRI)模型。用血管夹阻断左肾血流1h,于缺血末摘除右肾,再灌注后6h及24h采血测肌酐(Scr)值;同时取左肾组织测丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并行病理检查。结果:再灌注6h、24h后,丹参组的Scr与模型组比较无明显差异,但明显高于川芎嗪组和假手术组(P<0.01)。再灌注6h后,丹参组与川芎嗪组肾组织MDA含量无显著差异,而再灌注24h后丹参组的MDA含量明显高于川芎嗪组(P<0.01);再灌注后6h、24h后,川芎嗪组肾组织SOD活性均高于丹参组(P<0.05)。肾脏病理检查提示模型组肾小管坏死明显,丹参组也有较明显的肾小管坏死,而川芎嗪组肾小管病变明显改善。结论:川芎嗪对肾脏IRI有明显的防治作用,而抗氧化可能是其防治作用的机制之一;丹参无明显的防治肾脏IRI的作用。     

牛磺酸对烫伤大鼠血浆及心肌组织肿瘤坏死因子和血管紧张素Ⅱ含量的影响

目的 观察牛磺酸对大鼠严重烧伤后心肌损害的影响。方法 用健康Wistar大鼠．随机分为对照组、烧伤组(造成30％TBSAⅢ度烫伤)和治疗组(烧伤后腹腔注射牛磺酸．剂量400mg/kg体重)。于伤后l、3、6、12和24h检测血浆TNFα、AngⅡ和cTnT含量与心肌中TNFα、AngⅡ含量。结果 烧伤组伤后3h血浆cTnT即呈显著升高，12h达峰值．24h仍显著高于对照组；烫伤后6h血浆和心肌组织TNFα含量显著高于对照组(P＜0．01)，12h达峰值；伤后lh血浆AngⅡ即显著升高，伤后24h血浆及心肌中AngⅡ仍显著高于对照组；牛磺酸治疗组血浆cTnT、TNFα和AngⅡ水平较烧伤组均有显著性降低。血浆TNFα、AngⅡ含量与血浆cTnT变化密切相关。结论 牛磺酸对严重烫伤后心肌损伤有较好的保护作用。     

地塞米松对脓毒症大鼠急性肾功能衰竭中性粒细胞表面CD18和血清TNF-α的影响

目的研究脓毒症大鼠急性肾功能衰竭时中性粒细胞表面CD18和血清TNF—α浓度的变化以及地塞米松（DXM）对其影响。方法72只雄性SD大鼠随机数字表法分成对照组（A组）、脂多糖（LPS）模型组（B组）、DXM＋LPS治疗组（C组）,各组在2、4h和6h时观察8只大鼠肾组织大体外观及病理学变化,测定血肌酐浓度的变化,中性粒细胞表面CD18的表达,以及用ELISA法检测血清TNF—α水平变化。结果B组肉眼观肾脏表面色泽暗红,可见包膜下点状、片状出血;C组肾脏表面有轻度充血、水肿;与A组比较,B组肾脏病理呈急性炎症改变,C组肾脏病变较B组明显减轻。在4、6h时点,B、C组血肌酐浓度与A组比较明显上升（P〈0．05）,但在4、6h时点B组血肌酐浓度高于C组（P〈0．05）。B组中性粒细胞表面CD18表达量（平均荧光道数）和血清TNF—α浓度较A组明显升高（P〈0．05）,C组较B组中性粒细胞表面CD18表达量和血清TNF—α浓度显著降低（P〈0．05）。结论DXM可以通过下调中性粒细胞表面CD18表达量和血清TNF—α浓度,抑制中性粒细胞在肾脏的浸润而保护脓毒症大鼠的肾功能。     

