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1.
目的:探讨Fas(CD95)在骨髓增生异常综合征(MDS)发病机制中的作用及临床意义。方法:用酶联免疫夹心法检测25例MDS患者血浆可溶性Fas(sFas),用流式细胞术检测骨髓(BM)CD34+细胞、CD34-细胞、外周血单个核细胞(PBMNCs)Fas抗原的表达。结果:MDS难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)/转变中的RAEB(RAEB-t)组患者骨髓CD34+细胞百分率显著高于对照组及难治性贫血(RA)组(均为P<0.01);RA组及RAEB/RAEB-t组骨髓CD34+细胞Fas表达显著高于对照组(分别为P<0.01,P<0.05),其中RA组高于RAEB/RAEB-t组,有统计学意义(P<0.05);RA组患者骨髓CD34-细胞Fas表达高于对照组及RAEB/RAEB-t组患者(均为P<0.05)。两患者组血浆sFas显著低于正常对照(均为P<0.01),sFas水平与患者血红蛋白(Hb)浓度呈正相关(r=0.67,P<0.01)。结论:MDS患者骨髓、外周血细胞Fas抗原广泛表达,Fas表达异常与MDS的发生、发展密切相关。  相似文献   

2.
【目的】探讨有效的体外培养扩增CD4^+CD25^+Treg的方法。【方法】收集健康志愿者外周血5例,免疫磁珠法分选出CD4^+CD25^+Treg。将实验分为3组,第1组在CD4^+CD25^+Treg中加入100nmol/L rapamycin(1μg/mL)和包被了CD3/CD28单抗的磁珠培养3周,第8天开始加入1000U/mL的IL.2,第2组培养条件除不加rapamycin外其余与第1组相同,第3组培养细胞为CD4^+CD25^+细胞,培养条件同第1组。培养第7、14、21天收集细胞计数,第21天收集细胞行流式细胞术三标法检测CD4、CD25、FOXP3的表达。MTY法检测体外扩增的CD4^+CD25^+Treg对自体和异体的CD4^+T细胞增殖的抑制作用。【结果】三组细胞均有明显的扩增。加rapamycin培养的CD4^+CD25^+Treg细胞的扩增率比不加rapamycin扩增倍数低,但细胞的纯度明显增加。CD4^+CD25^+T细胞组在培养第1周扩增迅速,从第2周开始增殖减慢,其中CD4^+CD25^+Treg细胞的比例较培养前无明显的差别。三组至第3周时扩增倍数分别为89&#177;21、338&#177;78、216&#177;55(F=484.655,P〈0.0001),细胞的纯度分别为84.32%&#177;4.62%、34.04%&#177;5.78%、0.68%&#177;0.39%(F=24.660,P〈0.0001)。体外抑制实验显示体外扩增的CD4^+CD25^+T细胞对自体和异体的CD4^+T细胞增殖均有明显的抑制作用,并且随着效靶比浓度的降低而降低。在CD4^+T/Treg比例为8:1、4:1、2:1、1:1时对自体CD4^+F细胞的抑制率分别为9.65%、16.43%、28.75%、55.34%,对异体CD4^+T细胞的抑制率分别为6.43%、14.72%、26.47%、50.25%,而且在各浓度梯度其抑制作用在自体和异体之间均无明显的差异。【结论】我们采用rapamycin+CD3/CD28单抗标记的磁珠+IL-2在体外成功扩增了CD4^+CD25^+Treg,其扩增的倍数为89.4&#177;20.53,具有免疫抑制功能,有望进一步应用于临床。  相似文献   

