干姜-细辛-五味子药对的止咳、抗炎作用研究

目的：观察中药干姜—细辛—五味子药对的止咳、抗炎作用,探讨中药配伍的科学性与严谨性。方法：建立小鼠浓氨水引咳模型与小鼠耳廓肿胀急性炎症模型,比较干姜—细辛—五味子—（1∶1∶1）药对与细辛、细辛—五味子（1∶1）药对对咳喘、急性炎症模型的作用,研究干姜—细辛—五味子药对配伍的药效作用。结果：干姜—细辛—五味子药对能显著延长小鼠的咳喘潜伏期,并减少3m in内的咳喘次数;显著抑制小鼠耳廓炎症肿胀度。干姜-细辛-五味子药对具有明显的止咳和抗炎作用,且作用优于细辛、细辛—五味子药对。结论：干姜和五味子两味药在干姜-细辛-五味子药对中具有协同作用,配伍后增强了细辛的止咳、抗炎作用,从而证实了这一药对配伍的科学性与严谨性。     

华细辛和北细辛HPLC特征图谱识别与抗炎靶点及抗炎成分分析

建立华细辛和北细辛HPLC特征图谱并结合聚类分析研究2种来源细辛的识别方法;应用网络药理学方法预测细辛潜在抗炎靶点并寻找潜在抗炎成分。对89批细辛药材(12批华细辛和77批北细辛)的数据进行分析确定了11个特征峰,用对照品、紫外光谱和LC-MS指认了11个特征成分。特征峰面积聚类分析显示华细辛和北细辛被分为2类,且利用特征峰面积比值可实现两者区分,当特征峰9(细辛素)/参照峰S(卡枯醇)峰面积比值大于5时为华细辛,小于2时为北细辛。对119种细辛成分进行网络药理学分析的结果表明细辛抗炎作用可能与COX-2,COX-1,iNOS,MAPK14,LAT4H,NR3C1,PPARG和TNF等8个靶点相关,其中COX-2最为关键,与5种特征成分细辛脂素、芝麻脂素、细辛素、甲基丁香酚和黄樟醚均存在相互作用。此外,细辛脂素、芝麻脂素与iNOS,MAPK14也存在相互作用关系,黄樟醚和细辛素可作用于iNOS,COX-1,LAT4H,甲基丁香酚可作用于COX-1,LAT4H。细辛脂素与芝麻脂素均可作用在COX-2,iNOS和MAPK143个靶点上,提示它们是细辛发挥抗炎作用的活性成分;COX-2分子对接结果和COX-2活性实验结果验证了细辛脂素、芝麻脂素可抑制COX-2活性,为细辛抗炎作用活性成分。基于HPLC特征图谱的华细辛和北细辛识别方法简便易行;预测到的细辛抗炎靶点和抗炎成分为完善细辛质量评价体系奠定了基础。     

细辛脂素抗心脏移植急性排斥反应的作用及对黏附分子表达的影响

目的：实验筛选细辛免疫抑制作用的有效成分细辛脂素,探讨其抗心脏移植急性排斥反应作用及对黏附分子的影响。方法：提取细辛中的细辛脂素,健康雄性Wistar大鼠（供体）和SD大鼠（受体）各64只,建立大鼠异位心脏移植模型,将接受心脏移植的SD大鼠分成4组：阳性对照组,不给任何处置；环孢霉素A(CsA)组,术前1 d开始灌服CsA；细辛脂素组,术前1 d开始灌服细辛脂素；混合药物组,术前1 d开始灌服半量CsA和半量细辛脂素。每组各8只,术后第7天处死,另外8只用于观察移植物生存天数。移植心常规石蜡包埋、切片,显微镜观察并进行组织病理分级；免疫组化染色法检测移植物局部细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和血管内皮黏附分子-1（VCAM-1）含量。结果：移植心存活时间,CsA组、细辛脂素组和混合药物组均较阳性对照组显著延长（P<0.01）。与阳性对照组比较,细辛脂素可减轻心肌病理形态学的损伤。CsA组、细辛脂素组和混合药物组移植心局部ICAM-1和VCAM-1含量较阳性对照组明显减少。结论：细辛脂素可延长移植物存活时间并减轻病理形态的损伤,与CsA有相似的免疫抑制作用。ICAM-1和VCAM-1在发生排斥反应时表达增加,细辛脂素可抑制二者的表达。     

