中国东北地区HCVRNA阳性血清RT－PCR产物的RFLP分型

为了解东北地区ＨＣＶ感染的基因型，对东北地区４５例ＨＣＶＲＮＡ阳性血清的ＰＣＲ产物用ＲＦＬＰ分析进行基因分型，结果：ＨＣＶⅡ型占８２．２％，Ⅲ型占１５．６％，Ⅱ／Ⅲ混合型占２．２％型。与国内其它地区ＨＣＶ基因型构成比无显著性差异。证明东北地区ＨＣＶ感染也以Ⅱ型为主。     

胎儿LAK／IL—2治疗长期HBV无症状携带者的临床研究

应用儿脾ＬＡＫ细胞，配合ｒＩＬ－２和ｒＩＦＮ－γ治疗８例长期ＨＢＶ无症状携带者，结果表明：有７５％（６／８）的患者ＨＢｅＡｇ转阴，其中有２５％（２／８）的患者ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ均转阴，治疗后ＣＤ＾＋８Ｔ细胞稍有增高，Ｔａｃ抗原比治疗前和对照组均显著增高，血ｓＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－８和ＮＴＦ－α治疗后均显著增高。     

中国东北地区HCV RNA阳性血清RT—PCR产物的RFLP分型

为了解东北地区ＨＣＶ感染的基因型，对东北地区４５例ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清的ＰＣＶ产物用ＲＦＬＰ分析进行基因分型，结果：ＨＣＶⅡ型占８２．２％，Ⅲ型占１５．６％，Ⅱ／Ⅲ混合型占２．２％型。与国内其它地区ＨＣＶ基因型构成比无显著性差异。证明东北地区ＨＣＶ感染也以Ⅱ型为主。     

HCV基因型与IFN—α2b抗病毒疗效的关系

目的；研究丙肝病毒基因型与丙肝患者使用ＩＦＮ－α２ｂ治疗效果的关系。方法；采用ＨＣＶ基因组ＮＳ５区ＰＣＲ产物酶切分型方法，对７９例丙肝患者做ＨＣＶ基因分型。所有病例均按预定方案应用ＩＦＮ－α２ｂ治疗，根据ＡＬＴ的变化情况和判断疗效。首先考察应用１ＭＵ和３ＭＵ ＩＦＮ－α２ｂ两种剂量在治疗效果上的差异性；然后研究ＨＣＶ基因型对ＩＦＮ－α２ｂ治疗效果的影响。     

Ⅲ型中国株丙型肝炎病毒E2/NS1基因的克隆与序列分析

目的构建插入Ⅲ型中国株丙型肝炎病毒Ｅ２／ＮＳ１基因片段的真核表达载体，分析该基因片段的核苷酸一级结构。方法利用逆转录套式ＰＣＲ扩增Ⅲ型中国株丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ２／ＮＳ１基因片段，通过定向克隆将其克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３上，采用双脱氧链终止法测定其核苷酸序列。结果构建出含有Ⅲ型中国株丙型肝炎病毒Ｅ２／ＮＳ１基因片段的克隆，该区基因片段的核苷酸一级结构和Ⅲ型日本株ＨＣＶ（ＨＣ－Ｊ６）的同源性为８８．３７％，Ⅱ型中国株ＨＣＶ（ＨＣ－Ｃ２）的同源性为７０．６９％，其推定的氨基酸同源性分别为８９．２９％和７５．５５％。结论基因的核苷酸一级结构在同一基因型中有较高的同源性，而不同基因型之间的同源性则相对较低。对不同基因型之间Ｅ２／ＮＳ１基因一级结构的研究将有助于ＨＣＶ疫苗的研制。     

慢性丙型肝炎血清抗HCV—IgM及HCV RNA水平的研究

目的：探讨影响干扰素（ＩＦＮα－２ｂ）治疗慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）疗效的因素，并预测ＩＦＮ的疗效。方法；采用美国ＡＧ－９６００型ＰＣＲ定量仪及间接酶联免疫吸附试验检测血清ＨＣＶＲＮＡ水平和抗ＨＣＶ－ＩｇＭ水平。结果；５例患者对ＩＦＮ产生完全应答，９例部分应答，６例无应答，治疗前血清抗ＨＣＶ－ＩｇＭ水平完全应答组明显高于部分应答组（Ｐ〈０．０１）及无应答组（Ｐ〈０．０５）；血清ＨＣＶＲＮＡ水平完全应答     

