斑蝥合剂对H22肝癌小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的:探讨斑蝥合剂对H22肝癌小鼠的抑瘤作用及其免疫调节的机制。方法:选择移植性肝癌H22小鼠为模型,观察斑蝥合剂的抑瘤作用,检测T淋巴细胞增殖功能、NK细胞杀伤功能、T淋巴细胞表型变化及γ干扰素、白细胞介素-4含量。结果:斑蝥合剂对荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑制作用,抑瘤率为65.76%;斑蝥合剂治疗组小鼠T淋巴细胞转化刺激指数和NK细胞杀伤百分数均高于模型对照组(P<0.01);斑蝥合剂治疗组与模型对照组相比,斑蝥合剂治疗更能改变T淋巴细胞亚群比例;斑蝥合剂治疗组小鼠T细胞分泌γ干扰素及白细胞介素-4能力均有升高(P<0.05,P<0.01)。结论:斑蝥合剂具有抑制肿瘤生长的作用,并且对荷瘤小鼠的免疫功能有一定调节作用。其作用机制包括增强小鼠体内T细胞免疫功能、NK细胞的杀伤功能及体液免疫功能。     

扶正活血抗癌方对H22肝癌小鼠抑瘤及免疫调节的实验研究

目的：探讨扶正活血抗癌方对H22肝癌小鼠抑瘤及免疫调节的作用。方法：选择移植性肝癌H22小鼠为模型，设生理盐水组（对照组）10只，予生理盐水灌胃；实验组（治疗组）10只，予扶正活血抗癌方灌胃，均为15d。观察扶正活血抗癌方的抑瘤作用，检测T淋巴细胞增殖功能、NK细胞杀伤功能、T淋巴细胞表型变化及IFN-γ、IL-4含量。结果：扶正活血抗癌方对荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑制作用，抑瘤率为28％；实验组小鼠NK细胞杀伤百分数均比生理盐水组显著增加（P〈0．01）；与生理盐水组相比，实验组更能改变T淋巴细胞亚群比例；实验组小鼠T细胞分泌IFN-γ及IL-4能力均有显著升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论：扶正活血抗癌方具有抑制肿瘤组织生长的作用，对荷瘤小鼠的免疫功能有一定调节作用。其作用机制包括增强小鼠体内T细胞免疫功能、NK细胞的杀伤功能以及体液免疫功能。     

九味扶正中药合剂对荷瘤小鼠免疫功能影响的研究

本文观察了九味扶正中药合剂荷瘤不鼠免疫功能（腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾脏ＮＫ细胞活性和ＩＬ－２活性）的影响。结果显示：中药合剂对小鼠细胞免疫功能有正向调节作用，且对ＮＫ细胞活性的影响呈一定的时效关系。中药合剂可以消除由环磷酰胺引起的免疫系统抑制作用。     

理气药对荷瘤小鼠免疫功能的影响

实验中发现理气药有一定的抑制小鼠肿瘤（S180，Lewis肺癌）生长的作用。当小鼠接种S180和Lewis肺癌后，其免疫功能降低，白细胞介素Ⅱ（IL－2）活性低下，T细胞亚群比例失调，Th／TS＜1。经理气药治疗，明显抑制了IL－2活性的降低，与对照组比较，差别有显著意义（P＜0．05），并能提高T辅助细胞，调整T细胞亚群的比例，使Th／TS＞1。表明理气药能提高荷瘤机体的免疫功能，以达到抗肿瘤效应。     

用流式细胞术测定大气颗粒物提取液对小鼠T淋巴细胞亚群的影响

以太原市大气中粗、细颗粒物提取液为样品，用流式细胞仪测定它对小鼠T淋巴细胞亚群影响。结果显示，粒颗粒物提取液对小鼠T细胞亚群无影响（P＞0．05），细颗粒物提取液对小鼠T细胞亚群有影响（P＜0．05）。表明大气中细颗粒物可影响免疫功能，且随剂量增加，抑制作用越强。     

中药相关成分对T细胞亚群的调节作用

T细胞及其亚群对机体免疫功能有十分重要的影响。中药可以通过调节T细胞亚群的数量，活性及各亚群细胞之间的比例来调节T细胞的免疫功能。许多中药成分对TH，TS，CTL等T细胞亚群有调节作用。     

