颗粒细胞与卵母细胞关系研究进展

颗粒细胞与卵母细胞共处于同一个微环境中,颗粒细胞通过复杂的缝隙连接与卵母细胞进行细胞之间的“对话”,并调控卵母细胞的生长与成熟。卵母细胞成熟后发生排卵,卵丘细胞通过自身及分泌作用影响着精卵结合及雄原核的形成。在哺乳动物的研究中发现,卵丘细胞与胚胎共培养能够克服发育阻滞,并对胚胎的发育起很好的支持作用。随着人类辅助生殖技术的发展,学者们越来越重视在基因及转录水平上对卵丘细胞的检测,从而对卵子及胚胎质量进行预测。综述颗粒细胞在卵子生长与成熟、受精及胚胎发育等方面的作用。     

MicroRNA调控卵巢颗粒细胞功能的研究进展

正卵巢颗粒细胞在卵泡形成窦腔时,分化为卵丘细胞(cumulus cells, CC)和壁层颗粒细胞(mural granulosa cells,MGC)。CC突起的尖端穿过透明带,终止于卵母细胞膜,从而形成卵丘-卵母细胞复合体。CC通过缝隙连接与卵母细胞进行双向信息传递,进而有助于卵母细胞的成熟、受精与早期胚胎发育[1]。MGC表面存在多种受体,并且能够分泌多种激素和细胞因子,     

助孕技术中的显微操作

人类体外受精中成功应用显微操作已有１０年，在此期间显微操作的应用范围逐渐扩大，包括单精子注射，透明带去除，极体与卵裂球活检及细胞浆和细胞核移植，目前显微操作的现代技术包括以下诸项：卵子的辅助受精，胚胎的辅助孵化，移去卵子或胚胎的一部分用作植入前诊断及细胞浆和细胞核的移植，本文对上述几方面作一简要论述，重点是卵子的显微受精。     

人卵丘细胞内基因表达与胚胎发育潜能的关系

缺乏准确、客观、非侵入性的胚胎评估标准是目前体外受精-胚胎移植技术所面临的主要挑战之一。本文对卵丘细胞内基因表达与胚胎及卵子发育潜能之间的相关研究进行了总结,发现卵丘细胞内特定基因的表达与胚胎发育、成熟及发育潜能之间存在紧密的联系。近年来,通过实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）及微阵列技术筛选出一系列颗粒细胞中能够预测受精结局、胚胎形态学评分、妊娠结局等胚胎发育潜能的候选标记基因,这些基因主要涉及卵丘扩展、脂类代谢、细胞凋亡等过程。然而,卵母细胞及胚胎的发育受卵泡内、外多种因素的影响。欲确立一种全面、准确、非侵入性的胚胎发育潜能评估方法仍需更深入的研究。     

人卵丘细胞与卵子发育潜能关系的研究进展

人卵丘细胞与卵母细胞之间存在密切联系,前者可以直接影响后者的发育、成熟以及所形成胚胎的质量.在辅助生殖技术中,通过对卵丘细胞的研究,可以为胚胎选择提供更加客观、准确且无创的方法,提高妊娠率,推动选择性单胚胎移植的发展,减少高序多胎妊娠及其所带来的不良妊娠结局.目前,从基因及转录水平探讨卵丘细胞与卵子质量的关系已成为研究热点.研究表明,卵丘细胞中卵母细胞发育相关基因表达上调能够预测优质胚胎;细胞周期检测点及DNA修复相关基因与卵子质量有关;细胞凋亡、葡萄糖生成、抗氧化应激相关基因及核转录因子I/B是预测卵子发育潜能和妊娠结局的生物学指标.     

