葛根素抑制家兔髂动脉球囊损伤后再狭窄

观察家兔髂动脉球囊损伤后葛根素抑制损伤部位平滑肌细胞增殖的药效。复制球囊损伤家兔髂动脉造成血管狭窄模型 ,实验分为 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组、10 0mg (kg·d)葛根素治疗组和手术对照组 ,通过体外超声定期检测血管腔直径 ,病理切片观察血管内膜和中膜面积。结果发现 ,球囊损伤术后第 5周 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.6 6± 0 .4 1mm)和 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.5 9± 0 .17mm)显著高于对照组(1.13± 0 .4 3mm)。病理切片结果发现 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组内膜 /中膜面积比 (36 %± 18% )显著低于对照组(12 4 %± 6 4 % )。结果提示 ,葛根素对球囊损伤术后血管平滑肌细胞增殖有一定抑制作用。     

兔动脉球囊损伤后丝裂素活化蛋白激酶表达的研究

目的　探讨丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)在动脉球囊损伤后内膜增殖过程中表达的变化。方法　 4 0只大耳白兔分成 4组 :行胸腹主动脉球囊损伤 ,术后 3d、7d和 14d取材 ,随机分为 3组 (即术后 3、7及 14d组 ) ;对照组不进行球囊损伤。应用蛋白印迹杂交及逆转录 聚合酶链反应方法 ,观察主动脉损伤后内膜增殖过程中MAPK表达的变化。结果　动脉球囊损伤后 3d、7d和 14d ,MAPK活性、蛋白和基因表达均高于对照组 ,以 3d表达最为明显。结论　MAPK在动脉损伤后异常表达 ,可能与平滑肌细胞迁移、新生内膜形成及血管重塑有关。     

大鼠胸主动脉球囊损伤后平滑肌细胞PCNA和P27表达的变化

目的探讨大鼠胸主动脉球囊损伤后增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P27表达变化规律。方法30只400～500g的雄性SD大鼠随机分为2组。手术组(n=24)行球囊损伤大鼠胸主动脉术;对照组(n=6)不行球囊损伤,作为正常对照。于术后2d、7d、14d、28d取胸主动脉应用HE染色、免疫组化和计算机图像分析法进行形态学、PCNA和P27表达水平检测。结果(1)正常动脉壁不表达PCNA,球囊损伤后开始表达,术后2d时中膜表达显著(24.08±2.35);术后7d出现新生内膜,PCNA在内膜高度表达(35.32±3.46)而中膜表达已明显下降(9.47±1.56);后内膜、中膜表达均逐渐下降,28d时形成显著的新生内膜(0.173±0.030)mm2,管腔狭窄;(2)正常动脉壁显著表达P27(19.29±1.54),球囊损伤后中膜表达迅速下降,2d达最低水平(2.93±0.55),后逐渐回升;14d、28d新生内膜中可见P27表达,并逐渐增多;(3)P27表达与PCNA表达呈显著负相关(r=0.868P<0.001)。结论球囊损伤大鼠主动脉后管壁P27表达下调伴随PCNA表达上调,血管平滑肌细胞恢复增殖能力并向内膜下迁移并过度增殖,从而形成显著的新生内膜、管腔狭窄。     

