持续胰岛素输注对脓毒症早期大鼠肝脏线粒体的保护作用

目的: 探讨持续胰岛素输注对脓毒症早期大鼠肝脏线粒体是否具有保护作用及其作用机制.方法: SD大鼠24只随机分为正常对照组(n=8)、 LPS组(n=8)和胰岛素干预组(n=8).监测各组大鼠的血糖水平及腹腔注射后2 h和6 h的血清TNF-α和IL-6水平;运用流式细胞术检测24 h时点分离肝脏线粒体的膜电位;检测测分离肝脏线粒体SOD和MDA水平;电镜观察24 h肝脏线粒体形态学变化.结果: LPS组在腹腔注射LPS后各监测时点, 血糖水平较正常对照组均显著升高, 并且注射后2 h和6 h的血清TNF-α和IL-6水平较正常对照组显著升高.与正常对照组相比, LPS组24 h肝脏线粒体膜电位显著下降, 线粒体SOD水平显著升高, 而MDA水平则变化不显著.胰岛素干预组与LPS组比较, 血糖水平、 TNF-α及IL-6和肝脏线粒体SOD水平均显著降低, 而肝脏线粒体膜电位则显著升高, 线粒体MDA水平则改变不显著.肝脏线粒体超微结构改变尚不明显, LPS组与正常对照组相比, 仅个别线粒体出现空泡样改变, 部分基质凝固;而胰岛素干预组则未见空泡样改变.结论: 脓毒症早期大鼠肝脏线粒体存在可逆性损伤;持续胰岛素输注对脓毒症早期大鼠肝脏线粒体有明显的保护作用, 此保护作用可能与其减轻过度的炎症反应和降低过高的血糖水平有关.     

川芎嗪对缺氧缺血性脑损伤大鼠海马星形胶质细胞的影响

观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)大鼠海马星形胶质细胞的影响。将90只7日龄Wistar大鼠随机分为假手术组、HIBD组、TMP治疗组,各组分别在0h、6h、12h、24h、48h五个时间点取右脑,透射电镜下观察海马CA1区星形胶质细胞超微结构变化,免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary a-cidic protein,GFAP)表达的变化。结果显示,在电镜下HIBD损伤组星形胶质细胞肿胀,体积增大,核形状不规则,核质比增大,核仁明显,位于近核膜处,细胞器明显减少,线粒体肿胀,嵴紊乱,有缺失,可见粗面内质网池扩张;TMP组星形胶质细胞损伤轻,形态基本正常。HIBD后海马CA1区星形胶质细胞反应明显增强(P<0.01),川芎嗪治疗后可明显减轻星形胶质细胞的反应程度(P<0.01)。以上结果提示川芎嗪可通过减轻HIBD后星形胶质细胞的反应程度发挥保护和修复神经细胞的作用。     

脂多糖诱导脓毒症小鼠心肌细胞及线粒体自噬

目的探讨脓毒症心肌损伤时心肌细胞及线粒体自噬水平的变化。方法雄性C57BL/J小鼠随机分为空白对照组(NC)、LPS处理6、12、24、36 h组。LPS处理组小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS建立脓毒症模型,空白对照组注射等量生理盐水。分别于以上时间点处死小鼠,收集血液及心脏组织,提取心肌组织胞质蛋白、线粒体及线粒体蛋白,另取心肌组织进行冰冻切片;应用ELISA试剂盒测定血清心肌肌钙蛋白I(c Tn I)含量变化;JC-1染色结合荧光酶标仪检测LPS刺激后不同时间点线粒体膜电位变化;Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、PTEN诱导激酶1(pink1)、E3泛素连接酶帕金森病蛋白(parkin)水平;免疫荧光组织化学染色检测心肌组织LC3、pink1/parkin蛋白的定位及其在不同处理组的表达差异。结果与对照组相比,LPS诱导的脓毒症小鼠血清c Tn I在6 h即开始明显升高;LPS处理组线粒体膜电位下降,在LPS 12 h组最低;细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在腹腔注射LPS 12 h明显升高,然后逐渐下降;pink1/parkin在腹腔注射LPS 6 h明显升高,然后逐渐下降。结论脓毒症心肌损伤时心肌细胞及线粒体自噬水平升高,自噬应激可能更早发于心肌线粒体。     

