内毒素血症时大鼠肝细胞线粒体损伤及其机制的研究

目的:观察急性感染性内毒素血症大鼠肝细胞线粒体呼吸链的损伤及其机制。方法:将体重在250-280g健康SD大鼠随机分为空白对照组、内毒素组。提取内毒素血症大鼠肝细胞线粒体,测定其超氧阴离子O₂生成量,同时测定线粒体呼吸链功能:复合体Ⅱ+Ⅲ的电子传递与质子转移定量关系(H⁺/2e^-)、ADP/O、呼吸控制率(RCR)。结果:内毒素血症大鼠肝细胞线粒体电子漏显著增加;大鼠肝细胞线粒体以琥珀酸为底物的态4和态3呼吸速率增加,ADP/O、RCR及复合体Ⅱ+Ⅲ的H⁺/2e^-显著降低。结论:在内毒素血症的发病机制中存在由于肝细胞线粒体内源性氧自由基生成增加对线粒体呼吸功能所造成的氧化损伤。     

肠源性内毒素血症与肝脏微循环障碍

在严重肝损伤患者及实验动物模型均可发现存在内毒素血症[1].内毒素血症导致肝功能衰竭的进一步加重,其机理是否为微循环障碍造成?现就对此问题研究的学说综述如下.     

选择性肠道清洁法对重症烫伤大鼠肠源性内毒素血症的影响

本实验采用大鼠４０％Ⅲ°烫伤模型，初步观察了选择性肠道清洁法（ＳＤＤ）对肠源性内毒素血症的防治效果。结果发现，防治组动物门、体循环内毒素水平伤后均显著降低（Ｐ＜０．０５～０．０１），各段肠腔内游离内毒素含量较烫伤对照组下降９９．５％以上。且肠道细菌易位率致伤１～５天都明显减少，回肠粘膜二胺氧化酶活性逐渐恢复。防治组大鼠严重烫伤５天存活率提高２６．７％（Ｐ＜０．０５）。本结果提示，该方法对于重症烫伤大鼠肠源性内毒素血症具有显著防护效应，并能抑制肠道细菌的移居与减轻肠粘膜的进一步损害。因此，及早进行ＳＤＤ可能有助于烧伤后肠源性感染及其它并发症的防治。     

急性肝衰竭时肾组织白三烯C4含量的动态变化

目的：探讨白三烯Ｃ４（ＬＴＣ４）在急性肝衰竭时肾功能障碍发生中的作用。方法：采用ＴＡＡ（硫代乙酰胺，ｔｈｉｏａｃｅｔａｍｉｄｅ）复制大鼠急性肝衰模型，观察了给药后６、１２、２４及４８ｈ肝功能、肾功能、血浆内毒素及肾组织ＬＴＣ４的动态变化。结果：随着给药时间的延长，肝、肾功能障碍均逐渐加重，血浆内毒素水平亦渐增高，而肾组织ＬＴＣ４出现先升高后下降的现象，在１２～２４ｈ达高峰。结论：ＬＴＣ４可能与肾功能障碍的发生有关     

硫代乙酰胺所致急性肝衰时内毒素血症与肝内胆汁淤积关系的研究

本实验采用硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）灌胃复制大鼠急性肝功能衰竭的动物模型。检测血中内毒素、转氨酶、脂蛋白-x等含量以及胆汁流量。结果表明，大鼠发生了肝内胆汁淤积与内毒素血症（ETM），并且两者呈正相关（P＜0．05）。同时肝细胞膜上Na -K -ATP酶的活力明显降低，与ETM含量呈负相关（P＜0．05）。结果提示：ETM与肝内胆汁淤积的发生有密切关系．     

实验性急性肝衰竭时门脉高压发生机制的研究

目的：阐明急性肝衰竭时门脉高压的发生与肠源性内毒素血症和肝内微循环障碍的关系。方法：动态观察皮下注射硫代乙酰胺大鼠门脉血流动力学、血浆内毒素、内皮素－１、肿瘤坏死因子－α及台盼蓝肝脏原位灌流等。结果：随着给注射时间的延长,血浆内毒素水平、ＡＬＴ和ＬＤＨ明显升高,血浆及肝组织ＴＮＦ－α和ＥＴ－１显著增多,台盼蓝灌流时间明显延长。肝组织可见肝窦直径显著变窄,肝细胞肿胀变性坏死使肝窦被挤压。结论：肠源性内毒素血症及其引发的肝微循环障碍在急性门脉高压形成中具有重要作用。     

