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目的:探讨急性髓细胞白血病(Acute myeloid leukemia,AML)患儿的miR-126表达水平及临床意义.方法:选取2017年8月~2019年8月在我院诊治的56例AML患儿为AML组,同期48例骨髓穿刺检查的非血液系统肿瘤患儿作为正常组,采用实时荧光定量PCR法检测AML组及对照组骨髓单个核细胞中mi... 相似文献
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主鸿鹄 《国际输血及血液学杂志》2011,34(6):509-512
随着实时定量PCR方法学的发展,越来越多的医院已将其应用于白血病微小残留病的监测,并且显示出较好的临床价值,但同时也存在许多问题.本文就实时定量PCR监测急性髓系白血病微小残留病的方法以及临床意义等方面的进展进行综述. 相似文献
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本研究旨在探索miR-223在急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血浆中的表达情况及其在不同疾病状态下的表达特点。选取北京儿童医院2005年5月至2012年1月住院ALL患儿64例,包括初诊患儿30例,缓解患儿30例,复发患儿4例。直接使用血浆进行逆转录和实时荧光定量PCR的方法检测样本中miR-223的表达情况。结果发现,miR-223在初诊患儿血浆中表达较低,在缓解患儿中表达升高。由于复发例数太少,暂未发现差异性;在初诊或缓解患儿中,miR-223在TEL-AMLI阳性组和无融合基因B系ALL组表达均无明显差异。结论:miR-223在初诊患儿血浆中表达较低,在缓解患儿中表达明显升高,可能起着抑癌基因的作用,并可作为白血病的分子标志物以及监测疗效的指标。 相似文献
4.
目的:了解hergmRNA在急性髓性白血病(acutemyeloid leukemia,AML)患者中的表达情况,并初步分析其临床意义。方法:通过实时荧光定量PCR方法检测48例初诊AML患者和15例正常人外周血hergmRNA的表达情况,分析hergmRNA的表达水平与AML患者的临床与实验室特征以及患者的疗效和复发的关系。结果:48例初诊AML患者检测到38例(79.17%)外周血表达hergmRNA,初诊AML患者及正常人外周血hergmRNA表达水平的中位值分别为0.03(0.00~2.49)%和0.35(0.04~1.09)%,AML患者明显低于正常人(P=0.00),AML患者外周血hergmRNA的表达水平与其临床和实验室特征无明显相关性。不表达hergmRNA患者的完全缓解率(9/10,90%)高于表达的患者(31/38,81.58%),复发率前者低于后者,但差异无统计学意义(P=0.53,0.27)。结论:初诊AML患者外周血hergmRNA的表达水平明显低于正常人,尚未发现hergmRNA的表达情况与疾病预后的明确关系。 相似文献
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目的 采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中微小RNA-125b(microRNA-125b,miR-125b)转录本含量,初步评价其在AML临床诊断中的意义. 方法 建立扩增miR-125b转录本的SYBR Green I染料法qPCR,对miR-125b转录本克隆质粒进行扩增,评价其在AML诊断中的特异性、重复性和灵敏性.并对69例AML患者的骨髓单个核细胞标本进行初步检测并评价其临床相关性. 结果 该方法能定量检测骨髓标本中miR-125b的表达水平,熔解曲线呈单峰,在108~ 103 copies/μL范围内有良好的线性关系(R2=0.999)并且检测重复性良好.结果显示69例AML患者中miR-125b表达水平明显高于25例对照组,差异有显著统计学意义(P=0.001).在初发AML的不同亚型中,M3型的miR-125b表达水平高于其他亚型,差异有统计学意义(P<0.05).miR-125b表达水平与非M3型AML患者的年龄、性别、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量、FAB分型、核型分组之间均无相关性(P>0.05).4例初诊AML患者在获得完全缓解后miR-125b表达水平均较治疗前有所降低. 结论 所建立的实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测骨髓单个核细胞标本中miR-125b的表达水平,为进一步临床应用研究奠定了方法学基础.miR-125b异常高表达是AML中的一个常见分子事件,检测其表达可能有助于AML患者的辅助诊断和疾病状态监测. 相似文献
