幼龄鼠经口投入乳酸杆菌菌体的抗肿瘤效果

乳酸杆菌菌体注入静脉、腹腔、胸腔、皮下或肿瘤内,对各种实验肿瘤均发挥显著的抗肿瘤效果,并使巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK)活化。但是对幼龄动物经口投入的抗肿瘤效果至今尚未见报道。本文主要探讨鼠出生后早期经口投入乳酸杆菌菌体对肿瘤增殖的抑制作用。材料和方法:取妊娠14日的C_(57)BL/6小鼠,将出生2日的幼龄鼠用于实验。用乳酸杆菌干酪乳杆菌 YIT9018加热处理死菌体。移植肿瘤为 C_(57)BL/6小鼠同系肿瘤路易士氏肝癌(3LL)。实验组用胃管投入乳酸杆菌菌体(250μg/只/天),对照组经口投入生理盐水。第14天时分为 A,B 组,A 组于左脚垫处移入3 LL     

重组人催乳素对小鼠和人结肠腺癌的过继细胞免疫治疗的促进作用

恶性肿瘤病人进行骨髓移植(BMT)治疗后恶性肿瘤的复发对癌症病人来说仍然是一个主要难题.过继免疫治疗极有可能是有效的预防方法之一.首先采用C57BL/6鼠建立荷结肠腺癌(MCA-38)模型,将MCA-38细胞株经尾静脉注入小鼠,该鼠将因为肿瘤定向转移于肺而导致死亡.荷瘤后10天对小鼠进行致死剂量照射,同时给予同基因骨髓移植(BMT)并加脾细胞移植悬液(SC)移入,在此基础上给予重组人催乳素(rhPHL)(10μg/天,连续10天,ip).实验分为单纯     

β-胡萝卜素增强小鼠对同基因肿瘤的免疫应答

给接种 B_(16)黑色素瘤的 C57BL/6小鼠行β-胡萝卜素灌胃,每日10mg/kg。20天后,取小鼠脾细胞和B_1~6黑色素瘤细胞混合注入健康 C57BL/6小鼠皮下,观察肿瘤生长情况并检测脾细胞增殖活性和腹腔巨噬细胞的细胞毒活性。实验组和对照组小鼠肿瘤大小无显著性差异,但实验组肺部瘤转移灶数明显低于对照组;实验组脾细胞增殖活性和巨噬细胞细胞毒活性明显高于对照组。提示β-胡萝卜素可增强小鼠的抗肿瘤免疫功能。     

组胺对C57BL/6小鼠B16黑色素瘤转移行为的影响

背景与目的:肿瘤生物治疗中微血管壁通透性是大分子抗体偶联药物进入瘤体的主要屏障.组胺可通过增加微血管壁通透性和组织液的生成促进抗体偶联物在肿瘤局部的富集.本研究观察组胺所致微血管壁通透性的增加和组织液的生成增多是否会增加肿瘤血行及/或淋巴的转移.方法:采用瘤细胞悬液接种法将小鼠黑色素瘤细胞B16注入小鼠左上肢腋部皮下,建立C57BL/6小鼠荷瘤模型.实验组接种第6天起,背部皮下注射300 mg/kg组胺,隔日一次,共5次,对照组注射等体积生理盐水.组织化学方法检测肿瘤细胞在各脏器的转移情况.分别用Student t-test和四格表资料确切概率法分析组胺对肿瘤细胞增殖和转移的作用.结果:接种成瘤率100%.300 mg/kg组胺隔日一次皮下注射能明显抑制肿瘤的生长,实验组与对照组瘤重分别为(5.26 1.55)g和(6.96±1.31)g,二者间差异有统计学意义(P＜0.01).实验组与对照组淋巴结转移率分别为33.3%和75.0%,血行转移率分别为25.0%和75.0%,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:组胺能够抑制C57BL/6小鼠B16黑色素瘤的血行和淋巴转移,该抑制作用部分与其抑制瘤细胞的增殖有关.     

