鼻咽癌组织Fas和FasL的表达及其意义

目的　探讨鼻咽癌组织Fas和FasL表达水平的变化及其意义。方法　用免疫组织化学方法检测 30例鼻咽癌患者活检的鼻咽癌组织和 1 0例正常人鼻咽部活检组织的Fas和FasL的表达。结果　鼻咽癌患者癌组织Fas表达的阳性率显著低于正常人鼻咽部黏膜组织 (P <0 0 5 ) ;EBV VCA IgA阳性患者的鼻咽癌组织Fas表达阳性率明显低于EBV VCA IgA阴性患者 (P<0 0 5 ) ;鼻咽癌患者癌组织FasL表达阳性率明显高于正常人鼻咽部黏膜上皮细胞 (P <0 0 1 ) ;Ⅲ、Ⅳ期患者NPC组织FasL表达阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者 (P <0 0 5 )。结论　鼻咽癌患者活检的鼻咽癌组织Fas表达下调而FasL表达上调 ,这可能与鼻咽癌细胞免疫逃逸有关     

鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22表达的关系及意义

目的研究鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22的表达及其相关性。方法收集53例鼻咽癌石蜡档案标本和30例鼻咽黏膜慢性炎标本,分别行EBER和miR-BART22原位杂交及MAP3K5免疫组化检测;另分别选取10例鼻咽癌和鼻咽黏膜新鲜标本提取蛋白行MAP3K5的Western blot检测。结果 53例鼻咽癌EBER均阳性,49例miR-BART22阳性;30例鼻咽黏膜慢性炎EBER和miR-BART22均阴性。MAP3K5在53例鼻咽癌组织中50例为阴性,癌巢周围粘膜组织呈阳性表达,3例弱阳性(+)表达。30例鼻咽粘膜慢性炎中,25例强阳性表达(++～+++),3例弱阳性(+)表达,2例阴性;鼻咽癌和鼻咽黏膜慢性炎MAP3K5差异具有统计学意义(P<0.001);Westernblot检测结果黏膜慢性炎MAP3K5蛋白表达值高于鼻咽癌(P=0.029)。MAP3K5和miR-BART22表达呈负相关(P<0.001)。结论 MAP3K5在鼻咽癌组织中表达水平低于黏膜上皮组织。MiR-BART22与之相反,在鼻咽癌中高表达,而黏膜慢性炎中缺乏。MAP3K5和miR-BART22在鼻咽癌中表达呈负相关。根据以上实验和相关文献,我们推测MAP3K5可能是EB病毒miR-BART22靶标基因,EB病毒miR-BART22通过抑制MAP3K5的表达,使相应磷酸化MAP3K5蛋白减少,进而下调MAPK通路下游基因蛋白的磷酸化,并行使对NPC细胞抑制凋亡、阻止分化并促进免疫逃逸等作用。     

NLRP3在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的:探讨炎症小体NLRP3在鼻咽癌组织和正常鼻咽黏膜组织中的表达水平变化及其与患者临床预后的关系。方法:采用实时定量PCR和免疫组化检测40例鼻咽癌组织和12例正常鼻咽黏膜组织中NLRP3的表达水平。结果:1NLRP3在鼻咽癌组织中表达显著高于正常鼻咽黏膜组织(P<0.05);2在鼻咽癌患者中,NLRP3的表达水平与肿瘤的淋巴结转移以及患者的临床预后有关(P<0.05),NLRP3高表达患者较低表达患者具有更好的局部无复发生存率和无瘤生存率,但与年龄和组织病理类型无明显相关关系(P>0.05)。结论:NLRP3具有提示鼻咽癌肿瘤转移及判断患者预后的价值。     

EBV编码的miR-BART8-3p与鼻咽癌放疗抵抗的相关性分析

目的:探究EB病毒(EBV)编码的miR-BamHI-A区右向转录(BART)8-3p(EBV-miR-BART8-3p)与鼻咽癌(NPC)放疗抵抗的相关性。方法:选取2018年7月至2020年7月本院104例初诊NPC患者(NPC组),另选取同期100例慢性鼻窦炎鼻息肉患者(良性病变组),比较两组患者血浆和组织EBV-miR-BART8-3p表达水平。分析NPC患者血浆和组织EBV-miR-BART8-3p表达水平在临床病理特征、放疗效果中的差异,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆EBV-miR-BART8-3p水平对NPC患者发生放疗抵抗的预测价值。结果:NPC组血浆和组织EBV-miR-BART8-3p表达水平均显著高于良性病变组(P<0.001)。9例EBV-DNA阴性NPC患者血浆和组织EBV-miR-BART8-3p表达水平低于EBV-DNA阳性者;经Pearson相关系数分析,EBV-DNA阳性NPC患者血浆与组织EBV-miR-BART8-3p表达水平呈正相关,且两者与EBV-DNA拷贝数亦呈正相关(r值分别为0.452、0.717、0.726,均P<...     

