丹参乙酸镁通过抑制TGF-β途径减轻脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制

目的 探讨丹参乙酸镁通过抑制转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/激活素受体激酶5(activin receptor-like kinase 5,ALK5)/SMAD2/3(drosophila mothers against decapentaplegic protein 2/3)/NADPH氧化酶(NADPH oxidase,NOX)/H2O2途径产生对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法 构建大鼠线栓法脑缺血/再灌注模型,使大鼠脑缺血2 h后,再灌注24 h。实验动物随机平分为假手术组（sham组）、脑缺血/再灌注组（I/R组）、脑缺血/再灌注+丹参乙酸镁组（I/R+MLB组）和脑缺血/再灌注+溶媒组（I/R+vehicle组）4组,分别检测sham组、I/R组、I/R+MLB组以及I/R+vehide组动物死亡率、神经学评分、脑梗死体积、脑内TGF-β1含量、ALK5 mRNA及蛋白含量、pSMAD2/3蛋白含量、NOX活性及H2O2水平。结果 与I/R组比较, I/R+MLB组大鼠脑组织梗死体积明显缩小(P<0.01), TGF-β1含量(P<0.05)、pSMAD2/3蛋白含量(P<0.01)、NOX活性(P<0.01)和H2O2水平(P<0.01)均降低。结论 丹参乙酸镁具有抗脑缺血/再灌注损伤的作用,其机制与抑制TGF-β1/ALK5/SMAD2/3/NOX/H2O2通路有关。     

脑缺血再灌注时血脑屏障损伤的炎性机制研究进展

近年来,炎症反应在脑缺血/再灌注中的作用逐渐引起人们的重视.大量证据表明,炎症反应介导了脑缺血/再灌注损伤.脑缺血再灌注过程中伴随着细胞因子和黏附分子的表达,白细胞黏附,大量蛋白水解的酶、氧自由基及花生四烯酸等代谢产物的产生,破坏了脑毛细血管内皮细胞及基底膜,从而导致了血脑屏障的损害.本文就脑缺血再灌注时血脑屏障损伤的炎性机制的最新进展作一综述.     

脑缺血再灌注损伤后大脑皮质和海马区脑红蛋白的表达变化

目的研究脑缺血再灌注损伤后脑红蛋白（NGB）在大脑皮质和海马区的表达变化。方法采用双侧颈总动脉夹闭法制备沙鼠全脑缺血再灌注损伤模型,在缺血20min后分别再灌注2、8、16、24、48、72h,处死动物并取脑,采用免疫组化染色结合阳性细胞计数的方法,检测脑缺血再灌注损伤后大脑皮质和海马区NGB的表达变化。结果沙鼠脑缺血再灌注损伤后,大脑皮质的NGB蛋白表达于损伤后16～48h上调,而海马区NGB表达则呈持续减少的趋势。病理学检测显示海马区神经细胞损伤程度较大脑皮质区严重。结论不同脑区对缺血性损伤的耐受性差异可能与NGB表达水平有关。NGB表达上调可能对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

高压氧与脑缺血血管内皮细胞粘附分子表达的相关研究近况

炎症反应是脑缺血再灌注损伤中最重要的发病机制之一 ,因此抗炎治疗也就成为当前治疗脑缺血疾病的热点 ,而在这一炎症反应过程当中 ,血管内皮及各种细胞间粘附分子(intercellular adhesion m olecule,ICAM)的表达又是其中关键的环节 ,本文将近年来高压氧 (hyperbaric oxygen,HBO)治疗脑缺血及与粘附分子相关的某些研究进展综述如下。一、缺血再灌注损伤和粘附过程研究表明 ,炎症损伤在脑缺血再灌注损伤的发病中起重要作用 ,小血管炎症反应是脑损伤级联反应当中的重要一环 [1 ,2 ] 。脑缺血级联反应中 ,大量细胞毒性成分诱导自由基和其他…     

异丙酚预处理对全脑缺血再灌注大鼠脑组织S100β和神经元特异性烯醇化酶的影响

目的探讨异丙酚预处理对全脑缺血再灌注大鼠脑组织S100β及神经元特异性烯醇化酶（NSE）含量的影响，评价异丙酚对脑组织的保护作用。方法30只雄性SD大鼠，随机分为假手术组（A组）、单纯脑缺血再灌注组（B组）和缺血前2h异丙酚预处理组（C组），每组10只，C组动物在缺血前腹腔注射异丙酚100mg／kg，采用线栓法制作全脑缺血再灌注模型，于脑缺血再灌注后24h评估并记录动物的神经行为学评分，测定大鼠脑组织S100β和NSE含量。结果异丙酚预处理组神经行为学评分较单纯脑缺血再灌注组高（P〈0．05），假手术组评分也明显高于单纯脑缺血再灌注组（P〈0．05），异丙酚预处理组脑组织中S100β和NSE含量明显低于单纯脑缺血再灌注组（P〈0．05）。结论异丙酚可以降低脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织S100β和NSE的含量，减轻神经损害，缺血前2h异丙酚预处理可以改善大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经行为学评分，有明显的脑保护作用。     