暴发性肝衰竭晚朝大鼠血液流变学变化与内毒素血症的研究

应用硫代乙酰胺灌胃复制暴发性肝衰竭大鼠模型，测定了肝衰竭晚期大鼠和正常大鼠血液流变学指标的变化及血浆内毒素含量。结果表明，暴发性肝衰竭晚期大鼠红细胞变形性与正常对照比较无明显差异，但红细胞的聚集指数、血浆粘度、全血粘度及血浆内毒素含量均显著高于正常对照组，且全血粘度的变化与血浆内毒素水平呈负相关。提示暴发性肝衰竭晚期伴有血液流变功能紊乱，且与内毒素血症相关。     

内毒素血症在肝癌发生发展中的作用

目的:探讨内毒素血症在肝癌发生发展中作用。方法:利用饮水中加入0.03%TAA,4个月形成肝硬化,6个月形成肝癌动物的模型。TAA+LPS组从第5个月开始皮下注射内毒素,至实验结束。在肝癌发生发展过程中进行血浆内毒素水平、γ-GT活性、DNA指数、增殖指数,并对N-ras、p53基因点突变进行分析。结果:内毒素可增加bcl-2与p53蛋白过度表达与增加N-ras、p53基因的点突变,增加自由基生成与降低抗氧化酶活性,加重DNA损伤。结论:内毒素能够促进TAA诱发肝癌变的过程。     

急性内毒素血症早期大鼠淋巴管运动变化及其一氧化氮合酶组织学研究

目的:研究急性内毒素血症早期大鼠淋巴管运动变化和一氧化氮合酶(NOS)的相关组织染色,探讨二者的关系。方法:股静脉注脂多糖(LPS),观察大鼠肠系膜淋巴管2h内的运动变化及相关组织的酶组化、HE染色。结果:LPS组淋巴管管径变大,运动频率减少,镜下见小肠绒毛中央乳糜管及粘膜下淋巴管丛极度扩张;对照及LPS组淋巴管内皮细胞及管壁上神经纤维都含有NOS阳性反应产物。结论:内毒素血症早期淋巴管扩张,运动减少,NOS可能在其中起重要作用。     

乙型肝炎患者肠源性内毒素血症、高组胺血症与细胞免疫功能之间的关系

目的：探讨慢性乙型肝炎患者肠源性内毒素血症（IETM）、组胺与细胞免疫功能之间的关系。 方法： 慢性乙肝患者80例，根据测定的血浆内毒素水平，将其分为内毒素（ET）阳性组和阴性组，分别检测血清白细胞介素10、12（IL-10、IL-12）、干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素2、4（IL-2、IL-4）浓度，组胺（HA）水平、类胰蛋白酶（TS）释放和AP50单位。 结果： 各肝炎患者IL-4与 IL-10水平明显高于健康人，而 IL-12和 IFN-γ水平明显低于健康人（P<0.05）；按照内毒素分组，阳性组患者IL-4与 IL-10水平明显高于阴性组（P<0.05），而IL-12和 IFN-γ水平在两组之间无明显差别。AP50、HA、TS水平在肝炎患者均明显高于正常对照组（P<0.05），且在内毒素阳性组均明显高于阴性组。乙肝患者内毒素分别与IL-4、IL-10、AP50及HA呈显著正相关，而HA分别与IL-12、IFN-γ呈明显负相关，与AP50、TS呈明显正相关。内毒素阳性组患者，内毒素水平分别与IL-4、IL-10、AP50及HA水平呈显著正相关，而在阴性组则无此相关性。 结论： AP50可以作为IETM存在的标志物，IETM通过激活补体而导致高组胺血症并且长期持续存在，引起细胞免疫功能低下，对肝病非常不利。     

急性肝功能衰竭时肠粘膜屏障损伤的研究

目的：探讨急性肝功能衰竭（简称肝衰）时肠粘膜屏障损伤及其机制,并观察中药大黄对它的防治作用。方法：采用鲨试剂法作血浆内毒素定量,酚一次氨酸法测定谷氨酰胺浓度及荧光法测定谷氨酰胺酶活性和组胺含量,Dans蓝染色法测定肠粘膜通透性。结果：硫代乙酰胺（thioacetamide,TAA)引发大鼠急性肝衰,并伴有严重的肠源性内毒素血症（intestinalendotoxemiaIETM)：肠谷氨酸肢酶活性降低,肠粘膜对谷氨酸胺利用减少,肠粘膜通透性增加。组织细胞学显示,TAA组动物肝细胞发生严重变性坏死;肠粘膜淤血、水肿、糜烂,肠肥大细胞脱颗粒。电镜示肠微绒毛倒伏、脱落,细胞间紧密连接破坏。大黄组动物IETM与肝组织损伤明显减轻。结论：急性肝袁伟有肠粘膜屏障损伤,其发生机制与IETM及其介导的组腹增多有关。大黄对急性肝衰时肠粘膜屏障损伤有一定防治作用。     