p38 MAPK在高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的:探讨p38 MAPK在高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中的作用.方法:将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK2)分为正常对照组(NG),高糖组(HG),无关siRNA转染组(RG)、转染p38 MAPK siRNA 24 h组(24hG)、转染p38MAPK siRNA 48 h组(48hG).免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和细胞角蛋白(CK)的表达,RT-PCR法检测CK mRNA的表达,Western Blot检测p38 MAPK的活化及α-SMA的表达.结果:p38 MAPK siRNA能显著抑制高糖诱导的p38 MAPK过度活化;高糖刺激后肾小管上皮细胞α-SMA蛋白表达明显高于正常组(P＜0.05),而p38 MAPK siR-NA转染组其水平显著低于高糖组(P＜0.05);高糖诱导HK2细胞CKmRNA和蛋白水平明显降低(P＜0.05),而p38 MAPKsiRNA转染后其水平显著高于高糖组(P＜0.05);结论:高糖可导致肾小管上皮细胞p38 MAPK通路的激活而下调CK,同时导致α-SMA蛋白的表达,诱导其表型转化.     

丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管p38MAPK表达的影响

目的：观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和纤维连接蛋白（FN）表达的影响,从而探讨其防治糖尿病肾病的机制。方法：设立正常对照组（NG）、糖尿病组（DG）和糖尿病丹芪合剂治疗组（DQT）,链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病模型,12周后测定大鼠血糖、血肌酐和24 h尿蛋白及肾脏指数;PAS染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学方法检测肾小管p38MAPK和FN蛋白的表达;RT-PCR方法检测肾皮质p38MAPK mRNA的水平。结果：与NG相比,DG大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白及肾脏指数均显著升高,肾小管上皮细胞p38MAPK蛋白及mRNA和FN蛋白表达明显增多,DQT除血糖外,血肌酐和24 h尿蛋白均显著下降,p38MAPK蛋白及mRNA和FN蛋白表达明显减少。结论：丹芪合剂可能通过抑制p38MAPK的表达而减少FN的分泌和沉积,延缓糖尿病肾小管间质损害的进程。     

中药川芎嗪对烫伤动物豚鼠肾脏保护作用的实验研究

目的　探讨中药川芎嗪对烫伤动物 (豚鼠 )肾脏的保护作用。方法　复制 30 %TBSAⅢ度烫伤动物 (豚鼠 )模型 ,并随机分成复苏组和治疗组 ,每组均在烫伤后 2、4、8、12、2 4、4 8h 6个时相点 ,分别抽腹腔静脉血 2～ 3ml,用放免法测血浆ADM、ET数值 ;同时在伤后 4、12、2 4、4 8h 4个时相点切取肾脏标本 ,用电镜观察肾脏超微结构改变 ;另设正常对照组。结果　①血浆ADM :伤后两组各时相点均显著升高 (P <0 0 5) ,8h达峰值 ,两组比较复苏组低于治疗组 ,在 4、8、12、4 8h各时相点差异有显著性 (P<0 0 5)。②血浆ET两组各时相点均显著升高 (P<0 0 1) ,治疗组升高明显低于复苏组 ,在 12h内差异有显著性 (P <0 0 5,P <0 0 1)。③ADM与ET具有剂量相关性。④肾脏电镜观察 :两组伤后 4h即出现明显病理改变 ,12h最严重 ,4 8h后减轻。治疗组损害明显轻于复苏组。结论　ADM与ET含量变化 ,参与了烧伤休克的发病过程 ,中药川芎嗪可减轻严重烫伤后肾脏的损害 ,提高ADM与ET的比值 ,对烫伤动物豚鼠肾脏有保护作用 ,ADM有协同作用     

肿瘤坏死因子在人膜增生性肾小球肾炎中的表达

目的 :探讨肿瘤坏死因子 (TNF -α)在人膜增生性肾小球肾炎发病中的作用。方法 :采用病理组织学及免疫组织化学SABC法对 2 0例人膜增生性肾小球肾炎进行染色观察。结果 :TNF -α蛋白在肾组织内表达增加 ,阳性反应见于肾小管上皮细胞和肾小球内 ,以肾近曲小管上皮细胞阳性最明显 ,与正常组相比有显著性差异 (P <0 .0 1) ,肾小球内呈程度不等的弱阳性 ,但与正常组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,远曲小管阳性反应不明显。结论 :TNF -α在肾小管内表达增强可能在肾脏纤维化及硬化中起重要的介导作用     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK表达的影响

