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1.
非小细胞肺癌病人痰标本p16和MGMT基因的异常甲基化 总被引:1,自引:0,他引:1
痰脱落细胞学检查以其方例、无创的特点成为目前诊断肺癌的最基本手段之一,然而它的敏感性比较差。近年来分子肿瘤学的理论和技术进展为我们提供了利用分子病理学标志物发现早期肺癌的可能。研究表明,某些基因的异常甲基化是肺癌中常见的分子水平改变;其包括p16INK4a(p16)和O^6甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O^6-methyl-guanine-DNA methyltransferase,MGMT)。在这项研究中,我们从肺癌病人的痰标本脱落细胞中分离制备DNA,检测了p16和MGMT这两个基因的启动子区的甲基化状态。采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)的方法,我们对71例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)病的痰标本进行了分析。所有被检NSCLC病人均有明确的组织病理学诊断,其中,肺鳞癌39例,肺腺癌25例,腺鳞癌7例。这71例病人的痰标本仅有31例(43.6%)被细胞学检查诊断为癌。我们的分析资料显示:在71例痰标本中p16基因的高甲基化检出率为83.1%(59/71),MGMT的高甲基化检出率为59.2%(42/71)。在被测痰细胞DNA中,这两个基因(其中一个或两者)的启动子区异常甲基化的综合检出率高达90.1%(64/71);而且与相应肿瘤组织中这两个基因的甲基化状态存在很好的符合率。这项研究结果表明,利用MSP技术检查痰脱落细胞DNA中p16和MGMT两基因的异常甲基化是一项敏感、无创、易行的方法。它将有助于非小细胞肺癌早期发现,以及肺癌高危人群的筛查。 相似文献
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目的:检测非小细胞肺癌(non—small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血血浆中p16基因、O^6-甲基乌嘌呤-DNA甲基转移酶(O^6-methylguanine—DNA methyhransferase,MGMT)基因启动子的甲基化状态,探讨p16、MGMT基因启动子的异常甲基化在NSCLC筛查及早期诊断中的意义。方法:利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测NSCLC患者外周血血浆p16、MGMT基因启动子的甲基化状态。结果:65例NSCLC血浆样品中分别发现19例(29.23%)p16基因启动子异常甲基化和16例(24.62%)MGMT基因启动子异常甲基化,45例正常对照血浆组未检测到p16、MGMT基因启动子的异常甲基化(P〈0.05),血浆中两基因甲基化检出率与NSCLC的分型及临床分期无明显相关性(P〉0.05)。结论:利用巢式甲基化特异性PCR法检测外周血血浆中p16、MGMT基因启动子的甲基化,可为NSCLC的筛查、早期诊断及预后判断提供有价值的信息。 相似文献
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检测痰脱落细胞p16基因甲基化对周围型肺癌的诊断价值 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨检测痰脱落细胞p16基因甲基化对周围型肺癌的诊断价值。方法 应用甲基化特异性PCR(methylation specificPCR ,MSP)对 5 0例周围型肺结节患者及 2 0例正常人痰脱落细胞p16基因甲基化改变进行检测 ,将检测结果与术后病理报告相对照。结果 周围型肺癌痰脱落细胞 p16MSP阳性率( 2 7/ 44 ,61.4%)明显高于良性周围型肺结节 ( 1/ 6,16.7%)及正常人 ( 3 / 2 0 ,15 .0 %) ( χ2 值分别为 4.2 81和11.869,P <0 .0 5 ) ,良性周围型肺结节 p16MSP阳性率与正常人无显著性差异 ( χ2 =0 .13 6,P >0 .0 5 )。鳞癌和腺癌患者痰脱落细胞 p16MSP阳性率无显著性差异 ( χ2 =3 .416,P >0 .0 5 )。如果以痰脱落细胞 p16MSP阳性作为判断肺结节恶性的标准 ,其诊断周围型肺癌的阳性预测值为 96.4%,阴性预测值 2 2 .7%,灵敏度 61.4%,特异度 83 .0 %。结论 检测痰脱落细胞 p16基因甲基化对周围型肺癌具有辅助诊断价值 相似文献
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肺癌患者组织样品中p16基因的异常甲基化 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 分析肺癌患者组织样品中p16基因启动子区域异常甲基化的改变情况,评价该指标作为辅助临床诊断的分子标记物的价值。方法 运用甲基化特异性PCR技术,检测51例原发性肺癌患者的肿瘤组织、外周血血浆和痰标本中p16基因启动子区域的异常甲基化改变。结果 在43例肿瘤组织、36例血浆和39例痰标本中检测到了p16基因异常甲基化。凡在肿瘤组织检出p16基因甲基化阳性的病例,其血浆和(或)痰标本也为阳性;而肿瘤组织p16基因甲基化阴性的病例,其血浆和痰标本也为阴性。将血浆和痰标本的p16甲基化分析与痰细胞学检查相结合,可以发现92.2%的肺癌病例。结论 利用半巢式甲基化特异性PCR进行的血浆和痰标本p16基因甲基化分析,有可能成为辅助肺癌诊断的分子生物学指标。 相似文献
5.
