苦参碱体内外抗大鼠肝纤维化的作用(英文)

目的:研究体外苦参碱对HSC-T6大鼠储脂细胞和NIH3T3成纤维细胞增殖和胶原合成的影响,以及体内对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响。方法:细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和[~3H]脯氨酸掺入法。肝纤维化评价以血清透明质酸和肝中羟脯氨酸含量为指标。结果:苦参碱(1～2mmol·L~(-1))显著减少血清刺激的HSC-T6细胞以及NIH3T3细胞增殖和胶原合成;苦参碱(0.25～2mmol·L~(-1))浓度依赖地抑制血小板源生长因子(PDGF)促HSC-T6细胞增殖以及抑制转化生长因子β_1(TGF-β_1)促胶原合成的作用。体内苦参碱(50,100mg·kg~(-1))均能显著降低血清透明质酸和肝脏羟脯氨酸水平。结论:苦参碱阻断PDG和TGF-β_1的作用,抑制储脂细胞增殖和胶原合成可能是其抗肝纤维化作用的机制之一。     

苦参碱对实验性大鼠腹膜纤维化的影响

目的：探讨苦参碱对腹膜透析大鼠腹膜纤维化的影响和可能的机制。方法：采用高糖透析液＋脂多糖复制腹膜纤维化模型。将大鼠随机分为对照组、模型组、苦参碱低剂量组和苦参碱高剂量组。治疗组在造模同时每日腹腔内注射不同剂量的苦参碱。35d后处死各组大鼠，行2h腹膜平衡试验，测量超滤量，检测腹膜功能；留取腹膜组织行病理切片做HE及Masson染色观察腹膜组织学改变；用RT-PCR法测定腹膜血管内皮生长因子（VEGF）和纤维连接蛋白（FN）表达率。结果：苦参碱治疗组的腹膜厚度和血管增生程度比模型组明显减轻，VEGF和FN的合成水平也明显下降。结论：苦参碱可以有效的防治腹膜纤维化的进程。     

异佛司可林抑制炎症和纤维化细胞因子减轻小鼠肺纤维化作用研究

本文旨在探讨异佛司可林(isoforskolin,ISOF)对博莱霉素(beleomycin,BLM)诱导小鼠肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的影响,并初步探索其作用机制.本研究中动物福利和实验过程均遵循昆明医科大学动物伦理委员会的规定.实验分为假手术组、博莱霉素组(气管滴入BLM 5 mg·kg...     

水飞蓟宾对小鼠腹腔巨噬细胞释放纤维化因子的影响

目的:研究水飞蓟宾对小鼠腹腔巨噬细胞释放纤维化因子的影响。方法:小鼠腹腔巨噬细胞先后用卡西霉素和脂多糖刺激培养24h诱导纤维化因子。巨噬细胞培养上清中促胶原合成活性和转化生长因子β活性分别采用³H-脯氨酸掺入法和雕肺上皮Mv-1-Lu细胞测定。结果:水飞蓟宾(6.25-50μg／mL)以浓度依赖方式抑制巨噬细胞产生胶原刺激活性和转化生长因子β₁。结论:水飞蓟宾减少巨噬细胞释放促纤维化因子可能是其保肝抗硬化机制之一。     

水飞蓟宾对小鼠腹腔巨噬细胞释放纤维化因子的影响

目的：研究水飞蓟宾对小鼠腹腔巨噬细胞释放纤维化因子的影响。方法：小鼠腹腔巨噬细胞先后用卡西霉素和脂多糖刺激培养24h诱导纤维化因子。巨噬细胞培养上清中促胶原合成活性和转化生长因子p活性分别采用^3H-脯氨酸掺入法和雕肺上皮My-1-Lu细胞测定。结果：水飞蓟宾（6．25—50μg／mL）以浓度依赖方式抑制巨噬细胞产生胶原刺激活性和转化生长因子β1。结论：水飞蓟宾减少巨噬细胞释放促纤维化因子可能是其保肝抗硬化机制之一。     

氧化苦参碱治疗肝纤维化的临床研究

目的　探讨氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的效果及其机制。方法　 5 8例慢性乙型肝炎伴肝纤维化病人随机分为治疗组 (2 8例 )和对照组 (30例 )。治疗组给予氧化苦参碱每日 6 0 0mg静脉注射 ,对照组给予维生素类一般保肝药 ,疗程 3个月。结果　治疗组治疗第 1个月末血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)复常率高于对照组 (P <0 0 5 ) ,但第 2个月末、治疗结束时两组复常率间差异无显著意义。治疗组治疗结束时血清转化生长因子 β1、透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、Ⅳ型胶原 (ⅣC)和层粘蛋白 (LN)水平较治疗前显著下降 (分别为P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,对照组治疗前后血清TGFβ1、HA、PCⅢ、ⅣC和LN水平差异无显著意义 (均为P >0 0 5 )。结论　氧化苦参碱有减轻乙型肝炎肝纤维化的作用。     