昆明医科大学微生物学与免疫学教研室，云南 昆明 650500

［摘要］目的　研究人工培养云南虫草菌粉（yunnan cordyceps sinensis,YNCS）的免疫调节作用．方法　ICR小鼠随机分组,每天用不同剂量的YNCS灌胃,用环磷酰胺（CY）诱导免疫功能低下模型,通过观察免疫器官、吞噬细胞功能、淋巴细胞增殖、血清凝集素、T细胞亚群等指标变化来判断YNCS对机体的免疫调节作用．结果　YNCS对小鼠的胸腺指数和脾指数有上调作用;YNCS低剂量对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有增强作用;低、中剂量YNCS组ConA、LPS刺激淋巴细胞增殖比模型对照组显著增高（P＜0.01）;YNCS低、中剂量对小鼠L3T4+ T淋巴细胞有上调作用,并使L3T4+ 淋巴细胞和L3T4+/Lyt2+ 比值恢复接近正常水平．YNCS低、中、高剂量组对小鼠凝集素有明显提高作用（P＜0.01）．结论　YNCS可以上调免疫功能抑制小鼠胸腺指数和脾指数,促进T淋巴细胞的增殖,调节小鼠T细胞亚群,增加血清凝集素水平,从而调节小鼠免疫功能．同时,高剂量的YNCS对免疫有一定的抑制作用     

西地那非对胃癌移植瘤小鼠髓源抑制细胞免疫活性的调节作用

目的: 探讨西地那非对胃癌移植瘤小鼠外周血髓源抑制细胞（myeloid derived suppressor cells, MDSCs）的比例以及免疫功能的调节机制。方法： 建立胃癌MFC荷瘤小鼠模型,6周龄雌性615小鼠18只随机分为正常对照组、荷瘤PBS组和荷瘤西地那非组。接种移植瘤24 h后荷瘤西地那非组每天给予西地那非灌胃,荷瘤PBS组每天给予等体积的PBS灌胃。通过计算抑瘤率观察西地那非的体内抗肿瘤活性,应用流式细胞术检测外周血MDSC、T细胞亚群比例。结果: 与正常对照组比较,胃癌移植瘤小鼠外周血MDSC的比例升高（P<0.05）,外周血CD4+/CD8+的比值降低（P<0.05）。外周血MDSC比例与CD4+/CD8+比值呈显著负相关（r=-0.858,P<0.01）。与荷瘤PBS组相比,西地那非可抑制胃癌移植瘤小鼠肿瘤生长,28 d后抑瘤率为41.2%,且可以降低荷瘤小鼠外周血MDSC的比例（P<0.05）,提高外周血CD4+/CD8+的比值（P<0.05）。结论：胃癌移植瘤小鼠外周血MDSC比例升高,导致免疫功能紊乱。西地那非可能通过抑制MDSC数量,调节T细胞亚群的比例,增强抗肿瘤免疫,抑制肿瘤生长。     

人参养荣汤对小鼠免疫功能的调节

目的 :研究中药制剂人参养荣汤在机体免疫应答过程中的正向调节作用。方法 :通过检测小鼠CTL细胞杀伤活性、T淋巴细胞亚群、IgG水平来观察人参养荣汤对环磷酰胺免疫抑制效应调节作用。结果 :人参养荣汤具有提高免疫功能低下小鼠CTL细胞毒活性 ;上调免疫功能低下小鼠CD4 和CD8 T细胞数量 ;对免疫功能低下小鼠的IgG产生具有一定的正向调节作用。结论 :中药制剂人参养荣汤是一种正向免疫调节剂。     