目的研究氯沙坦对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK表达的影响.方法将60只Wistar大鼠随机等分为对照组、糖尿病组和氯沙坦组;给予一次腹腔注射链尿佐菌素(STZ)制造糖尿病模型,模型成功后,氯沙坦组给予氯沙坦40mg/kg·d-1灌胃,正常对照组和糖尿病组给予等量清水灌胃.第8周测定各组大鼠尿蛋白、内生肌酐清除率,处死大鼠取肾组织石蜡包埋切片,免疫组织化学法观察肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK表达并进行半定量分析.结果糖尿病大鼠尿蛋白排泄、内生肌酐清除率均显著高于对照组(P＜0.01),肾间质损害明显;氯沙坦组24h尿蛋白排泄、肾间质纤维化均较糖尿病组减轻;糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK阳性表达相对面积分别为0.2209±0.0405和0.1942±0.0857,与对照组比较均显著上调 (P＜0.01);氯沙坦组肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK阳性表达相对面积分别为0.0873±0.0176和0.1284±0.0571,较糖尿病组显著下调(P＜0.01). 结论氯沙坦能显著下调糖尿病大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK表达.     

维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及可能的机制. 方法 健康雄性Wistar大鼠18只随机分为对照组、IRI组和维生素E组.动物右肾切除1周后,夹闭左肾动脉制作IRI模型,24 h后取肾标本,维生素E组右肾切除后给予维生素E 50 mg/d灌胃至再灌注24 h.半定量分析肾脏病理损伤、TUNEL检测肾组织凋亡、比色法测肾组织caspase-3活性. 结果 ①与对照组相比,IRI组肾脏病理损伤严重、肾小管上皮细胞凋亡明显增加、caspase-3活性明显增高(P<0.01);②与IRI组相比,维生素E处理组肾脏病理损伤明显减轻、肾小管上皮细胞凋亡明显减少、caspase-3活性明显减少(P<0.01). 结论维生素E能抑制肾脏IRI诱导的肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能是通过抑制caspase依赖的细胞凋亡途径实现的.     

尿激酶联合黄芪对环孢素A大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB表达的影响及意义

目的探讨尿激酶（uPA）联合黄芪（AM）对环孢素A（CsA）大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB（NF-κB）表达的影响及意义。方法采用1：7服灌胃CsA（25mg&#183;kg^-1&#183;d^-1）制备大鼠慢性肾纤维化模型,将大鼠随机分为5组：对照组、模型组、uPA组、AM组及联合治疗组,4周末取标本。HE染色观察肾脏组织结构变化;采用试剂盒测定肾组织羟脯氨酸的含量;应用免疫荧光观察P-p65的表达及定位;采用Western印迹法检测大鼠肾组织P—065、p65、IκBα和IκBβ的蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组肾小管损伤程度加重,羟脯氨酸含量增加,肾组织中NF-κB活化显著增强,p65由细胞质转移至细胞核,P-p65表达显著上调,IκBα降解明显增加（P均〈0．05）。与模型组相比,各治疗组肾小管损伤程度减轻,羟脯氨酸含量减少,P-p65表达被显著抑制,IκBα降解减少（P均〈0．05）,且联合组的治疗效果更显著。IκBβ的蛋白表达水平各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NF-κB信号通路介导了肾脏纤维化的发生发展,uPA与AM能减轻肾脏纤维化,这可能与其能抑制NF-κB通路激活有关。     

