紫杉醇体外抗肝癌活性(英文)

目的:研究紫杉醇在体外对SMMC-7721人肝癌细胞的抑制作用及其机理。方法:用MTT比色法测定细胞生长。用流式细胞仪及显微镜观察进行细胞周期动力学和凋亡的分析。结果:紫杉醇抑制人肝癌细胞生长的IC_(50)为18.96nmol·L~(-1),并有一定的浓度和时间依赖关系。经紫杉醇10nmol·L~(-1)处理后细胞积聚在G_2/M期并发现明显的凋亡,形态学观察可见多个多核细胞。结论:紫杉醇通过引起细胞周期阻滞、异常的有丝分裂以及细胞凋亡抑制人肝癌细胞生长。     

紫杉醇诱导食管癌细胞的细胞周期阻断与细胞凋亡

目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0／G1期及G2／M期并诱导其凋亡，凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征，流式细胞仪检测有凋亡峰出现，琼脂糖凝胶电泳显示3nmol·L-1紫杉醇作用72h便可见明显的DNA梯带。100nmol·L-1和1000nmol·L-1浓度的紫杉醇作用于细胞，在形态变化与细胞周期变化上有很大差别。紫杉醇作用短时间（＜2h）去除后再培养比持续性作用更早促使细胞凋亡。结论紫杉醇不仅可以阻断食管癌细胞的分裂，而且对于间期细胞也有很大作用。细胞周期阻断并不直接诱导细胞凋亡，甚至可能抑制细胞凋亡的进程。食管癌细胞中存在多条凋亡途径。     

紫杉醇诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

目的：探讨紫杉醇对Jurkat（人T细胞白血病细胞株）细胞增殖抑制丰及细胞周期各时相变化的影响。方法：应用MTT比色法和流式细胞仪检测紫杉醇对Jurkat细胞增殖抑制的时间效应，浓度效应及凋亡率。结果：紫杉醇对Jurkat细胞有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性；流式细胞仪分析：G1期细胞增高，S期细胞减少，G2／M期细胞相对增多。结论：紫杉醇能够抑制Jurkat细胞增殖，抑制GT期细胞向S期的进程，促进Jurkat细胞凋亡。     

新型紫杉烷类化合物Lx2-32c的抗肿瘤作用及机制研究

目的：研究新型紫杉烷类化合物Lx2-32c的抗肿瘤作用及作用机制。方法：体外微管蛋白聚合试验采用比浊法、肿瘤细胞增殖试验采用MTT法、肿瘤细胞周期分析采用流式细胞术、细胞内P53蛋白表达采用Western blot分析法、细胞内α-tubulin的形态观察采用免疫荧光法；体内药效学采用人体肿瘤细胞裸鼠异体移植瘤模型。结果：Lx2-32c在体外对多种人体肿瘤细胞均具有较强的抗增殖活性；在体内明显抑制人胃癌BGC-823、人卵巢癌A2780及人肺腺癌A549肿瘤的生长。作用强度较同剂量的紫杉醇为强。作用机制研究表明，Lx2-32c在体外能明显促进微管蛋白的聚合；使人胃癌细胞（BGC-803、BGC-823）及卵巢癌细胞（A2780）阻滞于有丝分裂期（G2／M），并使细胞出现明显的凋亡形态改变；诱导A2780细胞内P53蛋白表达呈剂量依赖性增高；促进肿瘤细胞α-tubulin聚合并形成稳定的微管束。结论：新型紫杉烷类化合物Lx2-32c在体内外均具有较强的抗肿瘤作用，其机制与促进微管聚合形成稳定的微管束，从而使肿瘤细胞阻滞于G2／M期，并通过P53途径诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

茶多酚对人鼻咽癌细胞系放射增敏机制的实验观察

目的探讨茶多酚对鼻咽癌细胞生长的抑制,及对放疗增敏作用机制的观察。方法体外培养鼻咽癌CNE-2细胞系,分单纯放疗组和放疗加茶多酚组,通过MTT（四唑蓝比色试验）法观察组间细胞生长的抑制情况,通过流式细胞仪检测细胞周期变化,通过电子显微镜观察细胞凋亡情况。结果 MTT法显示与单纯放疗组相比,放疗加茶多酚组,随着茶多酚浓度的增高和作用时间的延长对鼻咽癌细胞生长的抑制也逐渐增加;流式细胞仪结果显示放疗加茶多酚组使G2/M期的细胞减少,提示放疗杀伤了更多的处于G2/M期的细胞;电子显微镜观察细胞凋亡超微结构显示放疗加茶多酚组能较早的诱导鼻咽癌细胞产生凋亡小体。结论茶多酚在体外试验中显示,其对鼻咽癌细胞系CNE-2的放疗有增敏作用。     