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本研究旨在探讨急性髓系白血病(AML)患者治疗过程中,应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测混合谱系白血病(MLL)的相关融合基因MLL-AF9的基因表达水平及其对监测微小残留病(MRD)的价值。应用RQ-PCR精确地定量检测433例初治AML患者中11例舭L-AF9融合基因阳性患者的表达水平,分析该基因表达水平的变化与临床表现的关系。结果显示:患者MLL-AF9融合基因表达水平初诊时为(1.3-55.28)%;5例单纯化疗患者之中有2例在第1个疗程结束后至第2疗程开始前,该融合基因表达水平〈0.1%,2例全部获得血液学完全缓解且存活;3例MLL-AF9融合基因≥0.1%,均未获得血液学完全缓解且仅1例存活。6例造血干细胞移植患者中,有4例在移植前1个月内该融合基因表达水平〈0.1%,全部患者存活且无复发;2例≥0.1%,均在移植后复发、死亡,且在骨髓细胞形态学复发前1个月内该基因表达水平均≥0.1%。结论:RQ-PCR检测MLL-AF9融合基因可以反映患者MRD的动态变化,与患者的临床预后存在内在相关性,是检测预后的良好指标。此外,RQ-PCR可能有早期检测分子生物学复发的潜力。 相似文献
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为探讨儿童急性淋巴细胞白血病初诊时TEL-AML1融合基因表达水平与患儿的临床特点、早期治疗反应的关系,采用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)定量检测35例患儿(包括标危20例,中危15例)初诊TEL-AML1表达水平和诱导缓解治疗结束微小残留病(MRD)水平,比较MRD阴性与MRD阳性患儿的初诊TEL-AML1表达水平及临床特点,分析初诊TEL-AML1表达水平、MRD水平与临床特点、早期治疗反应的相关性。结果发现,初诊时TEL-AML1表达水平为1.63×104拷贝/104拷贝ABL(中位数)。诱导缓解结束时,16例(10例标危、6例中危)患儿未达到分子缓解,MRD水平分别为0.84-282.93拷贝/104拷贝ABL。初诊TEL-AML1表达水平与各临床特点及MRD水平缺乏相关性。MRD水平与泼尼松实验治疗第8天外周血幼稚细胞数显著相关。初诊时外周血白细胞计数〈25×109/L的患儿,MRD水平还与白细胞计数、幼稚细胞百分比显著相关。MRD阴性患儿初诊TEL-AML1表达水平显著低于MRD阳性者。结论:对于TEL-AML1+儿童ALL,45.71%未能在诱导缓解治疗结束时获得分子缓解,说明了后续治疗的重要性。泼尼松实验治疗的效果预示了诱导缓解治疗结束时的MRD水平。初诊外周血白细胞计数、幼稚细胞百分比和初诊TEL-AML1表达水平均在一定程度上影响诱导缓解治疗结束时的MRD水平。 相似文献
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急性髓性白血病完全缓解患者残留白血病细胞检测研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究的目的是观察急性髓性白血病患者完全缓解后血液和骨髓中微小残留病变变化情况 ,并探讨微小残留病变在监测急性髓性白血病复发中的应用价值。用流式细胞术检测 3 3例化疗达完全缓解的急性髓性白血病患者血液和骨髓中残留白血病细胞 (residualleukemiccells,RLC)。结果显示 :急性髓性白血病完全缓解组和正常对照组外周血RLC分别为 ( 4 .75 18± 4 .15 3 7) %和 ( 0 .4 83 5± 0 .2 0 0 5 ) % ,二者比较有统计学差异 (P <0 .0 0 1) ;完全缓解组骨髓和正常对照组骨髓RLC分别为 ( 17.90 82± 2 0 .4 819) %和 ( 0 .72 85± 0 .2 2 0 9) % ,二者比较有统计学差异 ( P <0 .0 0 1) ;持续缓解组与复发组外周血RLC分别为 ( 2 .2 3 3± 1.5 92 3 ) %和 ( 10 .2 3 69± 9.4 714 ) % ;持续缓解组与复发组骨髓RLC分别为 ( 4 .779± 3 .0 3 3 6) %和 ( 3 8.0 685± 19.4 2 95 ) %。二组比较有统计学差异 (P <0 0 0 1)。结论 :应用流式细胞术检测残留白血病细胞对及时预测复发有重要意义 ,有利于在复发早期进行治疗。 相似文献