叉头蛋白3在鼻咽非角化性鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的观察叉头蛋白3(FoxP3)在鼻咽非角化性鳞状细胞癌中的表达情况,以探讨调节性T(Treg)细胞在鼻咽癌发生、发展中的意义。方法通过免疫组织化学(SP)法检测FoxP3在57例鼻咽非角化鳞状细胞癌和22例鼻咽部黏膜慢性炎症中的表达情况及CD8在鼻咽癌中的表达。结果在鼻咽癌组中FoxP3阳性Treg细胞数(105.05±52.22)显著高于鼻咽部黏膜慢性炎症(6.35±6.06),二者的差异有统计学意义(P<0.05)。FoxP3阳性Treg细胞的数量与患者性别及肿瘤分化程度有关(P<0.05)。结论在鼻咽非角化鳞状细胞癌中,FoxP3阳性Treg细胞的增殖可能抑制机体的抗肿瘤免疫功能,并为肿瘤细胞的免疫逃逸提供良好的环境。     

鼻咽癌患者血浆EBV-DNA的水平和组织中MMP-9的表达及意义

目的:研究EBV-DNA在鼻咽癌患者血浆中的表达和MMP-9在鼻咽癌组织中的表达水平及两者的关系.方法:采用荧光定量PCR方法检测血浆EBV-DNA水平,用免疫组化SP法检测鼻咽癌组织和鼻咽黏膜慢性炎组织中MMP-9的表达水平.结果:(1)鼻咽癌患者血浆EBV-DNA阳性检出率明显高于健康对照者,鼻咽癌组织中MMP-9阳性表达率高于鼻咽黏膜慢性炎组织;(2)血浆EBV-DNA阳性水平、鼻咽癌组织MMP-9的表达都与肿瘤的临床分期相关;(3)血浆EBV-DNA阳性的鼻咽癌患者其组织标本中MMP.9表达阳性率高于血浆EBV-DNA阴性的.结论:进一步证实TEBV与鼻咽癌有密切关系;MMP-9在鼻咽癌突破基底膜中起到重要作用;两者在鼻咽癌的发生发展中起到协同作用.     

CCT亚基γ在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨CCT亚基γ在鼻咽癌组织中的表达及临床意义.方法:收集100例鼻咽癌组织(鼻咽癌组)和60例鼻咽黏膜慢性炎组织(鼻咽黏膜慢性炎组),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CCT亚基γmRNA表达水平,免疫组化及免疫印迹检测组织标本中CCT亚基γ蛋白表达水平,单因素分析CCT亚基γ与鼻咽癌患者临床病理特征及预后的关系.结果:鼻咽癌组CCT亚基γmRNA表达水平、蛋白阳性表达率评分及蛋白水平均高于鼻咽黏膜慢性炎组(P<0.05).CCT亚基γ蛋白表达水平与鼻咽癌患者的TNM分期、复发有关(P<0.05),与年龄、性别、吸烟史、远处转移及病理分型无关(P>0.05).CCT亚基γ高表达水平患者的3年总生存率低于低表达水平患者(P<0.05).结论:CCT亚基γ在鼻咽癌组织高表达与鼻咽癌患者临床分期及复发密切相关,CCT亚基γ增高预示着患者预后不良.     