强脊康对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的研究中药复方强脊康对小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响,为其临床治疗强直性脊柱炎提供实验依据。方法制备小鼠免疫超常和免疫抑制模型,灌胃给药中药强脊康。采用绵羊红细胞的定量溶血测定法（QHS法）、溶血素的分光光度法和McAb间接免疫荧光法,分别检测小鼠脾脏细胞分泌抗体能力、血清溶血素水平和胸腺CD4＋、CD8＋T细胞亚群。结果强脊康能够抑制免疫超常模型小鼠脾脏抗体形成细胞产生和分泌抗体能力,降低血清溶血素水平;能够显著降低免疫超常模型小鼠胸腺CD4＋、CD8＋T细胞亚群及CD4＋/CD8＋比值,明显升高免疫抑制模型小鼠胸腺CD4＋、CD8＋T细胞亚群及CD4＋/CD8＋比值。结论中药强脊康能抑制免疫亢进小鼠的体液免疫功能;对免疫亢进和抑制小鼠的细胞免疫功能起到双向调节作用。     

The inhibitory effect of Chinese herb on SARS virus infection

[目的]测定H5N1病毒感染BALB/c的小鼠模型的细胞免疫动态变化,探讨病毒对机体免疫系统的影响。[方法]通过流式细胞仪测定CD3+T、CD4+T、CD8+T等细胞免疫变化。[结果]感染H5N1病毒的小鼠血液中CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞数量下降(P<0.05),脾脏中T细胞数量下降的趋势与血液相同,CD4+T/CD8+T的比例上升,只是两者的时间有所差别。[结论]说明病毒对细胞免疫T细胞数量影响较大,而且CD8+T受到的影响更为明显,反应了机体特异性细胞免疫功能受抑制,并且彼此之间的平衡受到破坏。     

大鼠间充质干细胞对BALB/c小鼠体外淋巴细胞实验的影响

目的 研究大鼠间充质干细胞(MSC)对BALB/c小鼠淋巴细胞增殖和CD4+CD25+调节性T细胞亚群的变化。方法 分离、扩增SD大鼠MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定。取第5代MSC与分离的小鼠淋巴细胞在刀豆蛋白(ConA)刺激下共培养5天 ,流式细胞仪测定细胞增殖,CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例的变化。结果 当淋巴细胞: MSCs在1:10及1:50时均可抑制ConA刺激下可抑制小鼠淋巴细胞增殖,淋巴细胞: MSCs在1:10 时CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例明显升高。结论 大鼠MSC具有异种基因免疫抑制作用     

TK/GCV治疗H-2半相合CD34+和TK+T细胞移植急性移植物抗宿主病研究

目的探讨TK/GCV对H-2半相合CD34+细胞和TK+T细胞混合移植急性移植物抗宿主病(graft versus host disease GVHD)疗效,为临床应用提供实验依据.方法从亲代雄性供鼠骨髓分离CD34+细胞,同时取脾脏T细胞转染TK基因.两者混合移植雌性F1代受鼠,每只受鼠输入CD34+细胞和TK+T细胞分别为1×105和1×107.移植0天或移植7 d给予丙氧鸟苷(Ganciclovir,GCV)治疗,剂量为50mg/kg·d×7 d腹腔注射.结果F1受鼠全部发生急性GVHD,对照组小鼠3周内全部死亡;GCV治疗组与对照组相比差异显著,P＜0.01.移植0天或移植7 d应用GCV小鼠生存时间分别为(26.6±4.8)d和(40.5±8.4)d.移植7 d给予GCV疗效较好,P＜0.05.结论TK/GCV系统对H-2半相合CD34+和TK+T细胞混合移植急性GVHD有较好治疗作用;GCV给予时间不同疗效有差异.     

