pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化

目的明确pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化.方法 55只健康成年SD大鼠,分为正常对照组,Y迷宫训练组,假训练组,其中训练组与假训练组再各分为训练后0h、1h、3h、6h、24h亚组,每组动物各5只.训练组动物接受Y-迷宫光电结合训练,假训练组动物接受光电不结合假训练,应用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内各区pERK1/2阳性神经元分布及表达的变化.结果正常对照组pERK1/2免疫阳性神经元分布较少,但在双侧视上核、室旁核表达很丰富,其次在小脑分子层和浦肯野细胞层、杏仁核、纹状皮层表达较多,海马部位偶见2～5个阳性神经元,有较多阳性纤维着色,在纹状体整个区域无阳性神经元表达.在训练后0h纹状体尾壳核和边缘区[(31.2±4.8)个]出现表达,在海马CA2、CA3区出现较多阳性神经元胞体[(44.2±4.2)个],皮层大部、杏仁核的表达也有明显增强,而训练后1h、3h、6h上述各区仍有持续增强,训练后24h表达降至正常,纹状体边缘区阳性神经元消失,海马部位仅有个别阳性神经元[(3.8±3.3)个],P值均小于0.01.假训练组各时间点在海马、纹状体尾壳核、边缘区等部位均无或仅有个别阳性细胞或阳性纤维,与训练组相比差异显著.结论正常状态下pERK1/2在全脑分布较为局限,且表达强度较低.Y迷宫学习可诱导海马、尾壳核、纹状体边缘区等区域的pERK1/2的表达,而且pERK1/2参与了Y迷宫的习得、短期记忆的形成、短期记忆向长期记忆的转换和长期记忆的形成等学习记忆的各个阶段.     

急性低血压对清醒大鼠前庭内侧核区pERK1/2表达的影响

[目的]探讨在清醒大鼠诱发急性低血压对前庭内侧核（MVN）区pERK1/2表达的影响.[方法]股动脉插管观察大鼠血压,股静脉插管注射给予硝普钠（SNP）诱发急性低血压,使血压下降约30%左右后,利用免疫组织化学方法观察MVN区pERK1/2表达的变化,并结合化学损伤单侧前庭器官观察可能的外周机制.[结果]股静脉注射给予清醒大鼠SNP诱发急性低血压后5,10,20,40 min时,双侧MVN区均可见明显的pERK1/2蛋白表达,而5,10 min时表达增多最明显,与对照组比较差异具有统计学意义.在单侧前庭器官损伤组（24 h）诱发急性低血压后的各个时间段,前庭器官损伤同侧MVN区pERK1/2阳性神经元的表达明显减少,但损伤对侧MVN区的pERK1/2表达明显增多.[结论]静脉注射给予清醒大鼠SNP诱发急性低血压可致MVN区兴奋,此作用可被破坏外周前庭器官所阻断.     

七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马pERK1/2表达的影响

目的探讨七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马p ERK1/2表达的影响。方法出生后14 d SD幼鼠54只,随机分为对照组(C组)、七氟醚5%组(Sevo组)、假手术组(Sham组)各18只。C组不做任何处理,Sevo组幼鼠暴露于5%的七氟醚4 h,Sham组幼鼠吸入氧气4 h,1周、3周、6周后于上午8:00~11:00应用Morris水迷宫对幼鼠进行7 d的行为学观察,记录逃避潜伏期,行为学结束后随即取出6只幼鼠用免疫组化法测定海马CA1区神经元p ERK1/2的表达。结果与Sham组比较,Sevo组逃避潜伏期和探索时间明显延长(P<0.01),Sevo组海马CA1区神经元p ERK1/2的表达明显减少(P<0.01);Sham组与C组逃避潜伏期时间差异无统计学意义,海马CA1区神经元p ERK1/2的表达之间差异无统计学意义。结论七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响与抑制海马p ERK1/2表达有关。     

异氟醚吸入麻醉对老龄大鼠海马pERK1/2表达的影响

目的:检测相同浓度不同维持时间异氟醚吸入全身麻醉对老龄大鼠海马pERK1/2表达的影响,研究老龄大鼠异氟醚麻醉后认知功能变化的机理,以期更好地阐明麻醉后认知功能障碍的发生机制.方法:将60只老龄Wistar大鼠,随机分为A、B、C和D组,每组15只.A组为正常对照组,B、C、D组以异氟醚3 %浓度诱导,待翻正反射消失后再以1.5 %浓度分别维持0.5、1、2 h,待麻醉结束后任其自然苏醒.麻醉结束后24 h,应用Morris水迷宫对A、B、C、D四组大鼠开始连续5天的行为学观察,在第三天和第五天从四组中各取5只老龄大鼠取脑组织切片进行磷酸化ERK1/2(pERK)的免疫组织化学染色,观察和分析异氟醚麻醉分别维持0.5、1、2 h与pERK表达的关系.结果:第三天B、C、D组大鼠海马CA1区pERK表达(IOD值)均低于第五天(P＜0.01),同一时间点各诱导组也比对照组低(P＜0.05).结论:吸入全麻药异氟醚可以引起大鼠脑内海马CA1区的pERK明显减弱,并且这种改变与动物的麻醉时间长短之间存在着高度的一致性,麻醉时间越长,pERK表达越低,提示这些脑区内ERK1/2磷酸化与全麻的产生或效应之间可能有密切的关系.     

