束缚应激大鼠中枢AMPA受体和相关蛋白mRNA表达的变化及逍遥散对其调节作用

目的观察海马及杏仁核α-氨基羟甲基恶唑丙酸（AMPA）受体各亚基和相关调节蛋白在束缚应激状态下的mRNA表达变化及逍遥散的作用。方法使用捆绑的方法制作束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7天后和21天后检测模型大鼠海马CA1区、CA3区、齿状回（DG）、杏仁核AMPA受体亚基GluR1-4、N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感性融合蛋白（NSF）、PKC作用蛋白1（PICKl）mRNA表达的情况。结果7天束缚应激状态下,GIuRlmRNA在海马CA1区表达显著下降（P〈0．05）,在CA3区和杏仁核表达显著上升（均P〈0．05）,GluR2、GluR3mRNA在杏仁核（均P〈0．05）,GluR4mRNA在CA1区（P〈0．01）表达显著增高,NSF、PICK1mRNA表达在杏仁核有明显增高趋势;逍遥散对CA1区GluR4及杏仁核GluRl、GluR2、GluR3mRNA表达变化有显著调节作用（P〈0．05,P〈0．01）。21天束缚应激状态下,CA1区GluR4、DG的GluR2mRNA表达显著下降（均P〈0．05）,杏仁核GluRlmRNA表达显著增强（P〈0．01）;逍遥散对CA1区GIuRl、GluR4mRNA表达变化有显著调节作用（均P〈0．05）。结论短期重复应激对于AMPA受体各亚基mRNA表达的影响较强,逍遥散对AMPA受体各亚基mRNA表达的调节在海马CA1区和杏仁核较明显。     

逍遥散对肝郁脾虚证大鼠边缘系统神经元超微结构的影响

目的:探讨慢性束缚应激所致肝郁脾虚证大鼠海马CA1区和杏仁核细胞超微结构的变化,明确逍遥散和6-氰基-7-硝喹啉-2,3-双酮(CNQX)对慢性应激所致肝郁脾虚证的保护作用及其机制。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为正常组(A组)、假手术组(B组)、模型组(C组)、逍遥散组(D组)、CNQX组(E组)和逍遥散+CNQX组(F组)。C、D、E、F组大鼠通过连续21d慢性束缚应激建立肝郁脾虚证候模型,D、F组大鼠每天束缚前灌服逍遥散5.32g/kg,E、F组大鼠在第1、4、7、10、13、16、19、21d右侧杏仁核区微量注射α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂CNQX0.5μl。第22d处死动物,用透射电镜方法观察海马CA1区和左侧杏仁核神经细胞和突触的形态结构。结果:模型组大鼠海马出现了细胞核变形、线粒体嵴模糊,突触结构不清等,正常组、假手术组和给药各组大鼠CA1区未见明显异常;各组大鼠杏仁核均未见明显异常。结论:逍遥散可改善慢性束缚应激导致的海马CA1区超微结构的损伤,其作用机制可能与CNQX一致。     

激动肝郁脾虚证大鼠海马CA1区AMPA受体对杏仁核区AMPA受体亚基基因表达的影响及逍遥散的调节作用

目的:探讨逍遥散治疗肝郁脾虚证的基因调节机制。方法:25只SD雄性大鼠随机等分为5组,正常组、模型组、假手术组、α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)组和逍遥散组。以21d慢性束缚应激方法造肝郁脾虚证模型组。假手术组、AMPA组和逍遥散组均采用21d慢性束缚联合脑部埋管微量注射方法造模,AMPA组在双侧海马CA1区埋管微量注射AMPA,逍遥散组灌服逍遥散溶液。运用RT-PCR一步法检测海马CA1区和杏仁核区AMPA受体的重要亚基GluR1 mRNA和GluR2 mRNA的表达变化。结果:在杏仁核区,与AMPA组比较,逍遥散组GluR1mRNA和GluR2 mRNA表达差异无统计学意义;在海马CA1区,与正常组比较,AMPA组GluR1 mRNA和GluR2mRNA表达差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与AMPA组比较,逍遥散组GluR1 mRNA和GluR2 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论:结合前期实验,从基因表达角度,进一步推断逍遥散通过纠正杏仁核和海马AMPA受体的"兴奋-抑制"失衡,重建稳态,来治疗肝郁脾虚证。     

逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区NMDAR2A和NMDAR2BmRNA基因表达的调节作用

目的:观察海马及杏仁核N-甲基D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid(NMDA)受体NMDAR2A(NR2A)和NMDAR2B(NR2B)的蛋白在束缚应激状态下的mRNA表达变化及道遥散的作用。方法:使用捆绑的方法制作束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7天后和21天后检测模型大鼠海马CAI区、CA3区、齿状回(DG)、杏仁核NMDA受体NMDAR2A和NMDAR2B的蛋白mRNA表达的情况。结果:NR2AmRNA和NR2BmRNA在海马的CA1,CA3,DG和BLA都有不同程度的基因转录。NR2AmRNA在CA3,DG和BLA区,7天和21天模型组的表达均下调(P0.05和P0.01),在CA1区不明显。NR2BmRNA在CA1,CA3,DG和BLA区,21天模型组的表达均下调(P0.05和P0.01),在CA1和BLA区7天模型组表达不变。逍遥散对CA3和DG区的NR2AmRNA和NR2BmRNA有明显的调节作用,在CA3和DG区7天和21天的表达均上调(P0.05和P0.01)。而在CA1区对NR2AmRNA和NR2BmRNA没有调节作用。其中以CA3区和DG区的调节作用最明显,这里可能是逍遥散的调节靶点。结论:逍遥散在海马和杏仁核区对慢性束缚应激引起的神经传递的改变有明显的双向调节作用,可以影响突触可塑性,以适应机体的功能,主要靶点在CA3和DG区。     

逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区GAP-43和Nogo-AmRNA基因表达的调节作用

目的 观察海马及杏仁核GAP-43和Nogo-A mRNA的蛋白在束缚应激状态下的mRNA表达变化及逍遥散对其表达变化的作用.方法 使用捆绑的方法制作束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7天后和21天后检测模型大鼠海马CA1区、CA3区、齿状回(DG)、杏仁核GAP-43和Nogo-A mRNA表达的情况.结果 在慢性束缚应激中,GAP-43 mRNA在海马各区的21天模型中都下调(P<0.01和P<0.05),在CA3和DG区的影响较大(7天和21天模型都下调),而在杏仁核中上调显著(P<0.01和P<0.05).Nogo-AmRNA在海马各区的21天模型中都上调(P<0.01和P<0.05),以CA3的影响明显,而在杏仁核中下调显著(P<0.01).束缚时间越长,对它们的影响愈大.在CA1区,7天模型组中,GAP-43mRNA没有变化(P>0.05),在CA3和BLA区7天模型组中,No go-AmRNA都没有变化(P>0.05).慢性束缚应激明显地影响了大鼠海马和杏仁核中GAP-43和Nogo-AmRNA基因的转录情况,引起突触结构的改变可能影响了突触可塑性.逍遥散对慢性束缚应激引起的GAP-43和Nogo-AmRNA基因转录可能有明显的调节作用,但有选择性,总的来说CA3和D G区的作用明显,而在CA1的7天模型组中没有作用.结论 逍遥散可双向的调节CA3和D G区的GAP-43和Nogo-AmRNA基因转录水平,可能影响突触可塑性.     