丙型肝炎病毒基因型与丙型肝炎临床病情关系的研究

应用引物特异ＰＣＲ法对沈阳地区８３例各型丙型肝炎，６例原发性肝癌抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ均阳性的血清标本进行ＨＣＶ基因分型，旨在了解本地区ＨＣＶ基因型分布情况及ＨＣＶ不同基因型与丙型肝炎病人临床病情轻重的关系。结果表明：ＨＣＶ－Ⅱ型感染占５７．３％（５１／８９）、ＨＣＶ－Ⅲ型感染占２８．１％（２５／８９）、Ⅱ／Ⅲ混合型感染占１３．５％（１２／８９）、未分型占１．１％（１８９）；急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度、肝炎后肝硬化及原发性肝癌中ＨＣＶ－Ⅱ型感染分别占６２．５％、３５．５％、６６．７％、８５．７％、９０．９％及１００％，而ＨＣＶ－Ⅲ型感染分别占２５％、４６．７％、８．３％、０％、９．１％及０％。提示沈阳地区ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主，其次为Ⅲ型及Ⅱ／Ⅲ混合型，ＨＣＶ不同基因型与丙型肝炎病人临床病情的严重程度呈密切相关     

丙型肝炎患者HCV基因的检测,分型及临床分析

运用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测临床肝炎患者血清中ＨＣＶ ＲＮＡ对５４例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用限制性内切酶Ｓａｕ３ＡＩ／ＨａｅⅢ春５’ＮＣ区扩增产物进行酶切。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶ Ⅰ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ，Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅡ／Ⅲ，Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４）；     

湖南地区丙型肝炎病毒基因型在肝细胞癌组织中的分布

采用型特异性引物ＰＣＲ分型法对５０例肝细胞癌组织中感染的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）进行基因分型。结果显示：单独ＨＣＶⅡ型感染为６０％（３０／５０）；单独Ⅲ型感染６％（３／５０）；感染为Ⅱ＋Ⅲ型１０％（５／５０），Ⅱ＋Ⅳ型为１６％（８／５０），Ⅱ＋Ⅰ＋Ⅲ型为４％（２／５０）；Ⅰ￣Ⅳ型均阴性的病例４％（２／５０）。表明湖南地区肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主，并存在Ⅱ型与其它型的混合感染；少数病例可能系     

湖南地区丙型肝炎病毒基因型在肝细胞癌组织中的分布

采用型特异性引物ＰＣＲ分型法对５０例肝细胞癌组织中感染的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）进行基因分型。结果显示：单独ＨＣＶⅡ型感染为６０％（３０／５０）；单独Ⅲ型感染６％（３／５０）；感染为Ⅱ＋Ⅲ型１０％（５／５０），Ⅱ＋Ⅳ型为１６％（８／５０），Ⅱ＋Ⅰ＋Ⅲ型为４％（２／５０）；Ⅰ～Ⅳ型均阴性的病例４％（２／５０）。表明湖南地区肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主，并存在Ⅱ型与其它型的混合感染；少数病例可能系单独Ⅲ型感染所致     

90例丙型肝炎患者HCV基因分型研究

目的 了解徐州地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型的分布情况。方法 对９０例血清ＨＣＶ ＲＮＡ阳性的丙型肝炎（ＨＣ）患者，行ＨＣＶ基因酶切分型。结果 ９０例中ＨＣＶ－Ⅱ型７１（７８．９％），ＨＣＶ－Ⅲ型１７例（１８．９％），ＨＣＶ－Ⅱ／Ⅲ混合型２例（２．２％）。结论 徐州地区ＨＣＶ流行株基因型主要为Ⅱ型，同时存在Ⅲ、Ⅱ／Ⅲ混合型。     

