谷氨酰胺诱导大鼠热休克蛋白70mRNA的表达

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是感染或非感染(如创伤、休克)等致病因素作用于机体后,诱发机体细胞合成的一组高度保守的蛋白质,谷氨酰胺(Glu-tam ine,Gln)作为体液中最丰富的氨基酸之一,对机体多个脏器有保护作用。一些研究表明,Gln在体外可促进果蝇Kc细胞HSP的表达[1];Gln诱导的HSP表达对肠道上皮细胞有保护[2]。但Gln是否能在动物的各个脏器引起HSP的表达及时间和量效关系如何,尚未见明确报道。本研究对此进行了实验观察,拟为临床应用提供理论依据。1材料和方法1.1主要试剂力太(批号J20020081,Fresennius Kabi公司,德国),…     

谷氨酰胺诱导热休克蛋白70表达对高氧肺损伤的干预效果

目的观察谷氨酰胺诱导大鼠肺组织表达热休克蛋白70(HSP70)的作用及HSP70对高氧肺损伤的保护作用。方法健康清洁级雄性Wistar大鼠18只(体重252~286g),随机均分为谷氨酰胺组(G组)和对照组(C组):G组以0.75g/kg谷氨酰胺行腹腔注射,每天注射1次,连续3d;C组大鼠每天腹腔注射同等容积的生理盐水。于注射后第4天每组各取3只大鼠的肺组织,用免疫印迹法(Western blotting)检测HSP70表达,其余12只大鼠全部放入高氧环境(氧浓度95%)中继续喂养,观察在高氧环境下第6天两组大鼠肺组织形态学改变。结果注射谷氨酰胺后第4天,G组大鼠肺组织HSP70蛋白表达水平明显升高,其灰度值为20.34±2.26;C组HSP70蛋白表达水平较低,其灰度值为1.82±0.67,G组明显高于C组(P<0.05)。G组第6天肺部炎症表现为肺泡内极少量红细胞渗出;而C组病理改变为肺泡大小不等,肺泡腔变大,肺泡壁变薄,有肺大泡形成,肺泡内有出血和炎症细胞浸润。结论大鼠腹腔注射谷氨酰胺可明显增加肺组织HSP70表达,HSP70可减轻高氧肺损伤时肺组织炎性改变。     

热休克蛋白27、70与恶性肿瘤

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)广泛存在于生物体内,是一类在进化上高度保守的细胞应激蛋白.其中HSP27和HSP70在抗凋亡过程中发挥重要的作用,在多种肿瘤细胞中异常高表达,尤其是腺癌起源的肿瘤.HSP27和HSP70在恶性肿瘤的发生、发展中的作用及其机制是近年来研究的热点,有望对肿瘤的治疗提供新的平台.     

创伤性休克患者血浆热休克蛋白70表达及其意义

目的　　检测创　伤性休克患者外周血中热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）的表达水平并探讨其与创伤性休克发生发展　的关系。方法　　采用Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法分别测定３６例创伤性休克患者　（观察组）及３０例正常人（对照组）血浆ＨＳＰ７０表达水平。结果　　ＨＳ　Ｐ７０在创伤性休克组为（４　３０１．３±１　１５５．３），与正常对照组（６　０９２．３±１　２３３．５）比较，差异　有高度显著性（Ｐ＜０．０１）；２２例休克得到控制者ＨＳＰ７０为（６　１０２．２±１　２９１．６）较入院时　（４　２７３．６±１　０９９．３）明显升高，差异有极显著意义（Ｐ＜０．０１）。结论　　创伤性休克患者血浆ＨＳＰ７０表达水平明显下降，可能是创伤后休克发生发展的一个　重要因素，而且与预后有密切关系。     