4种黄酮化合物对小鼠腹腔巨噬细胞纤维化因子产生及作用的影响

目的：研究黄颜木素、槲皮素、芹菜素和根皮素对小鼠腹腔巨噬细胞纤维化因子的产生及作用的影响。方法：小鼠腹腔巨噬细胞先后用卡西霉素和脂多糖刺激培养24h诱导纤维化因子。巨噬细胞上清促肝星状细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和^3H-脯氨酸掺入法测定。转化生长因子β活性采用雕肺上皮Mv-1-Lu细胞测定。结果：黄颜木素、槲皮素、芹菜素和根皮素（12．5～50μmol／L）以浓度依赖方式抑制巨噬细胞产生胶原刺激活性和转化生长因子β1，但对巨噬细胞产生促细胞增殖作用无影响。结论：黄颜木素、槲皮素、芹菜素和根皮素具有减少促纤维化因子产生的作用。     

苦参碱对腺嘌呤诱导大鼠慢性肾小管-间质纤维化的作用

目的为探讨苦参碱对腺嘌呤诱导大鼠肾小管-间质纤维化的防治作用及其机制。方法60只雄性Wistar大鼠被随机分为3组①正常对照组(NCG)8只;②腺嘌呤处理组(ATG)28只;③苦参碱治疗组(MTG)24只。按250mg·kg-·1d-1体重给ATG和MTG的大鼠灌服腺嘌呤,连续21天,而灌服腺嘌呤1周后,MTG的大鼠每天还按20mg·kg-·1d-1的剂量用苦参碱腹腔注射,分别观察苦参碱治疗的大鼠在14天、21天和28天的血清尿素氮、肌酐、IL-6和肾组织病理改变等指标的变化,用放射免疫法检测血清IL-6的水平,免疫组化法检测肾组织TGF-β1蛋白的表达,并对免疫组化染色阳性信号进行半定量分析,用HE染色对各组肾小管-间质损伤进行半定量分析。结果在相同时间点上,MTG大鼠的血清肌酐、尿素氮与ATG大鼠比较,有明显的改善(P<0.05);MTG大鼠的血清IL-6水平、肾小管间质的TGF-β1蛋白表达显著低于ATG大鼠(P<0.05),但均高于NCG大鼠(P<0.01),MTG的大鼠肾小管间质损伤指数低于ATG大鼠(P<0.05)。结论在腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化过程中,苦参碱能降低其血清BUN、Scr、IL-6水平和TGF-β1蛋白在肾小管间质中的表达,阻抑肾间质纤维化的进展。     

小剂量饮酒对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的影响

目的研究小剂量饮酒对四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化的影响。方法40只雄性昆明小鼠随机分为4组,空白对照组小鼠自由饮水,予植物油皮下注射;四氯化碳模型组小鼠自由饮水,予以CCl4皮下注射;酒精模型组小鼠予酒精代水饮,并皮下注射植物油;酒精＋四氯化碳组小鼠予以酒精代水饮,并皮下注射CCl4。通过检测小鼠血清ALT、AST水平,肝脏的病理组织学改变及肝组织转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA和I型胶原（collagenI）mRNA的表达水平以观察小剂量饮酒对CCl4诱导的小鼠肝纤维化的影响。结果酒精＋四氯化碳组小鼠与其他3组小鼠相比,血清ALT、AST水平,肝细胞坏死程度和肝纤维化程度以及TGF-β1、collagenImRNA的表达水平均为最高。结论小剂量饮酒加重了CCL诱导的小鼠肝纤维化和肝功能损伤程度。     

氧化苦参碱对慢性肝炎肝硬化思考肝纤维化的影响

目的：观察氧化苦参碱在治疗慢性乙型肝炎、肝硬化中抗肝纤维化的作用。方法：采用氧化苦参碱600mg肌肉注射，与应用复方丹参滴丸的病例对照。治疗前后重点检测思者血清肝纤维化指标(HA、LN、PCIII、Ivc)。结果：观察组病例肝纤维化指标下降明显，与对照组比较有显著性差异(P＜0．01)。结论：氧化苦参碱具有良好的抗肝纤维化作用。     

