实验性吗啡依赖大鼠肾皮质组织化学变化

目的通过观察吗啡依赖大鼠肾脏碱性磷酸酶和酸性磷酸酶组织化学变化,探讨吗啡依赖对大鼠肾脏的影响。方法皮下注射吗啡建立吗啡依赖大鼠模型,用组织化学和图像分析技术观察肾脏酶组织化学的变化。结果吗啡依赖组大鼠肾近曲小管上皮细胞内碱性磷酸酶组织化学反应与对照组相比明显减弱(P<0.05),酸性磷酸酶组织化学反应明显增强(P<0.05)。结论吗啡依赖可引起大鼠肾脏损害。     

部分肾切除大鼠肾组织蛋白酶B的表达与肾脏纤维化的关系

目的探讨组织蛋白酶B(cathepsin B,CB)在5/6肾切除大鼠肾组织纤维化发生发展中的作用.方法取健康Wister大鼠80只,随机分成假手术组和手术组.每组分为术后15、30、60、90d 4个时相点,每组每时相点10只大鼠.采用生物化学、形态计量、免疫组化技术观察大鼠肾功能、肾组织形态学、肾组织蛋白酶B和Ⅳ型胶原表达.结果CB主要在肾近曲小管上皮细胞内表达;手术组大鼠术后15、30d近曲小管CB表达增多,在增生的系膜细胞内也有较多CB表达,术后60、90d时肾小管上皮细胞CB表达逐渐减少,CB表达与肾小球硬化比率、病变肾小管肾间质体积分数和Ⅳ型胶原表达显著负相关.结论正常大鼠肾CB主要在近曲小管上皮细胞内表达;大鼠5/6肾切除术后早期,CB表达代偿性增强,这对于减轻肾组织纤维化有积极意义,随着术后时间延长,损伤因素占主导地位,CB表达的代偿逐渐减弱,参与肾组织纤维化的发生机理.     

硒对氟致肾损害的影响

给SD大鼠饮用含氟、硒、及氟加硒的水溶液8周,观察硒对氟致肾损害的影响。结果表明氟可使肾脏脂质过氧化物含量明显增加,肾近曲小管上皮细胞变性、坏死,线粒体数目增多,线粒体嵴减少,基底膜局部增厚,并可使肾近曲小管上皮细胞的琥珀酸脱氢酶（SDH）和碱性磷酸酶（ALP）活性明显降低,乳酸脱氢酶（LDH）和酸性磷酸酶（ACP）活性明显增高。补硒后则可促进肾脏的氟排泄,降低肾脏脂质过氧化物含量,肾脏的组织病理学和超微结构改变明显减轻,SDH活性增加,ACP活性降低。结果提示,硒对氟导致的肾损害具有明显的拮抗作用。     

Caspase-3在缺氧和内毒素致肾小管损伤的肾组织表达

目的 为了建立缺氧和内毒素致肾小管损伤模型,观察Caspase-3在肾组织的表达,以探讨其肾小管的损伤机制.方法 以SD大鼠为实验动物,予麻醉及机械通气,同时予阴茎静脉注射伤寒杆菌脂多糖,吸入氧浓度从21%降至5%的氧,通气至180rain结束.取肾组织作HE染色病理切片检查及用Caspase-3免疫组化S-P法染色观察模型肾组织的病理改变及肾组织中Caspase-3的表达.结果 (1)病理组织学所见:大部分肾小球充血,内皮及系膜细胞轻度肿胀,肾近曲小管上皮明显肿胀,呈浊样改变;大部分远曲小管镜下未见明显改变,部分上皮细胞肿胀,浊样变性在;整个肾间质呈充血现象.无炎性细胞浸润,(2)免疫组化结果:Caspase-3染色位于胞浆,大部分远曲小管上皮呈Caspase-3阳性反应,以外髓远曲小管为明显;近曲小管偶见Caspase-3阳性细胞,肾小球Caspase-3染色阴性.结论 (1)缺氧及内毒素可致肾小管损伤,且以近曲小管为著,远曲小管及内髓部损伤相对较轻,(2)Caspase-3在远曲小管明显表达,提示在缺氧及内毒素致肾小管损伤中,同时存在细胞变性坏死及细胞凋亡,近曲小管以细胞变性坏死为著,而远曲小管细胞凋亡明显.

