老年肝郁失眠证候大鼠模型的建立和评价

目的:建立并评价复合型老年肝郁失眠证候大鼠模型。方法:Wistar大鼠随机分为环境对照组,单因素模型组(睡眠剥夺组),复合型模型组,复合型模型+舒郁安神方35 g.kg-1.d-1治疗组。采用D-半乳糖腹腔注射60 mg.kg-1.d-1大鼠6周致亚急性衰老模型,然后采用夹尾刺激法致肝郁,每次刺激30 min,1日2次,持续1周,最后放入自制睡眠剥夺箱中进行快速眼动睡眠(REMS)剥夺48 h,制作老年肝郁失眠证候大鼠复合型模型。观测大鼠体征、脑部自由基水平及血浆6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量。结果:与环境对照组、单因素模型组、舒郁安神方组比较,老年肝郁失眠证候复合型模型组大鼠丙二醛(MDA)、TXB2含量均显著升高(P<0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)活性、6-keto-PGF1a含量及6-keto-PGF1a/TXB2均显著降低(P<0.01)。结论:老年肝郁失眠证候大鼠模型具有临床证候病理特征,是可行、可靠的复合型动物模型。     

酸枣仁汤对老年血亏阴虚失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸、γ-氨基丁酸及γ-氨基丁酸A受体表达的影响

目的:观察酸枣仁汤对老年血亏阴虚失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)含量及GABAA受体α1和γ2亚单位表达的影响。方法:用D-半乳糖致亚急性衰老、环磷酰胺及氢化可的松致阴血亏虚,及自制改良多平台法剥夺睡眠48 h,制作复合型老年血亏阴虚失眠证候大鼠模型。采用高效液相色谱法检测模型大鼠大脑皮质及下丘脑氨基酸类神经递质Glu及GABA含量变化,采用免疫组化染色和mRNA半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测大脑皮质及海马部位γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)α1和γ2亚单位的表达变化,并考察酸枣仁汤对这些指标的影响。结果:与环境对照组比较,证候模型组大鼠大脑皮质及下丘脑Glu及GABA含量显著升高(P0.01,P0.05),且Glu/GABA比值增高,大脑皮质及海马部位的GABAARα1和γ2亚单位免疫化学累积光密度明显较高(P0.01),皮质部位GABAARα1和γ2 mRNA的表达均显著上调(P0.01),经酸枣仁汤干预后各指标明显下降(P0.01,P0.05),并趋于正常范围。结论:皮质及海马部位GABAARα1和γ2亚单位表达的明显上调是老年失眠证候的可能病理机制之一,酸枣仁汤的治疗机制可能与其减少脑内氨基酸毒性作用,下调大脑皮质及海马部位GABAARα1和γ2亚单位的表达有关。     

肝病患者不同血瘀证TXB2/6-keto-PGF1α的临床实验研究

目的:从分子水平探讨肝病患者不同血瘀证及其形成的病理机制。方法:采用前瞻性研究的方法进行肝病瘀血舌患者血液血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的测定。结果:肝病各组的TXB2显著增高(P<0.01),6-keto-PGF1α显著降低(P<0.05,P<0.01)。TXB2/6-keto-PGF1α显著增高(P<0.01);不同肝病血瘀证组与正常组的TXB2、6-keto-PGF1α、TXB2/6-keto-PGF1α的比较有显著性差异(P<0.01),湿热瘀滞、肝瘀痰阻、气滞血瘀的TXB2、6-keto-PGF1α、TXB2/6-keto-PGF1α与气虚血瘀组比较有显著差异(P<0.01)。结论:肝病及不同血瘀证组的TXB2与TXB2/6-keto-PGF1α显著增高,6-keto-PGF1α显著降低,说明血浆TXA2-PGI2平衡失调与血瘀证发生发展密切相关,通过测定TXB2、6-keto-PGF1α的含量可以反映肝病瘀血舌象及其不同血瘀证的发生机制。     