补体级联反应在脑缺血/再灌注炎症损伤中的作用

缺血性脑血管疾病及缺血再灌注损伤严重危害人类的健康.补体系统过度激活的炎症效应片段是脑缺血再灌注损伤中最重要的始动因素之一.本文就脑内补体表达,脑缺血时脑内补体的激活,活化的补体片段对脑的损伤机制以及补体抑制剂在脑缺血再灌注中的应用研究进行综述.     

沙土鼠全脑缺血控制性低流量灌注的促神经功能康复研究

目的动态研究严重脑外伤时不同灌注时间和灌注量对全脑组织缺血损害的恢复程度和凋亡基因的表达，以探明控制性再灌注的神经功能康复作用。方法沙土鼠随机分5组，实验组夹闭两侧颈总动脉，造成沙土鼠全脑缺血模型，夹闭10min后，开放10min，开放不同脑血流量(1／4，1／2，1／1)和单纯血液稀释后分别观察缺血海马CA区凋亡基因的表达及缺血区大脑半球的改善状况，梯度灌注后行全脑缺血后神经功能评分对比。结果开放10min，1／2脑血流量时Bel—x／1基因明显上调，海马CA区缺血损害改善最明显，凋亡细胞减少，神经功能评分最高。开放10min，全脑血流量一次性开放时海马CA区损害最严重，凋亡明显，神经功能评分最低。结论(1)控制性再灌注有较好的抗神经元细胞凋亡和神经恢复功能作用；(2)低流量灌注有明显改善脑缺血的作用。     

还原型谷胱甘肽对脑缺血大鼠海马神经元泛素蛋白结合物表达的影响

目的 探讨游离锌(Zn2+)和泛素蛋白结合物在大鼠脑缺血/再灌注损伤后海马神经元内的变化,以及还原型谷胱甘肽(GSH)干预的影响.方法 取雄性SD大鼠90只,随机均分为假手术对照(sham)组,脑缺血/再灌注(I/R)组,还原型谷胱甘肽+脑缺血/再灌注处理(GSH)组.I/R组按Pulsinelli的四血管阻塞法建立大鼠前脑缺血/再灌注模型,Sham组大鼠进行相同的手术处理,但不进行四血管阻塞.GSH组大鼠于造模前30min给予GSH(1.2g/kg)腹腔注射,Sham组和I/R组在相同时刻注射等量生理盐水.分别在脑缺血/再灌注后6、24、72h三个时间点从各组取大鼠,断头取脑,取海马CA1区进行相应处理后用于后续检测.应用FluoroJade B染色法检测神经元变性死亡的数目,TSQ荧光染色检测神经元内Zn2+变化,Western blotting检测海马神经元内泛素蛋白结合物的表达变化.结果 脑缺血/再灌注后6、24h时点,各组大鼠海马CA1区神经元均未见Fluoro-Jade B荧光染色阳性细胞;72h时点,sham组仍未见阳性细胞,GSH组阳性细胞数目(48.6±10.8个/0.2mm2)明显少于I/R组(96.7±13.3个/0.2mm2,P＜0.01).脑缺血/再灌注后72h时点,与sham组比较,I/R组大鼠CA1区细胞内游离Zn2+聚集增加,GSH组神经元游离Zn2+聚集较I/R组有所减少.脑缺血/再灌注后6h时点,I/R组海马CA1区神经元泛素蛋白结合物的表达(10.25±1.23)较sham组(3.68±0.46)和GSH组(7.20±0.97)明显增多(P＜0.01),后两组比较有统计学差异(P＜0.01).结论 GSH可通过螯合神经元内游离Zn2+和降低泛素蛋白结合物聚集对大鼠脑缺血/再灌注损伤发挥保护作用.     