Abstract：

Objectives To observe the expression of caspase-3 in the kidney of a rat model of renal tubular damage induced by endotoxin and hypoxia and explore the mechanism of renal tubular damage. Methods Ten rats were anesthetized with artificial ventilation and received 2 mg/kg lipopolysaccharide (LPS) injection through the penile vein. The FiO_2 was reduced 90 min later from 21% to 5%, and the ventilation was withdrawn after another 90 min. Immediately after ventilation withdrawal, the kidney of the rats were obtained for immunocytochemistry and HE staining. Results HE staining showed obvious hyperemia in most of the glomeruli, mild swelling of the endothelial and mesangial cells, severe swelling and turbidity in the proximal tubular epithelial cells without obvious changes in most of the distal proximal tubules. A small portion of the interstitial epithelial cells showed swelling and turbidity, and the entire renal interstitium appeared hyperemic but without inflammatory cell infiltration. Immunocytochemistry detected the presence of caspase-3 in the cytoplasm, and most of the distal renal tubule cells were positive for caspase-3, while only occasional cells showed caspase-3 positivity in the proximal tubular epithelial cells. Most of the proximal tubular epithelial and glomerulus cells were negative for caspase-3. Conclusions Endotoxin and hyoxia can induce renal damage, particularly in the proximal renal tubule cells, and the distal tubular epithelial cells sustain relatively light damage. Caspase-3 is strongly expressed in the distal renal tubular cells, suggesting that in renal tubular damage induced by endotoxin and hypoxia, cell degeneration, necrosis and apoptosis coexist in the tubular epithelial cells; degeneration and necrosis occur primarily in the proximal tubular epithelial cells, while apoptosis is obvious in the distal renal cells.     

慢性砷暴露对小鼠肾组织DNA损伤的研究

目的:通过检测8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)在砷暴露小鼠肾脏组织中的表达和分布,探讨砷的肾毒性作用机制。方法:昆明种小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为低剂量组(1ppmAs2O3)、中剂量组(2ppm As2O3)、高剂量组(4ppm As2O3)和生理盐水对照组,连续染毒60天后断头处死,用HE染色法进行组织病理学观察,用免疫组化及图像分析方法检测肾组织内8-OHdG的水平。结果:与对照组相比,1ppm、2ppm和4ppm染砷组小鼠肾组织出现不同程度细胞肿胀,胞浆空泡变性,核固缩、溶解及血管扩张、充血等病理学改变,近曲小管较肾小球损伤严重。免疫组化结果表明,肾组织中8-OHdG含量明显增高,并呈现明显的剂量-反应关系,其总光密度值与对照组比较具有显著性差异(P<0.01)。而且,8-OHdG在近曲小管的表达明显高于肾小球区域。结论:慢性低剂量砷暴露可引起小鼠肾组织DNA的氧化损伤和病理变化,尤其对肾脏近曲小管的损伤作用较为明显。     

硒对氟致肾损害的影响

给SD大鼠饮用含氟、硒、及氟加硒的水溶液8周，观察硒对氟致肾损害的影响。结果表明：氟可使肾脏脂质过氧化合物明显增加，肾近曲小管上皮细胞变性、坏死，线粒体数目增多，线粒体嵴减少，基底膜局部增厚，并可使肾近曲小管上皮细胞的琥珀酸脱氢酶（SDH）和碱性磷酸酶（ALP）活性明显降低，乳酸脱氢酶（LDH）和酸性磷酸酶（ACP）活性明显增高。补硒后则可促进肾脏的氟排泄，降低肾脏脂质过氧化物含量，肾脏的组织病理学和超微结构改变明显减轻，SDH活性增加，ACP活性降低。结果提示，硒对氟导致的肾损害具有明显的拮抗作用。     