盆腔消症灌肠液对模型动物血浆血栓素和6-酮前列腺素的影响

目的:盆腔消症灌肠液对模型动物血浆TXB2和6-keto-PGF1α的影响。方法:采用苯酚胶浆制作致炎模型,分别设空白对照组、模型对照组、阳性药物对照组(相当于生药0.405g/kg体重)、盆腔消症灌肠液高剂量组(相当于生药1.171g/kg体重)、盆腔消症灌肠液低剂量组(相当于生药0.585g/kg体重),造模2周后,连续灌肠给药14d,心脏取血,采用放射免疫法测定血浆中TXB2、6-keto-PGF1α的含量。结果:模型组大鼠血浆TXB2含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值显著高于空白组(P<0.01)、6-keto-PGF1α含量显著低于空白组(P<0.01);盆腔消症灌肠液高剂量组大鼠血浆TXB2含量及TXB/6-keto-PGF1α比值显著低于模型组(P<0.01)、6-keto-PGF1α含量显著高于模型组(P<0.01)。结论:盆腔消症灌肠液可以通过降低模型大鼠血浆TXB2含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值、提高模型大鼠6-keto-PGF1α含量,显著改善模型大鼠的血瘀状态,对慢性盆腔炎的治疗有一定意义     

逍遥散对肝郁脾虚证大鼠TXB_2、6-Keto-PGF_1α影响的观察

目的:探查逍遥散对肝郁脾虚证大鼠TXB2、6-Keto-PGF1α水平的影响。方法:建立肝郁脾虚证大鼠模型,用逍遥散加以治疗,测定其治疗前后血浆TXB2、6-Keto-PGF1α的水平及TXB2/6-Keto-PGF1α比值。结果:灌胃治疗8d后,肝郁脾虚证模型逍遥散治疗组与肝郁脾虚证模型自然恢复组相比,TXB2及TXB2/6-Keto-PGF1α比值明显降低(P<0.01)。结论:逍遥散可调节肝郁脾虚证TSA2和PGI2之间的平衡,从而有效改善肝郁脾虚证大鼠血流不畅的状况。     

老年阴虚失眠动物模型的建立与评价

目的：研制中医阴虚血少证失眠大鼠模型。方法：选用健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、天王补心丹组、艾司唑仑组,在D-半乳糖制作亚急性衰老模型基础上,采用咖啡因腹腔注射叠加多平台水环境持续睡眠剥夺法制作失眠大鼠模型,以天王补心丹为模型验证药物,观察动物睡眠情况、活动量、精神状况、双目、口唇、爪甲、皮毛等一般情况及呼吸频率、心率、血压、力竭性游泳时间、摄食量、体重、耳温、血液血红蛋白总数、血红蛋白浓度等。结果：模型组动物睡眠时间显著减少,精神萎靡,目光呆滞,行动迟缓,呼吸频率加快,心率加快,血压升高,力竭性游泳时间缩短,摄食量减少、体重减轻,耳温升高,运用治疗天王补心丹可有效缓解上述症状。结论：本实验方法制作的失眠大鼠模型,在证候表现方面与阴虚血少证有很强的相关性,其发病过程及主要症状和体征也基本符合临床失眠特点,是一种操作简单、方便易行的失眠模型制作方法。     

肝郁脾虚证大鼠TXB2、6-Keto-PGF1α含量的观察研究

目的:探查肝郁脾虚证大鼠血液运行的状况.方法:采用塑料夹夹尾+隔日禁食+禁食时在鼠笼上方悬挂食物的方法建立肝郁脾虚证大鼠模型,测定其血浆TXB2、6-Keto-PGF1α的含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值.结果:肝郁脾虚证大鼠模型与正常对照组相比,TXB2及TXB2/6-Keto-PGF1α比值明显升高(P<0.01),6-Keto-PGF1α则无明显变化(P>0.05).结论:肝郁脾虚证大鼠出现了TXA2和PGI2之间平衡的失调,造成血液高黏和易形成血栓,表明肝郁脾虚证大鼠存在着血流不畅或血瘀的状态.     

