大肠癌患者外周血中癌细胞角蛋白20的检测

目的：以逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测外周血大肠癌细胞,探讨大肠癌患者外周血中癌细胞存在的临床意义。方法：应用RT－PCR方法检测47例没Dukes分期结肠癌患者及其肝转移患者外周血中大肠癌细胞角蛋白20（CK20）,并以大肠癌组织（20例）和正常健康人外周血（20例）为对照。结果：正常健康人外周血中未见CK20mRNA表达,大肠癌患者外周血中CK20 mRNA检出率达40.4％（19／47）,Dukes B,C,D期患者外周血CK20 mRNA检出率分别为20.5％（5／20）,41.2％（7／17）和87.5％（7／8）,（P＜0.05）。肝转移患者CK20 mRNA检出率为87.5％（7／8）,无肝转移患者检出率为30.8％（12／39）（P＜0.01）。结论：CK20可作为肿瘤标志物,用于检测外周血中的大肠癌细胞,预测肿瘤复发及转移,识别高危患者。     

肺癌转移监测—影像学与细胞角蛋白19—mRNA对照应用研究

目的：建立一种利用影像学和细胞角蛋白19－mRNA(CK19-mRNA)全面评估肺癌患者癌细胞转移状况的方法。并探讨其临床意义。方法：利用影像学手段检测肺癌患者临床肿瘤转移灶,同时采用逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）方法检测肺癌区域性淋巴结和肺癌患者外周血CK19－mRNA表达,来评估肺癌患者亚临床转移（微转移）情况。结果（1）在临床癌转移灶检测方面,影像学具有较高的灵敏度,能够发现1cm以上的转移灶,（2）在亚临床转移检测方面：（1）将CK19 RT－PCR和传统的病理学检测方法进行对比9枚病理学检测阳性淋巴结CK19RT－PCR均为阳性,31枚病理学检测为阴性的淋巴结中有10枚CK19 RT－PCR阳性。（2）将CK19 RT－PCR和影像学进行对比,有5枚淋巴结经CT或MRI确诊为转移（标准为短径大于1cm),CK19 RT-PCR均为阳性;而经CT或MRI诊断为可疑或无临床意义的35枚淋巴结中,CK19 RT－PCR有14枚阳性。（3）30例肺癌患者外周血标本中有12例CK19 RT－PXR阳性（40％）,15例肺良性病变及5例正常人外周血中只有1例阳性。结论：（1）影像学检查是诊断肺癌临床转移可靠和主要的手段,具有很高的灵敏性。（2）在微转移检测方面,CK19 RT－PCR可作为一个标志物来检测肺癌微转移,并且有很高的灵敏度和特异度。（3）CK19RT－PCR结合影像学检查,有助于全面评估肺癌患者的转移状况;定期检测外周血CK19－mRNA,尚可作为疗效的观察指标。     

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血中阳性表达的临床意义

目的：研究大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志，探讨CK20 mRNA阳性表达与肿瘤病理指标的关系，观察大肠癌患者手术前、后外周血中CK20 mRNA表达的变化情况。方法：采用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）的方法，对大肠癌42例、原发性肝细胞肝癌5例、对照组（非癌肿）10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因CK20 mRNA表达进行检测。结果：对照组（非癌肿）10例及原发性肝细胞肝癌5例手术前、后外周血中CK20 mRNA均为阴性表达。大肠癌组42例，手术前外周血中CK20 mRNA阳性表达率为50．0％（21／42），手术后48h外周血中CK20 mRNA阳性表达率为59．5％（25／42）。大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达率与肿瘤细胞病理分化程度无关，与Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关。结论：大肠癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志，有助于判断大肠癌的预后及鉴别原发性肝细胞肝癌和大肠癌肝转移。手术操作会促使肿瘤细胞向血液中播散，手术过程中应加强预防措施以减少癌细胞的播散。     