小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞-间充质细胞转型研究

目的:探讨小鼠肾间质纤维化早期是否存在肾小管上皮细胞间充质细胞转型的形态学变化.方法:利用单侧输尿管梗阻的方法建立小鼠肾间质纤维化模型,常规组织学分析小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测a-SMA的表达,肾基底膜六胺银染色和透射电镜观察肾小管基底膜的变化情况,明胶酶谱分析观察肾脏中MMP2和MMP9的表达情况.结果:成功地建立了小鼠肾间质纤维化模型,并被组织学分析证实.免疫组化分析显示肾脏中出现了大量表达a-SMA的细胞,肾基底膜六胺银染色和透射电镜分析显示小鼠肾间质纤维化早期肾脏出现了肾小管基底膜局部断裂和肾小管上皮细胞迁出的改变,明胶酶谱分析显示小鼠肾脏中MMP2和MMP9于肾间质纤维化早期有一过性增高变化.结论:肾小管基底膜局部断裂,肾小管上皮细胞迁出以及MMP2和MMP9的表达变化参与了小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞-间充质细胞转型的过程.     

肿瘤坏死因子在人膜增生性肾小球肾炎中的表达

目的 :探讨肿瘤坏死因子 (TNF -α)在人膜增生性肾小球肾炎发病中的作用。方法 :采用病理组织学及免疫组织化学SABC法对 2 0例人膜增生性肾小球肾炎进行染色观察。结果 :TNF -α蛋白在肾组织内表达增加 ,阳性反应见于肾小管上皮细胞和肾小球内 ,以肾近曲小管上皮细胞阳性最明显 ,与正常组相比有显著性差异 (P <0 .0 1) ,肾小球内呈程度不等的弱阳性 ,但与正常组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,远曲小管阳性反应不明显。结论 :TNF -α在肾小管内表达增强可能在肾脏纤维化及硬化中起重要的介导作用     

迷迭香酸对单侧输尿管梗阻小鼠肾脏的抗氧化保护作用

目的:探讨迷迭香酸对小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化的抗氧化保护作用.方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分成3组:假手术对照组(Sham组,n=8)、UUO模型组(结扎左侧输尿管制作UUO模型,n=24)、UUO迷迭香酸干预组(UUO+RA组,n=24).除Sham组外,其余2组根据不同的观察时间细分为3、7、14天亚组n=8).术后第3、7、14天分别处死各组小鼠.组织病理学方法观察肾小管间质损伤情况;Western blotting方法检测肾组织中波形蛋白(Vimentin)和E-5黏蛋白(E-cadherin)表达;比色法测定小鼠左肾皮质匀浆中脂质过氧化标志物MDA以及抗氧化酶SOD的含量.结果:UUO模型组与假手术组比较:随着模型损伤时间的延长,肾间质损伤程度逐渐加重,Vimentin和MDA含量明显增高,E-cadherin和SOD含量明显降低.迷迭香酸干预组与UUO模型组比较:3大时肾脏病理、Vimentin、E-cadherin以及MDA、SOD含量无明显改变;7天时肾间质纤维化减轻,Vimentin、MDA含量降低,E-cadherin、SOD含量增高;14天时肾间质纤维化明显减轻,Vimentin、MDA含量明显降低.E-cadherin、SOD含量明显增高.结论:迷迭香酸可能通过减少单侧输尿管梗阻侧肾皮质脂质过氧化物的产生、增加抗氧化酶的含量.从而改善小鼠氧化应激所致的肾问质纤维化.     