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陈果 《国际输血及血液学杂志》2013,36(2):133-135
急性髓系白血病(AML)是较为常见的造血系统恶性克隆性疾病.虽然目前临床应用大剂量化疗和干细胞移植等手段取得了一定的疗效,可延长部分患者无病生存期,但是恶性疾病易复发的特点使得其长期生存率依旧很低.微小残留白血病(MRL)是导致白血病复发的重要原因,若能及时发现残留病变并施加相应的临床干预,对于减少缓解后复发,改善白血病预后将提供极大的帮助.目前,尚无对MRL的统一标准定义,但现有的技术可以在一定程度上对MRL进行相关指标的检测,利用多参数流式细胞技术(MFC)以及实时荧光定量PCR(RQ-PCR)等手段可监测MRL,这对MRL明确诊断后治疗决策的选择以及治疗后预后判断均有重要意义.现就MRL相关指标的检测在AML治疗及预后判断中的研究及应用进展作一综述. 相似文献
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目的分析miR-221在卵巢上皮癌(epithelial ovarian cancer,EOC)患者血清中的表达水平,并探讨其在EOC诊断中的临床应用价值。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测EOC组、卵巢良性肿瘤组及健康人对照组血清miR-221的表达水平,分析其与EOC患者临床病理参数的关系,同时检测各组血清CA125的含量,ROC曲线分析血清miR-221及CA125对EOC的诊断效能。结果血清miR-221在EOC组中的表达水平明显高于卵巢良性肿瘤组(U=133.12,P0.05)和健康人对照组(U=194.86,P0.05),而后两组间的差异无统计学意义(U=69.45,P0.05)。血清miR-221单独诊断EOC的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.874(95%CI:0.826~0.922),当cut off值为4.32时,其敏感性为78.2%、特异性为81.3%;血清miR-221和CA125联合诊断EOC的AUCROC为0.923(95%CI:0.887~0.958),当cut off值为0.313时,敏感性为86.2%、特异性为83.5%。血清miR-221表达水平与EOC患者年龄(U=102.68,P=0.097)、有无淋巴结转移(U=86.85,P=0.134)、病理组织分型(H=5.74,P=0.295)无关,而与临床分期有关(H=15.21,P=0.023)。结论血清miR-221在EOC患者中的表达水平升高,与CA125联合检测可以提高对EOC诊断的效能。 相似文献
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目的探讨急性髓系白血病(AML)患者免疫表型和白血病相关的免疫表型(LAIP)特征及在微量残留病(MRD)检测中的意义。方法采用CD45/SSC设门四色流式细胞术,检测610例AML患者和20名健康志愿者下列抗原的表达:CD7、CDll7、CD33、CD34、CDl0、CDl9、CD56、CD38、CDl3、CDl4、CD64、CD9、CDl6、CD2、CD5、CDllb、CDl23、HIA-DR。结果正常骨髓中CD34^+和CDll7^+SSC值低(SSC^low)的细胞比例分别为(0.35±0,15)%和(0.76±0.31)%。CD34^+SSC^low细胞中绝大多数细胞共表达CDl3、CD33、CD38、CDll7、HLA-DR(84%~94%)。CD9和CDl5的相对比例为20%和33%,而CDllb、CD56、CDl9和CD64的相对比例均低于10%,CD7为12%。CDll7^+SSC^low细胞中,CDl9^+、CD11b^+、CD56^+和CD7^+细胞相对比例低于10%,CD9^+细胞为14%,CD38^+和HIA-DR^+细胞的相对比例为87%和91%,其余抗原(CDl5、CDl3、CD33、CD34)均在30%~50%。AML患者中CDll7、CD38表达率约为95%,CD33、CD9表达率约为84%。HLA-DR和CDl3表达率分别为77.23%和75.25%。CD64和CD34的表达率分别为64.41%和59.51%。CDl5表达率为43.06%,CDllb表达率为22,07%。86.39%的AML患者LAIP阳性,以AML-M1和M3最高,AML-M4E0最低。LAIP主要表现为交叉系列抗原表达和非同期共抗原表达,前者以CD34与CD7、CDl9、CD56同时阳性为主。在非同期抗原表达中,CD34^+CD64^+、CDll7^+CDllb^+、CDll7^+CD38^-/dim、CDll7^+HLA-DR-/^dim正常值在0.01%左右,与AML之间的对数差大于3,为灵敏度较高的LAIP。结论多参数流式细胞术适于80%以上AML患者MRD检测。 相似文献