炎性因子IL-1β对星形胶质细胞抗氧化应激能力的影响

目的:本研究应用原代培养星形胶质细胞,探讨炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)对星形胶质细胞抗氧化应激能力的影响。方法:在原代星形胶质细胞培养中分别加入1 ng/ml IL-1β,流式细胞仪检测不同作用时间(0、24、48、72 h)细胞线粒体膜电位改变,激光共聚焦显微镜观察活性氧(ROS)生成,分光光度法检测细胞内谷胱甘肽(GSH)含量,RT-PCR、Western Blot检测星形胶质细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的表达变化。结果:1 ng/ml IL-1β处理原代培养星形胶质细胞24~72 h,细胞线粒体膜电位无明显改变,细胞未出现明显损伤。IL-1β孵育24 h,细胞内ROS生成减少,GSH生成增加;48 h细胞内ROS生成增加,GSH较24 h组减低(P0.05);72 h,原代培养星形胶质细胞内ROS生成明显增加,GSH较0 h组降低(P0.05)。1 ng/ml IL-1β处理原代培养星形胶质细胞24 h,细胞内GSH-Px mRNA及蛋白水平较0 h组升高(P0.05);但仅是一过性反应,IL-1β孵育72 h后,原代培养星形胶质细胞内GSH-Px mRNA及蛋白水平均较0 h组降低(P0.05)。结论:持续炎性因子刺激下,星形胶质细胞抗氧化应激能力呈现动态改变,并且细胞内抗氧化物参与此变化过程。     

脑缺血/再灌注损伤中产生IL-17A的神经细胞类型鉴定

目的在离体细胞水平鉴定脑缺血/再灌注损伤中产生白细胞介素-17A(IL-17A)的脑固有神经细胞类型。方法利用原代培养小鼠脑皮层神经元、小胶质细胞和星形胶质细胞1~4 h氧-糖剥夺/24 h复糖复氧(OGD/R)模拟细胞离体缺血/再灌注损伤模型,用免疫荧光双标、实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)等技术,确定产生IL-17A的神经细胞类型。结果三种神经细胞中,除NeuN阳性神经元外,小胶质细胞和星形胶质细胞在OGD/R处理后,均可表达IL-17A蛋白,且分别与其特定标志物Iba-1和GFAP存在共定位现象。星形胶质细胞经过1~6 hOGD/24 h R处理后,IL-17A mRNA表达水平随OGD时间延长显著增高,且在4 hOGD/R时达高峰[(2.74±2.48),P0.001,每组n=5]。此外,OGD/R可促进星形胶质细胞表达IL-17A蛋白[(3.17±0.91),P0.05,每组n=5]。结论脑缺血/再灌注损伤中星形胶质细胞可能是产生IL-17A的主要来源。     

脓毒症心肌功能障碍模型大鼠的构建与评价

背景:目前认为心肌线粒体结构与功能的损伤在脓毒症心肌功能障碍中起着关键作用。目的:构建大鼠脓毒症心肌功能障碍模型,为研究该疾病提供有效的实验手段。方法:72只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组28只、脂多糖组44只;两组大鼠各随机抽取20只用于观察造模后10 d生存率;脂多糖组剩余24只依据造模后时相分为脂多糖6,12,24 h组3个亚组,每组8只。脂多糖组腹腔注射10 mg/kg脂多糖建立大鼠脓毒症模型,对照组注射等量生理盐水。脂多糖各亚组分别于各时相点行超声心动图检查心功能。留取心肌组织光镜观察心肌组织病理形态结构,透射电镜观察心肌超微结构;ELISA法检测大鼠静脉血清心肌肌钙蛋白、脑钠肽浓度。实验经宁夏医科大学总医院伦理审查委员会批准(审批号:2018-320)结果与结论:①与对照组比较,脂多糖组大鼠10 d生存率明显降低;②与对照组比较,脂多糖6 h组左室射血分数、左室缩短分数未见降低(P均>0.05),脂多糖12 h组、脂多糖24 h组左室射血分数、左室缩短分数显著降低(P均<0.01),且随时间延长降低更明显(P均<0.01);③与对照组比较,脂多糖12 h组、脂多糖24 h组血清肌钙蛋白Ⅰ、脑钠肽水平升高(P均<0.01),且随脂多糖注射时间延长,肌钙蛋白Ⅰ、脑钠肽水平逐渐升高(P均<0.01);④脂多糖各组心肌病理形态及超微结构与对照组比较出现明显损伤,且随着脂多糖注射时间延长损伤加重;⑤结果说明,实验成功建立大鼠脓毒症心肌功能障碍模型,该模型稳定可靠。     