他克莫司改善肾缺血再灌注损伤时对Bcl-2蛋白、TNF-a表达的影响

目的通过建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,研究他克莫司改善肾缺血再灌注损伤的作用以及对Bcl-2蛋白、TNF-a表达的影响。方法随机选健康Wistar雄性大鼠60只,分为三组：假手术组、对照组、实验组,每组20只。在到达设定的不同再灌注时间点取血及肾脏标本,全自动生化分析仪测定血清肌酐（scr）、血清尿素氮（BUN）;酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子（TNF-a）含量;免疫组化检测肾组织B细胞淋巴瘤（Bcl-2）;采用HE染色分析肾组织病理损伤程度。结果 （1）实验组和对照组的血清scr、BUN在相应再灌注各时间点的值均高于假手术组;缺血45 min,再灌注2、6 h和24 h时,实验组血清scr、BUN的水平显著低于对照组（P〈0.05）。（2）对照组,缺血45 min,再灌注0.5、2、6 h及24 h随着再灌注时间的延长血清TNF-a含量明显升高;在再灌注的各时间点,实验组的血清TNF-a含量水平均显著低于对照组（P〈0.05）。（3）各组大鼠肾组织中均有Bcl-2表达,主要在肾的远曲小管、近曲小管表达,但免疫反应强度不同。实验组在再灌注的各时间点均高于对照组,并在再灌注的2、6、24 h的Bcl-2免疫反应强度显著高于对照组（P〈0.05）。（4）肾组织的病理变化：在光镜下,实验组再灌注的各时间点肾小管及肾小管上皮细胞病变程度较对照组明显减轻,仅出现肾小管扩张、肾小管上皮细胞肿胀、肾间质血管扩张充血;假手术组肾小管上皮细胞未见明显改变。结论他克莫司具有改善大鼠肾缺血再灌注损伤的作用。他克莫司可能是通过降低血清TNF-α表达水平达到改善大鼠肾缺血再灌注损伤,通过对肾脏Bcl-2蛋白表达增加,抑制肾细胞的凋亡,达到改善大鼠肾缺血再灌注损伤。     

根除幽门螺杆菌的抑酸治疗促进铋剂在肾脏中蓄积的形态学观察

目的探讨根治幽门螺杆菌的抑酸治疗对果胶铋(CBP)在肾脏中蓄积作用的影响。方法将体重200~250g的48只雄性SD大鼠随机分为5组A1组单用CBP,停止喂药时处死。B1组单用CBP,停药8周后处死。A2组果胶铋四联[CBP+羟氨苄青霉素(AMO)+甲硝唑(MTR)+奥美拉唑镁(LOSEC)],停止喂药时处死。B2组果胶铋四联(CBP+AMO+MTR+LOSEC),停药8周后处死。对照组给予蒸馏水。每日各喂药1次,共14d,取各组大鼠肾组织,AMG染色后复染,光镜下观察铋剂在组织中的沉积部位并进行灰度测量值比较。电镜下观察铋剂在胞浆中的具体沉积部位及胞浆细胞器的受损程度,并通过电镜能谱分析的方法确定样品中的化学元素成分是否为铋元素。结果光镜观察近曲肾小管细胞中布满了大量的铋颗粒,灰度测量比较发现四联用药组比单一用药组铋的肾脏蓄积量要大(P<0.05),停药8周后肾脏的蓄积量均较前明显减少(P<0.01)。电镜观察肾近曲小管细胞胞浆的溶酶体中特异性地聚集着大量黑色颗粒,并存在可逆性的细胞受损表现。结论四联疗法确可促进铋的吸收,增加铋剂在肾脏中的蓄积,损伤肾小管细胞的功能。     