D-半乳糖联合对氯苯丙氨酸致肾不藏志不寐大鼠下丘脑神经递质和凋亡基因的实验研究

目的:观察D-半乳糖联合对氯苯丙氨酸(PCPA)致肾不藏志不寐大鼠下丘脑神经递质和凋亡基因的变化。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、老年组、失眠组、肾不藏志不寐组(模型组),每组10只。老年组大鼠给予D-半乳糖皮下注射,失眠组给予对PCPA腹腔注射,肾不藏志不寐组给予D-半乳糖皮下注射联合PCPA腹腔注射建立模型,对照组给予等剂量生理盐水注射。造模结束后测量各组大鼠体质量、采用水迷宫观察大鼠定位航行探索运动轨迹、采用RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑GABAARα1、GABAARβ2、GABAARγ2、Bax、Bcl-2 mRNA的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组体质量显著降低(P<0.01);定位航行探索运动轨迹显著延长;模型组下丘脑GABAARα1、GABAARβ2、GABAARγ2、Bcl-2mRNA相对表达量均显著性降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.05);下丘脑Bax mRNA相对表达量显著性增加(P<0.05)。结论:D-半乳糖联合PCPA致肾不藏志不寐大鼠下丘脑睡眠相关的神经递质和凋亡基因表达发生改变。     

泻肝补肾汤对前列腺炎性不育大鼠血浆血栓素B2 6-酮-前列腺素F1a含量的影响

在用大肠杆菌前列腺注射法建立细菌性前列腺炎性不育大鼠模型的基础上,观察了泻肝补肾汤对其血浆血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α含量的影响。实验结果显示,模型组大鼠血浆血栓素B2含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值显著高于正常组（P〈0.01）、6-酮-前列腺素F1α含量显著低于正常组（P〈0.01）;泻肝补肾汤组大鼠血浆血栓素B2含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值显著低于模型组（P〈0.01）、6-酮-前列腺素F1α含量显著高于模型组（P〈0.01）。实验结果表明,泻肝补肾汤可以通过降低模型大鼠血浆血栓素B2含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值、提高模型大鼠血浆6-酮-前列腺素F1α含量,以显著提高其生育能力。     

电针对类痛经模型大鼠血浆血栓素B_2、六酮前列腺素F_(1α)的影响

目的:观察电针即刻介入对类痛经模型大鼠的镇痛效应及血浆血栓素B2(TXB2)、六酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影响,进一步探讨针刺缓解胞宫疼痛的作用机制,并初步探讨经穴效应的特异性。方法:动情间期雌性SD大鼠60只随机分为盐水组、模型组、三阴交组、血海组、悬钟组、非穴组,每组10只。除盐水组外,其余各组大鼠均连续10 d给予皮下注射苯甲酸雌二醇注射液,末次给药1 h后,腹腔注射缩宫素0.2 mL/只,制备类痛经大鼠模型。于第10天各电针组给予即刻电针20 min。记录大鼠20 min扭体潜伏期和扭体评分;采用放射免疫法测定大鼠血浆TXB2、6-keto-PGF1α的含量。结果:与盐水组相比,模型组扭体潜伏期明显缩短(P<0.01),扭体评分明显增高(P<0.01),血浆TXB2的含量、TXB2/6-keto-PGF1α比值均明显升高(P<0.01);与模型组相比,三阴交组扭体潜伏期明显延长(P<0.05),各电针组扭体评分均明显减少(P<0.01),血浆TXB2的含量、TXB2/6-keto-PGF1α比值均明显降低(P<0.05,P<0.01),三阴交组血浆6-keto-PGF1α的含量明显升高(P<0.05);各电针组之间比较,扭体潜伏期,扭体评分,血浆TXB2、6-keto-PGF1α的含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针即刻介入可通过调节血浆TXB2、6-keto-PGF1α的失衡,改善血管内环境,缓解血管的痉挛状态,从而缓解胞宫疼痛,且经穴之间具有相对特异性。     

复方"小续命汤"有效成分组对试验性衰老大鼠的作用

目的:建立大鼠衰老模型,观察中药复方“小续命汤”有效成分组(GEC)对衰老大鼠的影响。方法:应用D-半乳糖加鱼藤酮建立衰老模型;采用Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力;并测定大鼠脑中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AchE)及胆碱乙酰转移酶(ChAGT)活性。结果:D-半乳糖可引起拟衰老效应,学习记忆能力下降,脑内GSH含量减少、SOD活性降低、MDA含量升高,但对AchE、ChAT无影响。GEC可改善D-半乳糖诱导的衰老大鼠的学习记忆能力下降及某些生化功能改变。结论:提示中药复方“小续命汤”GEC可改善D-半乳糖引起的衰老效应,其作用机制可能与抗氧化有关。     