奥沙利铂诱导人白血病细胞株凋亡的研究

目的：研究第三代铂类化合物奥沙利铂对人早幼粒细胞白血病细胞株(HL—60)的影响。方法：采用MTT法检测奥沙利铂对HL—60细胞作用的时间效应和剂量效应；流式细胞仪检测细胞的DNA含量，分析细胞周期的改变；光镜和电镜观察奥沙利铂作用后细胞形态变化。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，奥沙利铂对HL-60细胞增殖的抑制作用就越明显。0．032mmol/L奥沙利铂作用72小时，细胞生长抑制率86．5％，流式细胞仪检测HL-60细胞Q／M期细胞增多，形态学显示细胞凋亡。结论：奥沙利铂有明显抑制恶性白血病细胞生长和促进细胞凋亡的作用。     

叶酸受体介导的负载紫杉醇纳米药物输送系统的体外生物活性的研究

目的:叶酸受体介导的负载紫杉醇纳米药物输送系统的的体外生物活性研究。方法:应用激光共聚焦观察肝素-叶酸-紫杉醇纳米粒进入叶酸受体阳性表达KB细胞和叶酸受体阴性表达A549细胞的情况,考察纳米粒对靶细胞摄取情况;以原药紫杉醇为对照组,应用MTT法检测纳米粒子对叶酸受体阳性表达KB细胞的抗癌抑制活性;应用流式细胞仪对纳米粒子抗癌机制进行分析。结果:细胞摄取实验表明,肝素-叶酸-紫杉醇纳米药物是通过叶酸受体介导的内吞作用实现对靶细胞的特异性;与紫杉醇对比,纳米粒子的针对叶酸受体阳性细胞的抑制效果更好,半数抑制浓度(IC50)为0.06g/mL,MTT实验结果与细胞摄取实验结果一致;流式细胞仪检测表明肝素-叶酸-紫杉醇纳米药物也表现出与紫杉醇相似的抑制作用,即G2/M期均有所增长。结论:体外生物活性检测表明叶酸受体介导的负载紫杉醇的纳米药物输送系统有较好的靶向性,其应用前景值得期待。     

丹酚酸C诱导肝癌HepG2细胞有丝分裂阻滞及凋亡的研究

目的研究丹酚酸C(salvianolic acid C,SalC)的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测Sal C对人肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡,Giemsa染色进行细胞有丝分裂的形态学观察,微管蛋白聚合实验检测Sal C对微管蛋白聚合活性的影响,比色法检测细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹酚酸C能抑制多种人肿瘤细胞增殖,其中对HepG2细胞的抑制作用较明显。流式细胞术分析发现Sal C使HepG2细胞阻滞于G2/M期并随作用时间延长出现明显的凋亡峰,细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性升高。Gi-emsa染色提示HepG2细胞发生有丝分裂阻滞。Sal C能明显抑制微管蛋白的聚合。结论 Sal C具有抗肿瘤细胞增殖活性,通过抑制微管蛋白聚合诱导细胞有丝分裂阻滞从而诱导凋亡。     

多西紫杉醇诱导宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的研究

目的：观察多西紫杉醇对体外培养的宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法：不同浓度（1、5、10、20、40μg/mL）的多西紫杉醇处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞6、12、24、48、72h后,用MTT法测定其生长抑制率,倒置显微镜及透视电镜观察细胞形态学变化,通过流式细胞术分别测定细胞凋亡率、细胞周期分布,RT-PCR法检测自噬基因Beclin1表达的变化情况。结果：多西紫杉醇呈剂量和时间依赖性抑制宫颈癌HeLa细胞增殖（P〈0.05）;多西紫杉醇10μg/mL处理的HeLa细胞,早期（24h内）可出现明显的细胞自噬性变化,细胞凋亡数明显增加,G2/M期阻滞,且自噬基因Beclin1的表达明显增高。结论：多西紫杉醇具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡等作用,其机制可能与上调自噬基因Beclin1的表达水平有关。     

熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究

目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。结果 MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

人参总甙及单体对脐血CD34+细胞体外增殖及分化的影响

目的：探讨人参总甙、人参皂甙单体对脐血CD34^ 细胞体外增殖及分化的影响。方法：用MethoCult^TM H4435半固体培养基加入不同浓度的人参总皂甙(GS)、Rgl、Rbl，计数CFU—E、BFU—E、CFU—GM集落。结果：GS、人参皂甙单体Rg1、Rb1具有刺激脐血CD34^ 细胞集落形成的作用，人参皂甙单体的作用优于GS。不同浓度的人参皂甙对脐血CD34^ 细胞集落刺激不同，但其集落形成能力明显高于对照组。GS的最佳浓度为50mg／L，Rg1和Rb1最佳浓度为5mg/L。高浓度的GS、Rgl、Rb1集落形成能力下降，但并不显示抑制作用。结论：人参总甙、人参皂甙单体能促进造血干或祖细胞增殖，并且能诱导定向分化，具有类似生长因子和协同生长因子作用。     

EGFR纳米抗体抑制雌激素依赖的人子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖与迁移

纳米抗体是骆驼来源的一种轻链缺失的抗体,具有与单克隆抗体相似的抗原结合特异性和亲和力,此外还具有分子量小、稳定性好、易于制备等优点,因而具有巨大的生物医药应用价值。本研究利用基因工程技术在大肠杆菌中成功制备出了高纯度的EGFR纳米抗体(antiEGFRnano)。CCK-8法检测细胞增殖及迁移实验(细胞划痕实验和Transwell法检测)证明,重组的EGFR纳米抗体具有显著的抑制子宫内膜癌细胞增殖及迁移的活性,这为靶向EGFR治疗子宫内膜癌提供了一种全新的思路和方法。     

大鼠肝实质及非实质细胞分离和质量检测

目的　探索分离肝实质细胞及非实质细胞的合理条件。方法　应用胶原酶 /蛋白酶E消化分离和低速离心技术 ,以细胞活率、细胞产量和细胞纯度等指标检测细胞质量。结果　在 37℃ ,0 5g·L-1的胶原酶作用 30min ,80 0r·min-1离心条件下 ,肝实质细胞产量 (98× 10 9± 4× 10 9·L-1)、纯度 (97%± 2 % )和活率 (>90 % )最好。胶原酶和蛋白酶E合用 ,肝非实质细胞产量最高 (2 8 6× 10 9± 3 7× 10 9·L-1) ,Kupffer细胞纯度合理 (16 0 %± 3 5 % ) ,且Kupffer细胞含量符合体内正常分布。结论　本实验方法分离细胞对于进一步研究肝实质 ,尤其肝非实质细胞功能有实际意义。     

新化合物D261抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖及其作用机制

<正>肺癌是当今恶性肿瘤死亡率最高的癌症。早期肺癌主要以手术治疗为主,并辅以放疗化疗。但是化疗药物毒副作用大,且抗药性在一些肿瘤靶向性药物中逐渐显现。因此,亟需新的抗肿瘤药物。天然产物是小分子新药的主要来源。我们在对天然小分子化合物的筛选过程中发现D261(从固体发酵物中提取,纯度大于95%)具有潜在的抗肿瘤活性,且对非小细胞肺癌的抑制作用最显著。因此,本文对D261影响非小细胞肺癌NCI-H460及其相关机制作了初步     