细胞角蛋白19基因诊断淋巴结微转移癌灶的意义

目的研究淋巴结转移情况以判断肿瘤预后,指导综合治疗。方法应用细胞角蛋白19（cyto－keratin19,CK19）RT－PCR方法对上皮性肿瘤及淋巴结进行CK19mRNA检测。结果5例正常淋巴结无CK19mRNA表达;15例乳腺癌、10例胃癌、11例大肠癌均表达CK19mRNA;82个淋巴结中,组织学检查11个有肿瘤转移,其CK19RT－PCR也为阳性,其余71个无肿瘤浸润淋巴结,经CK19RT－PCR发现16个表达CK19mRNA。结论CK19RT－PCR方法提高了淋巴结转移的检出率,在上皮性肿瘤患者的其它部位（外周血、骨髓）微转移癌灶的检测中有推广应用价值。     

改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移

目的探讨改良巢式RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达情况,并分析其与微转移的关系,建立一种简便、快速的检测血中癌细胞微转移的方法。方法采用改良的巢式RT-PCR技术检测大肠癌患者及正常对照组外周血CK20mRNA的表达。结果CK20mRNA在正常对照组中均无表达,在大肠癌患者中阳性表达率为55.4%（62/112）。不同细胞分化程度大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率无显著性差异（P〉0.05）;而不同Dukes分期大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率有显著性差异（P〈0.05）。结论改良的巢式RT-PCR技术检测血中微转移大肠癌细胞的CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,有助于癌细胞微转移的早期诊断,有助于指导辅助化疗和监测疗效。     

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血微转移中的表达

目的检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法采用RT—PCR技术检测32例大肠癌患者、11例肠道良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA定性和半定量表达。结果（1）CK20 mRNA在大肠癌患者中的阳性率为50．00％,相对系数为（0．89±0．17）;在肠道良性病变患者中阳性率为9．09％,相对系数为0．11;在健康体检者中阳性率及相对系数均为0。大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20 mRNA明显增高（P〈0．05）。（2）CK20 mRNA阳性率和相对系数在不同临床分期、远处转移中差异有统计学意义（P〈0．05）;其阳性率在浸润深度、淋巴结转移中无统计学意义,但相对系数有统计学意义（P〈0．05）。阳性者生存率低于阴性者（P〈0．05）。（3）CK20 mRNA与癌胚抗原（CEA）、糖链抗原199（CA199）表达呈正相关（P〈0．05）。结论CK20 mRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后。     

贲门癌患者外周血CK-20mRNA基因表达的临床意义

目的 探讨贲门癌早期转移的生物标记物CK－20mRNA基因表达及其临床意义。方法 应用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）法检测29例贲门癌患者外周血CK－20mRNA的表达情况。结果 29例贲门癌患者中12例外周血CK－20mRNA表达阳性，按UICC国际TNM标准分期外周血CK－20mRNA的表达率分别为：I期0／5，II期2／10，Ⅲ期8／12，IV期2／2。结论 贲门癌患者外周血CK－20mRNA阳性表达可作为贲门癌血行转移的分子指标之一，与TNM分期有一定关系。     

食管癌患者外周血CK20、CK19、CEA mRNA的表达及其临床病理意义

目的：研究89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA mRNA的表达,并探讨其临床病理意义。方法：巢式RT—PCR技术检测89例食管癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达。结果：89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为49．44％、34．83％及52．81％;三基因同时检测时,至少1个基因检测结果为阳性的表达率为71．91％,与食管癌的淋巴结转移和（或）远处转移具有相关性。结论：CK20、CEA可作为检测食管癌患者外周血微转移的生物学标志,RT—PCR联合检测多种标志物可为了解肿瘤的恶性生物学行为、指导临床治疗方案的选择、判断预后及监测疗效提供依据。     

大肠癌患者外周血细胞角蛋白-20信使核糖核酸与白细胞介素-10联合检测的临床意义

目的 联合检测大肠癌患者外周血细胞角蛋白－20信使核糖核酸（CK－20 mRNA)与血浆中白细胞介素－10（IL－10）,并评价其临床意义。方法 应用RT－PCR检测大肠癌患者外周血CK－20mRNA；应用ELISA检测其血浆IL－10浓度。结果 对照组25例健康查体者，其外周血中未见CK－20mRNA的表达；观察组46例大肠癌患者，25例外周血中CK－20mRNA表达阳性。大肠癌患者外周血CK－20mRNA的表达与Dukes分期关系为：A组20．0％（1／5），B期27．3％（3／11），C期61．1％（11／18），D期83．3（10／12）；其中C，D期与A，B期比较差异有高度显著性（P＜0．01）。大肠癌患者血浆IL－10浓度明显高于健康查体者，且与Dukes分期显示相关。外周血CK－20mRNA阳性表达的大肠癌患者血浆IL－10水平高于阴性者。结论 联合检测大肠癌患者外周血CK－20mRNA与IL－10，掌握检测大肠癌转移的相关指标，可以及时全面地了解大肠癌患者病情进展情况。     