急性肝衰竭时肾功能障碍发生机理的探讨

本实验研究了半乳糖胺所致急性肝衰时内毒素血症和肾功能障碍的关系以及丹参的防治作用。实验结果表明、半乳糖胺所致肝衰的动物均伴有内毒素血症的发生、肾功能明显异常(Pcr,BUN升高,Ccr,UV,U_(Na)V降低,FE_(H2O),FE_(Na)增高)。经丹参治疗后内毒素血症明显减轻,肾功能也随之明显改善,从而提示内毒素血症和肾功能障碍密切相关。本实验结果证明,内毒素血症在肝肾综合征的发生,发展中是一个重要致病因素;丹参对肝肾综合征具有明显的防治作用。此外,半乳精胺所致肝衰竭模型同时也可用于肝肾综合征发病机理与防治的研究。     

内皮素在急性肝衰竭时肾功能障碍发生中的作用

目的：探讨内皮素在急性肝衰竭时肾功能障碍发生中的作用。方法：对硫代乙酰胺（ＴＡＡ）诱导的急性肝衰竭大鼠肝肾功能及内皮素水平进行动态观察。结果：随着肝损伤的加重，肾功能亦进行性恶化（表现为血肌酐升高，肌酐清除率下降，尿量减少，尿钠分泌降低等），血浆内毒素逐渐升高，均于４８ｈ最为严重。伴随上述变化，肾组织内皮素活性渐升高，亦于４８ｈ达高峰。血浆内皮素和肌酐清除率及肌酐清除率与肾组织内皮素水平之间均呈显     

糖调节蛋白78在大鼠肠源性内毒素血症促进肝硬化形成中的作用

目的:探讨糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠肠源性内毒素血症(IETM)促进肝硬化形成过程中的作用。方法:51只雄性Wistar大鼠随机分为肝硬化模型4周组、6周组、8周组及同期正常对照组。采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化,HE染色和VG染色分别观察肝损伤和肝纤维化情况;RT-PCR法和免疫组化法分别检测肝组织GRP78 mRNA及蛋白表达;同时测定血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、内毒素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、同型半胱氨酸(HCY)以及肝组织匀浆中TNF-α、丙二醛(MDA)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)水平。结果:(1)随病程进展,各模型组血浆中ALT、内毒素、TNF-α、HCY以及肝组织中GRP78 mRNA、蛋白表达水平、MDA、TNF-α、PⅢP含量和肝组织纤维化指数均逐渐升高并显著高于正常对照组(P0.05)。(2)血浆中升高的内毒素水平分别与GRP78蛋白、血浆MDA和HCY水平以及肝纤维化指数呈显著正相关(P0.01);表达增高的GRP78蛋白分别与血浆MDA和HCY水平以及肝纤维化指数呈显著正相关(P0.01)。结论:GRP78可能在肝硬化形成过程中发挥重要作用;内质网应激很可能是IETM促进肝纤维化乃至肝硬化发生的重要机制。     

肠源性内毒素血症对肝组织细胞间粘附分子-1表达的影响

目的:探讨肠源性内毒素血症对肝组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:采用Western blot 的方法检测硫代乙酰胺(TAA)诱导的肠源性内毒素血症大鼠肝组织中ICAM-1表达的变化。结果:ICAM-1的分子量为95 kD,正常对照组与注射TAA 6 h组ICAM-1的表达很弱,而在注射TAA 12 h以后的表达有增强,且与血浆内毒素水平及反映肝损伤程度的ALT活性变化相一致。结论:肠源性内毒素血症可诱导肝组织中ICAM-1表达的上调,后者与肝损伤程度相一致。     

谷氨酰胺防治急性肝衰竭大鼠肠道细菌移位实验研究

目的探讨谷氨酰胺（Gln）对急性肝衰竭（AHF）大鼠肠道细菌移位防治作用及机制。方法SD大鼠随机分成4组，对照组（A组），防治组（B组），治疗组（c组），模型组（D组）。B组、c组、D组腹腔注射D．氨基半乳糖（GaIN）建立急性肝功能不全大鼠模型。A组及D组予生理盐水灌胃。B组造模前两天予Gln灌胃防治，C组造模后一天Gln灌胃治疗。4d后处死动物。进行肝脏病理评分；观察肠系膜淋巴结细菌移位及平均组织含菌量、肠组织学改变；测量回肠绒毛高度和隐窝深度；检测血浆二胺氧化酶含量。结果B组和C组肝脏病理评分明显低于D组。B组肠系膜淋巴结细菌移位率低于D组，有显著性差异。B组、C组的血浆二胺氧化酶含量低于D组。B组显著低于C组。B组及C组的回肠绒毛高度和隐窝深度明显高于D组。B组明显高于C组，差异显著。结论谷氨酰胺可改善AHF大鼠的肠道黏膜屏障功能，减少AHF大鼠的肠道细菌移位的发生。