3.
目的:探讨TNF—α和Fas/FasL的表达及骨髓细胞凋亡与骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)发生发展的关系。方法:采用ELISA法检测MDS患者骨髓单个核细胞培养上清液中TNF-α浓度,采用流式细胞术测定骨髓CD34^+细胞Fas、FasL的表达率和细胞凋亡率。结果:各型MDS惠者骨髓单个核细胞培养上清液中TNF-α浓度和CD34^+细胞Fas、FasL的表达率均明显高于正常对照组(P〈0.01)。其中RA/RAS组的TNF-α浓度和CD34^+细胞Fas^+表达率均明显高于RAEB和RAEB-t组(P〈0.001),而RAEB与RAE-t组组间无明显差异(P值分别为0.115和0.239);RAEB和RAEBt组细胞的CD34^+ FasL^+表达率明显高于RA/RAS组(P值分别为0.001和0.010)。RA/RAS和RAEB组的细胞凋亡率均高于对照组(P值均为0.000),而RAE-t组的细胞凋亡率与对照组相近(P=0.216)。各型MDS患者TNF-α浓度与CD34^+Fas^+表达率呈正相关(r=0.570,P=0.012)。而CD34^+细胞凋亡率与TNF-α浓度或CD34^+Fas^+表达率之间均无直线相关关系(P值分别为0.103和0.091)。结论:MDS患者骨髓细胞的调亡受多因素的调节.TNF-α与Fas/FasL系统介导的凋亡以及机体对其调控的失常参与了MDS骨髓无效造血的病理生理过程。  相似文献   

4.
目的观察多发性抽动症(Tourette’s syndrome,TS)患儿外周血中T淋巴细胞亚群CD4^+CD45RA^+、CD4^+CD45RA^+细胞的表达及临床意义。方法利用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测34例TS患儿外周血中T淋巴细胞亚群CD4^+CD45RA^+、CD4^+CD45RA^+细胞的表达,同期检测35名年龄、性别无差异的健康儿童为对照。结果TS组外周血中CD4^+CD45RA^+细胞百分率(63.70±5.57)较正常对照组(45.39±7.70)高,t=10.29,P〈0.01;TS组外周血中CD4^+CD45RO^+细胞百分率(17.09±4.46)较正常对照组(41.99±8.47)低,t=11.11,P〈0.01;TS组CD4^+CD45RA^+/CD4^+CD45RO^+比值(4.32±1.51)较正常对照组(1.21±0.37)高,t=7.78,P〈0.01;TS组CD4^+CD45RA^+、CD4^+CD45RO^+双阳性率(14.63±7.56)较正常对照组(9.37±3.20)高,t=2.89,P〈0.05;均有显著统计学意义。结论TS患儿存在免疫功能紊乱,主要表现为外周血中CD4^+CD45RA^+细胞百分率明显增高,CD4^+CD45RO^+细胞百分率明显降低,TS患儿CD4^+CD45RA^+/CD4^+CD45RO^+失衡,TS患儿CD4^+CD45RA^+、CD4^+CD45RO^+双阳性率较高,这可能在TS发病机制中起着重要作用。  相似文献   

5.
目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者血浆白细胞介素12(IL-12)的水平及其临床意义。方法:用酶联免疫夹心法(ELISA)检测25例MDS患者及24名正常人血浆中IL-12(p70)水平,用流式细胞仪检测T细胞亚群。结果:MDS难治性贫血(RA)组患者血浆IL-12(p70)水平明显高于正常对照组及MDS难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)/转变中的RAEB(RAEB-t)组(均为P<0.01),RAEB/RAEB-t组患者血浆IL-12(p70)水平低于对照组(P<0.05)。MDS患者IL-12(p70)水平与CD8细胞表达率呈正相关(r=0.41,P<0.01),与CD4表达率呈负相关(r=-0.53,P<0.01)。结论:IL-12与MDS的发生、发展密切相关。  相似文献   