脑缺血再灌注损伤自由基的改变及其与脑组织损伤的关系

目的探讨脑缺彬再灌注损伤自由基的改变及其与组织损伤间的关系。方法采用大鼠缺血-再灌注动物模型，观察缺血-再灌注损伤过程中自由基指标、NO的改变，脑组织损伤及脑微循环障碍的情况，以及中药羌活石菖蒲的保护作用。结果脑缺．血／再灌注损伤过程中脂质过氧化增强，LPO明显升高，SOD明显降低，脑组织损伤明显，脑微循环严重障碍。结论脑缺彬再灌注损伤过程中自由基的改变明显，自由基损伤与组织损伤间关系密切，中药羌活石菖蒲对脑缺血／再灌注损伤有一定保护作用。为临床脑外伤等疾病的治疗提供实验依据。     

继发性脑损害时血小板膜黏附分子及孕激素的变化

引起继发性脑损害的原因复杂 ,可能与多种损伤因子 [如黏附分子 (CAM )CD6 2p、CD6 3等 ]造成脑缺血、脑水肿或脑出血有关。近来研究发现孕激素有脑保护作用[1-3 ] ,但在继发性脑损害中的作用及与损伤因子的关系研究较少。笔者对颅脑损伤后出现严重的继发性脑损害患者血中CD6 2p、CD6 3及孕酮作动态观察 ,探讨它们在继发性脑损害中的作用。一、临床资料与方法1.临床资料 :39例为本院 2 0 0 0年2月～ 2 0 0 2年 12月期间的急性颅脑损伤伴继发性脑损害患者 ,除外有严重的胸、腹及四肢合并伤患者。男 2 9例 ,女10例 ;年龄 16～ 6 0岁 ,平…     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后大脑皮质神经元自噬的研究

目的 检测大鼠局灶性脑缺血再灌注后皮质神经元的损伤及自噬情况,并初步探讨自噬在脑缺血损伤过程中的作用.方法 用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,实验动物随机分为:假手术组(Sham组)和大脑中动脉栓塞再灌注组(MCAO组).HE染色检测大鼠皮质神经细胞损伤.免疫荧光双标记法检测皮质神经元及星形胶质细胞自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达水平.结果 与Sham组比较,大鼠脑缺血再灌注后,皮质神经细胞损伤严重;LC3/NeuN和Beclin-1/NeuN双标阳性细胞数显著增加(P＜0.05),二者分别占LC3和Beclin-1单标阳性细胞数的比例均接近100％,未发现LC3/GFAP和Beclin-1/GFAP双标阳性细胞,说明LC3和Beclin-1主要表达于神经元.结论 脑缺血再灌注可能主要通过增加LC3、Beclin-1蛋白表达水平激活皮质神经元内的自噬.     

灯盏花注射液对脑缺血再灌注损伤的防治研究

目的 :探讨灯盏花注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤的防治作用及其机理。方法 :采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,观察灯盏花注射液对脑缺血再灌注后大鼠神经病学评分、梗死体积比、BCL - 2蛋白表达的影响。结果 :灯盏花注射液可减少脑缺血再灌注后大鼠神经病学评分数值 (P <0 .0 1) ,减少梗死体积比 (P <0 .0 1) ,上调BCL - 2蛋白的表达 (P <0 .0 1)。结论 :灯盏花注射液对脑缺血再灌注损伤具有防治作用 ,其机理可能与上调BCL - 2蛋白表达有关     

牛磺酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究牛磺酸(Taurine)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响并探讨其机制。方法采用大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)模型,将大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注组(I/R)和缺血再灌注加牛磺酸处理组(I/R+Taurine),观察缺血1 h再灌注24 h后,各组大鼠脑梗死体积、脑水含量及核因子кB(NF-кB)P65表达的变化。结果3组大鼠脑梗死体积百分比分别为0(、13.32±3.18)%(、9.21±2.24)%,与单纯缺血再灌注组比较,牛磺酸处理组脑梗死体积减少30.83%(P<0.05);脑水含量分别为(79.28±0.66)%,(82.46±0.94)%,(80.73±1.40)%,给药组脑水肿明显减轻(P<0.05);免疫组化染色结果显示牛磺酸抑制NF-кB的表达(P<0.05)。结论牛磺酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,该作用与其抑制NF-кB的激活,减轻神经细胞损害有关。     

心脑通口服液对全脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的探讨心脑通口服液抗脑缺血的作用。方法用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,观察心脑通口服液对脑缺血再灌注过程中脑电图及翻正反射恢复时间、脑含水量、脑指数的影响;对全脑缺血再灌注后脑组织匀浆丙二醛含量,超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活性的影响。结果在全脑缺血再灌注大鼠模型上,心脑通口服液可以缩短翻正反射恢复时间,促进脑电的恢复;降低脑含水量和脑指数;提高脑组织超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活性,降低丙二醛含量。结论心脑通口服液对缺血性脑损伤有一定的保护作用。     

脑再灌流综合征机理研究近况

脑缺血后再灌流引起脑实质的损伤,与挽救可逆转的损害细胞的作用相似,甚至较单纯缺血更严重。这种现象称为脑再灌流综合征(Reperfusion Syndrome of Brain),简称脑再灌。是脑介入性溶栓治疗所面临的实际问题。本文就脑再灌损伤及其机制作一综述,以提高对该综合征的认识,改善溶栓患者的预后。     