细辛与牛蹄细辛的鉴别

细辛为常用中药 ,《中国药典》规定正品细辛为马兜铃科植物北细辛 Asarum heterotropoides Fr.var.mandshuricum ( Maxim.) Kitag.、汉城细辛Asarum sieboldii Miq.var.seoulense Nakai或华细辛 Asarum sieboldii Miq.的干燥全草。细辛的混淆品种较多 ,目前已发现的就有 2 0余种 [1 ]。在基层单位药品委托检验中 ,我们发现一细辛的混淆品 ,经作者鉴定为马兜玲科细辛属植物牛蹄细辛 Asarumdelavayi Franch.的干燥全草。有关牛蹄细辛的鉴别未见报道 ,现将北细辛与牛蹄细辛的药材性状进行比较鉴别。牛蹄细辛的性状特征　植株粗壮 ,根茎横…     

龟龄集中细辛特殊炮制工艺的代谢组学研究

目的探究细辛在龟龄集中入药时需用老陈醋炮制的科学内涵。方法采用基于1H-NMR的代谢组学技术结合多元统计手段对细辛及米醋制细辛、老陈醋制细辛的化学成分进行比较分析。结果从细辛1H-NMR图谱中指认出30余种代谢产物;细辛生品与2种醋制品可以明显分开,米醋炮制品和老陈醋炮制品的代谢物也有明显区别。米醋制细辛和老陈醋制细辛在初级代谢产物上的化学差异大于次级代谢产物。结论本研究为龟龄集的特殊炮制工艺的现代研究奠定了基础。     

不同来源细辛属药材中马兜铃酸A的定量分析

细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterolropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.) Kitag.、汉城细辛A. sieboldii Miq. var. seoulense Nakai或华细辛A. sieboldii Miq.的根及根茎［1］。具有祛风散寒，通窍止痛，温肺化饮之功，临床用于风寒感冒，头痛，牙痛，鼻塞鼻渊,风湿痹痛，痰饮喘咳诸病的治疗，是一味常用中药，尚含有微量的肾毒性成分马兜铃酸A［2］。倪美华等［3］测定了北细辛地上、地下部分马兜铃酸A质量分数，分别为7956～11312 ng·g-1和0867～1767 ng·g-1；高钧等［4］测定华细辛不同部位马兜铃酸A为079～115 mg·g-1，其中以根部最低为079 mg·g-1，叶片为464 mg·g-1，较高；张萍等［5］对19批细辛进行了含量检测，其中北细辛为4～8 μg·g-1，华细辛为10 μg·g-1。上述测定结果显示，细辛根及根茎中马兜铃酸A含量较地上部分低，这可能是除细辛应用历史原因之外［6］，2005年版《中国药典》将细辛全草入药改为根及根茎入药的另一个主要原因。但从文献显示，马兜铃酸A的含量测定结果差异较大，相差约1 000倍。为较全面了解细辛中肾毒性成分概况，本实验采用HPLC测定了全国9省市(直辖市)36批细辛根及根茎药材中的马兜铃酸A含量，以期为细辛药材质量标准的增定提供科学依据。     