CD8+CD28-T细胞在哮喘小鼠发病机制中的作用及地塞米松对其的影响

目的 探讨CD8+CD28-T细胞在哮喘发病机制中的作用及地塞米松对该细胞的影响.方法 30只BALB/c小鼠随机分为哮喘组、地塞米松组、正常对照组,各10只.哮喘组和地塞米松组给予卵白蛋白致敏后雾化吸入卵白蛋白溶液,地塞米松组每次雾化吸入前腹腔注射地塞米松1 mg/kg,各组分别于末次雾化激发后测定小鼠的气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数;取肺组织作HE染色病理切片;测BALF中IgE含量;流式细胞仪检测小鼠血、BALF中CD8+CD28-T细胞占淋巴细胞百分比;分析BALF中IgE、EOS计数与血液中CD8+CD28-T细胞百分比的相关性.结果 哮喘组、地塞米松组气道反应性明显高于正常对照组.哮喘组BALF中细胞总数和EOS计数分别为(5.56±4.06)× 102/L和(3.29±2.23)× 102/L,均明显高于地塞米松组[(2.59±1.69)× 102/L,P=0.044和(1.11±0.73)×102/L,P=0.008]及正常对照组[(0.91±0.65)×102/L,P=0.003和(0.43±0.37)× 102/L,P=0.001)];而后两组之间差异均无统计学意义(均P>0.05).哮喘组、地塞米松组、正常对照组BALF中IgE含量分别为(23.85±5.97)g/L、(13.15±2.22)g/L、(6.54±1.03)g/L,三组间差异有统计学意义(F=38.558,P=0.000).哮喘组、地塞米松组、正常对照组CD8+CD28-T细胞百分比在外周血中分别为(18.68±4.12)%、(13.43±2.90)%、(8.43±4.60)%;在BALF中分别为(1.25±0.40)%、(0.66±0.49)%、(0.21±0.19)%,组间差异均有统计学意义(F=11.837,P=0.001;F=12.885,P=0.000).哮喘组BALF中IgE含量和EOS计数与外周血中CD8+CLY28-T细胞百分比均呈正相关(r=0.864,P=0.012和r=0.804,P=0.029).结论 CD8+CD28-T细胞数量与哮喘小鼠气道炎症有明显相关性,地塞米松可有效抑制哮喘气道炎症并可能抑制了CD8+CD28-T细胞的表达和功能.

Abstract：

Objective To explore whether or not CD8+ CD28- T cell play a pathogenic role in asthma and detect the effects of dexamethasone ( DXM ). Methods A total of 30 mice were randomly divided into 3 groups: asthmatic group, DXM group and control group ( n = 10 each). The asthmatic and DXM groups were sensitized twice and inhaled ovalbumin. The DXM Group received an intraperitoneal injection of DXM lmg/kg before inhaling ovalbumin. After successful modeling, 3 mice were selected randomly from each group to measure the airway responsiveness. Also a bronchoalveolar lavage cytological study was performed and lung tissue sections were prepared for histopathologic examination to evaluate the airway inflammation. The content of IgE in bronchoaleolar lavage fluid ( BALF) was detected with a murine IgE ELISA kit. And the fractions of CD8 + CD28- T cell of peripheral blood and BALF were tested by flow cytometry to analyze the correlation between IgE, eosinophils ( EOS) of BALF and CD8 + CD28 - T cell of blood. Results The airway hyperresponsiveness in asthmatic and DXM groups were significantly higher than that in the control group. The number of total cells and EOS of BALF in the asthmatic group [ ( 5. 56 ±4. 06) × 102/L; (3. 29 ±2. 23) × 102/L] were significantly higher than that in control group [ (0. 91 ±0.65)×102/L, P = 0.003; (0.43 ±0.37) × 102/L, P = 0.001] and DXM group [(2.59 ±1.69) ×102/L, P =0.044; (1. 11 ±0.73) ×l02/L, P = 0.008]; while the DXM group was insignificantly higher than the control group (P=0. 234, P=0. 363). There were significant differences in the contents of IgE of BALF for the asthmatic, DXM and control groups [ (23. 85 ±5. 97) g/L, (13. 15 ±2.22) g/L, (6.54±1. 03) g/L, F = 38. 558, P = 0. 000 ] . The percentages of CD8 + CD28- T cell in peripheral blood in asthmatic and DXM groups [ (18. 68 ±4. 12)% and ( 13.43 ± 2. 91) % ] were significantly higher than those in control mice [ (8. 43 ± 4. 60) % , both P < 0. 05 ]. The percentages of CD8 + CD28 - T cell of BALF in asthmatic group and DXM group [(1.25±0. 40)% and (0. 66 ± 0. 49) % ] were also significantly higher than those in control mice [ (0. 21 ± 0. 19) % , both P < 0. 05 ]. The percentages of CD8 + CD28 - T cell of blood and BALF in the DXM mice were significantly lower than those in asthmatic group. The correlations between IgE ( r = 0. 864, P = 0. 012), EOS ( r = 0. 804, P = 0.029) and CD8 + CD28- T cell were significant. Conclusion The fraction of CD8 + CD28- T cell is closely correlated with the inflammation of asthmatic airway. The airway hyperresponsiveness and inflammation in asthmatic mice may be relieved by DXM through its effect of inhibiting the expression of CD8 + CD28- T cell.     