颈交感神经阻滞对急性颅脑损伤患者的脑保护作用

颈交感神经阻滞是将局部麻醉药注射在颈部交感神经节阻滞交感神经的方法.目前的研究表明,颈交感神经阻滞可调节血管舒缩物质,降低神经细胞热休克蛋白- 70表达的上调以及减轻脑缺血再灌注损伤[1,2].并在增加脑组织中脑源性神经营养因子水平在促进神经细胞生长、分化、存活和正常功能中具有重要作用[3],但在急性颅脑损伤患者中的运用及其脑保护作用目前未见报道.笔者观察颈交感神经阻滞对急性颅脑损伤患者的脑保护作用.     

罗布麻提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察罗布麻提取物（Aplocyilum venetum L Extract,AVE）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、AVE（高、低剂量）组和阳性对照组（银杏叶胶囊）,口服给药5d后,采用改良的Ionga法,建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。再灌注2,4h后对大鼠神经功能障碍进行评分,测量其脑梗死面积、脑含水量。结果 与模型组相比,AVE两个剂量组可以减轻神经症状,缩小缺血面积,并且可以减轻脑水肿。与阳性对照组对比,各指标无显著性差异。结论 AVE对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠具有保护作用。     

异丙酚对大鼠脑缺血再灌注损伤诱导型一氧化氮合酶表达的抑制作用

目的 观察异丙酚预先给药对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响,在分子水平上探讨异丙酚对迟发性脑神经元损伤保护作用机制.方法 采用Pulsinelli-Brierley四血管阻断法制备全脑缺血模型.应用免疫组织化学方法和原位杂交技术检测海马CA1区iNOS的表达.结果 同缺血再灌注对照组相比,异丙酚预处理组大鼠海马CA1区iNOS表达明显降低,存活的神经元数目明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.结论 异丙酚可能通过抑制iNOS表达而对脑缺血再灌注迟发性神经元损伤有一定的保护作用.     

咪唑安定对脑缺血再灌注沙土鼠血管内皮生长因子表达的调节作用

目的 观察咪唑安定对沙土鼠全脑缺血再灌注损伤过程中血管内皮生长因子(CEGF)表达的影响,为咪唑安定临床合理应用提供实验依据.方法 健康雄性沙土鼠共72只,随机分为对照组、损伤组和治疗组(n=24).采用双血管法建立沙土鼠全脑缺血再灌注模型,对照组仅游离双侧颈总动脉但不夹闭;损伤组夹闭双侧颈总动脉10min,放开动脉夹后即刻腹腔注射生理盐水50ml/kg 1次,随后每天同一时间点在动物清醒状态下腹腔注射生理盐水50ml/kg,共6d;治疗组夹闭双侧颈总动脉10min,放开动脉夹后即刻腹腔注射0.01%咪唑安定注射液5mag/kg随后每天同一时间点在动物清醒状态下腹腔注射0.01%咪唑安定5mg/kg,共6d.以双侧动脉夹放开时间为基准点,分别在放开后6h、1d、3d、7d运用正电子发射断层显像(PET)观察脑梗死体积变化,用免疫组织化学方法观察脑组织VEGF的表达,每次的观察时间点均设在腹腔注射前.结果 对照组脑内再灌注面积无明显异常;与对照组比较,损伤组与治疗组沙土鼠在再灌注后各时间点的脑内灌注面积明显缩小(P<0.01);与损伤组比较,治疗组在再灌注后6h脑内灌注面积无差异,但在1d、3d、7d时明显增加(P<0.01).对照组脑内可见少量的VEGF阳性细胞表达.损伤组沙土鼠在再灌注6h即有VEGF阳性表达,随再灌注时间延长,表达逐渐增强,于再灌注3d时表达最强,以后缓慢下降,至7d时仍有部分表达,与再灌注6h时比较,有显著差异(P<0.01).表达细胞主要为神经胶质细胞和巨噬细胞,其次为神经细胞及血管内皮细胞.治疗组VEGF的表达趋势与损伤组相似,但在再灌注后各时间点的VEGF表达均较损伤组强(P<0.01).结论 咪唑安定5mg/(kg·d)可减少沙土鼠脑缺血再灌注损伤后脑梗死的体积,促进脑缺血再灌注损伤中内源性VEGF的表达,并由此可能对损伤后神经功能中远期的恢复产生影响.     

高压氧治疗脑缺血再灌注损伤的机制及进展

脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)是指脑缺血致脑细胞损伤,恢复血液再灌注后其缺血性损伤反而进一步加重的现象.