经皮冠状动脉介入治疗后肌钙蛋白I阳性患者血清基质金属蛋白酶水平升高的临床意义

目的 :探讨血清基质金属蛋白酶 (MMP)在稳定型心绞痛患者中介入治疗后的表达。方法 :16例冠状动脉造影正常的患者 (对照组 )及 5 1例行冠状动脉介入治疗的稳定型心绞痛患者 (患者组 )入选 ;术后常规查肌钙蛋白I(cTnI) ,分别采取术前 ,术后第 1、第 3及第 5天的外周血 ,Elisa试剂盒测定MMP 2、MMP 9的水平。结果 :5 1例患者中共有 2 1例患者cTnI增高 ,平均 (0 .6 8± 0 .2 3) μg/L ;术前两组的MMP水平无明显差异 ;cTnI阳性者的MMP 9在术后第 1天明显高于阴性者及对照组〔(198± 5 8.5 )∶(14 4± 4 8.3)、(132± 4 6 .7) μg/L ,均 P <0 .0 5〕 ,并在术后第 3天、第 5天保持较高水平 ;MMP 2仅在术后第 1天增高 ,第 3天、第 5天恢复正常。结论 :冠状动脉介入治疗后心肌微损伤的发生率较高 ,这种心肌微损伤对患者的预后有一定的影响 ;血清MMP水平的增高 ,可能是此类患者临床预后较差的原因之一。     

兔主动脉球囊损伤后MMP-2和TIMP-2 mRNA的动态变化

目的 :探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )、基质金属蛋白酶组织抑制因子 2 (TIMP 2 )核糖核酸 (mR NA)在主动脉球囊损伤后的改变及可能作用。方法 :在兔腹主动脉球囊损伤的模型上 ,应用RT PCR的方法 ,观察MMP 2、TIMP 2mRNA在球囊损伤后不同时间的表达情况。结果 :MMP 2mRNA在球囊损伤后第 1天表达开始升高 ,第 7天达高峰。TIMP 2mRNA球囊损伤后第 1天表达开始逐渐升高 ,第 2 8天达高峰。结论 :MMP 2mRNA在球囊损伤后表达第 7天达高峰 ,在再狭窄早期平滑肌细胞的迁移与增殖中起重要作用 ;TIMP 2mRNA球囊损伤后表达第 2 8天达高峰 ,可能与再狭窄中、后期新生内膜形成及血管重塑有关。     

曲匹地尔对兔动脉球囊损伤后内膜增生和载脂蛋白J表达的影响

目的观察曲匹地尔对球囊损伤后血管内膜增生和载脂蛋白J(apoJ)表达的影响,探讨其抑制内膜增生的可能机制。方法纯种雄性日本大耳白兔90只,随机分成3组(每组30只):假手术组、球囊损伤组和曲匹地尔组,假手术组和球囊损伤组从术前7 d开始给予肌肉注射生理盐水1 ml·kg-1·d-1,曲匹地尔组肌肉注射5％曲匹地尔1 ml·kg-1·d-1。在光镜下观察曲匹地尔对兔腹主动脉球囊损伤的模型血管内膜增生的影响,应用逆转录多聚酶链反应和免疫组化的方法观察球囊损伤后apoJ的动态表达及曲匹地尔对其表达的影响。结果球囊损伤后第1、4、7、14、28天apoJ mRNA和蛋白表达都显著高于假手术组,且分别在损伤后第1天(3．82±0．36和0．64±0．16, P<0．01),和第14天(46．21±10．37和5．50±1．65,P<0．01)表达最为明显。曲匹地尔可以抑制血管内膜的增生,并能抑制apoJ mRNA和蛋白的表达。结论球囊损伤后apoJ的表达可能与血管内膜增生有关。曲匹地尔抑制血管内膜增生的作用可能与其抑制apoJ的表达有关。     

全反式维甲酸对球囊损伤大鼠胸主动脉内皮后MMP-2和MMP-9表达的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠胸主动脉球囊损伤后MMP2和MMP9表达的影响,探讨ATRA治疗血管再狭窄的可能机制与作用。方法54只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和ATRA治疗组。所有大鼠从术前4d至术后处死接受植物油或ATRA混悬液灌胃,球囊剥脱模型组与治疗组大鼠胸主动脉内皮,分别在术后2d、7d、14d及28d取胸主动脉,通过组织学检查、免疫组化结合图象分析技术测定血管壁形态学变化,MMP2和MMP9的蛋白表达水平及ATRA灌胃对其影响。结果1MMP2术后2d开始上升,7d最高,14d后开始下降。2MMP9术后2d在中膜大量表达,7d后表达极少。3术后7d新生内膜开始增生,14d大量新生内膜形成,28d以后内膜继续增厚。4使用ATRA后,血管新生内膜明显减少,MMP2及MMP9蛋白表达也有不同程度下降。结论ATRA能下调血管成形术后MMP2与MMP9的表达,可能在调节细胞外基质的降解、成形术后血管重塑中起作用。     