大蒜素对小鼠外周血淋巴细胞的影响

目的探索大蒜素对小鼠外周血淋巴细胞的影响。方法将40只清洁级昆明小鼠随机分为生理盐水对照组[0.1 mL生理盐水/(10 g·bw)]、大蒜素低剂量组[100 mg/(kg·bw)]、大蒜素中剂量组[200 mg/(kg·bw)]和大蒜素高剂量组[400 mg/(kg·bw)],每组10只,每天灌胃1次,灌胃容量0.1 mL/10 g,连续灌胃14 d后,随机选取8只,采用摘眼球的方式进行取血,制取为单细胞悬液,用流式细胞仪进行检测,分析大蒜素对于小鼠外周血中的CD4~+T细胞、CD8~+T细胞及CD4~+/CD8~+值及淋巴细胞周期的影响。结果高剂量组及中剂量组与对照组相比淋巴细胞亚群和周期均出现了显著性差异,CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+值相对提高,CD8~+T细胞值降低(P0.05);G_2/M期及S期的细胞的比例增加,G_0/G_1期的细胞的比例降低(P0.05)。结论大蒜素具有一定的免疫调节功能,尤其中、高浓度的大蒜素通过对外周血淋巴细胞周期的阻滞作用,使外周血淋巴细胞处于较高的增殖状态,促进淋巴细胞亚群的分化,激化小鼠的免疫功能,对小鼠的细胞免疫和体液免疫功能具有增强作用。     

联合应用棕榈酰化肽与聚肌胞对黑色素瘤特异性CD8+T细胞的影响

目的：探讨联合应用棕榈酰化肽与聚肌胞（poly IC ）对肿瘤特异性CD8＋ T 细胞的影响。方法15只C57BL／6小鼠随机分为5组（每组3只）：对照组（仅给予PBS ）、线性肽（g p10025‐33,黑色素瘤特异性CD8＋ T细胞表位）组、线性肽＋poly IC组、棕榈酰化肽组、棕榈酰化肽＋poly IC组。经肌内注射免疫小鼠后,取得外周血及脾组织,通过流式细胞仪分析黑色素瘤特异性CD8＋ T细胞数量,通过Elisa及Elispot法分析疫苗活化的CD8＋ T细胞体外对黑色素瘤细胞的识别。取15只荷黑色素瘤C57BL／6小鼠,监测不同方法免疫后皮下肿瘤的大小。结果与线性肽＋poly IC组比较,棕榈酰化肽与poly IC联合应用显著增加外周血gp10025‐33特异性CD8＋ T 细胞的数量[（23．53±5．398）％ v s（1．158±0．239）％,P＝0．014],且内源性CD8＋ T 细胞可以识别黑色素瘤细胞并显著抑制皮下肿瘤生长（P＜0．001）。结论联合应用棕榈酰化肽与poly IC可促进黑色素瘤特异性CD8＋ T细胞的免疫应答,从而显著抑制肿瘤生长。     

小鼠MHC-Ⅰ/MHC-Ⅱ类分子限制性表位MAGE-3多肽疫苗的设计及其免疫效应

[目的]设计小鼠MHC-Ⅰ/MHC-Ⅱ类分子限制性表位黑色素瘤抗原-3(MAGE-3)多肽疫苗即包含CD4~+一CD8~+T细胞表位的MAGE-3多肽抗原,并探讨其免疫效应.[方法]采用计算机模拟设计的方法,结合文献资料选择MHC-Ⅰ/MHC-Ⅱ类分子限制性表位的MAGE-3多肽.采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)、细胞毒性实验评价多肽诱导T淋巴细胞的增殖能力及刺激的T淋巴细胞释放细胞因子的能力.[结果]获得的联合表位多肽序列为FITC-YEEYYPLIFLDNDQETMETSEEEEYEEYYPLIF,高效液相色谱法分析多肽纯度≥90%.MAGE-3表位多肽抗原能够诱导T淋巴细胞增殖,并诱导T淋巴细胞分泌IFN-γ,高于对照组(49%vs spots/10~6,P≤0.05).MAGE-3表位多肽可诱导细胞毒T淋巴细胞使42%的MFC细胞溶解破裂,高于对照组(P≤0.05).[结论]包含CD~+-CD8~+T细胞表位的MAGE-3多肽抗原在体外实验中显示有一定的免疫效应,此抗原肽可作为多肽疫苗用于对表达MAGE-3抗原的H-2K<'K>型小鼠胃癌进行免疫治疗.     