肝郁脾虚证大鼠双侧杏仁核注射CNQX后行为变化及逍遥散的调节作用

目的:从行为学角度探讨逍遥散治疗肝郁脾虚证的调节机制。方法:75只雄性SD大鼠随机等分为5组,正常组、模型组、假手术组、6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮(CNQX)组和逍遥散组。以21d慢性束缚应激方法造肝郁脾虚证模型组,在此基础上,运用脑立体定位仪埋管微量注射α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体的拮抗剂造CNQX组,为评估手术创伤对模型的影响程度加造假手术组。逍遥散组造模方法和CNQX组相似,突出逍遥散和CNQX二者干预的可比性,于第1、7、14、21天分别比较CNQX组和逍遥散组行为变化各项指标趋势是否一致。结果:模型组大鼠逐步呈现肝郁脾虚证表现;CNQX组起到干预治疗作用,大鼠焦躁状态得到抑制;逍遥散组大鼠表现自然,逍遥散起到较好的调节作用。排除了手术创伤等混杂因子,逍遥散组和CNQX组行为学实验结果变化趋势逐步相似。结论:结合前期RT-PCR和免疫组化实验,从宏观行为学角度,进一步推断逍遥散和CNQX有一条相似作用通路,即通过纠正杏仁核和海马的"兴奋-抑制"失衡,重建稳态,来治疗肝郁脾虚证。     

逍遥散对慢性束缚大鼠应激脑区GAP-43和Nogo-A蛋白的调节作用

目的:观察大鼠在束缚应激状态下海马及杏仁核GAP-43和Nogo-A蛋白表达的变化及逍遥散的调节作用。方法:使用每天捆绑3小时的方法制作慢性束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7天和21天后用Western blot方法检测各组大鼠海马CA1区、CA3区、齿状回(DG)和杏仁核的GAP-43和Nogo-A的蛋白表达情况。结果:在海马各区,21天模型组的GAP-43表达量下调显著(P0.01和P0.05),在CA3区,7天模型组的GAP-43表达量下调显著(P0.05);而在杏仁核区,21天模型组的GAP-43上调明显(P0.01)。在海马各区,21天模型组的Nogo-A表达量上调显著(P0.01和P0.05),以CA3和DG区明显;而在杏仁核区21天模型组下调明显(P0.01)。逍遥散的调节作用在CA3和DG区对21天模型组均有明显的作用。结论:逍遥散的抗抑郁作用与其对GAP-43和Nogo-A蛋白表达的双向性调节作用有关。     

通督醒神针刺法对脑缺血再灌注后学习记忆障碍模型大鼠海马组织AMPA受体及其辅助蛋白表达的影响

目的 探讨通督醒神针刺法治疗脑卒中后认知障碍的可能作用机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组各12只，通督醒神组13只。模型组和通督醒神组大鼠均接受线栓法建立脑缺血再灌注后学习记忆障碍大鼠模型。造模成功后通督醒神组大鼠选取“神庭”“百会”穴电针干预，每日1次，每次30 min，持续14天，其余各组只抓取不进行其他干预。于干预的第9天开始进行5天的定位航行实验，于干预的第14天进行空间探索实验评价大鼠学习记忆能力。空间探索实验后，每组大鼠取材海马组织，采用TTC染色法观察脑梗死体积变化；高尔基染色法观察大鼠海马CA1区锥体神经元形态及树突棘密度改变；运用蛋白质免疫印迹法检测各组大鼠海马组织α-氨基-3-羧基-5-甲基异恶唑-4-丙酸（AMPA）受体亚基谷氨酸受体1 (GluR1)、谷氨酸受体2 (GluR2)、谷氨酸受体3 (GluR3)及辅助蛋白跨膜AMPA受体调节蛋白γ2(TARPγ2)、跨膜AMPA受体调节蛋白γ8 (TARPγ8)蛋白相对表达量；运用实时荧光定量PCR法检测大鼠海马组织GluR1、GluR2、GluR3 mRNA水平。结果 定位航行实验中，与正常组和...     

逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区GAP-43和Nogo-AmRNA基因表达的调节作用

目的观察海马及杏仁核GAP-43和Nogo-A mRNA的蛋白在束缚应激状态下的mRNA表达变化及逍遥散对其表达变化的作用。方法使用捆绑的方法制作束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7天后和21天后检测模型大鼠海马CA1区、CA3区、齿状回（DG）、杏仁核GAP-43和Nogo-A mRNA表达的情况。结果在慢性束缚应激中,GAP-43mRNA在海马各区的21天模型中都下调（P〈0.01和P〈0.05）,在CA3和DG区的影响较大（7天和21天模型都下调）,而在杏仁核中上调显著（P〈0.01和P〈0.05）。Nogo-A mRNA在海马各区的21天模型中都上调（P〈0.01和P〈0.05）,以CA3的影响明显,而在杏仁核中下调显著（P〈0.01）。束缚时间越长,对它们的影响愈大。在CA1区,7天模型组中,GAP-43mRNA没有变化（P〉0.05）,在CA3和BLA区7天模型组中,No go-A mRNA都没有变化（P〉0.05）。慢性束缚应激明显地影响了大鼠海马和杏仁核中GAP-43和Nogo-A mRNA基因的转录情况,引起突触结构的改变可能影响了突触可塑性。逍遥散对慢性束缚应激引起的GAP-43和Nogo-A mRNA基因转录可能有明显的调节作用,但有选择性,总的来说CA3和D G区的作用明显,而在CA1的7天模型组中没有作用。结论逍遥散可双向的调节CA3和D G区的GAP-43和Nogo-A mRNA基因转录水平,可能影响突触可塑性。     

当归芍药散对慢性束缚应激模型大鼠海马NMDAR1、GluR2及BDNF表达和抑郁样行为的影响

目的：观察当归芍药散对慢性束缚应激模型大鼠海马谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)、谷氨酸受体2(GluR2)以及脑源性神经营养因子(BDNF)表达和抑郁样行为的影响。方法：60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、当归芍药散组,每组15只。除空白组外,其余各组采用束缚方式制备慢性应激模型,当归芍药散组大鼠应激同时灌胃当归芍药散混悬液13.44 g·kg^-1·d^-1,氟西汀组应激同时灌胃氟西汀水溶液2 mg·kg^-1·d^-1,空白组与模型组灌胃等体积0.9%氯化钠溶液,1次/d,实验21 d。采用糖水消耗实验、高架十字迷宫实验评价大鼠行为学变化,尼氏染色法观察大鼠海马神经元病理变化,免疫组化法和qRT-PCR法分别检测大鼠海马CA1区NMDAR1、GluR2、BDNF蛋白及mRNA的表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠体质量降低,糖水消耗率、高架十字迷宫实验开放臂停留时间及进入次数显著减少(P<0.05),海马CA1区尼氏小体数量、GluR2与BDNF蛋白及mRNA表达...     

多因素AD动物模型的建立及针刺对其学习记忆功能的影响

为研究针刺对老年性痴呆（AD）的疗效，70只大鼠分成7组：正常对照组（A），模拟对照组（B），氯化铝（AlCl3)组（C），SCOP组（D），AlCl3 SCOP组（E），针刺组（F），药物组（G），除A，B两组外，其余各组大鼠腹腔注射D－半乳糖，在此基础上，予以相应处理：C组胃饲AlCl3,D组注射SCOP，E组胃饲AlCl3 注射SCOP，F，G组以E组法造模并分别予针刺（大椎，百会），喂服药物哈伯因，疗程30d,B组模拟E组，以生理盐水鼻饲和腹腔注射，A组不作任何处理，结果：C，D，E3组大鼠水迷宫游出时间，错误次数，跳台的触电潜伏期，3min错误次数，与B组比较均有改变，其中E组最为明显，F，G组的各项指标较E组改善，且两组间基本相同，提示：多因素损伤能更好地突出AD的特征：针刺能提高AD动物的学习记忆功能。     