重组腺病毒介导的人一氧化氮合酶基因转染对大鼠颈总动脉球囊损伤后新生内膜的影响

目的 :研究重组腺病毒介导的人内皮型一氧化氮合酶基因 (eNOS)表达生成的一氧化氮合酶 (NOS)对球囊损伤后大鼠颈总动脉新生内膜的抑制作用。方法 :在 2 93细胞内扩增、纯化Ad LacZ和Ad eNOS ,鉴定其是否携带有LacZ和eNOS基因。建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型后 ,将磷酸缓冲液 (PBS)、Ad LacZ和Ad eNOS在体内分别转染到损伤血管段 ,以X gal染色、苏木精 伊红染色 ,免疫组化及计算机图像分析处理等方法观察转染动脉节段外源性eNOS蛋白表达及其对新生内膜的影响。结果 :重组腺病毒携带有eNOS基因 ,并且在损伤血管段得到有效表达。转染后PBS组、Ad LacZ组和Ad eNOS组的新生内膜面积分别为 (0 .187± 0 .0 18)、(0 .134± 0 .0 6 1)和 (0 .0 6 3± 0 .0 2 6 )mm 2 ,新生内膜与中膜面积比值 (I/M)分别为 1.5 76± 0 .2 73、1.342± 0 .35 7和 0 .5 6 0± 0 .16 1。与PBS组、Ad LacZ组相比Ad eNOS组无论新内膜面积 ,还是管腔狭窄程度都明显减小。结论 :腺病毒介导的eNOS基因转染能有效抑制球囊损伤后血管内膜的增生 ,可防治血管成形术后再狭窄     

氯沙坦对大鼠血管损伤性重塑的影响及其与细胞凋亡的关系

目的 :探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )受体拮抗剂氯沙坦对血管损伤性重塑的作用及其内在机制。 方法 :将Wistar大鼠随机分为假手术组 (6只 )、氯沙坦组 (2 0只 )及对照组 (2 1只 ) ,后两组大鼠行胸主动脉球囊损伤术 ,术后不同时间段处死。三组均进行苏木精 伊红染色及计算机图像分析 ,Tunel标记法检测细胞凋亡率 ,免疫组化方法检测血管壁凋亡相关基因表达物Fas、Fas L、Bcl 2、Bax的变化。结果 :对照组术后第 7、14天损伤血管管壁横截面积增加明显 ,分别为 (0 .4 84± 0 .180 )mm2 和 (0 .6 6 1± 0 .2 4 1)mm2 ,与假手术组比较 ,P <0 .0 5。术后第 14天 ,氯沙坦组损伤血管管壁横截面积为 (0 .384± 0 .0 90 )mm2 ,与对照组比较 ,管壁增生程度显著降低。术后第 7天 ,管壁面积增生比与细胞凋亡率之间有负相关性 (r =- 0 .5 86 ,P <0 .0 5 ) ,氯沙坦组的细胞凋亡率显著高于对照组。氯沙坦组与对照组比较 ,术后第 7天管壁组织内Fas L表达增加 ,Bcl 2表达降低 (P <0 .0 5 )。结论 :AngⅡ受体拮抗剂氯沙坦可有效减轻大鼠动脉损伤后的血管增生性重塑。其机制可以与促进细胞Fas的表达、抑制Bcl 2的表达 ,从而增加细胞凋亡率有关     