NR2B-ERK-CREB信号途径参与了大鼠逃避性长期记忆

目的明确NR2B-ERK-CREB途径是否参与了大鼠Y迷宫逃避性长期记忆。方法雄性SD大鼠45只（第一军医大学实验动物中心提供）,共分为4组：ifenprodil腹腔注射组14只,DMSO腹腔注射组15只,此2组中分别有7只动物在Y-迷宫训练后立即处死,用来进行免疫组织化学染色;ifenprodil脑室注射组和DMSO脑室注射组各8只,分别在Y-迷宫记忆测试后立即脑室注射ifen-prodil（2.0μg/μl,注射量0.5μl/侧）或等量DMSO,并于记忆再巩固测试后立即断颈取脑,进行Westernblot蛋白免疫印迹检测。结果训练前15min腹腔注射ifenprodil组动物的Y迷宫学习成绩与DMSOip组相比,没有明显差异（P〉0.05）,但是在24h后测试动物的Y迷宫记忆,ifenprodilip组成绩差于DMSOip组成绩（P〈0.05）。Y迷宫训练后ifenprodilip组各脑区pERK1/2和pCREB表达普遍下降,其中pERK1/2在海马、纹状体、杏仁核下降最为明显,pCREB在海马、纹状体、小脑最为明显,与DMSOip组相比差异显著（P〈0.01）。第一次Y迷宫测试ifenprodilic组与DMSOic组成绩没有明显差异（P〉0.05）,测试后立即脑室注射并在术后6h测试动物对Y迷宫的记忆再巩固,ifenprodilic组成绩下降,与DMSOic组相比有明显差异（P〈0.05）,同时ifenprodilic组动物各被检测脑区pERK1/2和pCREB表达与DMSOic组相比均普遍下降。结论 NR2B-ERK-CREB途径参与了大鼠Y迷宫的习得、长期记忆形成、记忆的再巩固等过程,而且该途径对于长期记忆的形成和记忆提取是必要的。     

亨廷顿蛋白相关蛋白1在胚胎期大鼠脑内的表达

目的 观察亨廷顿蛋白相关蛋白1(huntingtin-associated protein 1, HAP1)在胚胎不同时期SD大鼠脑内的表达.方法 采用免疫组织化学方法,观察胚胎期SD大鼠不同脑区HAP1的表达情况.结果 E6.5组胚胎中未发现HAP1的表达;在E8.5组,神经上皮可见一定的HAP1的表达及stigmoid 小体;在E11.5组胚胎的脑组织中HAP1的表达略有增加,阳性细胞多呈中小型圆形,少见阳性纤维;在E14.5组,HAP1的强阳性信号出现在大脑皮质、后脑、末脑,丘脑、下丘脑、海马及纹状体的表达稍弱,细胞小而圆,排列密集;在E17.5组,HAP1的强表达主要集中在丘脑、下丘脑、脑桥、延髓、杏仁海马区和齿状回,并可见密集深染的阳性纤维;P0组和E17.5组比,HAP1的表达呈下降趋势.stigmoid 小体数目的 变化趋势与HAP1基本一致.结论 HAP1在胚胎早期即有表达,并逐渐增多,中期明显增加并持续到出生,提示HAP1可能参与中枢神经系统的形成和成熟机制.     

人参皂苷Rg1对脑挫伤后大鼠脑内胰岛素样生长因子1表达的影响

目的：探讨人参皂苷Rg1对脑组织挫伤后大鼠脑中胰岛素样生长因子1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）表达的影响。方法：Wistar大鼠26只，分为正常对照组（2只），脑挫伤模型组（8只）及人参皂苷Rg1治疗组（16只），在损伤后不同时间点（损伤后6h、12h、2d及6d）分别处死大鼠，使用免疫组化方法观察并检测脑中IGF-1的表达。结果：与对照组相比，脑挫伤模型组损伤后各时间点脑组织中IGF-1的表达有所升高（P〈0．05）；与模型组比较，人参皂苷Rg1治疗组IGF-1的表达明显升高（P％0．05）。结论：人参皂苷Rg1可能通过促进脑挫伤后脑组织IGF-1的表达，促进脑组织的功能恢复。     