柴胡疏肝汤对难治性癫痫大鼠脑电图及多药耐药蛋白 P-糖蛋白表达的影响

目的:探讨柴胡疏肝汤对锂-匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠脑电图变化以及多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法:将制备成功的50只SD难治性癫痫大鼠模型随机分为5组,模型组(B)、丙戊酸钠(VPA)组(C)、柴胡疏肝汤低(D)、中(E)、高(F)剂量组,每组各10只,另有空白对照组(A)10只。柴胡疏肝汤是以柴胡桂枝汤和四物汤为基础方加味煎煮浓缩而成,含生药1 g.mL-1。VPA组用量为0.2 g.kg-1,柴胡疏肝汤低、中、高浓度依次为4.5,9,18 g.kg-1,空白组和模型组给予等量生理盐水。各组均ig给药8周,给药结束后检测各组大鼠脑电图以及海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达。结果:脑电图:A组无痫性波出现,B组出现大量的痫性波,C,D,E,F组能不同程度的减少脑电图的痫性波,以F组最明显。在大鼠海马区、颞叶皮层,Western blotting检测各组P-gp表达,差异有统计学意义(P﹤0.01)。与A组相比,其余各组P-gp表达水平明显增强(P﹤0.01);与B组相比,C组表达水平增加(P﹤0.01),D,E,F组表达水平降低,以F组最明显(P﹤0.01)。结论:VPA明显增强难治性癫痫模型大鼠脑内海马、颞叶皮质P-gp蛋白的表达,柴胡疏肝汤低、中、高剂量均可以降低海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达以及脑电图的痫性放电,以高剂量组明显。     

降脂颗粒防治脂肪肝的实验研究

目的　观察降脂颗粒对大鼠脂肪肝的预防和治疗作用。方法　标准SD大鼠给予高脂饲料、乙醇灌胃、CCl4菜籽油溶液注射 ,联合建立复合脂肪肝动物模型[1] 。随机分为 10组 ,A1,A2 为空白对照组 ,B1,B2 为模型对照组 ,C ,D为降脂颗粒大、小剂量预防组 ,E为东宝肝泰预防组 ,F、G为降脂颗粒大、小剂量治疗组 ,H为东宝肝泰治疗组 ,各组给予相应药物灌胃处理 ,A1,B1,C ,D ,E组于实验第 16天 ,A2 ,B2 ,F ,G ,H组于实验第 4 6天处死动物 ,取血及肝组织做肝功能、血脂、肝脏内脂质及病理组织学检查。结果　①C ,D组与B1组比较 ,F ,G组与B2 组比较 ,各项肝功、血脂指标及病理检查结果均有改善 (P均 <0 .0 1)。②C ,D组与E组比较 ,F ,G组与H组比较 ,各项肝功、血脂指标及病理检查结果均无显著性差异 (P均 >0 .0 5 )。结论　降脂颗粒可预防和治疗脂肪肝 ,尤以高剂量预防及治疗组作用显著。     

五苓散对阿霉素型肾病综合征大鼠治疗作用的实验研究

目的 观察五苓散提取液对大鼠肾病综合征的治疗作用。方法 SD大鼠尾静脉注射阿霉素(ADR)建立肾病综合征模型。观察连续给药4周对大鼠24h尿蛋白、血清白蛋白、血清胆固醇、甘油三酯及肾组织病理学等方面的影响。结果 24h尿蛋白：高、中剂量组及强的松、中西药交替给药组与模型组相比均有差异。血清白蛋白：高、中剂量组及强的松、中西药交替给药组与模型组相比较有显著性差异，强的松、中西药交替给药组升高白蛋白作用优于高、中剂量组。血清胆固醇：高、中剂量组及强的松、中西药交替给药组与模型组比较均有显著性差异，而高剂量组、中西药交替给药组与空白组比较未见差异。甘油三酯：强的松组与模型组比较无差异，而五苓散高、中、低剂量组及中西药交替给药组均与强的松组比较有显著性差异。结论 五苓散提取液具有消除水肿、降低尿蛋白、降血脂、提高血清白蛋白以及减轻肾脏损害的作用，与强的松联合用药有协同作用。     

针刺预处理脑组织提取液抗大鼠脑缺血再灌注损伤作用探讨

目的:证实针刺预处理脑组织提取液的抗脑缺血再灌注损伤作用,为针刺效应物质的探讨提供初步的实验依据.方法:先以"肾俞""百会"穴针刺预处理大鼠脑组织提取液行大鼠腹腔注射,再采用颈动脉引流法脑缺血再灌注造模,脑组织石蜡包埋切片,HE染色,观察脑片缺血性病理变化,进行顶皮质Ⅰ区Ⅴ层幸存神经元计数.结果:在3个时间段F组幸存神经元密度均显著高于C、D、E 3组(P<0.05).结论:针刺预处理脑组织提取液具有明显的抗脑缺血再灌注损伤作用.     