6.
摘要:目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓中CD133的表达及其临床意义。方法应用流式细胞仪采用直接
免疫荧光标记法,分别测定31例难治性贫血伴幼稚细胞增多(RAEB)、10例难治性血细胞减少伴多系发育异常(RCMD)
以及11例再生障碍性贫血患者骨髓中CD133+细胞和CD34+/CD38-细胞比例,对比分析CD133及CD34/CD38在不同亚型
MDS中的表达及临床意义。结果在RAEB型MDS患者骨髓有核细胞中,CD133阳性细胞平均占6.75%,RCMD患者平
均占1.41%,而再生障碍性贫血对照组占2.70%,RAEB组显著高于其他两组(P<0.05);再障对照组与RCMD组之间无显
著性差异(P>0.05);CD34+/CD38-细胞比例在3组中均小于1%,统计学上无显著性差异(P>0.05)。结论CD133在MDS
的进展类型RAEB患者骨髓细胞中高表达,CD133有助于RAEB分型诊断;而CD34+/CD38-标记在MDS分型诊断中并无
价值。  相似文献   

7.
目的研究类风湿关节炎(RA)患者外周血糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关基因(GITR)在CD4^+CD25^+T细胞中的表达及细胞因子IL-6、IL-17的浓度水平变化,探讨两者在RA发病中的作用。方法流式细胞术检测GITR在CD4^+CD25^+T细胞的阳性表达率,ELISA法检测血清中IL-6、IL-17的浓度水平并分析GITR阳性表达率与RA患者DAS28的关系。结果 RA组中的CD4^+CD25^+Treg细胞表面GITR阳性表达率(3.03±1.95)%明显低于健康对照组(7.68±2.01)%,RA组中IL-6,IL-17浓度水平明显高于健康对照组(P〈0.05)。GITR阳性表达率与DAS28呈明显负相关。结论 RA患者GITR+CD4^+CD25^+T细胞阳性表达率低下,与RA发病及疾病的活动性有一定的相关性。  相似文献   

8.
董敏  王京华  晋青 《黑龙江医学》2005,29(12):889-890
目的探讨免疫细胞化学法在骨髓增生异常综合征(MDS)的诊断价值。方法应用一组单克隆抗体采用生物素-亲和素桥联碱性磷酸酶酶标法对14例MDS患者和7例正常人进行免疫表型检测。并且对免疫细胞化学法和骨髓普通瑞氏染色在淋巴样小巨核细胞检出率方面进行比较分析。结果免疫细胞化学法可提高淋巴样小巨核细胞检出率。MDS患者CD 41+淋巴样小巨核细胞表达异常增高,且随RA/RA S向RAEB/RAEB-t进展,表达增高。CD 34和CD 13在RAEB/RAEB-t阶段表达异常增高;CD 33表达较正常人异常增高。随着RA/RAS向RAEB/RAEB-t病情进展,CD 33、CD 13表达逐渐增加;CD 14、CD 41无表达异常。结论免疫细胞化学法具有操作简便快捷,可进行形态学识别等优点,可提高淋巴样小巨核细胞检出率。免疫表型检测可用于MDS的诊断。  相似文献   

9.
目的:探讨胰腺癌患者外周血高表达CD25的CD4+调节性T(CD4^+CD25^highT)细胞比率变化特点及其临床意义。方法:用流式细胞术检测58例胰腺癌患者和14名健康人外周血CD4^+CD25^highT细胞水平,进行分层分析,初步探讨其表型特征。结果:胰腺癌患者外周血中CD4^+CD25^highT细胞占CD4^+T细胞的百分比率为(15.61±13.97)%,明显高于健康人群(2.53±1.26)%(P〈0.01);CD4+CD25highT细胞具有调节性T细胞的表面标记特征,即HLA-Ⅰ、CD45 RO阳性,CD45 RA、CD69阴性。人白细胞DR抗原的表达水平在不同个体间的CD4^+CD25^highT细胞差异较大。这群细胞细胞膜表面共刺激分子CD80、CD86表达水平很低,而共刺激分子CD152(CTLA-4)在不同个体间的CD4^+CD25^highT细胞差异较大。胰腺癌Ⅰ-Ⅱ期患者,其外周血CD4^+CD25^highT细胞占CD4^+T细胞的比率为(18.75±20.76)%;Ⅲ期为(13.71±9.53)%;Ⅳ期为(14.20±7.46)%;各期CD4^+CD25^highT细胞占CD4^+T细胞的比率均显著高于健康人群水平(P〈0.01)。结论:胰腺癌患者外周血CD4^+CD25^highT细胞水平明显升高,可能与肿瘤免疫功能低下及肿瘤发生、发展密切相关。  相似文献   