低剂量环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞功能的影响

目的：研究低剂量环磷酰胺（CTX）单次注射对Lewis肺癌小鼠CD4⁺CD25⁺Treg细胞功能的影响,探讨CD4⁺CD25⁺Treg 细胞与肿瘤发生、发展的关系。方法：将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型,随机分成3组：CTX组、肿瘤组、单纯对照组。采用CTX单次注射,观测各组肿瘤体积动态变化;采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测各组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能;采用LDH释放法检测脾脏特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)细胞的杀伤活性。结果：与未治疗肿瘤组相比,CTX治疗可延缓荷19 d Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长;CTX组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平明显低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞功能明显高于肿瘤组（P<0. 05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞杀伤活性比肿瘤组略高,但变化不显著（P>0.05）。结论：CTX单次注射可降低Lewis肺癌小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞的数量及Foxp3 mRNA表达,使T淋巴细胞增殖功能及脾细胞中CTLs杀伤功能增强。     

Recombinant E. coli LLO/OVA induces murine BMDCs maturation via TLR4 and NOD1 receptor and promotes specific cytotoxic T cell immunity

Objective To explore the immune stimulation effect of recombinant E.coli LLO/OVA on mice bone marrow-derived dendritic cells （BMDCs） and T lymphocytes in vitro.Methods After BMDCs stimulated by E.coli LLO/OVA,their Toll-like receptor （TLR） and nucleotide-binding oligomerization domain （NOD） receptor signalling pathway were examined by superarray hybridization;and the priming effect of the vaccine activated BMDCs on CD4＋T and CD8＋T was determined by [3H]thymidine uptake and ELISA,the tumor cytotoxic effect of activated CD8＋T cells was determined by cytotoxic assay.Results After BMDCs were activated by E.coli LLO/OVA via TLR4,NOD1 receptor and NF-κB signalling pathway,the expression of their surface molecules including MHC class Ⅰ,MHC class Ⅱ,CD40,CD80 and CD86 significantly up-regulated;the secretion of IL-12 and IFN-？ increased also.The mature BMDCs stimulated the allergic CD4＋T and CD8＋T cells proliferation and their IL-2 and IFN-γ secretion,and the activated CD8＋T cells effectively killed B16-OVA melanoma cells and RMA-S/OVA lymphoma cells in vitro.Conclusion E.coli LLO/OVA is effective in inducing BMDCs maturation via activating TLR4 and NOD1 receptor signalling pathway and promoting specific anti-tumor T cell immunity in vitro.     

1型糖尿病人来源胰岛素原特异性T细胞克隆的建立及表型鉴定

[目的]研究1型糖尿病相关的胰岛素原(Proinsulin,PI)T细胞表位。[方法]采用有限稀释法建立糖尿病病人胰岛素原抗原特异性的T细胞克隆,~(51)Cr释放细胞毒性试验测定T细胞激活的HLA限制性和PI肽段中最小的抗原表位,用流式细胞仪分析其表型及表面肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apopto-sis-inducing ligand,TRAIL)的表达。[结果]建立了PI抗原特异性的CD4~+ T细胞克隆TWHPI-1,CD8~+ T细胞克隆TWH PI-2。前者为HLA DRB4 0101限制,PI最小抗原表位在PI(79～87),74.2％细胞表达 TRAIL。后者为HLA A1限制。PI最小抗原表位在PI(78～86),94.9％细胞表达TRAIL。[结论]HLA DRB4 0101-Al可能参与IDDM的致病过程,TRAIL可能是两株T细胞克隆引起胰岛细胞死亡的因子之一。