黄龙丸对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的影响

目的：观察黄龙丸对D-半乳糖所致小鼠亚急性衰老模型的自主活动、记忆力及抗疲劳和对SOD活性的影响。方法：ICR小鼠40只,雌雄各半,按体重随机分为4组,即空白对照组、模型组、黄龙丸、抗衰复春片组。黄龙丸组以2.5g/kg,抗衰复春片组0.7g/kg、均0.2mL/10g灌胃给药,模型组与对照组灌胃同体积的蒸馏水,每日1次,连续灌胃49天。给药的同时模型组和给药组小鼠每天颈背部皮下注射5%D-半乳糖,空白对照组皮下注射生理盐水,0.5mL只/,连续注射49天。黄龙丸对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠自主活动、跳台学习记忆能力及学习记忆遗忘、游泳时间和血清SOD活力的影响。结果：黄龙丸可使D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的站立次数明显增多,与模型组比较有显著性差异P〈0.05;明显增强学习记忆和延长学习记忆遗忘时间,可使跳台实验潜伏期延长,错误次数减少,与模型组比较P〈0.05;明显延长衰老小鼠游泳时间,与模型组比较P〈0.05;升高血清SOD活力,与模型组比较P〈0.05。结论：黄龙丸能够改善D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的多项体征,具有一定的抗衰老作用。     

二至丸对D-半乳糖致衰老模型大鼠CAT、GSH-PX影响的实验研究

目的:研究二至丸对D-半乳糖致衰老大鼠CAT、GSH-PX含量的影响,以探讨其延缓衰老的机理。方法:D-半乳糖复制大鼠衰老模型,观察其CAT、GSH-PX含量及二至丸对其影响。结果:二至丸各治疗组均对CAT、GSH-PX含量有一定影响,表现为升高二者的含量。结论:二至丸延缓衰老作用的发挥可能与其升高CAT和GSH-PX含量相关。     

补肾方对亚急性衰老大鼠模型总抗氧化力影响的实验研究

[目的]探讨亚急性衰老大鼠模型中血浆总抗氧化力(TAC)的建立及补肾方对TAC的作用.[方法]以Wister大鼠为实验对象,以血浆TAC为观察指标.[结果]亚急性衰老大鼠模型的TAC下降,补肾方能提高血浆TAC.[结论]TAC为极重要的抗衰老指标,补肾方具有抗衰老作用     

龟鹿二仙胶颗粒对D-半乳糖所致衰老大鼠抗氧化能力的影响

目的:研究龟鹿二仙颗粒对D-半乳糖所致衰老大鼠抗氧化能力的影响。方法:W istar雄性大鼠随机分组,正常对照组皮下注射生理盐水,模型对照组和各给药防治组大鼠均每日皮下注射D-半乳糖1.2g/kg,同时各防治组灌服龟鹿二仙颗粒或维生素E,连续造模给药16周,16周末各组大鼠腹主动脉采血分离血清,并取心、肝、肾组织冰浴匀浆,检测血清、组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)的含量,以评价龟鹿二仙胶颗粒对D-半乳糖所致衰老大鼠抗氧化功能影响。结果:与正常对照组相比,模型对照组血清、心、肝、肾匀浆SOD、GSH-Px活力显著降低,MDA含量显著增高。与模型对照组相比,各给药防治组SOD、GSH-Px活力显著增高,MDA含量显著降低。结论:龟鹿二仙胶颗粒对D-半乳糖所致衰老大鼠具有显著提高抗氧化能力的作用。     

脑忆清胶囊对痴呆小鼠自由基代谢的影响

目的：研究脑忆清胶囊对痴呆小鼠自由基代谢的影响。方法：小鼠每日颈背皮下注射5％D－半乳糖0．5ml,40d可造成拟痴呆模型,在注射D－半乳糖的同时,分别灌服脑忆清胶囊混悬液7．0,3．5及1．75g/kg3种剂量,并与脑复康作了比较观察。结果：脑忆清胶囊可明显提高拟痴呆小鼠血液中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)的活性和脑组织中SOD活性,显著降低拟痴呆小鼠血清、脑中过氧化脂质（LPO）的浓度和脑中单胺氧化酶B（MAO－B）活性,抑制拟痴呆小鼠脑、心、肝、肾组织中脂褐素（LF）的形成。结论：脑忆清胶囊有较好的清除自由基、延缓细胞衰老和改善大脑功能的作用。     