10.
章圣辉  韩义香  吴建波 《浙江医学》2006,28(10):800-802
目的 探讨CD28、CTLA-4(CD152)、B7—1(CD80)及B7—2(CD86)共刺激分子在强直性脊柱炎(AS)患者的外周血淋巴细胞上的表达异常与免疫功能紊乱的关系。方法 采用流式细胞仪检测69例AS患者和50例健康对照者CD28和CTLA-4在外周血CD3^+、CD4^+T和CD3^+、CD8^+T细胞上的表达及CD80和CD86在CD19^+B细胞上的表达。用ELISA法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平。结果 AS患者CD3^+、CD4^+T和CD3^+、CD8^+T细胞上的CD28和CTLA-4,CD19^+B细胞上CD80和CD86的表达较正常对照组显著增高(P〈0.05);AS患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平较正常对照组显著增高(P〈0.01)。结论 AS患者T细胞上表达过量的CD28,与B细胞的B7结合,激活T、B细胞,产生大量免疫球蛋白,同时刺激激活的T细胞表达CTLA-4,使T细胞不能充分表现效应功能。  相似文献   

11.
目的判断骨转移瘤患者经过放射性核素89SrCl2治疗后免疫学指标CD4 ,CD8 及CD4 /CD8 的变化及该指标对治疗效果的监控作用。方法选择经临床确诊的应用89SrCl2治疗的患者及正常对照组各24例。用流式细胞仪分别测定各患者治疗前、后及正常对照组CD4 ,CD8 及CD4 /CD8 值。每例患者均于治疗后第2,4和6个月行全身骨显像,记录骨转移病灶数及计算平均值。结果正常对照组CD4 ,CD4 /CD8 值高于骨转移瘤患者,而CD8 值低于骨转移瘤患者(P<0.05)。89SrCl2治疗后病灶数随CD4 增加、CD8 降低、CD4 /CD8 增加而相应减少。第4个月89SrCl2作用达峰值,各指标也达到极限值。结论CD4 ,CD8 ,CD4 /CD8 可以灵敏反映89SrCl2治疗效果,客观反映骨转移瘤病灶的变化。  相似文献   

12.
BACKGROUND: The relationship between oral lesions arising from HIV infection and CD4/CD8 cell ratios is of relevance in clinical assessment of immune suppression. OBJECTIVE: To correlate the prevalence of oral manifestations arising from HIV infection and the levels of CD4/CD8 cell ratios. DESIGN: A cross-sectional study. SETTING: Kenyatta National Hospital, Nairobi, Kenya. SUBJECTS: Two hundred and seven HIV-infected patients in medical wards were recruited in the study. RESULTS: Seventy eight (37.7%) were male and 129 (62.3%) female, with an age range of 18-73 years (mean=34.81 years). Oral manifestations encountered with highest prevalence in the oral cavity included: hyperplastic candidosis (labial mucosa) 15%, erythematous candidosis (gingival) 5%, angular cheilitis 32.4%, herpes simplex (corner of the mouth) 0.5%, persistent oral ulceration (labial mucosa) 0.5%, Parotid enlargement 2% and Kaposis sarcoma (hard/soft palate) 2.9%. CONCLUSION: The prevalence of oral manifestations was higher with low CD4 count <200 cell/mm3 and mean CD4/CD8<0.39(95%CI 0.32-0.48).  相似文献   