3号染色体短臂21-22区域63个新基因在鼻咽癌组织中的差异表达

目的 寻找与鼻咽癌发病密切相关的未知基因。方法 对63个定位于3号染色体短臂21-22D3S1609-D3S1295区域的单拷贝并代表未知基因的EST簇进行网上克隆,在获取基因大片段或全长cDNA序列的基础上,应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测63个未知基因在4种鼻咽癌细胞株、32例鼻咽部低分化鳞状细胞癌组织和16例鼻咽部慢性炎症组织中的表达状况。结果 49个未知基因在鼻咽癌组织和鼻咽部慢性炎症组织间的表达水平无显著性差异;8个未知基因在鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中均不表达;2个未知基因在鼻咽癌组织中表达明显增强;4个未知基因在鼻咽癌组织中表达明显减弱,其中Hs.27566基因在鼻咽癌细胞和组织中均显著低表达或不表达。结论 在染色体3p21-22D3S1609-D3S1295区域构建了63个未知基因在鼻咽癌的表达差异谱;筛选出6个在鼻咽癌组织中差异表达的未知基因。     

P16蛋白和P73蛋白在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的　探讨鼻咽癌组织中P16 蛋白和P73蛋白的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化S -P法 ,检测P16 蛋白和P73蛋白在 4 0例鼻咽癌组织和 2 0例鼻咽癌黏膜慢性炎症组织中的表达情况。结果　 4 0例鼻咽癌组织中P16 蛋白阳性表达率明显低于鼻咽黏膜慢性炎症组织 (P <0 0 5 ) ,而P73蛋白在 4 0例鼻咽癌组织中的表达较鼻咽黏膜慢性炎症组织相比明显增高 (P <0 0 5 )。P16 蛋白和P73蛋白的表达与颈部淋巴结转移、局部区域复发以及远处转移无明显相关 (P >0 0 5 ) ,且P16 蛋白与P73蛋白的表达亦无明显相关。结论　P16 蛋白的低水平表达和P73蛋白的高水平表达可能与鼻咽癌的发生发展有关。     

3号染色体短臂21-22区域63个新基因在鼻咽癌组织中的差异表达

目的寻找与鼻咽癌发病密切相关的未知基闪。方法对63个定位于3号染色体短臂21-22 D3S1609-D3S1295区域的单拷贝并代表未知基因的EST簇进行网上克隆，在获取基因大片段或全长cDNA序列的基础上，应用半定量逆转录．聚合酶链反应检测63个未知基因在4种鼻咽癌细胞铢、32例鼻咽部低分化鳞状细胞癌组织和16例鼻咽部慢性炎症组织中的表达状况。结果49个未知基因在鼻咽癌组织和鼻咽部慢性炎症组织问的表达水平无显著性差异；8个未知基因在鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中均不表达；2个未知基因在鼻咽癌组织中表达明显增强；4个未知基因在鼻咽癌组织中表达明显减弱，其中Hs．27566基因在鼻咽癌细胞和组织中均显著低表达或不表达。结论在染色体3p21-22D3S1609．D3S1295区域构建了63个未知基因在鼻咽癌的表达差异谱：筛选出6个在鼻咽癌组织中差异表达的未知基因。     

鼻咽癌组织中X 连锁凋亡抑制蛋白及caspase-3 和Smac /DIABLO 的表达及意义

目的采用组织芯片技术研究鼻咽癌组织中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、caspase-3与其拮抗蛋白Smac/DIABLO的表达及其意义。方法以50例鼻咽癌患者鼻咽部活体组织石蜡标本和20例鼻咽部慢性炎症组织石蜡标本为研究对象,利用组织芯片技术同时采用SP免疫组织化学方法检测鼻咽癌组织芯片中XIAP、caspase-3和Smac/DIAB-LO的表达。结果鼻咽癌组织中XIAP的阳性表达高于鼻咽部慢性炎症组织,caspase-3和Smac/DIABLO的阳性表达明显低于鼻咽部慢性炎症组织,差别均有统计学意义(P<0.05)。XIAP阳性的鼻咽癌石蜡标本Smac/DIABLO阳性表达率低于XIAP阴性的鼻咽癌石蜡标本Smac/DIABLO阳性表达率,鼻咽癌组织中XIAP与Smac/DIABLO表达呈负相关(P<0.05)。结论 XIAP在鼻咽癌中高表达,caspase-3、Smac/DIABLO在鼻咽癌中低表达,鼻咽癌中XIAP和Smac/DI-ABLO表达呈负相关。XIAP、caspase-3和Smac/DIABLO可能是鼻咽癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环,与鼻咽癌的发生、发展密切相关。     