四丁基丙二胺对人MG63骨髓瘤细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响

目的分析新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutylpropanediamine,TBP)对人骨髓瘤MG63细胞生长的影响及其机制。方法 MTT法用于分析细胞增殖,流式细胞分析用于细胞周期和凋亡细胞鉴定,琼脂糖凝胶电泳用于分析DNA片段化,Western blot用于分析细胞凋亡相关蛋白的表达水平,Transwell技术用于分析细胞的迁移能力。结果TBP明显抑制MG63细胞的增殖和迁移能力,抑制效应呈时间和剂量依赖性。流式细胞分析发现,TBP干扰细胞周期,导致G1和G2期细胞比例升高,但S期细胞比例明显下降,同时凋亡细胞数量大幅增加。TBP处理后,细胞染色体DNA出现凋亡细胞典型的DNA片段化现象,细胞质中促凋亡蛋白Bax和细胞色素C含量明显升高。结论 TBP具有抑制人骨髓瘤MG63细胞增殖的药理活性,其机制与抑制细胞周期和诱导细胞凋亡有关,提示TBP具有用于临床骨髓瘤治疗的潜在价值。     

新型化合物F-2对人肺癌NCI-H520细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的：探讨新型化合物F-2对人非小细胞肺癌NCI-H520细胞增殖迁移及凋亡的影响。方法： CCK-8实验检测肺癌细胞增殖情况;采用划痕实验检测化合物对H520细胞迁移的情况;倒置显微镜观察化合物刺激对细胞形态的影响;流式细胞术实验检测化合物对细胞凋亡的影响;Western blot实验检测化合物对细胞迁移及凋亡相关蛋白表达的影响。结果：化合物对H520细胞增殖有明显的抑制作用,且与浓度和时间呈依赖性关系。划痕实验结果表明化合物能够明显抑制肿瘤细胞迁移,并且western blot 实验结果表明化合物处理H520细胞后可上调Ｅ-cadherin的表达,下调N-cadherin蛋白的表达。Annexin-V／PI双染法结果显示,化合物可诱导H520细胞发生凋亡,且随着药物浓度增加凋亡率上升,并且增加了BaX/BcL-2蛋白表达比率。结论：化合物能够明显抑制肺癌细胞的增殖、迁移及诱导细胞凋亡,可能是通过阻断肿瘤细胞EMT过程,调节细胞凋亡过程中相关基因表达从而发挥抗肿瘤作用。     

王不留行提取物对内皮细胞增殖、迁移及其黏附的作用评价

目的体外分析王不留行抑制人微血管内皮细胞(HMEC)增殖、迁移和黏附的有效部位。方法SRB法测定药物干预细胞增殖的IC50和药物作用时间与药效学的关系;划线灼伤法研究细胞迁移;体外基质胶分析药物对细胞黏附能力的影响;HE染色观察药物对细胞染色体的影响。结果王不留行有效部位对HMEC增殖抑制的IC50为3.60mg.L-1,加药4h后起作用。加药48h后HMEC迁移受到明显抑制(迁移率为40.33%,对照组迁移率为77.68%)。加药组细胞黏附受到明显抑制,且呈浓度依赖关系。结论王不留行提取物能明显抑制内皮细胞增殖、迁移及黏附,因此具有潜在的价值用于抑制血管生成。     

杨梅酮对人肺腺癌A549细胞凋亡和细胞周期的影响

目的检测杨梅酮对体外人肺腺癌细胞A549细胞凋亡和细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪分别检测各组的细胞早期凋亡率和细胞周期百分率。结果杨梅酮能显著增加A549细胞早期凋亡率和G0/G1期的细胞比例,并且细胞凋亡率与杨梅酮浓度具有较好的量效关系。结论杨梅酮能显著增加体外人肺腺癌细胞A549细胞早期凋亡率,并可使A549细胞周期阻滞在G0/G1期。     

白细胞介素－1对粒系细胞和红系细胞的正负调节作用

应用重组人白细胞介素－１β（γｈＩＬ－１β）对小鼠骨髓和外周血粒系细胞与红系细胞作用的研究表明：ＩＬ－１单剂量腹腔注射后ｄ７红系造血细胞明显减少，网织红细胞在ｄ８显著下降。５～１０万Ｕ·ｋｇ－１剂量范围内ＩＬ－１促进粒系细胞的增殖和分化成熟。应用流式细胞仪对骨髓细胞周期分析显示骨髓大体积细胞在注射ＩＬ－１后ｄ３Ｓ期细胞明显增多。我们的结果表明ＩＬ－１抑制红系造血细胞的分化增殖，在适当的剂量范围内促进粒系细胞的增殖和分化成熟。其作用的分子基础是诱导造血细胞的细胞周期变化。