MT1-MMP、MMP-2和TIMP-2基因在去卵巢大鼠成骨细胞中的表达

目的　通过观察去卵巢 (OVX)骨质疏松模型大鼠成骨细胞膜型基质金属蛋白酶 1(MT1 MMP)基因的表达 ,探讨绝经后骨质疏松的发病机制。　方法　对OVX大鼠与假手术大鼠进行骨密度和骨组织形态计量学测定。股骨远端行原位杂交检测骨组织MT1 MMP、MMP 2和TIMP 2mRNA表达 ,免疫组化检测骨组织MT1 MMP、MMP 2和TIMP 2蛋白质表达。　结果　OVX大鼠第 3、4腰椎骨密度 (0 14 4± 0 0 11) g cm2 、(0 14 3± 0 0 15 ) g cm2 较对照组 (0 15 8± 0 0 18)g cm2 、(0 16 2± 0 0 17) g cm2 明显减少 ,OVX组骨小梁面积 (9 5 8± 3 39) %、厚度 (40 85± 8 0 4 ) μm和数目 (2 30± 0 4 8)个 mm分别较对照组 (2 0 6 3± 4 8) %、(44 73± 6 8) μm、(4 6± 0 7)个 mm明显下降 ,OVX组骨小梁间隔 (5 85 8± 115 1) μm较对照组 (2 5 4 6± 4 8 0 ) μm明显增宽 ;成骨细胞MT1 MMPmRNA与蛋白质表达下调 ,而MMP 2和TIMP 2之间表达无差异。　结论　雌激素不足可使成骨细胞MT1 MMP基因表达减少 ,可能为绝经后骨质疏松的发病机制之一。     

-G gamma A gamma-Thalassemia and gamma-chain variants in Chinese newborn babies

The occurrence of gamma-chain abnormal hemoglobins and of gamma-thalassemia in Chinese newborns was evaluated through analyses of the Hb F of over 1,100 babies and of the DNA from one baby and his parents. Gene mapping data identified this baby as a homozygote for -G gamma A gamma-thalassemia, which is caused by a deletion of about 5 kb due to an unequal crossing-over between the -G gamma- and -A gamma- genes. This condition is the same as that observed in Indian and Japanese babies [2,3]. Its gene frequency among babies from the Shanghai area was 0.012. A previously unrecognized G gamma chain variant, Hb F-Shanghai or alpha 2 G gamma 266(E10)Lys----Arg, was observed in one newborn. This variant was not detected by conventional techniques but only by high performance liquid chromatography, as the G gamma 66 Lys and G gamma 66 Arg chains had slightly different chromatographic mobilities. Lys at position gamma 66 participates in contacts with the heme group, and its substitution by another amino acid residue might interfere with physiochemical and/or functional properties. No other gamma-chain variants have been detected except the well-known A gamma T or F-Sardinia chain (f.A gamma T = 0.076).     

Two arrangements of the human fetal globin genes may be responsible for high G gamma values in Chinese newborns: -G gamma-G gamma-delta-beta and -G gamma-A gamma G gamma-A gamma-delta-beta

High G gamma values (78% and higher) have been observed in about 3% of Chinese newborns from the Shanghai area. We describe here two arrangements different from the normal -G gamma-A gamma-delta-beta arrangement which have been characterized in the DNA from three of these babies. One baby was heterozygous for a chromosome with two linked G gamma globin genes (-G gamma-G gamma-delta-beta), which has also been observed in Black newborns [Powers et al, Nucleic Acids Res 12:7023, 1984], while the two other babies were heterozygous for a chromosome with triplicated gamma globin genes, presumably of the -G gamma-A gamma G gamma-A gamma-delta-beta arrangement. A similar triplication has been observed in natives of the New Hebrides [Trent et al, Nucleic Acids Res 9:6723, 1981].     