慢性前列腺炎患者精浆中热休克蛋白的表达及临床意义

目的　探讨慢性前列腺炎患者精浆中热休克蛋白 70 (HSP 70 )的表达及临床意义。　方法　采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)对 10例慢性细菌性前列腺炎 (Ⅱ型 )、10例炎症型慢性非细菌性前列腺炎即炎症型慢性骨盆疼痛综合征 (ⅢA 型 )、10例非炎症型慢性非细菌性前列腺炎即非炎症型慢性骨盆疼痛综合征 (ⅢB 型 )患者及 6例健康志愿者精浆中HSP 70含量进行测定 ,并与慢性前列腺炎症状评分 (修订版 )进行相关性研究。　结果　Ⅱ型、ⅢA 型、ⅢB 型慢性前列腺炎患者及正常对照组精浆HSP 70含量分别为 (10 .74± 4 .0 2 )ng/ml、(2 .5 8± 0 .96 )ng/ml、(2 .78± 1.12 )ng/ml及 (6 .5 7±2 .72 )ng/ml。Ⅱ型患者精浆HSP 70含量显著高于正常对照组 ,P <0 .0 1,差异有显著性意义。ⅢA 型与ⅢB 型患者HSP 70含量均显著低于正常对照组 ,P <0 .0 1,差异有显著性意义。而ⅢA 型与ⅢB 型患者HSP 70含量间差异无显著性意义 ,P >0 .0 5。各组精浆HSP 70含量与慢性前列腺炎症状评分间均呈显著的负相关关系 (P <0 .0 1)。　结论　测定精浆中HSP 70的表达对各种类型慢性前列腺炎诊断有一定的临床应用价值 ,并可作为评价慢性前列腺炎病情程度的分子生物学指标。HSP 70在慢性前列腺炎的治疗方面也具有广阔的应用前景。     

O-ClcNAc修饰在谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌组织HSP70表达中的作用

目的 探讨O位-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)修饰在谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌组织热休克蛋白70(HSP70)表达中的作用.方法 健康雄性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8),正常对照组(C组)仅静脉输注乳酸钠林格氏液;LPS组、G+LPS组和A+G+LPS组均静脉注射LPS10 mg/kg,G+LPS组给予LPS前1 h静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg,A+G+LPS组给予LPS前1h依次静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg和O-位-N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶抑制剂四氧嘧啶50 mg/kg.注射LPS后6 h处死大鼠,取心肌组织,测定O-GlcNAc和HSP70的表达水平.结果 与C比较,其他各组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平均上调(P＜0.05);与LPS组比较,G+LPS组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平上调(P＜0.05);与G+LPS组比较,A+G+LPS组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平下调(P＜0.05).结论 O-GlcNAc修饰参与了谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌HSP70表达上调.     

骨肉瘤热疗前后热休克蛋白70表达的变化

目的 为明确骨肉瘤加热前后热休克蛋白（ｈｅａｔ－ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＳＰ）７０表达的异同，探讨骨肉瘤热疗与机体免疫功能变化的关系。方法 １９９７年４月－１９９９年７６月收集病理诊断为骨肉瘤的肿瘤标本２５例，患者均采用微波原位热疗进行保肢手术，术中将肿瘤加热５０℃持续１５ｍｉｎ，分别在微波热疗前后进行取材。     

丙泊酚对缺氧原代胎鼠大脑神经元热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨丙泊酚的脑保护机制.方法 培养12 d的胎鼠大脑神经元,随机分为丙泊酚组(n=12)、缺氧组(n=6)和对照组(n=6).丙泊酚组于缺氧前1 h换入含有14 μmol/L和56 μmol/L丙泊酚的培养液,随后缺氧30 min.于缺氧后1、3、6、8、24、48 h分别用原位杂交法和免疫组化法观察三组热休克蛋白70(HSP70)mRNA、热休克同源蛋白70(HSC70)mRNA及HSP70的表达.结果 缺氧30 min可诱导神经元HSPT0 mRNA、HSC70 mRNA和HSPT0表达,表达高峰分别为24、24和48h.14 μmol/L和56 μmol/L丙泊酚可诱导缺氧鼠脑神经元HSP70 mRNA和HSC70 mRNA表达高峰提前至8和6 h;56 μmol/L丙泊酚可使缺氧鼠脑神经元HSP70表达高峰提前至24 h.结论 丙泊酚可从转录和翻译两个水平促进缺氧鼠脑神经元HSP70的表达,产生延迟神经保护作用.     