实验性衰老糖尿病大鼠模型研究

目的:进行人工诱导衰老糖尿病大鼠模型的初筛。方法:选用Wistar雌性大鼠,采用腹腔注射D-半乳糖后,给予不同周期高脂高糖饲料喂养,再配以不同剂量的链脲佐菌素(STZ)素腹腔注射,制备模型大鼠。检测空腹血糖(FBG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),并取胰腺组织行HE染色常规病理切片,以初筛实验性衰老糖尿病大鼠模型。结果:①各组成模率之间差异无显著性;②衰老糖尿病各组大鼠FBG升高,SOD下降,MDA升高;③胰腺病理切片显示:衰老糖尿病各组胰岛细胞团为正常对照组的22.93%-44.51%(P0.01),且胰岛边界不清,岛内细胞排列不规则,细胞空泡化,细胞数目明显减少。结论:①不同造模法均可达到较高成模率。②采用腹腔注射D-半乳糖42d+高脂高糖6周+腹腔注射STZ(25mg/体质量.体表面积,2次)法所构建的实验性衰老糖尿病模型较为理想。     

中药制剂对衰老大鼠晶状体的抗氧化损伤作用

目的探讨中药制剂(制何首乌、北沙参、紫丹参)防止晶状体衰老的作用机制。方法30只2个月龄雄性大鼠,其中10只为正常对照组,20只用D-半乳糖每日皮下注射制成衰老模型,其中10只为衰老模型组,另10只用制何首乌、北沙参、紫丹参3味药制成的口服液灌胃,40日后应用荧光光谱法检测各组大鼠晶状体组织中水溶性荧光物质(WSFS)的含量。结果WSFS的含量:正常对照组(321.17±8.08)单位,衰老模型组(501.11±6.35)单位,中药治疗组(397.65±8.27)单位。衰老模型组与中药治疗组、正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),而中药治疗组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论制何首乌、北沙参、紫丹参3味药制剂对衰老晶状体具有抗氧化损伤的作用。     

不同方式诱导的大鼠骨质疏松模型的骨密度及骨代谢指标的差异

目的:探讨维甲酸、D-半乳糖、苯妥英钠和糖皮质激素4种方式诱导大鼠骨质增生模型的骨密度和各项骨代谢生化指标的变化。方法:将50只大鼠随机分为对照组、维甲酸诱导模型组、D-半乳糖诱导模型组、苯妥英钠模型组和糖皮质激素模型组,每组10只大鼠。采用相应的方式诱导大鼠骨质增生,持续给药2个月后观察1个月。检测5组大鼠的骨密度、血钙、血磷、骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、甲状旁腺激素(PTH)、胰岛素生长因子-1(IGF-1)等。结果:股骨骨密度、胫骨骨密度及BGP、IGF-1维甲酸诱导模型组、D-半乳糖诱导模型组、苯妥英钠模型组、糖皮质激素模型组均低于对照组(P0.05)。血钙及血磷D-半乳糖诱导模型组、苯妥英钠模型组、糖皮质激素模型组低于对照组(P0.05);维甲酸诱导模型组高于对照组(P0.05)。ALP甲酸诱导模型组高于对照组(P0.05)、BGP、IGF-1维甲酸诱导模型组、D-半乳糖诱导模型组、苯妥英钠模型组、糖皮质激素模型组低于对照组(P0.05)。PTH、TRAP维甲酸诱导模型组、D-半乳糖诱导模型组、苯妥英钠模型组、糖皮质激素模型组均高于对照组(P0.05)。结论:维甲酸、D-半乳糖、苯妥英钠和糖皮质激素4种方式诱导的大鼠骨质疏松模型中,骨密度、BGP、IGF-1、PTH和TRAP表现出了相同的变化趋势,而血钙、血磷、ALP的变化趋势则因诱导方式不同而不同。