p16基因5′-CpG岛甲基化对肺癌的早期诊断价值 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 检测 p16基因在肺癌患者癌组织及相应痰液脱落细胞中甲基化状态 ,以探讨其在肺癌早期诊断中的价值。方法 采用甲基化敏感的核酸内切酶 Sma 、Sac 酶切基因组 DNA,对 5 6份肺癌组织及相应痰液、6 0份非恶性病变肺组织及 2 8份痰液进行 PCR分析。结果 p16基因在肺癌组织中甲基化率为 30 .4% (17/5 6 ) ,相应的痰液中为 2 8.6 % (16 /5 6 ) ,两组差异无显著性 (χ2 =0 .0 430 ,P=0 .836 )。 6 0份非恶性病变肺组织甲基化率为 3.3% (2 /6 0 ) ,2 8份痰液无 1份发现 p16基因甲基化。结论 肺癌组织及相应的痰液脱落细胞 p16基因 5′- Cp G岛甲基化率相似 ,即痰液脱落细胞 p16基因甲基化状态可以反映肺癌组织 p16基因甲基化状态。因此 ,检测痰液脱落细胞 p16基因甲基化状态有助于肺癌的早期诊断 相似文献
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肿瘤抑癌基因p16对于肺癌的早期诊断非常重要,启动子的异常甲基化、第二号外显子的纯合子缺失、基因点突变、蛋白及mRNA的缺失表达都与肺癌的发生关系密切,且与肺癌的基因治疗、药物靶向治疗有关. 相似文献
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背景与目的:探讨食管鳞状细胞癌中06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine DNA methyltransferase,MGMT)基因和p16基因启动子的甲基化情况,了解这两个基因启动子甲基化与食管癌发生的关系. 材料与方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法分别对44例食管鳞状细胞癌组织进行MGMT基因和p16基因的甲基化检测,并对其甲基化频率分别进行差异性检验和关联性分析.结果:在44例食管鳞癌组织中,有18例(40.9%)出现MGMT基因启动子甲基化,23例(52.3%)出现p16基因启动子甲基化,7例(14.9%)两基因均出现甲基化,10例(22.7%)两基因均未出现甲基化.MGMT和p16基因启动子甲基化率差异无统计学意义(P>0.05).MGMT和p16基因启动子甲基化无明显相关关系(P>0.05).结论:MGMT和p16基因启动子甲基化均可能与食管鳞状细胞癌发生、发展过程密切相关,但二者是相互独立进行的. 相似文献
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非小细胞肺癌p16基因甲基化及缺失的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 研究p16基因在非小细胞肺癌组织中的甲基化和缺失情况,探讨其在肺癌诊断中的价值。方法 应用甲基化相关的PCR及双重PCR,检测50例肺癌组织和54例正常肺组织中p16基因第1外显子5′端启动子区域CpG岛甲基化及第2外显子缺失情况。结果 p16基因在非小细胞肺癌组织中甲基化率为32.0%(16/50)。缺失率为28.0%(14/50);54例正常肺组织甲基化率为3.7%(2/54),缺失率为0,二组比较,甲基化率(Fisher's exact=0.000)及缺失率(Fisher's exact=0.000)均有显著性差异。结论 甲基化和缺失是非小细胞肺癌p16基因失活的主要形式,检测p16基因甲基化和缺失状态可能有助于肺癌的诊断。 相似文献
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肺癌穿刺标本p16基因mRNA表达的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