维持性血液透析对不同年龄组尿毒症患者热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨血液透析对不同年龄段尿毒症患者血清热休克蛋白70的影响.方法 对2010年4月在我院进行维持性血液透析的尿毒症患者,根据年龄将92例患者分为3组(青年组、中年组、老年组).在透析前、后分别采用酶联免疫复合物法测定血清热休克蛋白70水平.结果 青年组透析前、后热休克蛋白70水平比较差异有统计学意义(P＜0.05...     

缺血缺氧性脑损伤中热休克蛋白70的表达及其意义

缺血缺氧可引起多种生化改变，最终结果是导致蛋白质的变性。在细胞内变性和异常蛋白质增加的同时，热休克蛋白70（HSP70）的表达也相应增加。HSP70的特殊改变在缺血缺氧性脑损伤的病理生理过程中发挥着重要作用。     

丙氨酰-谷氨酰胺双肽对肿瘤术后患者热休克蛋白70及肿瘤坏死因子的影响

目的 观察丙氨酰-谷氨酰胺双肽对肿瘤手术患者热休克蛋白、炎症反应及免疫状态的影响。方法 接受胸、腹部肿瘤切除手术患者116例进入研究，采用双盲设计，研究组58例接受丙氨酰-谷氨酰胺双肽补充的全胃肠外营养，对照组58例接受一般全胃肠外营养。7d后观察热休克蛋白（HSP）-70、肿瘤坏死因子（TNF）-α及CIM／CD8变化。结果 两组患者研究期间均未出现死亡及过敏等副反应，丙氨酰-谷氨酰胺组7d后TNF—α明显降低，CIM／CD8比率明显增多，HSP-70表达明显增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；而对照组7d前后无明显变化。结论 肿瘤手术患者术后使用丙氨酰-谷氨酰胺能增加HSP-70表达，减轻患者炎症反应，并改善患者免疫功能状态，对患者恢复有益。     

抑制热休克蛋白70表达对Eca-109细胞生长的影响

目的：观察热休克蛋白70（HSP 70）反义寡核苷酸阻断食管癌Eca-109细胞的HSP 70表达及对细胞增殖和凋亡的影响。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot技术检测HSP 70反义寡核苷酸(10μmol/L)转染Eca-109细胞后, 其HSP 70基因mRNA和蛋白表达的变化。观察HSP 70反义寡核苷酸转染对肿瘤细胞的生长抑制效应及转染后细胞凋亡率和细胞周期分布的改变。结果：HSP 70反义寡核苷酸可阻断Eca-109细胞HSP 70 mRNA和蛋白的表达;转染后48h和72h，生长抑制率分别为25.5%和35.4%;HSP 70反义寡核苷酸组细胞凋亡率明显高于HSP 70正义寡核苷酸组和未转染组（P<0.05）。结论： HSP 70反义寡核苷酸能抑制Eca-109细胞的生长并诱导其发生凋亡。     