玻璃化冷冻法在未成熟卵子冷冻技术中的应用

目的:探讨玻璃化冷冻法在未成熟卵子冷冻方面的应用价值。方法:选取GV期卵母细胞744枚,随机分为5组,A组(128枚),GV期卵子直接进行未成熟卵母细胞体外培养(IVM);B组(220枚),GV期卵子直接行玻璃化冷冻;C组(155枚),GV期卵子直接行IVM,待培养至MⅡ期,再行玻璃化冷冻;D组(112枚),GV期卵子去除冠-丘细胞,行玻璃化冷冻;E组(129枚),GV期卵子保留除冠-丘细胞行玻璃化冷冻。比较各组卵母细胞的存活率、成熟率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:与A组相比,B组和C组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率均降低(P<0.05);B组与C组间存活率、成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差异(P>0.05)。E组的成熟卵子率较D组提高(P<0.05),但两组在解冻卵子存活率、受精率、2细胞数和>2细胞数方面无差异(P>0.05)。结论:未成熟卵子的玻璃化冷冻保留冠-丘细胞可显著提高冻融效果。     

解脲支原体不同生物群别对小鼠体外受精的影响

目的:观察不同生物型别的解脲支原体(UU)对小鼠体外受精的影响,以探讨其对体外受精致病性的差异。方法:用血清型3型UU代表含有较小基因的生物群1(或Parvo生物型),血清型8型UU代表含有较大基因的生物群2(或T960生物型)。取小鼠成熟卵丘-卵母细胞复合体随机分为实验组与对照组,在体外加入小鼠精子进行受精。对照组精卵在不含UU的HTF培养液中培养,实验组精卵分别在含102～105CCU/ml的8型UU、103～106CCU/ml的3型UUHTF培养液中培养48h。每24h在倒置显微镜下观察记录,通过统计各组的受精率、D2评分、4-细胞期胚胎形成率,评价受精及胚胎发育情况。以观察不同生物群UU对小鼠成熟卵子体外受精的影响。结果:3型UU浓度≤103CCU/ml、8型UU浓度≤102CCU/ml时,受精率、D2评分、4-细胞期胚胎形成率等胚胎发育指标与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);3型UU浓度≥105CCU/ml、8型UU浓度≥104CCU/ml时,受精率、D2评分、4-细胞期胚胎形成率均较对照组低,且差异有统计学意义(P(0.01);而当3型UU浓度为104CCU/ml、8型UU浓度为103CCU/ml时,受精率与对照组比较差异无统计学意义。结论:UU能够干扰小鼠的体外受精,3型UU≥104CCU/ml、8型UU≥103CCU/ml浓度时就可对小鼠的体外受精造成抑制作用。代表生物群2的血清型8型UU可能较代表生物群1的血清型3型UU具有更强的致病性。     

克隆：惊人的相同

农历乙酉年刚刚过去，回顾过去的一年，在医学科学方面最令人震惊和感叹的，莫过于黄禹锡事件。2005年5月，韩国首尔大学一位叫黄禹锡的兽医学教授连续在世界著名的《自然》和《科学》杂志上发表他们的科研成果，宣称他们从16名女性自愿者身上取得了24枚卵子，将它们的细胞核去除，然后将她们本人的卵丘细胞的细胞核取出，注入去核的“卵（细胞）”内，让它们在体外发育至由100个细胞组成的称之为胚泡（囊胚）的早期胚胎。     

高龄女性卵子微环境的代谢组学研究进展

代谢组学通过对所有小分子代谢物进行定性定量分析,寻找与生理病理变化相关的代谢物,为疾病的诊断及治疗提供新方法。卵子发育依赖卵泡液、卵丘细胞等微环境。在卵子发育过程中,微环境为卵子提供能量、营养等,并清除有害代谢物,减轻对卵子的损伤。高龄女性生育力下降表现为卵巢储备功能下降及卵子质量降低。随着年龄的增长,卵子微环境代谢组学发生改变,如糖代谢、脂代谢、蛋白质代谢等,影响卵子发育、成熟、受精及后续胚胎发育,是导致高龄女性生育力下降的原因之一。分析高龄女性卵子微环境代谢组学不仅可以反映其物质组成及代谢水平变化,还可以反映代谢物对卵子的影响,进而评估卵子的发育潜能,为预测高龄女性体外受精-胚胎移植助孕结局提供参考。     