p16基因作为调控细胞周期的抑癌基因[1] ,在肺癌发生发展中起重要作用 ,其与Rb基因有可能共同构成肺癌基因分型诊断的基础[2 ] 。肺癌早期病理诊断一直是国内外医学界的难题 ,采用肺癌早期诊断立体定位仪[3] ,能为 1cm左右肺小病灶快速准确三维立体定位穿刺进行细胞病理诊断。我们采用RT PCR方法 ,研究肺癌微小量穿刺标本中p16基因的mRNA表达情况 ,并与我们前期研究的肺癌标本p16基因表达异常情况进行对比 ,探索RT PCR在肺微小量穿刺标本p16基因mRNA表达检测中的作用 ,以及肺癌穿刺标本p16基因mRNA表达在肺… 相似文献
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1 IntroductionThemostimportantmeanstorevealanddiagnoseperipherallungneoplasmareX rayphotographyandotherimagingstudies.It’swellknownthatitiseasytofindanoduleoramass ,butdifficulttomakethediag nosisbyradiography .Evencomputertomography (CT)andmagneticresonanceimage (MRI)technologycouldhardlymakeprecisejudgementofasolitarypulmonarynodule (SPN) .Investigatorshavecometorealizethatthealterationsofoncogenesandanti oncogenesareim portantfactorsintheoncogenesisand progressionofneoplasm ,sopeoplet… 相似文献
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痰液沉渣切片和痰涂片检查诊断肺癌的比较性研究 总被引:2,自引:2,他引:2
目的 寻找更快捷准确的痰液检查肺癌癌细胞的方法。方法 对经手术切除病理确诊的 12 0例肺癌患者 ,进行痰液涂片和痰液沉渣切片两种方法检查癌细胞的比较性研究。结果 ( 1) 12 0例肺癌患者痰涂片发现癌细胞 3 8例 ( 3 1.67%) ,而痰沉渣切片检出癌细胞 86例 ( 71.67%) (P <0 .0 0 1)。两种方法联合检出癌细胞 10 9例 ,检出率为 90 .83 %,显著优于单纯的痰沉渣切片法 (P <0 .0 0 1)。 ( 2 )痰沉渣切片HE染色能明确肺癌组织学类型的为 5 5 /86例 ( 63 .95 %) ,而痰涂片仅能分型 6/3 8例 ( 15 .79%) (P <0 .0 0 1)。 ( 3 )痰液沉渣切片可进一步作免疫组化染色 ,绝大部分HE染色不能分型的病例 ( 2 9/3 1)得以明确分型。结论 痰液沉渣切片方法简便、取材全面、癌细胞检出率高 ,并且能进行组织学分型 ,值得临床上推广应用 相似文献
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肺癌患者外周血血浆中p16基因异常甲基化的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 分析肺癌患者外周血血浆中p16基因启动子区异常甲基化发生情况,探讨血浆中p16基因异常改变作为肺癌临床辅助诊断分子生物学标志物的可能性。方法 利用半巢式甲基化特异性PCR技术,检测了137例肺癌患者血浆和112例相对应肿瘤组织DNA p16基因的异常甲基化情况。结果 在血浆和肿瘤组织中的p16基因甲基化检出率分别为75.2%和80.4%;其中鳞癌、腺癌、腺鳞癌和小细胞肺癌患者血浆标本的阳性率分别为77.9%,65.1%,75.1%和91.7%。血浆DNAp16基因甲基化仅在肿瘤组织存在同样甲基化的病例中被检出。血浆和肿瘤组织中,p16基因的甲基化异常改变与肿瘤的分期、分型无明显相关性。结论 分析血浆DNA的p16基因异常甲基化有可能成为辅助肺癌诊断的有效方法之一。 相似文献