洛伐他汀对恶性黑色素瘤B16细胞株的作用及其机制的研究

目的探讨洛伐他汀(Lovastatin)在体内对恶性黑色素瘤(malignant melanoma, MM)B16细胞株的作用及其相关机制。方法 C57小鼠随机分为5组:对照组:给予等渗盐水灌胃1次/日;Lov1组:给予Lov 4mg/(kgd)灌胃;Lov2组:给予Lov 16mg/(kgd)灌胃;DDP组:给予DDP 10mg/kg(d14、21), 腹腔注射;联合组:给予Lov 16mg/(kgd)+DDP 10mg/kg(d14、21)。观察肿瘤的生长情况。采用免疫组化S-P法测定Survivin、Fas、VEGF表达水平。结果 C57小鼠接种B16细胞后3-5天, 多数小鼠可以触及到瘤体, 第21天测得各处理组肿瘤体积明显小于对照组, 差异具有显著性(P＜0.05)。3周后处死小鼠, 联合组Survivin免疫组织化学评分最低;对照组VEGF呈高表达(5.750±0.619);对照组Fas表达最低。对于每一种指标, 比较各处理组与对照组的IHS评分, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论 Lov可通过下调Survivin、VEGF的表达而发挥其抑制B16细胞增殖、浸润和转移的作用, 并可通过上调Fas的表达而诱导B16细胞凋亡。     

PD-L1抑制剂对非小细胞肺癌小鼠血清IL-4、IFN-γ及生存率的影响

目的:分析程序性细胞死亡蛋白配体-1（PD-L1）抑制剂对非小细胞肺癌（NSCLC）小鼠血清白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ(IFN-γ)及生存的影响。方法:将20只重量16～20 g小鼠随机分为对照组、实验组各10只,对照组在制备NSCLC荷瘤鼠模型后注射0.9%氯化钠溶液,实验组在制备NSCLC荷瘤鼠模型后注射PD-L1抑制剂尼伏单抗,均连续注射4周,测定其体积大小、肿瘤抑制率与血清IL-4、IFN-γ变化,并记录小鼠生存率、生存时间。结果:注射前、注射3 d两组小鼠肿瘤体积比较差异无统计学意义（P>0.05）,注射1周、2周、3周、4周实验组肿瘤体积均低于对照组（P<0.05）,尤其在注射2～3周时实验组肿瘤体积抑制率基本达最大值;注射1周、2周、3周、4周实验组血清IL-4、IFN-γ水平明显高于对照组（P<0.05）;注射4周实验组生存率高于对照组,实验组平均生存时间较对照组长（P<0.05）,注射1周、2周、3周两组生存率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:PD-L1抑制剂能抑制NSCLC小鼠生长,可能通过上调其血清IL-4、IFN-γ水平而延长小鼠生存时间。     

抗骨桥蛋白抗体抑制HCCLM3裸鼠移植瘤的生长并增强其对放疗敏感度的实验

目的 探讨抗骨桥蛋白抗体对人肝癌HCCLM3细胞裸鼠移植瘤生长、转移和血管生成的抑制作用及对放疗的增敏作用.方法 74只裸鼠右侧腹皮下接种肝癌细胞株HCCLM3,次日随机取50只裸鼠随机分为5组,每组10只:A组尾静脉注射0.9％氯化钠溶液,B组尾静脉注射非特异性抗体,C、D、E组分别尾静脉注射抗OPN抗体5、10、20 mg/kg,每周2次.每两天观察肿瘤体积变化,第10周末处死裸鼠,收集肿瘤组织、肺组织进行病理组织学检查,用免疫组织化学法测肿瘤微血管密度.其余24只裸鼠随机分为4组:F组给予尾静脉注射0.9％氯化钠溶液、G组给予荷瘤鼠肿瘤局部以6 MeV电子线照射、H组给予尾静脉注射抗OPN抗体20 mg/kg、Ⅰ组给予尾静脉注射抗OPN抗体20 mg/kg+肿瘤局部6 MeV电子线照射.观察肿瘤体积变化,比较各组的肿瘤体积、抑瘤率,利用增敏系数(enhancement factor,EF)评价抗OPN抗体的增敏作用.结果 与A、B对照组相比,抗OPN抗体均能明显抑制肿瘤的生长(P＜0.01)、降低肿瘤组织中血管密度(P＜0.05)、减少肺转移(P＜0.05),其中以20 mg/kg剂量组明显.在放疗的实验中,抗体联合放疗组抑瘤率明显高于单纯放疗组和抗体组(P均＜0.01).EF＞1,提示抗OPN抗体对移植瘤有放疗增敏作用.结论 抗OPN抗体明显抑制了肿瘤的生长、转移、血管生成并能提高肝癌对放疗的敏感度,它有望成为治疗肝癌的又一武器.     