丹酚酸B对大鼠肝星状细胞胶原生成与丝裂原激活蛋白激酶活性的影响

目的:研究丹酚酸B影响肝星状细胞活化与转化生长因子β1胞内信号转导的抗肝纤维化作用机制.方法:正常大鼠肝脏链酶蛋白酶原位灌流消化与11％nycondenz密度梯度离心分离肝星状细胞,传一代培养.[~3H]TdR掺入法测定细胞增殖,丽春红染色、图像分析半定量细胞胶原沉积量,ELISA法测定细胞培养上清Ⅰ型胶原分泌量,培养上清酸化处理后,ELISA法测定活性TGF-β1含量.RT-PCR法分析细胞前胶原α_1(Ⅰ)基因的表达,免疫沉淀与蛋白印迹法分析丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)活性.结果:丹酚酸B 0.1-100 μmol/L浓度依赖性抑制星状细胞增殖,丹酚酸B 1-100 μmol/L浓度依赖性抑制细胞的Ⅰ型胶原分泌量与总胶原的沉积.丹酚酸B 1-10 μmol/L抑制TGF-β1自分泌量,下调α_1(Ⅰ)前胶原的基因表达.而且丹酚酸B 1-PffiO卫几明显抑制TGF-β1刺激的MAPK活性.结论:丹酚酸B可抑制肝星状细胞的增殖与胶原生成,抑制TGF-β1的自分泌与MAKP活性,这些作用是丹酚酸B抗肝纤维化的主要作用机制.     

Paeoniflorin prevents hepatic fibrosis of Schistosomiasis japonica by inhibiting TGF-β1 production from macrophages in mice

In order to investigate the effect of paeoniflorin (PAE) on hepatic fibrosis of mice with Schistosomiasis japonica in vivo and in vitro, a model of hepatic fibrosis caused by schistosomiasis was established in mice infected with cercariae of Schistosoma japonicum. Then, PAE was orally administered before and after praziquantel treatment and both therapeutics were given simultaneously at different time points after the infection. The concentration of serum hyaluronic acid (HA) was determined by radioimmunoassay (RIA). Hepatic granuloma and fibrosis were evaluated via HE and Masson staining. The expression of α-smooth muscle actin (α-SMA), transforming growth factor β1 (TGF-β1) and collagen I (Col I) protein was detected by immunohistochemistry. The effect of soluble egg antigen (SEA) and PAE on the production of TGF-β1 from mouse peritoneal macrophages (PMϕs) was investigated by RT-PCR, Western blotting and ELISA. The effect of TGF-β1 in optimum macrophage-conditioned medium (OPMCM) on the proliferation of hepatic stellate cells (HSCs) and collagen secretion from HSCs with anti-TGF-β1 antibody was explored by MTT assay and ELISA. The results show that PAE could significantly reduce the concentration of serum HA, the size of egg granuloma, the severity of hepatic fibrosis and the expression of α-SMA, TGF-β1 and Col I protein in the pre-treatment group. However, in sim-or post-treatment group, PAE did not have any significant therapeutic effect. TGF-β1 could be secreted from PMϕs stimulated by SEA. Meanwhile, the production of TGF-β1 from PMϕs could be depressed significantly by PAE in a concentration-dependent manner. TGF-β1 could promote the proliferation of HSCs and the secretion of collagens. In a word, PAE can prevent hepatic granuloma and fibrosis caused by schistosomiasis japonica through the inhibition of the secretion of TGF-β1 from PMϕs, the proliferation and activation of HSCs and the secretion of collagens from HSCs. Equally contributed to this work     

TGF-β1抑制伤寒沙门菌诱导巨噬细胞RAW 264.7凋亡的实验研究

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1在伤寒沙门菌诱导巨噬细胞凋亡过程中的调节作用。方法:ELISA检测伤寒沙门菌诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7培养上清中TGF-β1分泌水平,实时定量PCR检测伤寒沙门菌诱导小鼠巨噬细胞TGF-β1mRNA的表达,流式细胞术观察外源性TGF-β1对伤寒沙门菌诱导巨噬细胞凋亡的影响。结果:伤寒沙门菌感染组巨噬细胞TGF-β1的分泌和mRNA的表达水平显著高于对照组(P<0.05);伤寒沙门菌热杀死组、伤寒沙门菌感染组巨噬细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),LPS 伤寒沙门菌感染组的巨噬细胞凋亡率显著高于细菌脂多糖(LPS)组(P<0.05);1~100μg/L3个浓度的TGF-β1组的巨噬细胞凋亡率显著低于伤寒沙门菌感染组(P<0.05),并呈一定的剂量依赖关系。结论:伤寒沙门菌能够诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7表达TGF-β1,不同剂量的外源性TGF-β1能够抑制伤寒沙门菌诱导巨噬细胞凋亡的过程,提示TGF-β1在伤寒沙门菌诱导巨噬细胞的凋亡过程具有调节作用。     