热休克蛋白70表达对未成熟心肌和心肌间质的保护作用

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌和心肌间质的保护作用.方法 健康新生长耳大白兔30只随机分为5组.对照组:腹腔注射生理盐水0.4 ml 24 h后取离体心脏,建立Langendorff离体心脏灌注模型;E4h、E12h、E24h、E48h组,腹腔注射去甲肾上腺素,4、12、24、48 h后分别取离体心脏,方法同对照组.测定心肌细胞中HSPT0含量、血流动力学指标、心肌含水量(MWC)、心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET)含量、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性及其Ca2+含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m,心肌超微结构.结果 E24h组与其他各组比较,HSPT0含量明显增高(P＜0.01),MWC(72.48±1.36)低于其他各组(P＜0.05),ATP含量(11.64±1.87)、SOD活性(235.83±12.30)、心肌线粒体Ca2+-AT-Pase活性(18.46±1.95)、[ATP]m(106.26±9.42),HP含量(6.45±1.53)优于其他各组(P＜0.01),MDA含量(1.17±0.12)、CK(57.38±4.75),LDH漏出率(37.28±3.26)、心肌细胞内Ca2+含量(2.54±0.34)、心肌线粒体Ca2+含量(38.37±3.61)、ET含量(76.84±10.37)低于其他各组(P＜0.01),心肌超微结构损伤较其他各组明显减轻.结论 腹腔注射去甲肾上腺素24 h后可诱导未成熟心肌HSP70高表达,一定量的HSP70表达可明显减轻未成熟心肌和心肌间质的缺血再灌注损伤.     

热休克蛋白70在大鼠急性打击损伤脊髓中的表达

目的观察急性打击损伤大鼠脊髓组织中热休克蛋白70（heat shock protein70，HSP 70）的表达。方法65只大鼠随机分为3组：正常对照组5只、手术对照组和脊髓损伤组各30只，采用改良Allen法建立脊髓损伤动物模型。手术对照组和脊髓损伤组分别于处置后的2h、6h、12h、24h、48h、72h这6个时间点各采集5只大鼠的脊髓。应用免疫组织化学染色方法观察不同时点各组脊髓中热休克蛋白的表达变化。结果在大鼠正常胸段脊髓中没有基础性HSP70的表达。打击造成急性脊髓损伤后2h，脊髓组织内出现HSP70的表达，损伤后24～48h脊髓组织中HSP70染色达到高峰，并维持至损伤后72h。结论在遭遇损伤性刺激后，脊髓组织在随后的2～72h内HSP70的表达明显增加；HSP70可能在阻止脊髓的继发性损伤方面发挥一定的作用。     

缺血缺氧性脑损伤中热休克蛋白70的表达及其意义

缺血缺氧可引起多种生化改变,最终结果是导致蛋白质的变性。在细胞内变性和异常蛋白质增加的同时,热休克蛋白70(HSP70)的表达也相应增加。HSP70的特殊改变在缺血缺氧性脑损伤的病理生理过程中发挥着重要作用。     

脑缺血再灌与热休克蛋白70（HSP70）基因的表达

能否通过加强脑组织内源性的抗损伤机制如热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）等基因的适当表达来提高治疗脑缺血再灌注损伤的效果，可能会是防治脑缺血损伤的突破点。本文就脑缺血再灌注后ＨＳＰ７０基因的表达，ＨＳＰ７０的作用及作用机理进行综述。     

热休克蛋白70 mRNA在膀胱癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的　探讨热休克蛋白 70 (HSP 70 )mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及与细胞凋亡的关系。　方法　应用原位杂交法对 6 0例膀胱癌组织中HSP 70mRNA进行检测 ,原位DNA末端标记法 (TUNEL)检测细胞凋亡情况。　结果　 6 0例标本中 ,HSP 70mRNA阳性表达率为 5 6 .7% (34/ 6 0 )。HSP 70mRNA表达随肿瘤分级增高而增加 (P <0 .0 5 ) ;G1,G2 和G3 各级间两两比较 ,HSP 70mRNA表达差异也有显著性意义 (P <0 .0 5 )。随着肿瘤分期增高 ,HSP 70mRNA表达随之增加 (P <0 .0 5 ) ;Ⅰ ,Ⅱ和Ⅲ各期间两两比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。肿瘤细胞凋亡指数 (AIs)随恶性程度的增高显著降低 (P <0 .0 5 ) ;HSP 70mRNA表达率和AIs呈负相关 (rs=- 0 .6 85 ,P <0 .0 5 )。　结论　HSP 70mRNA表达随膀胱癌恶性程度增加显著增高 ,细胞凋亡则显著降低 ,提示HSP 70表达能够抑制膀胱癌细胞的凋亡。     