shRNA沉默CDK2基因对B16-F1细胞小鼠皮下移植瘤的影响

目的 早期恶性黑色素瘤可以通过手术切除的方式得到缓解,发生转移的黑色素瘤由于其耐药性,预后较差.为探索治疗黑色素瘤的新方法,本研究探讨由慢病毒载体pUL介导的shRNA沉默CDK2基因对黑色素瘤细胞B16-F1皮下移植瘤生长的影响.方法 于C57BL/6小鼠右侧腹股沟皮下注射B16-F1细胞建立移植瘤模型,采用癌灶多点注射的方法分为空白对照组、阴性对照组和实验组(n=5).阴性对照组,采用癌灶多点注射的方法将携带NC-shRNA的重组慢病毒(滴度为2×108 TU/mL)导入肿瘤灶,每只小鼠200,μL,隔日1次,共6次,观察18 d;空白对照组,用与阴性对照组相同的方式方法向瘤体注射PBS,观察18 d;实验组,采用癌灶多点注射的方法将携带CDK2-shRNA的重组慢病毒(滴度为2×108 TU/mL)导入肿瘤灶,每只小鼠200 μL,隔日1次,共6次,观察18d.观察肿瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,18 d后杀鼠取瘤称瘤质量,计算肿瘤生长抑制率,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测肿瘤组织细胞中CDK2蛋白表达情况.结果 C57BL/6小鼠接种瘤细胞3d后均有肿瘤形成.治疗的第6天空白对照组、阴性对照组和实验组的肿瘤体积分别为(48.7±8.4)、(50.0±8.9)和(31.4±8.7) mm3,实验组与空白对照组和阴性对照组相比,肿瘤生长速度明显降低,差异有统计学意义,F=8.879,P=0.004.空白对照组、阴性对照组和实验组的肿瘤重量分别为(0.56±0.10)、(0.55±0.11)和(0.28±0.07)g,实验组与空白对照组和阴性对照组相比,肿瘤体质量明显降低,差异有统计学意义(F=13.659,P=0.001),实验组与空白对照组相比肿瘤生长抑制率为50.2％;空白对照组、阴性对照组和实验组的细胞凋亡指数分别为(7.73±1.08)％、(7.87±1.42)％和(32.27±3.62)％,实验组与空白对照组和阴性对照组相比,瘤细胞凋亡指数显著升高,差异有统计学意义,F=189.748,P＜0.001.实验组与空白对照组和阴性对照组相比,组织细胞中CDK2蛋白的表达显著降低,差异有统计学意义(F=293.346,P＜0.001),实验组相对于空白对照组CDK2蛋白表达的抑制率为50.4％.结论 重组慢病毒CDK2-shRNA沉默CDK2基因的表达能有效抑制B16-F1细胞移植瘤的生长,CDK2基因可能成为黑色素瘤基因治疗的有效靶点.     

干扰肿瘤微环境对细胞毒性T淋巴细胞瘤体内归巢和杀伤活性的影响

目的 探讨应用低剂量环磷酰胺（cyclophosphamide, CYC）干扰荷瘤小鼠体内微环境对改善过继回输的细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte, CTL）瘤体内归巢和杀伤活性的作用。方法 建立C57BL/6荷瘤小鼠模型并分为对照组、CYC注入（CYCI）组、0.9%NaCl溶液注入（NSI）+CTL组和CYCI+CTL组,每组40只,分别给CYCI组、CYCI+CTL组每只小鼠腹腔注入CYC （20mg/kg）,NSI+CTL组小鼠注入等量0.9%NaCl溶液。检测注射前后不同时间小鼠瘤体内调节性T细胞（Treg）、白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）水平变化。于注射后第4天回输CFSE-CTL,每只0.2 ml,含5×l0⁶个细胞。流式检测对比NSI+CTL组和CYCI+CTL组瘤体内CFSE-CTL比例。结果 NSI+CTL组小鼠Treg、IL-10、TGF-β水平随着瘤体增长而逐渐增高;CYCI+CTL组比NSI+CTL组回输的CFSE-CTL在肿瘤内归巢明显增加和持久（P<0.05）。各组肿瘤体积除对照组和CYCI组外,其余各组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 提前应用低剂量CYC干预荷瘤小鼠体内微环境,可降低瘤体内Treg、IL-10和TGF-β水平,使过继回输的CTL在肿瘤中的归巢聚集明显增强,杀伤肿瘤效率提高。     