卵母细胞及其胚胎发育潜能相关的生物标记物

卵母细胞发育潜能是在卵泡发育过程中逐步获得的,卵丘细胞(CCs)与卵母细胞紧密接触,卵泡液(FF)为卵母细胞提供良好的微环境.因此,CCs功能及FF成分组成可以反映卵母细胞的发育潜能.CCs为卵母细胞提供代谢所需的营养物质如丙酮酸、丙氨酸、胆固醇等,并在卵母细胞的成熟、排卵、受精过程中发挥重要的作用.FF作为卵巢体壁细胞与血浆之间的媒介,其内的代谢相关分子、激素类分子、活性氧分子及一些细胞因子与卵母细胞的成熟及发育潜能密切相关.综述与卵母细胞及其胚胎发育潜能相关的生物标记物,主要是CCs、FF中的相关因子,两者结合为胚胎学家选择最佳的卵子提供参考.     

取卵后授精时间对胚胎质量的影响

目的:探讨体外受精—胚胎移植中取卵后授精时间对胚胎质量的影响。方法:对进行体外受精-胚胎移植51个周期的357枚卵子分为两组,A组取卵后2～3h授精,B组取卵后4～6h授精,均于受精后5h左右去除卵丘细胞观察第二极体排出的情况,分别统计并比较两组的成熟卵率、受精5h后的第二极体排出率、正常受精率、多精受精率及优质胚胎率。结果:两组的成熟卵率、受精5h后的第二极体率、排出第二极体卵母细胞的正常受精率与多精受精率和优胚率差异无统计学意义(P0.05)。结论:IVF-ET中取卵后在最佳授精时间内授精并不影响胚胎的质量。     

对非男性不孕IVF失败后人MII期卵母细胞的多参数分析

受精失败影响体外受精(IVF)和胞浆内单精子注射(ICSI)的临床妊娠率。高质量的MII(第二次减数分裂中期)卵母细胞是获得较高妊娠率的基础。卵母细胞成熟程度通常可从胞浆胞核两方面来判断：卵子染色质和纺锤体是评价胞核情况的指标，皮质颗粒(CGs)的分布及胞浆去浓缩精子染色质的能力反映卵胞浆情况。为明确受精失败的可能原因，为今后不孕症的治疗提供有价值的信息，应用荧光影像技术，从染色体、纺锤体和CGs3个方面对IVF中具有低受精率或全部受精失败患者的卵子进行回顾性多参数分析。     

卵细胞减数分裂的GV期停滞和活化

在ＬＨ峰出现前，卵细胞的减数分裂停滞在配子泡（ＧＶ）期。卵泡壁细胞分泌的可溶性因子，通过卵丘细胞作用于卵细胞，抑制卵细胞核的成熟。体外培养可以使卵细胞减数分裂自发性活化。适宜的体外培养条件可以将ＧＶ期卵细胞培养为可以受精并发育的成熟卵细胞。     

短时受精后补救ICSI的临床应用研究

目的:探讨降低体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中受精失败的有效方法。方法:对行IVF治疗的600个周期进行短时受精观察,于受精后5h左右去除卵丘细胞,观察卵子第二极体的排出情况;对第二极体排出率低于1/2的周期追加观察至受精后9h,如果存在可疑受精低下及全卵受精失败,则予以早补救卵细胞浆内单精子注射(ICSI)治疗(观察组);选择同时期连续进行ICSI治疗的患者共49个周期(对照组);比较两组的受精及妊娠情况。结果:两组的正常受精率、多精受精率、正常卵裂率及优质胚胎率差异有统计学意义(P<0.01);临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IVF-ET中短时受精后早补救ICSI不影响临床妊娠率,对预防及降低受精失败有重要意义。     

精子顶体反应及其相关调控因子研究进展

正受精是精子将所携带的单倍体遗传物质与卵子的单倍体遗传物质融合成双倍体合子的过程,此过程是一高度复杂且严格有序的生理过程。有学者[1]将人类受精过程概括为:1精子获能;2精子与卵丘细胞间相互作用;3精子活动力改变;4精子与透明带结合、透明带诱发精子顶体反应;5顶体内酶激活、释放;6精子穿透透明带;7精卵质膜融合;8卵子激活;9精子染色质解凝;10精卵核融合。其中,精卵     