Ski在大鼠活化星形胶质细胞中表达的变化

目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞中Ski和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白表达情况,利用间接免疫荧光法检测Ski蛋白在星形胶质细胞中的表达定位。结果:GFAP蛋白在星形胶质细胞中固有表达,LPS活化和划痕损伤后表达均上调。Ski在正常星形胶质细胞中呈低表达状态,1 mg/L LPS活化星形胶质细胞后,Ski表达开始增加,4 d时表达量最高(P0.05),6 d时开始下降,但仍高于未活化组;细胞划痕损伤后Ski蛋白表达情况与上述情况高度一致。Ski在正常及LPS活化6 d星形胶质细胞中表达主要集中在胞核,LPS活化后2和4 d时在胞质中出现明确的Ski表达。结论:Ski蛋白表达于星形胶质细胞,并在活化星形胶质细胞中表达上调。由此,我们推测Ski蛋白可能调控星形胶质细胞的活化、增殖等过程。     

炎症缺血缺氧损伤对体外培养的大脑皮层星形胶质细胞中内皮性脂酶表达的影响

目的:研究星形胶质细胞在炎症状态下缺血损伤对内皮性脂酶(endothelial lipase,EL)表达及活性的影响。方法:实验分为正常对照组、单纯损伤组和炎症损伤组。取新生大鼠脑皮质,体外分离培养纯化星形胶质细胞;单纯损伤组为对星形胶质细胞进行缺血缺氧损伤,炎症损伤组为白细胞共培养下的星形胶质细胞进行缺血缺氧损伤;两组损伤后分别在0,1,3,6,12,24,48 h不同时间点用逆转录PCR、实时荧光定量PCR和Western Blot检测EL的表达变化。结果:缺血损伤的星形胶质细胞中EL的表达比正常对照组偏高,并随着损伤时间的延长逐渐增高,在损伤后6 h和12 h达到峰值、随后下降。当加入炎症细胞后,炎症反应进一步促进EL在缺血缺氧损伤星形胶质细胞中的表达增加。结论:缺血缺氧损伤所介导的星形胶质细胞内EL的表达变化以及对该过程的促进作用可能直接影响到星形胶质细胞脂质的再利用,对损伤神经元的修复有极其重要的参考价值和临床意义。     

β—七叶皂甙钠对严重烫伤早期大鼠胶质原纤维酸性蛋白及突触变化的影响

目的:探讨β-七叶皂甙钠对严重烫伤早期大鼠突触可塑性的影响.方法:健康SD大鼠随机分为正常组、假烫伤组、烫伤组,烫伤后又设3、 6、 12、 24、 48h 5个时相点,用透射电镜观察突触超微结构变化;免疫组织化学显色观察脑胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达.结果:烫伤后神经元突触数量减少、星形胶质细胞线粒体肿胀、空泡化,GFAP表达增加.经β-七叶皂甙钠治疗后突触结构恢复,GFAP表达减少.结论:烫伤后大鼠皮质神经元突触结构遭破坏,β-七叶皂甙钠可能是通过保护神经元突触结构的基本完整,抑制GFAP表达,从而起到脑保护作用.     

氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞miR-21的表达变化

目的研究原代大鼠星形胶质细胞氧糖剥夺不同时间miR-21的表达,探讨miR-21是否参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的活性变化。方法原代大鼠星形胶质细胞随机分为正常组和氧糖剥夺组,分别培养3、6、9和12h。CCK-8法检测各组星形胶质细胞的活力,real-time PCR方法检测各组星形胶质细胞miR-21的表达。结果氧糖剥夺组miR-21的表达水平随培养时间延长呈先升高后降低的动态变化,3h开始高于对照组水平(P<0.05),6h达高峰(P<0.05),随后下降,9h与对照组无差异(P>0.05),12h显著低于对照组(P<0.05)。氧糖剥夺不同时间星形胶质细胞活力变化与miR-21的变化趋势一致。结论 miR-21可能参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的活性变化,发挥促增殖和抗凋亡的作用。     