17-DMAG抑制津白Ⅱ小鼠乳腺癌肝脾转移的实验研究及其相关机制

目的:动态观察HSPgO抑制剂17-dimethylaminoethylamino-17-demethoxygeldanamycin hydrochloride对津白Ⅱ小鼠高转移性乳腺癌生长及肝脾转移的抑制作用,并初步探讨其相关机制.方法:TA2小鼠40只,随机分为实验组和对照组,20只/组,自小鼠鼠鼷部接种TA2小鼠高转移性乳腺癌细胞,1x105/只.接种肿瘤后第4天于小鼠腹腔给予17-DMAG,1mg/(只·次),2次/周,于接种后17天和24天实验组和对照组各处死10只小鼠,收集小鼠移植瘤、肝和脾组织,留取部分新鲜组织进行Real-timePCR,检测实验组和对照组肿瘤组织中MMP-7、MMP-9mRNA的表达差别.剩余组织10%福尔马林固定后HE染色及基质金属蛋白酶-7的免疫组织化学染色.结果:接种肿瘤后第17天实验组的肿瘤体积明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组16只小鼠中肝转移5例,脾脏转移13例.对照组13只小鼠中肝转移13例,脾脏转移12例;实验组小鼠肝转移例数较对照组明显下降(P0.05).HE染色下观察实验组肿瘤出现明显的坏死.实验组中MMP-7蛋白和MMP-9 mRNA的表达较对照组明显减弱(分别为3.049±2.726和21.933±14.304;1.034±0.784和2.318±1.294),差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:17-DMAC可明显抑制TA2小鼠乳腺癌的生长,尤其是在肿瘤生长的早期,并可能通过降低MMP-7、MMP-9的表达来抑制TA2小鼠乳腺癌肝脾的转移.     

肿瘤疫苗与BCG合用的抗癌疗效及其程序性细胞死亡诱导的实验研究

用肿瘤疫苗进行肿瘤免疫治疗已有八十年历史,但由于肿瘤本身抗原性较弱不足以引起有效的抗肿瘤效应,疗效不够理想,随着免疫技术发展、免疫激活剂的应用,肿瘤疫苗制剂进行主动特异免疫治疗在动物及部分人类肿瘤获得良好的效果。本试验将S180 3×10~8/ml细胞经冻融及高渗KCl进行细胞膜提取,制肿瘤(疫)疫苗,观察肿瘤疫苗与BCG(简称瘤苗)合用对荷瘤小鼠肿瘤生长、存活期及瘤细胞程序性死亡的影响,结果发现经瘤苗50μl及BCG50μl(含100μg活苗)治疗后,荷瘤小鼠肿瘤生长缓慢,存活期延长,于荷瘤(S180 5×10~6/0.2ml腋下接种)后13天,测定肿瘤大小(长径×宽径),瘤苗治疗组与荷瘤对照组分别为110±30mm与250±70mm,差异显著P<0.01,瘤苗治疗组肿瘤生长明显受抑,于荷瘤前7天应用瘤苗其抑瘤更显著,肿瘤大小为90±10mm。于荷瘤后10天记录荷瘤小鼠死亡数直至60天,两组分别为34.6±7.3天,14.6±1.3天,瘤     

CD3AK细胞在裸鼠体内抗转移作用观察

为研究肿瘤引流淋巴结的淋巴细胞在体外用CD3单克隆抗体激活(CD3AK)后在体内是否仍然具有抗肿瘤作用,作者采用人卵巢癌病人盆腔引流淋巴结的淋巴细胞在体外用CD3单抗激活后输注载有高转移人卵巢癌裸鼠体内实验性治疗.实验共31只棵鼠分为4组:顺铂组、CD3AK组、联合治疗组各7只,对照组10只.治疗于接种移植瘤后10天开始,顺铂组以每只鼠给予顺铂7mg/kg的剂量腹腔注射0.5ml,在80天中共治疗6次,总剂量每只鼠为1.02mg.CD3AK组每只鼠各注射0.25ml含0.14×10~6～4.46×10~6细胞于腹腔和肿瘤周围,共治疗7次,每只鼠接受CD3AK细胞总量为10.76×10~6.观察到CD3AK细胞治疗组1只裸鼠移植瘤消退,2/7只裸鼠出现转移灶,与对照组8/10只裸鼠出现转移     