13.
目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第1天加入IL-15,而拮抗1组和拮抗2组分别于培养第1、3天加入STAT5a封闭性肽。流式细胞仪检测细胞表型变化,3H-TdR掺入法检测IL-15诱导产生的Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western blot法检测细胞内p-STAT5的变化。结果与对照组比较,IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达上调,IL-15诱导生成的Tregs具有较天然Tregs稍弱的免疫抑制功能。Western blot检测结果显示,IL-15组p-STAT5表达较对照组明显上调。加入STAT5a封闭性肽后,拮抗1组和拮抗2组中CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达下调,但拮抗2组[细胞表型分别为(47.9±6.0)%、(20.7±3.4)%]改变较拮抗1组[细胞表型分别为(30.7±8....  相似文献   

14.
目的 用双向凝胶电泳-质谱法(2.DE/MS)分析人CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达的蛋白质组,建立二者之问的差异表达谱。方法 提取人脾脏源CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞总蛋白质,双向电泳分离蛋白,比较两种细胞的蛋白质组表达差异,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间问质谱(Matrix-assisted laser des-orpfion/ionization time of flying maass spectrometry,MAIDI-TOF-MS)进行鉴定。结果 胶图差异分析发现25个表达水平存在明显差异的蛋白质点,其中17个点在CD4^ CD25^-T细胞上调,8个点在CD4^ CD25^ T细胞上调。质谱初步鉴定出15个差异蛋白质点。结论 CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达蛋白质组存在差异,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究调节性T细胞功能相关蛋白质。  相似文献   

15.
目的观察益气健脾方药及高效抗逆转录病毒疗法(HAART疗法)对艾滋病(AIDS)患者纯真型和记忆型T淋巴细胞的影响。方法将研究对象分为HAART疗法组和HAART疗法加补中益气丸组,用流式细胞仪法分别在治疗0,12,24,36,48周测定2组患者的CD4、CD8T淋巴细胞的计数及CD4CD45ROT、CD4CD45RAT计数,并算出比值。结果 2组患者的CD4、CD8T淋巴细胞计数及比值在各观察时间段比较差异无统计意义,2组CD4CD45ROT在治疗48周时差异有统计意义,CD4CD45RAT在治疗36,48周时差异有统计意义。结论益气健脾方药同HAART疗法联用能使AIDS患者的CD4-CD45RAT提早出现,优于单纯HAART疗法。  相似文献   

16.
王鹏  阚全程  余祖江 《广东医学》2007,28(2):183-184
目的 探讨头孢地嗪(CDZM)对正常小鼠外周血中CD3 ,CD4 ,CD8 及CD4 /CD8 的影响.方法 采用完全随机实验设计,分设6组,对小鼠分别连续7 d注射胸腺肽(Thy)10 mg/kg、头孢地嗪(500,200,50 mg/kg)、头孢曲松500 mg/kg及生理盐水后,在第7,14,21天分别采集外周血,经流式细胞仪对小鼠外周血中CD3 ,CD4 ,CD8 ,CD4 /CD8 进行检测,观察头孢地嗪对机体免疫功能的影响.结果 CDZM具有较好的免疫调节作用,可明显地提高外周血CD4 /CD8 的比值,与Thy相比,CDZM对机体免疫系统的影响更为持久.结论 头孢地嗪可通过调整CD4 和CD8 之间的平衡,有效地提高机体的免疫功能.  相似文献   