脓毒症大鼠肺血管内皮细胞、细胞间粘附分子1和E-选择素的变化及其意义

目的:观察脓毒症大鼠肺血管内皮细胞(VEC)、细胞间黏附分子1和E-选择素的变化特点并探讨其意义.方法:60只SD大鼠随机分成对照组和脓毒症组.以脂多糖(LPS)静脉注射制备大鼠脓毒症模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法研究ICAM-1和E-选择素的表达;用Hoechest染色评价肺VEC凋亡;用电子显微镜观察肺VEC.结果:脓毒症组大鼠肺ICAM-1 mRNA和ICAM-1蛋白的表达与对照组比较明显增加(P<0.01),脓毒症组ICAM-1 mRNA和ICAM-1蛋白的表达6小时增高,24小时达到高峰;E-选择素表达6小时达高峰,以后逐渐下降,24小时后降至对照组相同水平.脓毒症组肺VEC随着制模时间的延长,坏死和凋亡显著增加(P<0.01),电子显微镜观察也得到证实.结论:脓毒症大鼠肺ICAM-1和E-选择素的表达明显增加,可能导致肺VEC的坏死和凋亡以及急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的发生.     

黄芪注射液抑制脑缺血再灌注大鼠海马组织Apaf-1表达

 目的： 观察黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马组织凋亡蛋白酶激活因子1（Apaf-1）蛋白及其mRNA表达的影响。方法： 将健康雄性SD大鼠120只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、黄芪注射液干预组和溶剂对照组。采用四血管阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型,除假手术组外其余3组根据再灌注不同时点再分为0 h、0.5 h、2 h、6 h、24 h、72 h和120 h 7个亚组,于再灌注相应时点提取脑组织。采用免疫组织化学和Western blotting检测大鼠海马组织Apaf-1蛋白的表达,RT-PCR法检测Apaf-1 mRNA的表达。结果： 除0 h和120 h外,脑缺血再灌注组各个时点Apaf-1蛋白及mRNA表达均较假手术组增加 (P<0.05);与脑缺血再灌注组相比,黄芪注射液干预组各个时点Apaf-1蛋白及mRNA表达均显著减少 (P<0.05),而溶剂对照组各时点与脑缺血再灌注组相比则均无显著变化 (P>0.05)。结论： 黄芪注射液能抑制大鼠海马组织Apaf-1蛋白及mRNA表达,从而抑制脑缺血再灌注大鼠海马神经元的凋亡。     

乙醇性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症肝组织Toll样受体及髓样分化蛋白-2的表达变化

目的：探讨乙醇性肝病大鼠创伤弧菌（VV）脓毒症肝组织Toll样受体及髓样分化蛋白-2的表达及其动态变化。 方法:制作乙醇性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症模型。大鼠随机分为正常对照组、乙醇性肝病对照组和乙醇性肝病创伤弧菌脓毒症组。观察乙醇性肝病创伤弧菌脓毒症组大鼠在染菌后各时点脓毒症表现,并采用逆转录聚合酶链（RT-PCR）技术检测各时点大鼠肝组织TLR2、TLR4、MD-2 mRNA表达及其动态变化。结果:乙醇性肝病创伤弧菌脓毒症组大鼠染菌后6 h开始出现较明显的毒血症状,随着时间的延长毒血症状加剧。乙醇性肝病大鼠在染菌后2 h,TLR2、TLR4、MD-2 mRNA表达开始升高, 12 h达峰值,染菌后24 h下降。染菌后各时点TLR2、TLR4、MD-2 mRNA表达较正常对照组及乙醇性肝病对照组显著升高（P<0.05,P<0.01）。结论:乙醇性肝病大鼠VV脓毒症肝组织TLR2、TLR4、MD-2 mRNA表达水平随脓毒症病情的进展而升高,其与脓毒症的发生、发展密切相关,动态监测其改变对创伤弧菌脓毒症发病过程具有一定的意义。     

烫伤大鼠脑底动脉ET-1水平的测定及意义

目的:探讨烫(烧)伤损伤对大鼠脑血管内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)表达的影响,探讨内皮素-1在大鼠烫(烧)伤损伤诱发脑血管痉挛致脑功能障碍的作用。方法:Wistar大鼠随机分为单纯烫伤组(单烫组)、烫伤合并注射内毒素组(烫注组)、单纯注射内毒素组(单注组)三大组。各组再分为正常对照组、3h组、6h组、12h组、24h组、48h组,应用放射免疫分析测定(radioimmunoassay),分别检测各组实验动物脑基底动脉ET-1水平的变化。结果:单烫组、烫注组和单注组各组损伤后大鼠脑基底动脉ET-1水平较正常对照组增高,6h达高峰,12h仍持续较高水平。结论:烫(烧)伤损伤可引起大鼠脑血管ET-1显著增加,增加的ET-1在烫(烧)伤损伤诱发脑血管痉挛、引发脑血液循环障碍的病理发生过程中可能起重要作用。     