热休克蛋白70在人前列腺癌细胞株PC-3m和LNCaP中的表达及其意义

目的　探讨前列腺癌雄激素不敏感性的发生。方法　用细胞免疫化学方法和流式细胞术定位、定量分析体外培养的人前列腺癌雄激素不敏感细胞株PC-3m和雄激素敏感细胞株LNCaP中主要热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果　2种不同生物学特性的细胞株表面及细胞内均有HSP70表达,但PC-3m细胞膜及细胞内的阳性染色程度高于LNCaP;流式细胞术测定的PC-3m细胞膜及细胞内的表达量（17.61±4.20,69.54±10.50）分别高于LNCaP（7.42±1.70,21.83±6.30）,两者比较差异均有显著性(P＜0.05)。结论　正常状态下雄激素不敏感前列腺癌细胞株过表达HSP70,可能与雄激素不敏感性的发生、发展有关。     

维持性血液透析患者炎症状态与血清热休克蛋白70的关系

目的探讨维持性血液透析（MHD）患者热休克蛋白70（HSP70）检测与炎症状态的关系。方法将MHD患者92例根据超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平分为2组：非炎症组（hs-CRP〈3mg／L）58例;炎症组（hs-CRP≥3mg／L）34例。检测2组患者血清前白蛋白（PA）、血白蛋白（Alb）、hs-CRP、血红蛋白（Hb）、HSP70、铁蛋白、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）等。结果尿毒症患者血清HSP70与hs-CRP、IL-6、TNF-α、铁蛋白等炎症指标无明显相关性;与Hb、Alb、总胆固醇等营养指标也无相关性。非炎症组透析前HSP70水平较低,透析后迅速升高（P=0．013）;而炎症组透析前后的HSP70水平差异无统计学意义（P=0．871）。结论炎症状态可能是导致炎症组HSP70升高的原因;但HSP70不能反映MHD患者是否存在慢性炎症状况,也不能反映其蛋白质营养状态。透析前、后HSP70水平检测可反映机体抗应激反应能力。     

shRNA介导的热休克蛋白70敲低对人结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)敲低对结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响。方法:构建两种干扰HSP70的shRNA(HSP70 shRNA-1和HSP70 shRNA-2)质粒表达载体,分别转染到结肠癌HT29细胞,并以空质粒转染(阴性对照)和未转染的HT29细胞(空白对照)为对照,用RT-PCR和Western blot方法检测各组HT29细胞HSP70基因和蛋白的表达;将HSP70shRNA-2转染、空质粒转染及未转染的HT29细胞分别接种至裸鼠皮下建立移3组植瘤模型,观察肿瘤生长情况,3周后剥离瘤块,用HE染色、免疫组化和TUNEL法分别检测移植瘤组织形态学、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及细胞凋亡情况。结果:RT-PCR和Western blot结果显示HSP70 shRNA-1和HSP70 shRNA-2均能明显抑制HT29细胞HSP70基因和蛋白的表达,且HSP70 shRNA-2的抑制作用更为明显,空质粒转染对HSP70的表达无明显影响;与空白对照组比较,HSP70 shRNA-2转染组裸鼠移植瘤生长明显较明显减慢(P<0.01),瘤组织中心出现明显坏死,PCNA表达明显降低,细胞凋亡率明显增加(P<0.01),而空质粒转染组无明显上述改变(P>0.05)。结论:HSP70沉默能抑制结肠癌HT29细胞裸鼠移植瘤的生长,促进细胞凋亡,HSP70可能是治疗结肠癌有效靶点。