前列腺癌特异突变DNA聚合酶β表达载体转染NIH3T3的细胞生物学行为变化

目的观察前列腺癌(CPa)特异突变DNA聚合酶β(polβ)表达载体转染NIH3T3的细胞生物学行为变化。方法采用业已成功构建的2例特异突变polβ表达载体(pCDNA3.1-M1和pCDNA3.1-M2),采用脂质体包裹转染NIH3T3细胞,观察比较这些突变对细胞polβ基因mRNA和蛋白表达的影响以及引发的相应的细胞周期和细胞自发突变率等细胞生物学行为的变化。结果筛选得到高表达PCa特异突变polβ的NIH3T3细胞株(NIH3T3-M1,NIH3T3-M2)和高表达野生型polβ的NIH3T3细胞株(NIH3T3-W)。RT-PCR和Western印迹结果显示,外源DNApolβ在转化的NIH3T3细胞中呈现高表达。与转染空载体和未转染的NIH3T3细胞相比,转染PCa特异突变polβ的2个细胞株和转染野生型polβ的细胞株的细胞周期的S期比例及转染细胞的HGPRT(次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)基因的自发突变率均显著增加,且转染野生型polβ的细胞株亦显著高于转染PCa特异突变DNApolβ的细胞株。结论 DNApolβ高表达介导了肿瘤发生的分子机制。     

The Greek A gamma beta+-HPFH observed in a large black family

Several members of a Black family with a heterozygosity for an A gamma beta+-HPFH, shown in 1969 to have relatively low levels of Hb F and a low glycine to alanine ratio in the gamma chain of this Hb F, were reinvestigated. Thirteen of 30 available family members in two generations had the heterozygous form of this condition, which was characterized by a decreased level of Hb A2, an average Hb FAD value of 13.3%, an equal distribution of Hb F over the red cells, and normal hematological values. The gamma chain composition of isolated Hb F was determined by reversed phase high performance liquid chromatography for all 13 heterozygotes and showed an average A gamma value of 84.5%. Hybridization with synthetic oligonucleotides, specific for normal and mutant sequences at positions 111-129 5' to the A gamma globin gene, identified a G----A base substitution at position 117, similar to that seen in subjects with the Greek A gamma-HPFH. Our data support conclusions by others that this replacement is causative of the increased A gamma chain synthesis in this condition. Haplotype analysis supported the suggestion that the G----A substitution occurred as an independent event in this Black family.     

补体C3及C3 c和C3 d在IgA肾病肾组织中的表达

目的 阐明补体C3,C3c和C3 d分子在IgA肾病肾组织中的表达,探讨C3、C3c和C3d在IgA肾病发病中的作用.方法 对36例IgA肾病和43例无IgA沉积的系膜增生性肾炎患者进行回顾性分析,对其肾组织进行抗人C3,C3c和C3 d抗体检查,在免疫荧光显微镜下观察C3、C3c和C3 d在肾组织上各自的表达.结果 补体C3在IgA肾病组肾小球上的表达高于系膜增生性肾炎组患者.C3c和C3 d仅在IgA肾病上发现表达;它们的共同表达与肾脏病理损害有关(r=0.99176,P=0.0009).结论 补体C3、C3c和C3 d在IgA肾病肾组织上高表达,而且C3c和C3 d共同表达与肾脏损害有关,可能是向终末性肾衰竭转化的标志.     

HB F-Yamaguchi (γ75THR, γ80ASN, γ136ALA) is associated with Gγ-thalassemia

Restriction endonuclease analyses of DNA from a known Hb F-Yamaguchi heterozygote and three of his relatives have shown a deletion of about 5 kb, which includes one of the γ genes. This abnormality is similar to the ^Gγ-thalassemia described recently [4] and is probably caused by an unequal crossing over between -^Gγ- and -^Aγ^T-genes. The abnormal -^Gγ^Aγ^T-X- (X = Asp→Asn at γ80) hybrid gene produces the γ-Yamaguchi chain at a level usually seen for ^Gγ chains only.     

Different molecular defects of G gamma (A gamma delta beta)o-thalassaemia in Thailand

DNA from members of 2 Thai families with conditions considered to be delta beta-thalassaemia were studied by using restriction endonuclease DNA mapping. The propositus in family A is a double heterozygote for beta-thalassaemia and delta beta-thalassaemia. DNA analysis reveals a deletion of the beta-globin gene cluster starting at the area between the Sac I and Eco RI sites near the 3' end of the G gamma-gene and extending through the A gamma-, delta- and beta-genes to an unknown extent downstream. In family B, the propositus is delta beta-thalassaemia/Hb E. Deletion of the beta-globin gene cluster begins in the large intervening sequence of the A gamma-gene and removes both delta- and beta-genes downstream.     