bFGF对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡及fractalkine表达的影响

目的: 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠脑缺血再灌注缺血半暗带侧皮质区fractalkine表达的影响,进一步探讨bFGF的神经保护机制。方法: 应用栓线法建立大鼠脑缺血再灌注模型,36只实验大鼠随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组和bFGF组,缺血1 h再灌注24 h后行神经功能评分,TTC染色测梗死面积,TUNEL法检测细胞凋亡数目,免疫组化检测fractalkine表达,并进行图像分析。结果: 缺血再灌注组及bFGF组的神经功能评分分别为3.18±0.65和2.23±0.59,两组比较P<0.05;假手术组、缺血再灌注组及bFGF组凋亡细胞数目分别为0.91±0.65、17.28±1.01及13.22±1.35,bFGF组的凋亡细胞数目较缺血再灌注组明显减少(P<0.05);假手术组、缺血再灌注组及bFGF组fractalkine表达量分别为101.26±1.13、113.17±1.35及107.25±3.25,与假手术组相比,缺血再灌注组fractalkine表达减少,bFGF组fractalkine表达量显著高于缺血再灌注组(P<0.05)。结论: bFGF的神经保护作用可能与其上调fractalkine表达水平有关。     

Gene silencing of non-obese diabetic receptor family (NLRP3) protects against the sepsis-induced hyper-bile acidaemia in a rat model

The role of NOD-like receptor family (NLRP3) has been confirmed in various inflammatory diseases. The association between NLRP3 and hyper-bileacidaemia during the sepsis remains unclear. We aimed to investigate whether NLRP3 silencing protects against the sepsis-induced hyper-bileacidaemia. Sepsis was induced by caecum ligation and puncture (CLP). Gene silencing of NLRP3 was performed by injecting rats with NLRP3 short hairpin RNA plasmids (NLRP3 shRNA) 48 h before surgery. Rats were divided into four groups: group 1: sham; group 2: sepsis; group 3: NLRP3 shRNA + sepsis (called the ‘NLRP3 shRNA’ group); and group 4: scrambled shRNA + sepsis (called the ‘scrambled shRNA’ group). The serum levels of bile acids, hepatic expression of hepatocyte membrane transporters, hepatic cytokine levels and behaviours of immune cells were compared among the groups. Hepatic NLRP3 expression was increased dramatically during the sepsis, but was suppressed by pretreatment with NLRP3 shRNA. Compared with rats in the sepsis and the scrambled shRNA groups, rats in the NLRP3 shRNA group exhibited significantly decreased serum levels of glycine and taurine conjugated-bile acids, with rehabilitated expression of hepatocyte transporters, suppressed hepatic cytokine levels, decreased hepatic neutrophils infiltration and attenuated macrophages pyroptosis. Gene silencing of NLRP3 ameliorates sepsis-induced hyper-bileacidaemia by rehabilitating hepatocyte transporter expression, reducing hepatic cytokine levels, neutrophil infiltration and macrophages pyroptosis. NLRP3 may be a pivotal target for sepsis management.     

组织因子在大鼠脑微血管血栓形成中的表达

目的：探讨大鼠脑皮质微血管血栓模型中组织因子（TF）表达的动态变化及意义。 方法： 50只SD雌性大鼠，随机分成正常对照组、血栓2 h、4 h、6 h、24 h组，每组10只，应用光化学法诱导脑皮质微血管梗塞模型。分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫组化的方法检测脑血栓2 h、4 h、6 h、24 h血浆和脑血栓形成局部TF表达水平的变化。 结果： HE光镜和电镜观察的病理形态变化显示复制大鼠脑皮质微血管梗塞模型成功。血浆中TF含量4 h、6 h组显著高于正常对照组（P<0.01）。脑血栓局部微血管内皮细胞TF表达阳性，对照组为阴性，血栓6 h和24 h组TF平均吸光度值显著高于2 h和4 h组（P<0.01）。血浆中血管性血友病因子（vWF）含量2 h（P<0.01）、4 h（P<0.05）组显著高于正常对照组，抗凝血酶（AT）活性24h组显著高于其它各组（P<0.05）。 结论： 光化学诱导大鼠脑血栓形成模型操作简单，稳定可靠，与人体血栓形成过程相似：血管内皮损伤及内皮下TF暴露启动外源性凝血途径。组织因子凝血途径易化因素增强，表明TF参与大鼠脑皮质微血管血栓形成。     