3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺在北细辛、华细辛及汉城细辛不同部位的分布及含量分析

目的 考察3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺在《中华人民共和国药典》（简称“《中国药典》”）收载的北细辛、华细辛及汉城细辛不同部位中的分布和含量。方法 采用HPLC-DAD测定北细辛、汉城细辛和华细辛的果、叶、根及根茎中马兜铃酸I等3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺的含量,并以LC-MS检测细辛根及根茎中马兜铃酸I是否存在。结果 通过对30份细辛果、97份细辛叶和97份细辛根及根茎样品检测的结果表明：3种细辛的果中均分布较高含量的马兜铃酸I（0.095-2.200 mg ?g-1）、9-羟基马兜铃酸I（0.012-0.103 mg?g-1）、马兜铃内酰胺I（0.025-0.147 mg?g-1）和马兜铃内酰胺II（0.120-0.144 mg?g-1）,未检测到马兜铃酸II;3种细辛的叶中（除了2份样品）均分布有马兜铃酸I,含量为0.010-0.140 mg?g-1,其它4种成分未检测到;HPLC法在细辛根及根茎的97份样品中均未检测到3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺中的任何1种,但经过灵敏度更高的LCMS检验,所测定的4份细辛根及根茎样品中均分布极微量的马兜铃酸I（0.4-2.4 μg?g-1）。结论 本研究通过检测大量的细辛采集样品和多省市的细辛商品,报道了3种马兜铃酸和2种马兜铃内酰胺在《中国药典》收载细辛不同部位中的分布和含量情况,为《中国药典》（2005年版）把细辛药用部位由“全草”修订为“根及根茎”而保证细辛的临床用药安全提供了科学数据的支撑。     

细辛脑溶解度及羟丙基环糊精包合作用的考察

目的 考察溶剂、温度及环糊精对细辛脑溶解度的影响.方法 利用HPLC-UV法,测定细辛脑在不同溶剂、不同温度及不同浓度环糊精溶液中的溶解度.结果 细辛脑在水中的溶解度为0.1 mg·mL-1,在茶油、乙醇、甲醇中分别为13.44 mg·mL-1、1.87 mg·mL-1、1.76 mg·mL-1;环糊精浓度及温度与细辛脑溶解度呈现正相关,常温下45%丙基环糊精可使细辛脑在水中的溶解量增加10倍.结论 细辛脑为水难溶性成分,采用高浓度环糊精可以有效增加其在水中的溶解量.     

细辛常用量之我见

现代教材越来越“畏细辛如虎”。如《中药学讲义》第 1版、第 2版教材定细辛用量为 2 5～ 10 g ,《中药学》第 4版定为 5g ,第 5版定为 3g ,以至于 2 0 0 0年药典规定 :细辛用量为 1～ 3g ,成了地道的“不过钱”。考“细辛不过钱”之说最早源于宋代陈承《本草别说》 :“细辛 ,     

高效液相色谱法同时测定还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛的含量

目的:应用高效液相色谱法测定还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛的含量。方法:采用Agilent Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,用甲醇-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,检测波长265 nm,柱温30℃,进样量20μL,流速为1 m L/min,分别检测还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛含量,并用石菖蒲样品作对照。结果:石菖蒲样品和还脑益聪方中α-细辛醚的含量分别为1.274 2,3.489 1 mg/g,β-细辛醚含量分别为7.630 1,35.836 0 mg/g,细辛醛含量分别为0.833 7,7.808 3 mg/g。结论:还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛含量分别是石菖蒲样品的2.7倍、4.7倍和9.4倍,提示整方配伍后可提高三者的溶出率。     

细辛多糖对流感病毒H1N1型感染的保护作用及对炎症因子表达水平的影响

提取细辛多糖,分析其组成,研究其体外抗H1N1流感病毒活性及对肾阳虚外感证小鼠的干预作用。水提醇沉法制备细辛多糖,测定多糖含量并分析其单糖组成。体外采用细胞实时监测系统及Reed-Muench法评价其抗病毒活性。体内建立肾阳虚外感小鼠模型,比较麻黄细辛附子汤(以下简称"MXF组")和细辛多糖的药效。MXF组和细辛多糖组分别以1.8 g·kg^-1·d^-1和0.077 g·kg^-1·d^-1的临床等效剂量进行给药干预,每日1次,连续6 d。Real-time PCR法检测肺组织中H1N1流感病毒M基因及多个细胞因子的相对表达量。细辛中细辛多糖的质量分数为25.22%,多糖中蛋白质量分数为0.8%,其单糖组成为L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖。达菲、MXF和细辛多糖的治疗指数(TI)分别为30.00,8.06,10.33。细辛多糖3个给药浓度均可显著降低上清液中病毒含量(P<0.05)。与模型组相比,MXF组、细辛多糖组小鼠的肺指数显著降低(P<0.05),H1N1流感病毒的M基因相对表达量显著降低(P<0.05)。IL-10和IFN-γ的基因相对表达量出现不同程度上调,IL-1β,IL-6,MCP-1的基因相对表达量均出现不同程度的下调,细辛多糖可显著增强TNF-α的表达(P<0.01)。细辛多糖具有较好的体外抗流感病毒活性,并可通过降低肺组织中病毒载量及减轻肺组织的炎症损伤、调节炎症细胞因子表达起到对肾阳虚外感证小鼠的保护作用。相较于全方,细辛多糖有较好的抗病毒活性。     