运用荧光PCR进行大肠癌患者外周血中CK20表达的研究

目的 探讨荧光PCR法检测大肠癌患者外周血中CK20的表达情况并分析其与微转移的关系。方法 运用荧光RT—PCR技术对大肠癌患者外周血CK20的表达进行检测。结果 40例大肠癌患者外周血中检出CK20表达的有26例，检出率为65％。结论 运用荧光RT—PCR技术检测外周血中CK20的表达可以监测癌症微转移的发生，适于临床推广。     

CK20mRNA在胃癌患者外周血中的表达及及其临床意义

目的：研究胃癌患者外周血中CK20mRNA表达以判断癌细胞有无血行播散。方法：采用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）的方法,对胃癌30例,原发性肝细胞肝癌5例、对照组（非癌肿）10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因CK20mRNA进行检测。结果：对照组（非癌肿）10例及原发性肝细胞肝癌5例手术前、后外周血中CK20mRNA均为阴性表达。胃癌组30例,外周血中CK20mRNA手术前阳性表达率26．7％（8／30）,手术后48小时阳性表达率则为33．3％（10／30）。胃癌外周血中CK20mRNA的阳性表达率与细胞病理分化程度无关,与UICC病理贫苦无关,但与肝脏转移有关。结论：胃癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达可作为癌细胞血行播散的标志;有助于判断胃癌的预后;有助于鉴别原发性肝细胞肝癌和胃癌肝转移。胃癌手术中应采用“不接触肿瘤的游离技术”以养活癌细胞的播散。     

大肠癌患者外周血中癌细胞角蛋白20的检测

目的 :以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测外周血大肠癌细胞 ,探讨大肠癌患者外周血中癌细胞存在的临床意义。方法 :应用RT PCR方法检测 47例不同Dukes分期结肠癌患者及其肝转移患者外周血中大肠癌细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 ) ,并以大肠癌组织 (2 0例 )和正常健康人外周血 (2 0例 )为对照。结果 :正常健康人外周血中未见CK2 0mRNA表达 ,大肠癌患者外周血中CK2 0mRNA检出率达 40 4% (19/ 47) ,DukesB ,C ,D期患者外周血CK2 0mR NA检出率分别为 2 5 0 % (5 / 2 0 ) ,41 2 % (7/ 17)和 87 5 % (7/ 8) ,(P <0 0 5 )。肝转移患者CK2 0mRNA检出率为87 5 % (7/ 8) ,无肝转移患者检出率为 30 8% (12 / 39) (P <0 0 1)。结论 :CK2 0可作为肿瘤标志物 ,用于检测外周血中的大肠癌细胞 ,预测肿瘤复发及转移 ,识别高危患者     

大肠癌患者外周血CK20表达及p53基因突变的研究

目的建立高效,快速的外周血Cytokeratin20(CK20)表达的检测方法,探讨大肠癌患者外周血中CK20的表达与微转移的关系,研究大肠癌与P53基因突变的关系.方法,运用荧光监测技术结合RT-PCR,检测36例大肠癌患者术前后不同时间外周血中的CK20的表达,用SSCP技术对大肠癌患者进行P53基因突变检测.结果36例患者术前的外周血中检出CK20表达的有27例,阳性率为75%手术后24h患者外周血中检出CK20表达的有30例,阳性率为83.3%,术后早期化疗结束后仅13例为阳性,阳性率为36%.36表达可以监测癌症微转移的发生,简便快速,检出率高.     