人参皂苷Rg1对脑挫伤后大鼠脑内胰岛素样生长因子1表达的影响

目的：探讨人参皂苷Rg1对脑组织挫伤后大鼠脑中胰岛素样生长因子1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）表达的影响。方法：Wistar大鼠26只，分为正常对照组（2只），脑挫伤模型组（8只）及人参皂苷Rg1治疗组（16只），在损伤后不同时间点（损伤后6h、12h、2d及6d）分别处死大鼠，使用免疫组化方法观察并检测脑中IGF-1的表达。结果：与对照组相比，脑挫伤模型组损伤后各时间点脑组织中IGF-1的表达有所升高（P〈0．05）；与模型组比较，人参皂苷Rg1治疗组IGF-1的表达明显升高（P％0．05）。结论：人参皂苷Rg1可能通过促进脑挫伤后脑组织IGF-1的表达，促进脑组织的功能恢复。     

HCCR、pERK及pELK1蛋白在胃癌组织中的表达及其相关性

目的：检查胃癌组织及癌旁组织中HCCR、pERK及pELK1的表达,探讨之间的相关性。方法通过免疫组化方法检测60例胃癌及癌旁组织中HCCR、pERK及pELK1的表达情况。结果 HCCR、pERK及pELK1在胃癌组织中的阳性表达率分别为75.0%（45/60）、73.3%（44/60）及71.7%（43/60）,均高于其在癌旁组织中的表达,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 HCCR、pERK及 pELK1三者之间具有一定的协调表达率,在肿瘤组织中表达明显增高,可用来作为胃癌临床免疫组化的辅助指标。     

H-ras和pERK1/2蛋白在舌鳞癌中的表达及相互关系

目的：研究H-ras和pERK1／2蛋白在舌鳞癌组织中的表达及其相互关系。方法：采用免疫组化方法检测58例原发性舌鳞癌及20例正常癌旁组织中H-ras和pERK1／2蛋白的表达水平。结果：H-ras和pERK1／2蛋白表达在舌鳞癌阳性率显著高于癌旁组织（P〈0．05）。H-ras蛋白过表达与淋巴结转移有关（P〈0．05），pERK-／2蛋白过表达与病理组织学分级有相关性（P〈0．05）。结论：Ras／MAPK信号转导途径中H-ras和pERK1／2蛋白的过表达与舌鳞癌的恶性程度有密切关系。     

N-Ras、pERK1/2在非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义

本研究检测了非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma,NHL)N-Ras和pERK1/2(extracellular signal regulated kinase,ERK)表达水平,探讨其临床意义.     

局灶性脑缺血/再灌注后Fas、TNF-α在大鼠脑组织中的表达

目的 :通过观察局灶性脑缺血 /再灌注后大鼠脑组织中 Fas、肿瘤坏死因子 - α( TNF- α)的动态变化及细胞凋亡的情况 ,探讨脑缺血后 Fas、肿瘤坏死因子 - α与细胞凋亡的关系。方法 :采用大鼠大脑中动脉线栓动物模型 ,应用免疫组化及 TUNEL方法检测 Fas、TNF- α的动态变化和细胞凋亡情况并进行图像分析。结果 :局灶性脑缺血再灌注后 Fas过度表达 ,且在缺血再灌注后 6h达高峰 ,于 2 4 h开始下降 ;TNF- α的表达于再灌注 3h已有明显升高 ,2 4 h达到高峰 ,其后逐渐下降 ;细胞凋亡于再灌注 6h开始增加 ,2 4 h达到高峰 ,36h略有下降 ,且与 Fas及 TNF- α表达范围基本一致。结论 :Fas、TNF- α在局灶性脑缺血 /再灌注损伤中表达增加 ,介导细胞凋亡。它们在局灶性脑缺血再灌注损伤的病理过程中起到重要作用。     