不同年限及不同干燥方法的辽细辛中主要成分的含量测定

目的:以辽细辛中马兜铃酸A、细辛脂素以及甲基丁香酚的含量为指标,对不同年限及不同干燥方法的辽细辛中有效成分的含量变化进行评价,确定最佳采收年限和干燥方法。方法:采用HPLC法测定二年至六年的辽细辛及微波、红外、冻干等不同干燥方法中马兜铃酸、细辛脂素和甲基丁香酚的含量。结果:在不同年限干燥品中六年生辽细辛有效成分最佳,但与5年生相差不大。而在使用冷冻干燥方法时,辽细辛的有效成分含量整体较高,其中细辛脂素为0. 661 mg·g~(-1),甲基丁香酚为1. 349 mg·g~(-1)。结论:综合考虑细辛的最佳采收年限应该为五年,干燥方法除了冷冻干燥处理比较好也可以采用50℃低温干燥方法处理。     

通过ITS技术对不同来源辽细辛进行鉴别

目的:利用ITS序列对不同来源辽细辛进行DNA分子鉴定。方法:提取辽细辛植物的DNA,对其ITS序列进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增与测序,且从GenBank中下载上述所属植物的ITS序列,进行辽细辛的比对。结果:从NJ系统发育树分析看出,两属4个物种的26个样本被聚为3大支。细辛植物自成1支,汉城细辛属1支,马兜铃属植物1支。结论:表明ITS序列可以对细辛原植物进行鉴别,且在近缘物种鉴定方面具有较大应用价值。     

RP-HPLC测定石菖蒲、水菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量

石菖蒲具有开窍豁痰、化湿和胃、醒神益智等多种功效。其主要活性成分为β细辛醚、α细辛醚,具有解痉、抗惊厥和对戊巴比妥钠有协同等作用[1]。关于石菖蒲β细辛醚、α细辛醚成分的测定已有报道[2 ],本研究在此基础上,采用RP HPLC法测定石菖蒲、水菖蒲药材中β细辛醚、α细辛醚的含量。1　仪器与药品美国惠普公司HP10 50 -高效液相色谱仪;瑞士梅特勒公司AE -2 0 0型电子分析天平。β细辛醚对照品,自制(采用面积归一化法测定,其     

α-细辛醚对难治性癫痫细胞模型及Laminin β1的影响

目的研究α-细辛醚对难治性癫痫细胞模型的影响及对laminin β1表达的干预作用,探讨α-细辛醚抗癫痫的作用机制。方法体外培养海马神经元至第9天,随机将培养细胞分为正常对照组、模型组、模型+α-细辛醚(7.5μg/ml)组、模型+α-细辛醚(15μg/ml)组、模型+α-细辛醚(30μg/ml)组、模型+2μl无水乙醇组,观察各组神经元的形态学变化,检测各组细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)在12,24,48 h的变化。采用荧光定量PCR(FQ-PCR)和免疫组化检测各组laminin β1在处理后24 h的表达变化。结果①造模后少数神经元会发生迁移、融合,加α-细辛醚组均能减少神经细胞膜LDH的渗透。②在24 h,模型组lamininβ1 mRNA表达增加,各浓度α-细辛醚均能抑制laminin β1 mRNA的表达(均P<0.05)。③免疫组化显示laminin β1蛋白在细胞质和细胞外基质表达,平均光密度值:对照组(0.094 7±0.025 86),模型组(0.135 1±0.026 16),模型+30μg/mlα-细辛醚组(0.097 9±0.032 81)。结论α-细辛醚能减少难治性癫痫细胞模型神经元的细胞膜损伤,抑制laminin β1基因及蛋白的过度表达,这可能是α-细辛醚抗癫痫的作用机制之一。     