血管内皮抑素对小鼠体内Lewis肺癌血管生成及转移影响的研究

目的：观察血管内皮抑素（Endostatin）对C57小鼠体内Lewis肺癌生长、血管生成及转移的影响。方法：将荷Lewis肺癌的C57鼠进行不同剂量组的内皮抑素和顺铂干预，观察肿瘤生长、移植瘤及转移瘤体内的血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的表达及转移发生率，并作统计学分析。结果：内皮抑素对鼠Lewis肺癌的生长有明显的抑制作用。内皮抑素处理组（内含400μg、300μg、200μg和200μg＋DDP组）和模型组转移率间的差异有统计学意义（P=0．0303）。内皮抑素能显著下调移植瘤及转移瘤内的VEGF。移植瘤中模型组与其余各组之间均存在显著差异（P〈0．01）；400μg组与200μg组、DDP组、联合用药组之间均存在统计学差异（P〈0．05）；300μg组与200组之间存在统计学差异（P〈0．05）；转移瘤中模型组与其余各组之间均存在统计学差异（P〈0．05）。300μg与200μg之间有统计学差异（P〈0．05），200μg与DDP组和200μg＋DDP组之间有统计学差异（P〈0．05）。原位移植瘤与肺转移肿瘤组织中VEGF表达呈正相关（r=0．977，P=0．001）。内皮抑素能显著下调移植瘤及转移瘤内和MVD。在移植瘤中400μg和300μg组肿瘤微血管密度最小，彼此无差异；200μg加DDP组肿瘤微血管密度次之，200μg组肿瘤微血管密度再次，DDP组肿瘤微血管密度在各实验组中最多，模型组肿瘤微血管密度最大。在转移瘤中400μg、300μg和200μg组微血管密度最小，这三组彼此无差异。200μg加DDP组肺转移瘤组织微血管密度次之，DDP组肺转移瘤组织微血管密度在各实验组中最多；模型组肿瘤微血管密度最大。内皮抑素可以减少肿瘤肺转移，作用程度在一定范围内与内皮抑素剂量呈正相关。结论：血管内皮抑素可以通过下调瘤组织中的VEGF和MVD抑制肿瘤生长及转移。     

局部应用内皮抑素对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的研究

目的我们通过局部应用内皮抑素治疗小鼠Lewis肺癌,观察内皮抑素对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用,及内皮抑素对VEGF表达的影响.方法用小鼠Lewis肺癌细胞种植于15只C57小鼠体内,建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,当移植瘤体积生长至400～600mm3时分组并开始给药.小鼠随机分为三组,A组为空白对照组,B组每日尾静脉注射内皮抑素20μg,C组每日于肿瘤部位局部注射内皮抑素20μg,共11天.测定抑瘤率及微血管密度评价疗效,免疫组化(S-P)法测定VEGF在各组的表达水平.结果试验组较对照组抑瘤率增高(P＜0.05),微血管密度降低(P＜0.05),试验组VEGF水平较对照组低(P＜0.01).结论内皮抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长有明显抑制作用,局部用药较全身用药的作用增强,内皮抑素可以通过降低VEGF在肿瘤组织中的表达抑制肿瘤生长.     

Raw264.7细胞蛋白和PD-L1抗体在小鼠黑色素瘤(B16)中的抑瘤效果评价

目的探讨小鼠来源白血病毒诱导的肿瘤细胞(Raw264.7)蛋白和程序性死亡-配体(PD-L1)在C57BL/6小鼠黑色素瘤(B16)中的抑瘤效果。方法采用6~8周龄清洁级C57BL/6小鼠30只(雌雄各半),平均分为3组。各组小鼠分别于皮下接种B16细胞(2×10⁵个/只),待小鼠肿瘤平均体积达到100 mm³时,给予治疗。group A:腹腔注射Raw264.7细胞蛋白(50μg/只),每周1次,共2次。group B:腹腔注射PD-L1抗体(600μg/只,本课题组生产纯化),每3天1次,共4次。group C:相同时间点给予等体积生理盐水对照。各组小鼠给药后,测量肿瘤大小,末次测量后,各组小鼠无菌取脾脏,应用流式细胞术分析CD3/4/8⁺T细胞群比例。结果各组荷瘤小鼠给予相应治疗后,组C小鼠肿瘤体积增长迅速,末次测量平均体积达到4004 mm³;组B小鼠增长次之,末次平均体积达到1637 mm³;组A小鼠体积增长最慢,末次平均体积仅为882 mm³(P<0.01)。对小鼠脾脏免疫细胞分析显示,组B小鼠中CD3⁺CD8⁺T cell比例明显上调,平均达到77.65%,而CD3⁺CD4⁺T比例明显下调,仅为11.86%(P<0.01);而组A和组C两组小鼠CD3⁺CD4⁺T和CD3⁺CD8⁺T没有明显区别(P>0.05)。结论制备的RAW264.7细胞灭活蛋白和PD-L1抗体对于B16荷瘤小鼠均有抑瘤作用,且前者效果更为明显。     