克癃胶囊对大鼠前列腺增生及组织Ki-67、碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子mRNA表达的影响

 目的 探讨克癃胶囊对肾虚血瘀证大鼠前列腺增生的影响及其对前列腺增生相关蛋白、相关细胞因子的影响。方法 建立前列腺增生肾虚血瘀证大鼠模型,观察空白对照组(A组),模型组(B组),非那雄胺组(C组),低、中、高剂量克癃给药组(D、E、F组)大鼠前列腺和前列腺相关因子的变化。结果 ①C~F组大鼠前列腺湿重、前列腺指数均显著低于B组(P<0.05)。②与B组比较,C、E、F组前列腺组织中Ki-67的积分光密度明显降低（P<0.01）,D组无显著性差异(P>0.05)。③与B组比较,C、D、E、F组前列腺组织中碱性成纤维细胞生长因子的积分光密度明显降低（P<0.01）;但D、E、F组前列腺组织中碱性成纤维细胞生长因子的积分光密度均高于C组(P<0.05)。④与B组比较,C、D、E、F组前列腺组织中血管内皮生长因子mRNA的表达降低(P<0.05);但D、E、F组前列腺组织中血管内皮生长因子mRNA的表达均较C组为高(P<0.05)。结论 克癃胶囊可显著抑制大鼠前列腺增生,且呈剂量依赖性。可能与抑制前列腺增生相关蛋白及相关细胞因子的增高及表达密切相关,从而起到抑制前列腺增生的作用。     

康颈颗粒对大鼠颈椎间盘细胞凋亡的影响

目的研究补肾活血舒筋方康颈颗粒对大鼠颈椎间盘细胞凋亡的影响。方法125只SD大鼠随机分成芬必得组(B组)、康颈颗粒组(C组)、颈复康组(D组)、模型组(E组)、正常假手术组(F组),然后进行大鼠颈椎病造模。于术后3个月造模成功后给药,术后6个月分别处死各组大鼠,对颈椎间盘进行细胞凋亡检测。结果B、C、D、E组凋亡率与F组比较有显著性差异(P均<0.01),B组、C组与E组比较有显著性差异(P均<0.01)。结论康颈颗粒可有效抑制椎间盘细胞凋亡。     

淫羊藿对哮喘大鼠肺组织RANTES及MCP-3表达的影响

目的 观察补肾中药淫羊藿对哮喘大鼠肺组织调节激活正常T细胞表达和分泌因子(regulated on activation, normal T cell expressed and secreted,RANTES)、单核细胞趋化蛋白3（monocyte chemotactic protein-3,MCP-3）表达的影响,进一步探讨淫羊藿防治哮喘的作用机制。 方法 将挪威大鼠随机分成6组：正常组、模型组、阳性药组（给地塞米松）、淫羊藿低、中、高剂量组（分别给淫羊藿0.125、0.5、2.0 g/mL)。用Real-time PCR法检测肺组织RANTES、MCP-3 mRNA的表达,ELISA法检测各组血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）4、5的含量。结果 与模型组比较,各用药组大鼠肺组织RANTES、MCP-3 mRNA的表达下调（P＜0.05或P＜0.01）,TNF-α水平均明显降低（P=0.000）,阳性药组和淫羊藿中、高剂量组IL-4水平均明显下降（P=0.007,P=0.047,P=0.033）, IL-5水平仅见阳性药组和淫羊藿高剂量组显著下降（P=0.003,P=0.005）。结论 哮喘发作期给予淫羊藿可减轻哮喘气道炎症,并且其与抑制肺组织RANTES、MCP-3表达有关。