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目的:探讨血浆中脆性组氨酸三连体基因(fragile histidine triad,FHIT)、p16基因、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因(O6-methyl-guanine-DNA methyltransferase,MGMT)及信号转导通路基因(rasassociation domain family1A,RASSF1A)等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specifi c PCR,MSP)法,检测53例肺癌组织和对应的血浆标本以及24例肺良性病变组织中FHIT、p16、MGMT和RASSF1A4种基因启动子区甲基化状态。结果:肺癌组织中FHIT、p16、MGMT和RASSF1A基因启动子区甲基化检出率分别为39.6%(21/53)、49.1%(26/53)、35.8%(19/53)和18.9%(10/53);其对应的血浆标本中这4个基因的甲基化检出率分别为35.8%(19/53)、49.1%(26/53)、28.3%(15/53)和17.0%(9/53),两组标本甲基化检出率存在着较好的一致性(P>0.05)。24例肺良性病变组织标本和血浆标本中分别有同1例(0.04%)出现p16基因甲基化,与肺癌组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4项指标联合检测可显著提高肺癌检测的敏感度(73.6%)和特异度(95.8%)。p16基因在血浆中甲基化检出率与患者吸烟指数有明显相关性(P<0.05)。结论:血浆中多个肺癌相关基因甲基化联合检测有望成为肺癌筛查、早期诊断简便有效的指标。 相似文献
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(目的〕了解分子生物学检测方法是否对肺癌的诊断具有辅助价值。(方法)痰液处理方法为痰液0.5毫升加入痰处理液制备细胞沉淀液,酚氯仿提取DNA;SSCP-PCR银染和RFLP-PCR方法对痰液中P53、K-ras突变情况进行检测。(结果)在确诊的76例肺癌病人中,p53突变率为40.8%,K-ras突变率为25.0%,突变与肺癌类型、分期未见明显相关,其中有29例病人痰液普通脱落细胞学检测明性.痰液p53或K-ras突变阳性,最后经纤支镜刷检,活检部分经过手术征实为肺癌,有12例经手术证实为Ⅰ~Ⅱ期的相对早期的肺癌。(结论)痰液SSCP-PCR、RELP-PCR方法检测癌基因突变具有简便、实用、准确、可行的特点。对部分疑为肺癌而痰液脱落细胞学检测阴性的病人具有一定的辅助诊断价值。 相似文献
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液基细胞学检查系统在肺癌患者痰液检查中的临床应用价值 总被引:6,自引:0,他引:6
背景与目的传统的痰涂片内常混有大量粘液、血液、各种炎性细胞及坏死细胞碎屑,故阳性诊断率较低。液基细胞学检查系统(liquid-based cytologic test,LCT)已成功而广泛地应用于官颈细胞学诊断,而用于痰液细胞学诊断国内外报道均较少。本研究的目的是探讨LCT在肺癌患者痰液检查中的应用价值,寻找早期诊断肺癌的新途径。方法比较LCT与传统痰涂片方法应用于肺癌诊断的镜下特点及诊断率。结果LCT法涂膜面积明显缩小。背景干净,图像清晰,三维立体感突出。LCT对小细胞肺癌的诊断率显著高于传统涂片法(P〈0.05)。LCT与传统涂片法联合应用后,对肺癌的阳性诊断率可高达85.1%,明显优于单纯的传统涂片法(63.4%)(P〈0.01)。结论LCT在痰液制片、染色等方面便于实施质量控制,是值得推广的一种新技术,与传统涂片法联合应用具有重要的临床价值。 相似文献