舍曲林促进PC12细胞活性、酪氨酸羟化酶和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2的表达

目的 研究舍曲林对对NGF诱导的PC12细胞细胞活力以及酪氨酸羟化酶(TH)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(pERK1/2)表达的影响.方法 以NGF诱导后的PC12细胞为细胞模型,给予5μM、10μM、20μM、50μM不同剂量舍曲林,分别进行直接作用和保护作用处理后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活性,免疫组织化学观察细胞形态学改变以及蛋白质斑迹法(western blot)检测PC12细胞酪氨酸羟化酶(TH)和磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK1/2)的表达水平的变化.结果 中等剂量的舍曲林促进PC12细胞的活性,直接作用24h后20μM(1.32±0.11)、10μM(1.17±0.05),保护作用24h后20μM(1.15±0.11)显著高于对照组,高剂量50μM的舍曲林PC12细胞有很强的毒性作用.20μM舍曲林直接作用后PCI2细胞TH表达增加,TH与β-actin表达阳性面积的比值24h作用组(1.27±0.05)以及48 h作用组(1.23±0.08)与对照组(作用24h和48 h分别为0.99±0.04,0.92±0.07)相比差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05),20μM 舍曲林直接作用后PC12细胞pERK1/2表达也增加,pERK1/2与β-actin表达阳性面积的比值24 h作用组(1.41±0.05)以及48 h作用组(1.40±0.06)与对照组(作用24 h和48 h分别为0.86±0.04,0.78±0.06)相比差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05),免疫组织化学结果与上述一致.结论 舍曲林能提高PC12细胞的活性,对神经元提供保护可能是舍曲林抗抑郁作用机制之一,而这种作用可能是通过上调TH以及pERK1/2的表达实现的.     

全脑照射对迟发性脑损伤大鼠学习记忆能力和海马突触结构的影响

目的 探讨放射线全脑照射对大鼠迟发性脑损伤后学习记忆能力和海马突触结构的影响.方法 分组采用直线加速器对SD大鼠进行全脑照射,剂量分别为20 Gy和30 Gy.在照射前和照射后120d分别进行Morris水迷宫实验,分析各组大鼠行为学检测结果 ,采用平均逃避潜伏期和搜索策略两个指标评价大鼠学习记忆能力;同时用电镜和计算机图像分析仪观测模型鼠海马CA3区Gray Ⅰ型突触界面结构参数的变化.结果 20 Gy照射后120 d平均潜伏期为(41.17±10.76)s,搜索策略得分(27.13±2.34)分,30 Gy照射后120d平均潜伏期为(78.49±9.32)s,搜索策略得分(16.52±2.71)分,均与照射前及对照组差异有显著性.20 Gy照射后120 d海马突触后膜厚度为(22.03±6.84)nm,30 Gy照射后120 d海马突触后膜厚度为(23.19±7.65)nm,与放射前及对照组比均差异有差著性(P＜0.05).同时还观察到20Gy和30Gy照射后均较对照组突触活性带长度短,突触界面曲率小,突触间隙宽度变窄(P＜0.05).结论 迟发性放射性脑损伤后学习记忆能力下降,并且可能与海马突触病理改变有关.     

丁苯酞对放射性脑损伤大鼠学习记忆能力及海马MMP-9表达的影响

目的 探讨丁苯酞对放射性脑损伤大鼠学习记忆能力及海马MMP-9表达的影响.方法 分组采用直线加速器对Wistar大鼠进行全脑照射,剂量为30Gy.在照射前和照射后120 d分别进行Morris 水迷宫实验,对大鼠进行学习记忆能力的测试.结果 Morris水迷宫试验的结果显示:在学习能力试验中,与模型组相比,丁苯酞大剂量组和丁苯酞小剂量组的跳台逃避潜伏期明显缩短(P＜0.01),分别为( 79.61±7.17)s,(43.64 ±4.72)s,(42.15 ±4.19)s,错误次数明显减少(P＜0.01),分别为(36.43±6.59)次,(14.58 ±4.22)次,(13.66±3.91)次;在记忆能力试验中,与模型组相比(17.57±4.29)s,丁苯酞大剂量组和丁苯酞小剂量组原平台象限停留时间明显延长(P＜0.01),分别为(30.09±3.68)s,(31.25±3.17)s,游泳速度明显增快(P＜0.01).结论 丁苯酞可使海马组织MMP-9的表达水平降低,提示丁苯酞对放射性脑损伤的治疗可能是通过改变MMP-9的表达而发挥作用.     

D-半乳糖对成年小鼠海马神经元P—ERK1／2

目的研究D-半乳糖对成年小鼠海马神经元p-ERK1／2表达和学习记忆能力的影响。方法20只健康成年昆明种小鼠,雌雄各半,分为2组。颈背部皮下注射D-半乳糖注射液,每天125mg／kg body weight,连续35d,建立小鼠衰老模型。对照组注射生理盐水。其间观察小鼠一般状况,实验的最后1周分别进行跳台实验、Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力;实验结束后处死动物,提取海马组织总蛋白,免疫印迹检测p-ERK1／2表达量。结果与对照组比较,D-半乳糖组小鼠跳台试验潜伏时间减少和电击次数增加（P〈0．01）;Morris水迷宫实验航行逃避潜伏期明显大于对照组小鼠（P〈0．01）;D-半乳糖组p-ERK1／2表达量显著低于正常对照组（P〈0．01）,且雄性比雌性效果显著。结论D-半乳糖可能通过抑制成年小鼠海马神经元p-ERK1／2表达而损害其学习记忆能力。