17.
目的 研究HIV/AIDS患者外周血的CD4、CD8及病毒载量的相关性,并探讨其临床意义.方法 用流式细胞仪检测164例HIV/AIDS患者外周血的CD4、CD8及病毒载量,分析它们之间的相互关系.结果 CD4与病毒载量(LV)的结果比较显示随着CD4计数的上升病毒载量下降,但是CD4数值在200~400之间的区间内LV与CD4呈正比;CD4与CD8的结果比较显示从总体上观察CD4、CD8表现为正相关性,但是在CD4的200~400的区间CD8没有表现出明显的上升趋势;CD8与LV的结果显示在CD8数值的400~800的某一区间段CD8与LV呈正比,总体表现与病毒载量的关系十分复杂.结论 在艾滋病的发病过程中与CD4、CD8及病毒载量密切相关,CD4数值在200~400区间内,CD8与LV均表现为与其他区间不同变化规律.  相似文献   

18.
人CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞蛋白质组的双向电泳分析   总被引:3,自引:2,他引:1  
目的 用双向电泳技术分析人CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达的蛋白质组,建立二者之间的差异表达谱。方法 从人脾脏分选CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞,用双向电泳技术分析两种细胞蛋白质组的表达差异。结果 分选细胞纯度分别为CD4^ CD25^ T细胞82.3%,CD4^ CD25^-T细胞96.5%,双向电泳分析发现有4个蛋白点明显仅于CD4^ CD25^ T细胞检测到表达,有9个蛋白点明显仅于CD4^ CD25^-T细胞检测到表达。结论 CD4^ CD25^-T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达蛋白质组有明显差异。  相似文献   

19.
目的 探讨儿童肥大腺样体T淋巴细胞亚群免疫失衡与反复发作性分泌性中耳炎的关系.方法 72例反复发作性分泌性中耳炎患儿腺样体组织及34例非反复发作性分泌性中耳炎患儿腺样体组织.采用免疫组化方法检测上述二组T淋巴细胞CD4 +、CD8+的表达及CD4+/CD8 +值,统计分析二组之间是否有差别.结果 反复发作性分泌性中耳炎患儿腺样体组织中CD4+ 、CD8+细胞数及CD4+/CD8+ 分别为41.9±9.07,20.45±7.08,2.10±0.17;较非反复发作组17.4±6.85,13.02±5.88,1.33±0.11有显著性差异(P <0.05);其中CD4+细胞数明显多于CD8+细胞数.结论 反复发作性分泌性中耳炎的形成与T淋巴细胞亚群免疫失衡有关.  相似文献   

20.
目的 利用转化生长因子-β 1(TGF-β 1)体外诱导CD4 +CD25 -T细胞分化为CD4 +CD25 +调节性T细胞,通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制.方法 分选获取CD4 +CD25 -T细胞,根据诱导条件不同分为3组:对照组、无TGF-β 1刺激组和TGF-β 1组.检测CD4 +CD25 +T细胞比例,并用RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达水平.建立小鼠皮肤移植模型,于0、1、2、3 d输注上述细胞,观察皮肤移植物存活时间,并检测移植物的病理改变和受鼠外周淋巴细胞的增殖能力.结果 TGF-β 1组中CD4 +CD25 +T细胞比例与无TGF-β 1刺激组相近,但高表达Foxp3 mRNA(P <0.05).将培养的细胞输注给受鼠后发现,输注无TGF-β 1刺激组细胞的受鼠其移植物平均存活时间(mean survival time,MST)为(7.3±1.6)d,低于对照组(P <0.05);而输注TGF-β 1组细胞小鼠MST为(24.1±2.5)d,较对照组和无TGF-β 1刺激组明显延长(P <0.05).病理检测亦显示TGF-β 1组受鼠移植物结构完整,无明显淋巴细胞浸润.用Alamar Blue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示,TGF-β 1组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制,低于对照组.进一步检测外周血中IL-4和IFN-γ的表达水平,结果显示TGF-β 1组小鼠体内IL-4和IFN-γ均明显低于对照组和无TGF-β 1刺激组.结论 TGF-β 1可诱导CD4 +CD25 -T细胞分化为CD4 +CD25 +调节性T细胞,将诱导后的调节性T细胞进行过继输注可延长小鼠皮肤移植物存活时间.  相似文献   

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