苏拉明联合顺铂对肺腺癌小鼠移植瘤生长和转移的影响

背景与目的:新近研究发现新生血管生成在肿瘤生长、转移以及转移灶的生长过程中起重要作用。本研究观察苏拉明联合顺铂对肺腺癌细胞LA795的T739小鼠异体移植瘤生长和转移的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:建立肺腺癌细胞LA795的T739小鼠异体移植瘤模型,将32只接种LA795细胞T739小鼠随机分成4组,每组8只。对照组:每只小鼠每天生理盐水0.2ml腹腔注射;顺铂组:顺铂2mg·(kg·d)-1于接种后第4、11、18天各一次;苏拉明组:苏拉明10mg·(kg·d)-1;顺铂 苏拉明组:顺铂2mg·(kg·d)-1于接种后第4、11、18天各腹腔注射一次 苏拉明10mg·(kg·d)-1。用药16日,用药中观察肿瘤生长情况,于接种后第24天处死各组小鼠,取出双肺并剥离皮下肿瘤,计算出肺转移发生率,计数各组小鼠肺表面转移结节数并算出肺表面结节转移抑制率。收集移植瘤标本行光镜观察,采用免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织微血管密度(microvesseldensity,MVD),血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)的表达和原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果:顺铂组、苏拉明组、顺铂加苏拉明组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组,其抑瘤率分别为23.0%、34.4%、56.3%,而联合用药组抗瘤作用进一步增强。光镜观察顺铂组、苏拉明组、顺铂加苏拉明组肿瘤细胞出现坏死,苏拉明组和顺铂加苏拉明组肿瘤间质中血管数减少。各用药组NF-#B的表达都比对照组减少,凋亡指数比对照组明显提高,差异有显著性(P<0.01);苏拉明组及联合组与对照组和顺铂组相比肺表面转移结节数明显下降,同时肺转移发生率、皮下肿瘤MVD、VEGF的表达也明显下降,相反顺铂组对此则无明显改变。结论:苏拉明可明显抑制肺腺癌细胞在小鼠体内的生长和转移,与顺铂联用有协同作用,其作用机制可能与抑制其微血管形成、促进细胞凋亡有关。     

小鼠体内灌注五色灵芝提取液与LAK细胞协同抑瘤作用的观察

目的 探讨五色灵芝提取液与LAK细胞合用对小鼠移植性动物肿瘤的抑制作用.方法 按药物体内抑瘤作用常规筛选方法进行,试验动物用NIH小鼠.瘤株为小鼠肉瘤细胞(sarcoma-180).小鼠随机分成五组,每组10只.阴性对照组以生理盐水20 ml/kg/天灌胃.阳性对照组以环磷酰胺(CTX)20 mg/kg/天灌胃.第一实验组:灵芝液组20 g/kg/天灌胃.第二实验组:LAK细胞1×107/只/隔天+IL-2 5000U/天腹腔注射.第三实验组:灵芝液20 g/kg/天灌胃+LAK细胞1×107/只/隔天+IL-2 5 000 U/天腹腔注射.各组均于接种后24小时开始灌胃给药,连续10天.均于末次给药后24小时处死,计算抑瘤率.结果 各组抑瘤率分别是:第一实验组为46.41-60.42%,第二实验组为44.85-51.29%,第三实验组为对71.41-75.42%.各实验组的抑瘤作用与阴性对照组相比较,差异均有显著性意义(P＜0.001).灵芝液与LAK细胞联合组与单用灵芝液组或单用LAK细胞组比较,差异均有显著性意义(P＜0.05).结论 五色灵芝提取液与LAK细胞联合使用具有协同抑瘤作用.     