干扰素治疗前后肝组织内HCV—RNA变化分析

目的：探讨干扰素治疗前后,肝组织内丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶ－ ＲＮＡ） 的变化与血中ＨＣＶ－ ＲＮＡ 及ＡＬＴ 的关系。方法：对丙型慢性肝炎（ＣＡＨ） 患者２０ 例,经过干扰素（ＩＦＮ） 治疗,使用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ ＰＣＲ） 和原位杂交方法（ＩＳＨ） ,对肝组织内和血中ＨＣＶ－ ＲＮＡ 及ＡＬＴ 值分析。结果：ＩＦＮ 治疗丙型ＣＡＨ 的有效率为７０ ％ ,停药后６ 个月有效率为３０ ％ 。血中ＨＣＶ－ ＲＮＡ 转阴率为５５ ％ ,停药后６ 个月转阴率为１５ ％ 。肝组织中ＨＣＶ－ ＲＮＡ,经治疗消失的有３ 例,占１５ ％ 。结论：肝组织中ＨＣＶ－ ＲＮＡ 的有无,对ＩＦＮ 疗效的判定非常重要,即使血中ＨＣＶ－ ＲＮＡ 阴性、ＡＬＴ 正常的病例,如果肝组织中有ＨＣＶ－ＲＮＡ 残留,以后血中ＡＬＴ 值上升的可能性很大,应该进行抗病毒的再治疗。     

HCV NS-5区分型引物法检测新疆两城市HCV基因型

目的：了解新疆两城市丙型肝炎病毒感染者中存在哪些基因型，以便为今后防治ＨＣＶ感染提供依据。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ技术，选择ＨＣＶＮＳ－５区设计的分型引物（１ａ、１ｂ、２ａ和２ｂ）进行基因分型。结果：我们检测了１２８例（乌鲁木齐市９７例，克拉玛依市３１例）已证实为丙型肝炎病毒感染者的血清，其中基因分型检测出的９８例中可分为１ａ型１４例（１４．３％）、１ｂ型５８例（５９．３％）、２ａ型１１例（１１．８％）、２ｂ型１０例（１０．３％），混合感染５例（５．２％）（１ａ＋１ｂ型４例，１ｂ＋２ａ型１例）。在乌鲁木齐市和克拉玛依市的ＨＣＶ感染者中１ａ型分别为１１／７３例和３／２５例，１ｂ型分别为４６／７３例和１２／２５例。结论：表明新疆至少存在ＨＣＶ１ａ、１ｂ、２ａ和２ｂ基因型，但以１ｂ基因型感染为主。比较乌鲁木齐市和克拉玛依市两城市的ＨＣＶ基因型分布显示１ａ型和１ｂ型分布有明显差别（χ２＝３６，Ｐ＜０．００１）。另３０例用本方法未能检出分型，提示可能还有其它基因型存在     

抗HCV-IgM抗体测定及临床初步应用

将市售ＨＣＶ－ＩｇＧ诊断试剂盒加以改良，建立了ＨＣＶ－ＩｇＭ抗体检测方法，与抗ＨＢｃ－ＩｇＭ，抗ＨＢｓ－ＩｇＭ，抗ＣＭＶ－ＩｇＭ，抗ＲＶ－ＩｇＭ，ＲＦ及抗核抗体（ＡＮＡ）阳性血清均不起反应。正常人群中抗ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性率为１．５％（１／６８），抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性的４３例血透患者检出抗ＨＣＶ－ＩｇＭ１４例（３２．６％），１２例输血后肝炎抗ＨＣＶ－ＩｇＭ全部阳性。以上结果表明，抗ＨＣＶ－ＩｇＭ可作为输血后ＨＣＶ感染的一个敏感指标     

丙型肝炎病人PBMC对HCV合成肽增殖反应与干扰素疗效的关系

目的：探讨丙型肝炎病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）特异性抗原增殖反应与干扰素（ＩＦＮ）疗效关系。方法：用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究１１例经ＩＦＮ治疗与１３例未经ＩＦＮ治疗病人ＰＢＭＣ的增殖反应以及ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转和丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）复常指标。结果：１１例经ＩＦＮ治疗与１３例未经ＩＦＮ治疗病人ＰＢＭＣ对ＨＣＶ合成肽ＣＰ９、ＮＳ４增殖反应相比，前者明显增强，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５），且血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转和ＡＬＴ复常分别达到３６．３６％（４／１１）和５５．５５％（５／９），明显高于未经ＩＦＮ治疗组。结论：ＩＦＮ治疗丙型肝炎可提高ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原的增殖反应     