受精前后精子的变化

精原细胞初始是进行体细胞样的分裂,之后便进行减数分裂产生精细胞为初级精母细胞。继之发育成次级精母细胞。最近有人成功地将小鼠的次级精母细胞注入到成熟的卵子内,精子细胞内的半数染色体与卵细胞的核融合而受精。说明次级精母细胞已具备与卵细胞受精的能力,之后精细胞的各发育阶段为精细胞的受精提供运送能力。精子在     

体外受精后不同时期观察受精对胚胎质量的影响

目的探讨体外受精后不同时期观察受精对胚胎质量的影响。方法随机对进行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗的264个周期分两组进行观察,均于取卵后2～6小时授精。A组为实验组(176周期):于受精后5小时左右去除卵丘细胞提早进行受精观察;B组为对照组(88周期):受精后20小时左右去除卵丘细胞观察原核形成的情况。分别统计两组的年龄、不孕年限、获卵数、正常受精率、异常受精率、优质胚胎率。结果两组的女方年龄、不孕年限、获卵数、正常受精率、异常受精率、优质胚胎率等差异无统计学意义(P0.05)。结论IVF-ET中提早观察受精对胚胎质量无明显影响。     

重组日本血吸虫抗原诱导小鼠抗卵免疫的研究

目的 探讨重组日本血吸虫31／32kDa抗原(rSj31／32)诱导小鼠产生抗卵免疫的效果。方法 采用rSj31／32抗原免疫小鼠，攻击感染后42d，定量检测粪卵、肝肠组织内虫卵及雌虫子宫内虫卵数。结果 与对照组比较，rSj31／32抗原免疫小鼠肝、肠组织内总卵数和粪卵数分别减少46．0％，76．0％和83．0％，其中肝、肠组织内成熟虫卵数明显减少(69．0％和91．0％)，而肝组织内死亡虫卵数显增加(242．5％)。此外，雌虫子宫内虫卵数亦明显下降(49．8％)。结论 rSj31／32抗原能诱导小鼠产生抗雌虫生殖和抗卵胚发育的免疫，可望作为抗卵疫苗的候选抗原。     

不同受精时间对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨受精时间的长短对卵子受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、妊娠率和流产率的影响.方法以82个体外受精-胚胎移植（IVF—ET）周期为研究对象，要求每个周期获卵数最少为3枚，按精-卵共培养时间分为3组：1h受精组，共266枚卵，2h受精组，共335枚卵，16—20h受精组，共257枚卵。比较3组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、妊娠率（生化妊娠率和临床妊娠率）和流产率。结果2h受精组受精率最高为87．46％，与另外2组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。3组种植率、妊娠率和流产率与比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论短时受精可以提高卵子的受精率，并能提高种植率和妊娠率，降低流产率。     

我们要不要“量身订做”个孩子

据新浪网报道，台大医院研究团队日前从人类胚胎干细胞，培育出全球第一颗有生殖细胞基因的卵子，未来通过体细胞核转殖技术，将可为不孕症女性置身订做有自己基因的卵子，不必依赖捐卵。负责研究的台大医院妇产部主治医师陈信孚指出，美国生殖专家曾在2003年从小鼠身上的胚胎干细胞分化出卵子与囊胚，但在人类干细胞的研究则面临瓶颈。台大研究团队近年可在无血清、无喂养细胞的环境下培养胚胎干细胞，除了成功培育三株人类胚胎干细胞株外，更于最近进一步分化出卵泡（内含有卵子）的构造，且具有生殖细胞基因的表现。他强调，由干细胞培育卵子的研究，可让医界更了解卵子发育的过程，带动人类胚胎体外培养的效率，对于未来治疗不孕症、习惯性流产、提高试管婴儿技术的成功率，都有许多帮助。 台大医院妇产部主任杨友仕认为，经由人类胚胎干细胞所培育出来的卵子，可望在未来大量制造，形成一家“卵子银行”，并进一步为不孕妇女“量身订做”自己卵子的机会。例如一名卵巢功能丧失的不孕妇女，她可从自己的耳朵取一些体细胞，然后通过核转殖技术，将体细胞的细胞核放入体外培养的卵子内，取代卵子的细胞核，形同拥有属于自己基因的卵子，不用仰赖其他女性捐赠卵子。[编者按]