CD25+细胞在鼻咽癌中的表达及与EBV的关系

目的探讨CD25^＋细胞在鼻咽癌组织中的表达情况及EB病毒感染对CD25表达的影响。方法用免疫组织化学方法检测CD25^＋细胞在鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织中的表达情况。并用组织原位杂交技术检测EB病毒对其表达的影响。对照组选取鼻咽慢性炎症组织。结果CD25^＋淋巴细胞在鼻咽癌组织中比在鼻咽慢性炎症组织中的表达明显升高．差异具有显著性意义（P〈0．001）,且在未分化癌中表达高于角化型癌和非角化型癌（P〈0．05）。原位杂交显示EB病毒与CD25^＋淋巴细胞高表达有关。结论CD25^＋淋巴细胞在鼻咽癌组织中表达高于慢性炎症组织,EB病毒感染与CD25^＋淋巴细胞表达间存在相关性。     

鼻咽癌中ABC转运蛋白基因表达的研究

目的 探讨10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义.方法 采用实时荧光定量PCR,检测10种耐药相关的ABC转运蛋白在25例鼻咽癌组织中的表达水平,并与其在正常鼻咽组织中的表达进行比较分析.结果 10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中均有不同程度的表达,其中ABCA2、ABCC3在鼻咽癌组织及鼻咽正常组织中均高表达;ABCC1、ABCC5及ABCG2在鼻咽癌组织中的表达高于其在正常鼻咽组织中的表达.并有统计学差异;而ABCB1、ABCC2、ABCC3、ABCC4、ABCC6及ABCC11在两类样本中均为低表达.结论 在鼻咽组织中高表达的转运蛋白与鼻咽癌的天然耐药性有关;在鼻咽癌组织中高表达,而在正常鼻咽组织中表达显著降低的ABC转运蛋白很可能在鼻咽癌对化疗的耐药中起着重要作用,在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中均低表达的转运蛋白的转运药物则可能是鼻咽癌化疗的敏感药物.     

Lymphangiogenesis in tumor tissues and 5’-Nase, Flt-4, Flk-1 expressions

Objective To investigate lymphangiogenesis in tumor tissues and 5’-Nase, Flt-4, Flk-1 e xpressions.Methods 5’-Nase and Aplase expressions and the morphology of lymphatics in gastric carc inoma tissues were observed with enzyme histochemistry.Flt-4 and Flk-1 expre ssion in gastric carcinoma and sarcoma tissues was studied by immunohistochemist ry.CNE-2z cells were implanted into the subdermal layer of nude mice and hyal uronic acid was injected at the same sites.After 4 or 5 weeks, nasopharyngeal carcinoma (NPC) xenograft tissues were cut for immunohistochemistry and enzyme h istochemistry, and lymphangiogenesis, 5’-Nase, Alpase, Flt-4 and Flk-1 expres sion in NPC tissues was studied.Hyaluronic acid contents in sera of the patien ts with NPC and mice with NPC xenografts were measured by radioimmunoassay.Results There were a lot of lymphatics and solid strip-like tissues in gastric carcinom a and NPC xenograft treated with hyaluronic acid.The total number of lymphatic s (26.9±14.2/HP) increased significantly in gastric carcinoma tissues.Flt- 4 and Flk-1 positive expression was found in gastric carcinoma, sarcoma tis sues and NPC xenograft.Most of the vessels with positive Flt-4 were lymphatics. Flk-1 expression was only found in the walls of blood vessels.Hyaluronic acid content (363.52±98.15 ng/ml) in sera of patients with NPC was higher than t hat of the patients with chronic nasopharyngeal imflammation (306.29±27.15 n g/ml), with a significant difference (P=0.039).The hyaluronic acid conten t in sera of nude mice with NPC (2120.59±490.22 ng/ml) was markedly higher than that in normal mice (1588.99±502.12 ng/ml), with a significant differen ce between them (P=0.007).Conclusion There are a lot of lymph capillaries with positive 5’-Nase in gastric carcinoma and NPC xenograft treated with hyaluronic acid.Flt-4 positive expression is shown in gastric carcinoma, sarcoma tissues and NPC xenografts.The results sug gest there is lymphangiogenesis in these malignant tumor tissues.Hyaluronic ac id contents in sera of patients with NPC and nude mice with NPC increase, which may promote the formation of lymphatics.     