细辛类药材主要种质资源植物遗传多样性及生物系统学研究

细辛属Asarum L.(马兜铃科Aristolochiaceae)全世界约有100种植物,主产东亚和北美;我国有38种、4变种和1变型,其中华细辛组Sect.Asiasarum的3种植物被1995年版中国药典做为中药细辛收载,细辛属其他植物也多在产地做细辛或土细辛使用。遗传因素作为影响药材质量的内在因素越来越受到重视,但细辛类药材资源植物的遗传多样性及群体遗传结构的分析尚属空白,     

对“细辛不过钱”的本义探讨

本文通过对“细辛不过钱”的本义进行了考证,认为此话实指单味研末吞服细辛时剂量不可过钱,非言细辛伍于复方煎煮时剂量不可过钱。细辛所含挥发成份是有毒的,单味研末吞服应遵循“细辛不过钱”这一古训,然细辛加复方配伍煎煮后,可大大减低其毒性。古今临床实践表明,细辛用于复方煎剂不应拘于1钱(约合今之3—4g),根据临床病情需要可增至16—30g为宜。     

单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠肺通气功能相关指标的影响

目的复制寒饮射肺证动物模型,观察单叶细辛对该模型大鼠肺通气功能相关指标的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为单叶细辛组（单叶细辛水提液灌胃1mL／kg）、辽细辛组（辽细辛水提液灌胃1mL／kg）、盐水组（0．9％NaCl溶液灌胃1mL／kg）。各组给药均为每日1次,连续6d。在给药第6日灌胃后用7℃冷生理盐水做整肺灌洗,灌洗量2．5mL／kg,保留30s后抽出,5min后重复灌洗1次,连续5次,造成寒饮射肺模型,合并5次灌洗液备用。比较肺灌洗前后各组血栓素B2（TXB2）、内皮素（ET）、灌洗液磷脂与蛋白质含量的变化。结果整肺灌洗后盐水组TXB2、ET、蛋白质含量均明显升高,而磷脂含量较低。单叶细辛组、辽细辛组TXB2、ET、蛋白质含量较低而磷脂含量较高,与盐水组比较差异有统计学意义（P〈0．05）,而单叶细辛组和辽细辛组比较差异无统计学意义。结论单叶细辛可抑制寒饮射肺证大鼠TXB2、ET的产生,减少灌洗液中蛋白质含量,有效改善肺通气。     

影响细辛疗效和毒性的因素分析

细辛属马兜铃科植物,有疏风散寒,温阳止痛,宣肺化饮之功,为治疗风寒痹痛,心阳不足,痰饮内停之良药,由于受"不过钱"和药典规定剂量1～3g的影响,细辛总是小剂量应用于临床,从而影响细辛高疗效的发挥,本文通过对影响细辛疗效和毒性因素的分析,表明"不过钱"是细辛应用的特殊规律,而不是普遍规律。     

细辛与杜衡和及己的鉴别研究

细辛始载于《神农本草经》,列为上品。具有祛风散寒、温肺化饮、通窍止痛的功效。据《本草别说》、《本草衍义》、《名医别录》等诸家所论[1],细辛的药源广泛,＂处处有之＂,但以华阴（陕西省华阴县）、华州（陕西省华县）和高丽（今辽宁省东部及吉林省南部至朝鲜半岛）产者为好,即今之华细辛和北细辛为细辛之正品。细辛发挥功效的成分及毒性均来源于挥发油[2],故2005年版《中国药典》规定北细辛、华细辛、汉城细辛的挥发油不得少于2%[3]。