牛磺酸对血管紧张肽Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的抑制作用

目的：研究牛磺酸对血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的抑制及对转化生长因子β_1(TGF-β_1)蛋白表达的下调作用,以探讨其对抗AngⅡ诱导的心肌纤维化的作用。方法：在AngⅡ诱导心肌成纤维细胞增殖前后加不同浓度的牛磺酸,并采用羟脯氨酸法、MTT比色法分别测定胶原量和细胞增殖情况、SDS-PAGE电泳测胶原Ⅰ/Ⅲ型比值、ELISA法测定TGF-β_1蛋白的含量。结果：(1) AngⅡ有促进心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的作用,其浓度在1×10~(-7)mmol·L~(-1)时达最大效应；(2)牛磺酸能抑制由AngⅡ诱导的Ⅰ/Ⅲ型胶原比值增高和TGF-β_1蛋白含量的增加,其中100,200 mmol·L~(-1)的牛磺酸可抑制AngⅡ诱导的细胞增殖和胶原合成。结论：牛磺酸可用于抑制由AngⅡ导致的心肌纤维化。     

虫草菌丝对实验性肝纤维化的防治作用及其机制研究

目的 :探讨虫草菌丝对实验性慢性肝炎纤维化形成的抑制作用及其可能的作用机制。方法 :以CCl4 及乙醇诱导大鼠肝纤维化模型 ,自造模 10d后给予虫草菌丝悬浊液灌胃 ,同时设立正常对照组和模型对照组。于造模 9wk后处死全部大鼠 ,取血及肝组织标本。使用HE染色法观察肝组织形态学变化和肝纤维化病理学分级 ,生化及放免法测定血清ALT ,AST ,透明质酸 (HA) ,板层素 (LN)含量 ,使用免疫组化法及原位杂交法观察α 平滑肌动蛋白(α SMA) ,转化生长因子 β1(TGFβ1) ,血小板衍生生长因子 (PDGF) ,Ⅰ型和Ⅲ型胶原的蛋白或mRNA表达情况。结果 :与模型组相比 ,虫草组大鼠血清HA ,LN ,AST ,ALT含量均显著下降 (2 0 2±s 79vs316± 94 ;5 0± 3vs 6 0± 10 ;86± 34vs 2 2 4± 179;14 7± 6 0vs 2 73± 130 ;P <0 .0 5 )。肝组织表达α SMA ,TGFβ1,TGFβ1mRNA ,Ⅰ型胶原mRNA ,PDGF均显著减少 (0 .2± 0 .14vs 1.7± 1.4 ;1.7±0 .5vs 3.2± 1.2 ;1.1± 0 .8vs 2 .6± 1.4 ;0 .9±0 .4vs 1.9± 0 .7,P <0 .0 5 )。Ⅲ型胶原mRNA表达呈下调趋势 (0 .4± 0 .3vs 1.0± 0 .7,P =0 .0 6 95 )。而PDGFmRNA的表达下调则不明显 (0 .4± 0 .3vs 0 .7± 0 .5 ,P >0 .0 5 )。结论 :虫草菌丝能够抑制慢性肝炎纤维化的形成 ,延缓其     

培哚普利对实验性肝纤维化大鼠TGF-β1及其Smad3、7的影响

目的：探讨培哚普利抗大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。方法：用培哚普利治疗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型。免疫组化技术检测TGF-β1、Smad3及Smad7在肝内的表达及定位，常规生化方法检测肝功能，放射免疫方法检测透明质酸（HA），肝组织VanGiseonr染色、HE染色。结果：经培哚普利治疗后大鼠肝组织内TGF-β1及Smad3表达降低，而Smad7的表达增加。TGF-β1及Smad3的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆，Smad7则主要在肝细胞浆表达。血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、HA显著减低，肝小叶结构趋于正常，纤维间隔明显变薄。结论：培哚普利能有效地减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度，与其抑制肝内TGF-β1及Smad3．促进Smad7表达有关。