人垂体瘤转化基因1对NIH3T3细胞无直接肿瘤转化作用

目的 克隆人垂体瘤转化基因1（hpTTG1)cDNA并确定其在不同细胞内的分布和其在体外是否具有直接的肿瘤转化作用。方法 （1）用快速扩增（RACE）克隆hPTTG1 cDNA；（2）用Northern印迹检测hPTTG1 mRNA在肿瘤细胞的表达水平；（3）构建pCMX-GFP-hPTTG1表达质粒并转染HeLa等6种细胞，用荧光共聚焦显微镜观察GFP－hPTTG1的细胞内分布；（4）构建pIRESneo-hPTTG1表达质粒并转染NIH3T3细胞，经G418选择后检测hPTTG1是否有直接的致肿瘤作用。结果 （1）hPTTG1与大鼠PTTG的同源性为79％。开放可读框架由609bp组成，编码202个氨基酸；（2）hPTTG1在血液系统肿瘤细胞表达水平较其它肿瘤细胞为高，其表达水平由强到弱依次为THP－1，Raji,CEM,AR230,DLD-1,H1299,HeLa,HepG2和A549肿瘤细胞；（3）hPTTG1的细胞内分布在HeLa、Cos-7和DU145细胞主要位于细胞核，在A549、DLD－1和NIH3T3细胞则呈胞浆和胞核的弥漫性分布；（4）hPTTG1明显抑制NIH3T3细胞的生长，降低[^3H]胸腺嘧啶脱氧核苷的掺入率。hPTTG1单独不具有细胞肿瘤转化作用。结论 （1）hPTTG1在血液系统肿瘤细胞表达水平较其它肿瘤细胞为高；（2）hPTTG1的细胞内分布与细胞类型有关；（3）hPTTG1单独不具有细胞肿瘤转化作用。     

mdig基因的研究进展

mdig意为"粉尘诱导的基因",是2005年在煤矿工人肺泡巨噬细胞中发现的,并证实是一种新的肺癌基因.mdig基因抑制H3K9me3形成,并且可以使H3K9me3脱甲基化变成H3K9me2、H3K9me1,促使肺癌发生发展.目前已经发现mdig在肺癌等几种恶性肿瘤中过表达.本文就mdig的最新研究进展作一综述.     

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3疫苗免疫保护性的观察

目的　研究日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白1433(rSj1433)作为血吸虫病疫苗分子的潜能,并探讨rSj1433、rSjGST两种重组蛋白作为疫苗的协同作用及结核杆菌低分子量耐热多肽(Mtb)激活的γδT细胞在抗血吸虫病中的作用。　方法　用SDSPAGE、电洗脱和透析的方法制备rSj1433和rSjGST抗原,将两种抗原(分别用福氏佐剂和Mtb为佐剂)分别免疫BALB/c小鼠后,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染6wk后,剖杀小鼠计算各组的减虫率。　结果　各组的减虫率为rSj1433+福氏佐剂组32.20%,rSj1433+rSjGST+福氏佐剂组31.10%,rSj1433+Mtb佐剂组27.96%,rSj1433+rSjGST+Mtb佐剂组26.00%,rSjGST+Mtb佐剂组27.10%;各组的减卵率分别为(按以上组序)50.40%、53.30%、51.10%、58.60%和51.30%。　结论　rSj1433具有一定的抗血吸虫潜能,有可能成为抗日本血吸虫疫苗,但未见rSj1433和rSjGST的协同作用;Mtb激活扩增的γδT细胞在抗血吸虫免疫中的效果与福氏佐剂产生的免疫作用类似。