大剂量干扰素治疗慢性丙型肝炎50例临床观察

目的：探讨使用大剂量干扰素（ＩＦＮα）治疗慢性丙型肝炎（ＣＡＨ）的效果。方法：使用大剂量ＩＦＮα,每天６００万Ｕ,连续投药３周,以后每周３次间断投药２１周,共计２４周,治疗ＣＡＨ５０例。观察治疗前后血清ＨＣＶＲＮＡ与ＡＬＴ的变化,以此作为ＩＦＮ疗效的判定指标。结果：ＩＦＮ治疗ＣＡＨ有效率为６８％,停药６个月后有３４％复发。结论：ＩＦＮ的疗效与ＣＡＨ的基因亚型有关（Ⅲ型疗效显著,Ⅱ型较差）,与ＩＦＮ的剂量无明显关系。     

丙肝病毒感染者血清中sIL-2R和TNF-α水平的研究

目的：探讨血清中可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）水平及其在检查丙肝病毒感染中的价值。方法：应用ＥＬＩＳＡ方法检测４２例正常人及８７例丙肝病毒感染者血清中ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α水平。另外，将感染者分为３组，即Ａ组（抗－ＨＣＶ－Ａｂ（－），ＨＣＶ－ＲＮＡ（＋）），Ｂ组（抗－ＨＣＶ－Ａｂ（＋），ＨＣＶ－ＲＮＡ（－）），Ｃ组（抗－ＨＣＶ－Ａｂ（＋），ＨＣＶ－ＲＮＡ（＋））。结果：８７例感染者血清中ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α水平较正常人都明显增高Ｐ＜０．００１），所有组的血清中ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α水平也与正常人差异显著（Ｐ＜０．０１）。不同组彼此间比较ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α水平，除Ａ组与Ｃ组外，Ａ组和Ｂ组之间、Ｂ组和Ｃ组之间都有显著差异（Ｐ＜０．００１～０．０５）。结论：对ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α水平的检测可作为丙型肝炎辅助化验检查指标之一。     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１）经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｍＢｌｏｔ分析证实     

肝病患者丙型肝炎病毒感染及C基因分型

以第２代抗体法分析急、慢性肝病患者中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染，并对ＨＣＶ阳性者以型别特异的逆录聚合酶链反应进行Ｃ基因分型。在６４４例肝病患者中，第２代抗体阳性率为肝癌７．３％，急性肝炎３．４％，慢性肝炎６．６％，肝硬化６．６％；非肝病患者１０６例中，阳性率为３．８％。慢性肝炎ＨＢＶ感染达８９．５％。４１例ＨＣＶ阳性者的Ｃ基因分显示：Ⅱ型占８５．４％、Ⅲ型７．３％、Ⅱ／Ⅲ混合型７．３％，未见其他型     

辅酶B12Costa型模型化合物性质的研究

用循环伏安法研究了６个Ｃｏｓｔａ型辅酶２模型化合物「ＲＣｏ（Ｄｏ）（ＤｏＨ）ｐｎＨ２Ｏ」ＣｌＯ４（Ｒ＝ｎ－Ｃ３Ｈ７，ｉ－Ｃ４Ｈ９，Ｎ－Ｃ４Ｈ９，Ｎ－Ｃ５Ｈ１１，ｃ０Ｃ６５Ｈ１，Ｃ６Ｈ５ＣＨ２，（ＤＯ）（ＤＯＨ）ｐｎ＝Ｎ，Ｎ－双（２，３－丁二酮－２－亚胺－３－肟）丙二胺）的电化学性质，发现此类模型化合物的电化学行为包含了中心然价态的变化；Ｃｏ（Ⅲ）－Ｃｏ（Ⅱ）Ｃｏ（Ⅰ）以及Ｃｏ－Ｃ键的断裂的形成过程