三氟化硼三乙醇胺对家兔肾损害的研究

3个实验组家兔按等比级数为2的不同剂量喂饲三氟化硼三乙醇胺(TFA),隔日1次,共3个月,可引起血清尿素氮和Mg~++含量增高,肾小管上皮细胞浊肿,水变性,细胞内酸性磷酸酶活性增高,碱性磷酸酶及琥珀酸脱氢酶活性明显降低。肾小管上皮细胞基底膜增厚,其皱褶间隙扩张,细胞内粗面内质网扩张,线粒体肿胀,次级溶酶体增加。结果提示TFA对肾小管上皮细胞的代谢有干扰作用。     

表面活性蛋白-A和表面活性蛋白-D在人正常肾组织的表达与分布

目的:研究表面活性蛋白-A(SP-A)和表面活性蛋白-D(SP-D)在人正常肾组织的表达及表达部位。方法:收集5例正常的人肾组织,培养人肾小管上皮细胞(HK-2),同时收集5例正常的人肺组织作为对照。应用免疫组化技术检测SP-A和SP-D蛋白在人正常肾组织的表达部位;应用RT-PCR检测SP-A和SP-D mRNA在正常肾组织和HK-2细胞中的表达。结果:免疫组化方法检测到SP-A和SP-D主要表达在皮质部的近曲和远曲小管;RT-PCR结果显示,在人的正常肾组织和HK-2细胞中存在SP-A和SP-D mRNA表达。结论:与肺组织有相同内胚层来源的肾组织可表达SP-A和SP-D。     

DARPP-32在小鼠肾脏中的表达分布

目的研究DARPP-32在小鼠肾脏组织的表达和分布.方法免疫印记和免疫组化方法检测DARPP-32在小鼠肾脏组织的表达和分布.结果在小鼠组织中,抗DARPP-32多克隆抗体可检测到32×103蛋白的表达;DARPP-32染色阳性细胞位于髓质远曲小管、皮质层近曲小管及髓放射区集合管.结论DARPP-32很可能是多巴胺调节肾脏钠离子重吸收的一个重要中间环节.     

缬沙坦对肾小球硬化大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的观察缬沙坦对肾小球硬化大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨血管紧张素转化酶Ⅱl-型受体拮抗剂(AT1RA)对肾脏的保护作用。方法雄性SD大鼠36只随机分为对照组、肾小球硬化组和缬沙坦治疗组,每组12只。切除肾小球硬化组和缬沙坦治疗组大鼠左肾,1周后按5 mg.kg-1的剂量于尾静脉注射阿霉素,对照组行假手术及尾静脉注射等量生理盐水,注射阿霉素后次日始缬沙坦治疗组予缬沙坦20 mg.kg-1的剂量每日晨灌胃1次,对照组和肾小球硬化组仅灌以2 mL自来水。灌胃12周后处死大鼠,切取右肾用于肾脏病理分析,免疫组织化学法测定肾组织MCP-1。结果(1)形态学改变:对照组大鼠肾小管结构正常;肾小球硬化组多数肾小球呈节段性硬化,许多肾小球及肾小管受累;缬沙坦治疗组肾脏病变轻于肾小球硬化组,且肾小球硬化指数明显低于肾小球硬化组(P<0.01);(2)MCP-1的表达:对照组肾小管中有少量MCP-1的表达,在肾小球内几乎不表达,在肾小球硬化组和缬沙坦治疗组肾小球及肾小管内表达皆强于正常对照组(P<0.01)。缬沙坦治疗组MCP-1表达较肾小球硬化组弱(P<0.01)。结论缬沙坦可能通过阻断肾小球硬化大鼠肾素-血管紧张素系统,降低MCP-1在肾脏中的表达,抑制或减轻了巨噬细胞浸润,进而延缓肾小球硬化的进展。     