大肠癌患者手术前后血循环中癌细胞CK20m RNA检测的临床意义

目的:研究手术对大肠癌患者血循环中癌细胞的影响。方法:应用RT-PCR技术,检测82例大肠癌患者术前和术后血循环中CK20mRNA的表达。结果:在所有大肠癌患者血循环中术前有42.7%的患者CK20mRNA表达阳性,CK20mRNA阳性检出率与Dukes分期、淋巴结转移、肝转移有显著性差别。手术后在所有大肠癌血循环中有59.8%的患者CK20mRNA表达阳性,较术前阳性表达明显增多(P<0.05)。结论:血循环中癌细胞的存在是大肠癌的一种常见的早期事件,手术刺激可增加肿瘤细胞向血循环中释放。     

大肠癌组织血管生成与患者外周血CK20mRNA表达的临床研究

目的观察大肠癌组织中微血管密度、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达与大肠癌患者外围血癌细胞微转移的关系.方法采用S-P免疫组织化学法检测了58例大肠癌组织中的微血管密度(MVD)和VEGF的表达,用巢式RT-PCR法检测了大肠癌患者外周血中癌细胞微转移情况并分析其与病理指标的关系.结果 58例大肠癌组织中35例高中分化MVD计数为30.2±12.7,低分化大肠癌23例MVD计数为86.6±19.1;26例大肠癌组织中VEGF呈阳性染色(44.8%).MVD计数及VEGF阳性表达与大肠癌分化程度、Dukes分期、有无区域淋巴结转移及远处转移密切相关(P<0.05或P<0.01).58例大肠癌患者外周血中32例CK20mRNA阳性表达(32/58),术后48 h有35例阳性表达(35/58),其中根治性切除组有21例阳性表达(21/44),非根治性手术组12例阳性表达(12/14),21例根治性切除患者术后7～14 d有11例转为阴性,12例非根治性切除患者术后7～14 d有11例阳性表达.CK20mRNA阳性表达与大肠癌病理分化程度无关,但与Dukes分期、区域淋巴结转移及远处转移情况相关(P<0.01).CK20mRNA阳性表达患者大肠癌组织中MVD计数(88.5±15.1)与VEGF阳性表达率(65.6%)明显高于CK20mRNA阴性表达患者的MVD计数(31.0±12.9)和VEGF阳性表达率(19.2%)(分别P<0.01,P<0.001).结论大肠癌组织中MVD和VEGF阳性表达与大肠癌的病理分化程度、Dukes分期、淋巴结及远处转移情况相关.大肠癌组织血管生成与周围静脉血中癌细胞微转移情况密切相关.CK20mRNA的检测对大肠癌预后判断、疗效评估及指导综合治疗有重要意义.     

大肠癌患者外周血中CK20 mRNA检测的临床意义

目的　探讨大肠癌患者外周血微转移的检测及临床意义。方法　应用反转录聚合酶链反应 (RT-PCR) ,检测 4 7例大肠癌患者外周血中CK2 0mRNA的表达。结果　 4 7例病人外周血中查出CK2 0阳性表达 2 7例 ,阳性率 5 7.5 %。CK2 0阳性检出与Dukes分期、淋巴转移有关而与肿瘤病理分化程度无关。结论　CK2 0mRNA可作为检测大肠癌病人外周血中微转移的良好指标 ,外周血中CK2 0mRNA检测有助于识别具有复发或远处转移倾向的大肠癌病人。     

定量RT-PCR检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

目的:检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床价值.方法:采用实时荧光定量RT-PCR法检测51例经病理学确诊的结直肠癌患者和30例健康对照者外周血CK20 mRNA的表达水平.结果:结直肠癌患者中CK20 mRNA阳性率为27.45%,而健康对照组阳性率为6.67%,两者相比差异有统计学意义(P<0.025).随着临床分期的提高,患者外周血中CK20 mRNA的表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义(P>0.05).Dukes'C期与D期患者中>10拷贝/ml者高于A期与B期患者.结论:检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达水平可发现早期脱落的肿瘤细胞,对肿瘤微转移的诊断有一定的提示意义.     

膀胱癌患者外周血特异性标记物CK-20 mRNA检测及临床意义

目的膀胱癌患者外周血中特异性角蛋白上皮CK—20mRNA在诊断中的意义。方法以半巢式RT-PCR检测外周血有核细胞成分中CK—20mRNA。结果91例膀胱癌中检出CK—20mRNA 37例,阳性率41%,其中证实有转移的20例中17例阳性(85%),25例健康对照组均为阴性。外周血细胞CK—20mRNA的阳性率在远处转移的病例中显著升高(P<0.01)。结论检测膀胱癌患者外周血CK—20mRNA对早期发现膀胱癌细胞的血行播散有重要参考价值。