升麻苷H-1对脑缺血大鼠纹状体氨基酸类神经递质含量的影响

 目的:研究脑缺血大鼠脑纹状体区域细胞外液中氨基酸类神经递质的表达变化,以探讨升麻苷H-1神经保护作用的机制。方法:SD 大鼠随机分为假手术组、脑缺血组、升麻苷H-1高、中、低剂量组和金纳多组。用线栓法造成右侧大脑中动脉闭塞(MCAO),建立局灶脑缺血模型,假手术组和脑缺血组分别给予生理盐水腹腔注射,升麻苷H-1高、中、低剂量组和金纳多组分别给予不同剂量的药物腹腔注射,每天1 次,连续7 d。采用脑微透析技术在大鼠脑纹状体区域内进行微透析活体采样,将微透析液注入高效液相-电化学检测器,检测样品中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)的含量。结果:与假手术组相比,脑缺血组的兴奋性氨基酸Glu和Asp在脑缺血后2 h浓度升高(P<0.05)。升麻苷H-1高剂量组、金纳多组分别与脑缺血组相比,Glu和Asp在脑缺血后2 h显著降低(P<0.05);升麻苷H-1低、中剂量组分别与脑缺血组相比,Glu和Asp在脑缺血后2 h 没有显著降低(P>0.05)。与假手术组相比,脑缺血组的抑制性氨基酸神经递质GABA 和Gly在脑缺血后3 h浓度降低(P<0.05)。升麻苷H-1高剂量组、金纳多组分别与脑缺血组相比,GABA 和Gly在脑缺血后3 h显著升高(P<0.05);升麻苷H-1低、中剂量组分别与脑缺血组相比,GABA 和Gly在脑缺血后3 h 没有显著升高。结论:升麻苷H-1可以抑制脑缺血时兴奋性氨基酸的过度释放,并增加抑制性氨基酸的浓度。升麻苷H-1不仅能透过血脑屏障,同时可调节脑缺血兴奋性氨基酸神经递质的功能紊乱,可能对缺血脑组织神经元有一定的保护作用。     

葛根素预处理对大鼠脑缺血早期脑组织eNOS的影响

目的: 研究葛根素在脑缺血早期的脑保护作用是否与脑组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达有关。方法: 45只大鼠随机分为3个研究组:假手术组(S组)5只、脑缺血组(M组)20只和葛根素预处理组(P组)20只。其中,P组和M组又分别分为脑缺血0.5 h、1 h、2 h、4 h 4个亚组。除假手术组外其它大鼠制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,P组在手术前10 min腹腔注射葛根素(100 mg/kg),M组和S组在同样时点注射等量生理盐水。采用神经功能缺损评分、神经元尼氏体染色评价脑组织功能及形态变化;采用免疫组化和Western blotting方法检测脑组织eNOS,观察其分布和表达水平。结果: P组各亚组神经功能缺损评分较对应时点的M组减轻(P<0.05),神经元尼氏体溶解也较M组减少,其脑组织eNOS蛋白质的表达均明显高于对应时点的M组(P<0.05)。结论: 葛根素预处理对大鼠脑缺血早期的脑保护机制可能与其上调脑组织eNOS蛋白质表达有关。     

人参皂甙Rd预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后多聚ADP核糖聚合物的影响

目的:观察人参皂甙Rd缺血前预给药对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后多聚ADP核糖聚合物含量的影响。方法:60只健康雄性Sprague-Dawley大鼠,体重280～300 g,随机分为假手术组(Sham组)、丙二醇组(Vehicle组)和人参皂甙Rd处理组(Rd组),每组20只。Vehicle组和Rd组大鼠采用MCAO线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉,2 h后拔出栓线达到再灌注目的,建立急性局灶性脑缺血/再灌注模型。Vehicle组和Rd组分别于造模前30 min腹腔注射丙二醇(人参皂甙Rd稀释液)和人参皂甙Rd(10 mg/kg)。Sham组手术操作同前,但线栓未阻塞大脑中动脉。Western Blot和免疫组织化学方法检测大鼠大脑中动脉阻塞4 h后多聚ADP核糖聚合物的含量。结果:与Sham组相比,Vehicle组和Rd组缺血侧脑组织PAR聚合物含量增加(P<0.01);与Vehicle组相比,Rd组缺血侧脑组织PAR聚合物含量明显上调(P<0.01)。结论:10 mg/kg人参皂甙Rd预处理可能通过增加PAR聚合物的含量起到脑缺血损伤早期神经保护作用。