缺氧对孕鼠肾组织PKC-α表达的影响及当归的调节作用

目的探讨缺氧对孕大鼠肾组织中PKCα表达的影响及当归注射液是否调节其表达而具有保护缺氧孕大鼠肾的作用。方法Wistar孕大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组,当归组孕大鼠缺氧前经尾静脉注入当归注射液,然后采用低张性缺氧模型致孕大鼠缺氧3h,再复氧2h,剖腹取右肾。缺氧组孕鼠用生理盐水代替当归注射液,余同当归组。对照组不缺氧,余同当归组。各组孕大鼠肾组织经PKCα免疫组化染色后,进行图像分析。肾组织常规切片,做HE染色,光镜观察。结果对照组孕大鼠肾组织中阳性细胞PKCα主要分布在肾小管上皮细胞胞质内,染色浅:缺氧组肾组织中阳性细胞PKCα的分布与对照组相似,但阳性细胞增多,染色增强(P<0.05);与缺氧组相比,当归组PKCα阳性细胞减少,染色减弱(P<0.05)。光镜下,当归组与对照组比较,肾小管上皮细胞轻度水肿,管腔内少量管型,明显较缺氧组肾小管结构好。。结论①缺氧可剌激孕大鼠肾组织中PKCα的表达。②当归注射液使缺氧孕大鼠肾组织中PKCα的表达下调,可能有保护缺氧孕大鼠肾的作用。     

脑死亡供体肾脏病理改变及移植应用标准评判的探讨

目的探讨脑死亡供体肾脏病理改变及对临床使用的指导意义。方法对13例脑死亡供体26个肾脏进行了穿刺活检,做HE染色、网状纤维染色及PAS染色。结果发现大多数患者均有不同程度的近曲小管坏死,而远曲小管、肾小球、基底膜多无改变。选择肾近曲小管上皮细胞坏死<50%、肾小球无明显改变、肌酐<250μmol/L、年龄<55岁的供体26个肾脏施行了移植,均取得成功。结论脑死亡供体肾脏根据穿刺病理活检改变并结合临床表现可以作为临床移植的评判依据。     

猪肾近端小管的超微结构

目的 研究猪肾近端小管的超微结构。方法 树脂包埋一超薄切片、透射电子显微镜技术。结果 猪肾近端小管可分S1、S2、S3和S4段构成，其中S1、S2段构成了近端小管曲部，S3、S4段构成了近端小管直部。本文对各段细胞超微结构特点进行详细的描述。结论 猪肾近端小管的超微结构与人肾近端小管最接近。     

米非司酮对妊娠中期胎儿肾脏超微结构的影响

目的：观察米非司酮对妊娠中期胎儿肾脏超微结构的影响。方法：将25例中期引产孕妇（孕龄16～28周）随机分为2组：对照组(水囊组n=10）;实验组(米非司酮+水囊组,n=15）。实验组按孕龄分为实验Ⅰ组（n=10,孕周16～22周）, 实验Ⅱ组（n=5,孕周23～28周）,实验组口服米非司酮100 mg•d^-1,连服3 d,行水囊引产,对照组只行水囊引产。胎儿娩出后取肾脏组织,电镜下观察肾脏组织的超微结构。结果：实验Ⅰ组肾小球毛细血管内皮细胞肿胀、空化;系膜细胞核不规则,胞质内线粒体肿胀,系膜基质正常。滤过膜内皮细胞质厚,无孔,基底膜薄,多数足细胞核基质空化,足细胞轻度微绒毛化,次级突起可见较多微丝,突起呈融合状。近曲小管上皮细胞核空化,胞质内可见空泡结构及较多溶酶体。远曲小管大部分细胞核及胞质空化。实验Ⅱ组肾小球毛细血管可见内皮细胞孔,局部轻度增生呈连拱状,系膜细胞少量核不规则或轻度固缩状,胞质内线粒体轻度肿胀,部分嵴断裂。滤过膜内皮细胞胞质轻度肿胀,足突细胞结构基本正常,可见初级和次级突起,局部融合,轻度微绒毛化。近曲及远曲小管结构基本正常。结论：米非司酮可以引发胎儿肾脏的缺血缺氧性改变,孕龄越小者胎儿肾脏超微结构改变越明显。