缺血后处理对大鼠肾缺血/再灌注损伤及p38MAPK活性的影响

目的研究缺血后处理(IPO)对大鼠肾缺血/再灌注损伤(IRI)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性的影响。方法将24只SD大鼠依据随机数字表法分为3组,各8只。对照(S)组:仅结扎右侧肾蒂,左肾蒂游离;缺血/再灌注(IR)组:结扎右侧肾蒂,夹闭左侧肾蒂60 min后,开放灌注24 h;IPO组:肾脏缺血60 min后,进行10 s灌注、10 s阻断,共6个循环的IPO,然后开放灌注24 h,余同IR组。检测血尿素氮(BUN)、肌酐,酶联免疫吸附试验法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)水平,Western blot法检测肾组织磷酸化p38MAPK蛋白表达,观察肾组织的病理学变化。结果与S组比较,IR组和IPO组血BUN、肌酐,肾TNF-α、IL-1、p38MAPK蛋白表达量及组织病理评分显著增加(P<0.05);IPO组各指标较IR组显著下降(P<0.05)。结论 IPO能减轻肾IRI,其机制与抑制p38MAPK活化,进而抑制炎性因子释放有关。     

DM大鼠肾组织 Id2蛋白表达变化与纤维化病变发生发展关系的研究

目的：动态观察分化抑制因子2（Id2）在糖尿病大鼠血糖控制前后肾小管上皮细胞的表达变化,探讨其在肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化过程（EMT）中可能发挥的作用。方法：雄性 SD 大鼠随机分为正常对照组（N）、糖尿病组（DM）,糖尿病胰岛素治疗组（DMT）,采用链脲佐菌素（55 mg／kg）尾静脉注射复制Ⅰ型糖尿病大鼠模型,N 组和 DM组成模后分别于2周（2 w）、8周（8 w）、16周（16 w）、24周（24 w）时各处死6只;成模13周（13 w）起,DMT 组大鼠采用胰岛素个体化治疗,以血糖控制在4～7 mmol／L,尿糖阴性为准,分别于16 w 和24 w 时处死6只大鼠;观察大鼠血糖、24 h 尿蛋白并计算肾脏指数,HE、PAS 染色光镜下观察肾组织结构的变化,免疫组化观察大鼠肾脏纤维连接蛋白（FN）的蛋白表达情况,Western blotting 检测大鼠肾组织分化抑制因子（Id2）、E-钙粘素（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白变化,RT-PCR 检测肾组织 Id2 mRNA 表达情况。结果：（1）与 N 组相比,不同时间点 DM组血糖、24 h 尿蛋白量、肾脏指数均显著升高（P ＜0．01）,并出现肾组织形态学异常改变;而 DMT 组血糖、24 h 尿蛋白量、肾脏指数均低于 DM组（P ＜0．05）,肾纤维化病变改善;（2）与 N 组比较,DM组肾组织 Id2蛋白和 mRNA 的表达从2 w 开始减少,16 w、24 w 显著减少（P ＜0．05）,并伴有 E-cadherin 的表达减少（P ＜0．05）、α-SMA 表达增加（P ＜0．05）和 FN 蛋白的沉积增多（P ＜0．05）,相关性分析显示 Id2蛋白与 FN 蛋白成负相关（r ＝－0．931,P ＜0．05）,与 E-cadherin 蛋白成正相关（r ＝0．9000,P ＜0．05）;（3）与 DM组相比,DMT 组大鼠肾组织 Id2蛋白和 mRNA 表达均明显增加（P ＜0．05）,且 E-cadherin 的表达增加（P ＜0．05）、α-SMA 的表达及 FN 在间质沉积减少（P ＜0．05）。结论：胰岛素在控制血糖能上调肾小管上皮细胞 Id2蛋白的表达,恢复 Id2对肾纤维化的负调节作用,进而逆转肾小管上皮细胞的 EMT 及减轻肾间质ECM的沉积,改善 DN 肾纤维化病变。