榄香烯在HuPBL—SCID小鼠体内对人脑胶质瘤协同免疫治疗作用的研究

榄香烯(Elemene)是从中药莪术中提取的抗癌新药,早期的实验研究表明它对肿瘤细胞有直接杀伤作用,是细胞毒类抗癌药;最近研究提示,它还有可能是一种免疫功能调节剂.本研究旨在阐明其在抗肿瘤免疫调节中的作用.取健康人外周血,分离单核细胞,加入含IL-2500U/ml的RPMI1640培养液,体外扩增4d,收集活化的HuPBL,尾静脉注射1.5×10~7·(0.5 ml)~(-1)/只鼠,第14天重复注射1次.取指数增殖期的人脑胶质瘤体外细胞系SHG-44细胞(1)1.5×10~5·(0.5ml)~(-1)/只鼠,于HuPBL 2次转输后次日,直接注射于SCID鼠右腋皮下.从接种日至皮下扪及微结节的时间为肿瘤增殖的潜伏期,尔后局部剃毛,用卡尺测肿瘤短径(a),长径(b),并根据公式计算肿瘤体积W=a~2 X b/2.取肿瘤组织制备单细胞悬液,沿管壁加入到置有淋巴细胞分离液的试管内,常规收集淋巴细胞,按流式细胞计数仪和间接荧光原位杂交法鉴定.实验分组:(A)Lx BsAb(抗 CD3-抗胶质瘤双特异性抗体) IL-2 HuPBL;(B)BsAb IL-2 HuP-BL;(C)IL-2 HuPBL;(D)HuPBL;(E)RPMI 1940.Lx1.5mg/只鼠,IL-2 500 U/只鼠,BsAb 200μg/只鼠均从腹腔给药,每天1次,至宰杀前1d,共观察28d.     

肺癌的胸腔内结核菌苗局部免疫疗法

本文前瞻性随机抽样研究胸腔内单剂注射结核菌苗(BCG)是否可改善肺癌切除术后患者的预后。60例肺癌(未分化癌、腺癌或鳞癌,不包括燕麦细胞或小细胞未分化癌)切除后随机分成 BCG 组(29例)和对照组(31例)。前组于术后3～5天或留置胸管拔出时1次胸腔内注射 BCG10~7活单位,并于注射后14天加服异菸肼300毫克/日共12周,预防细菌过分增长。后组只用异菸肼300毫克/日共12周。所有患者于第2、4、12、26和52周以及其后每6个月随访1次,包括体检、胸片、皮试、血生化和试管内抗肺癌细胞的淋巴细胞毒性     

异种血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

背景与目的:肿瘤的生长、转移和新生血管生成有密切关系,血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是已知作用最强、最专一的促血管生成因子。本实验采用噬菌体展示技术,构建人血管内皮生长因子重组T7噬菌体疫苗,并检验疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用。方法:用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人肺癌组织克隆出人VEGF165基因,将人VEGF165基因与T7Select10-3b噬菌体基因重组,构建T7Select10-3b_VEGF噬菌体疫苗,制备噬菌体效价达到1×1013pfu/ml。将C57BL/6J小鼠随机分为3组,T7-VEGF疫苗组10只、空白噬菌体组(T7)10只、生理盐水组(NS)10只。将各组样品与等体积弗氏佐剂混合,各组小鼠每只每周分别免疫1×1012pfu/200!l重组噬菌体疫苗、空白噬菌体、生理盐水,共免疫4周。接种Lewis肺癌细胞,观察肿瘤的生长情况和小鼠状态.接种肿瘤14天后,处死小鼠,剥离肿瘤称重,检测小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度、肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果:T7-VEGF疫苗组,T7组、生理盐水组肿瘤均重分别为:(0.543±0.259)g、(0.982±0.359)g、(1.169±0.460)g。疫苗组肿瘤重量明显小于生理盐水组(P<0.01)。疫苗组血清产生抗VEGF抗体滴度为1∶1000。疫苗组、空白噬菌体组、生理盐水组MVD分别为:8.5±0.8,16.4±1.3,18.5±1.6。疫苗组MVD明显小于生理盐水组。结论:异种血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体疫苗可干扰机体对自身VEGF的免疫耐受,可产生较高水平的特异性抗VEGF抗体,并具有抑制小鼠Lewis肿瘤生长的效应。