转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌发生和转移中的作用

目的 探讨转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌发生和转移中的作用.方法 对65例鼻咽癌和9例鼻咽部慢性炎症组织中转酮酶活性进行检测;实时定量PCR检测鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中转酮酶基因家族(TKT、TKTL1和TKTL2)mRNA表达水平的变化,并分析TKTL1的表达与鼻咽癌发生和转移的关系.结果 鼻咽癌组织中转酮酶活性较鼻咽部慢性炎症组织明显增强(t=4.12,P=0.00);实时定量PCR结果 示鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平差异无统计学意义(t=1.28、1.62,P=0.32、0.26).然而,鼻咽癌组织中TKTL1的表达水平比鼻咽部慢性炎症组织明显上调(t=6.23,P=0.00),且有淋巴结转移的鼻咽癌组织中TKTL1的表达水平较尤淋巴结转移者明显增强,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.00).结论 转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌的发生和转移中可能起重要作用,TKTL1有望成为肿瘤治疗研究的新靶点.     

P16蛋白在鼻咽癌中的表达及意义

目的通过测定鼻咽癌组织中P16蛋白的表达情况,探讨P16抑癌基因异常或失活与鼻咽癌发生的关系。方法 应用S-P免疫组化技术,检测90例鼻咽癌组织中P16蛋白的表达情况,以慢性鼻咽粘膜炎症标本80份作为对照分析。结果 90例鼻咽癌组织中P16蛋白表达阴性68例,阴性率为75.56％(68/90);对照组80鼻咽炎症组织的P16蛋白表达阴性13例,阴性率为16.25％(13/80),两组比较差异有高度显著性(x2=59.717,P<0.01)。结论 抑癌基因P16失活或P16蛋白低表达与鼻咽癌的发生、发展有关系。     

鼻咽癌组织中P-Akt的表达及其临床意义

目的检测肿瘤相关分子P-Akt在鼻咽癌组织中的表达,分析其与临床病理特征的关系。方法收集广州医学院第二附属医院病理科2002—2003年存档的60例手术活检切取的鼻咽癌组织蜡块（鼻咽癌组）,另选择30例鼻咽慢性炎症患者的鼻咽部炎症组织石蜡标本（对照组）。应用免疫组织化学技术（SABC）检测鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织标本中P-Akt的表达,观察P-Akt与鼻咽癌患者临床病理特征的关系。结果（1）P-Akt在鼻咽癌组织中的阳性着色主要集中在细胞质,阳性21例,阳性率为35.0%,对照组无P-Akt表达,两组P-Akt阳性率间差异有统计学意义（P〈0.01）。（2）P-Akt表达水平与鼻咽癌组织原发病灶侵犯程度、淋巴结是否转移、远处转移及TNM临床分期有关（P〈0.05）;而与鼻咽癌组织的组织学分型无关（P〉0.05）。结论在鼻咽癌组织细胞质中P-Akt过表达,其表达与鼻咽癌患者的临床病理特征如淋巴结浸润、远处转移和TNM临床分期密切相关。P-Akt表达水平可作为预测鼻咽癌病期和转移的新指标。     

鼻咽癌组织RASSFIA基因的表达

目的 探讨RASSFIA基因在鼻咽癌发病过程中的作用。方法 采用逆转录—聚合酶链技术在4种鼻咽癌细胞株、32例鼻咽癌组织和16例正常鼻咽部组织中检测RASSFIA基因的表达。并分析鼻咽癌组织在3p21.3D3S4604徽卫星多态性位点的等位基因杂合性丢失状况。结果 RASSFIA基因在4种鼻咽癌细胞株中低表达，32例鼻咽癌组织的RASSFIA基因表达显著低于16例正常鼻咽部组织(P=0．001)；43．75％(14／32)的鼻咽癌组织在3p21．3D3S4604位点发生了杂合性丢失。鼻咽癌RASSF1A基因表达与性别、年龄、颈部淋巴结转移、TNM临缶床分期、D3S4604位点杂合性丢失和血清EB病毒VCA／IgA抗体滴度无显著相关性，但伴远处转移的鼻咽癌组织的RASSFIA表达显著低于无远处转移的鼻咽癌(P=0．014)。结论 RASSFIA基因的表达下调可能是鼻咽癌发病过程中的晚期事件，3p21区域可能还存在与鼻咽癌发生密切相关的抑瘤基因。