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目的探讨急性髓系白血病(AML)巨核细胞系抗原(MK)表达与临床、生物学特征的关系。方法采用流式细胞仪间接免疫荧光法对成人初治AML患者211例进行检测。结果27例(128%)表达MK;AML亚型中以杂合急性白血病(HAL)和急性单核细胞白血病(M5)表达最高,分别为45.5%和24.1%。MK表达与CD34抗原、外周血高白细胞数、多药耐药糖蛋白(Pgp)高度相关(P<0.05),与染色体核型无关。MK+AML的完全缓解(CR)率为33.3%,明显低于MKAML的719%。结论巨核细胞系抗原表达可能起源于较早期造血干细胞的恶性转化,可作为临床判断疗效及预后的参考指标之一。 相似文献
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PRAME mRNA在初诊急性髓系白血病患者中的表达及微量残留病监测中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 了解黑色素瘤优先表达的抗原(PRAME)mRNA在初诊急性髓系白血病(AML)患者中的表达,评估其在微量残留病(MRD)监测中的作用.方法 采用基于TaqMan探针的实时定量RT-PCR技术检测142例初诊AML患者(其中72例不具有特异融合基因)骨髓单个核细胞PRAMEmRNA水平,动态观察3例持续缓解及6例血液学复发患者(2例不具有特异融合基因)治疗前后共60份骨髓标本PRAME mRNA水平,以22份异基因骨髓移植供者的骨髓标本作为健康对照.随访的7例AML1-ETO(+)M2患者同时检测AML1-ETO mRNA水平.以abl作为内参基因.结果 健康对照骨髓标本均表达PRAME mRNA,表达水平最高为0.28%.全部初诊AML患者骨髓中位PRAME mRNA水平为3.97%(0.00%~714.97%).无特异融合基因的AML患者骨髓中位PRAME mRNA水平为0.60%(0.00%~408.72%).PRAME mRNA水平在AML各亚型之间差异有统计学意义(P<0.01),AML1-ETO(+)M2患者PRAME mRNA水平高于其他亚型(P值均<0.01),S型PML-RARa(+)急性早幼粒细胞白血病患者次之.随访的AML1-ETO(+)M2患者PRAME mRNA与AML1-ETO mRNA呈现同样的变化趋势,二者呈明显正相关(r=0.88,P<0.01).血液学复发患者中3例复发前PRAMEmRNA水平逐步升高,分别在复发前1~4个月超过正常上限,另3例患者在血液学缓解状态时PRAME mRNA水平始终未降至正常.结论 PRAME mRNA可以用于监测AML患者MRD,其水平持续升高或始终异常预示血液学复发. 相似文献
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目的探讨利用四色流式细胞术(FCM)检测B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)微量残留病(MRD)的临床意义.方法采用以抗CD34/CD10/CD45/CD19为主的两种四色荧光标记抗体组合,对98例B-ALL患者的671份骨髓标本和1份脑脊液标本进行FCM多参数MRD检测,98例随访患者中26例无发病初期的免疫分型资料.结果FCM检测显示白血病细胞<0.0001(MRD阴性)的标本为579份;白血病细胞>0.0001的样本数为93份,其中64份骨髓标本白血病细胞比例<0.05,29份标本白血病细胞比例>0.05,我们将其归为复发病例(包括治疗后未达CR的病例).共20例患者复发,其中19例血液学复发,1例中枢神经系统复发.15例血液学复发者在复发前7~17周发现MRD阳性,包括发病时免疫分型资料不明者6例,MRD水平均>0.0001;2例分别在复发前3个月和9个月检测MRD为阴性,此后中断检测.在诱导治疗结束和治疗3个月时,如果MRD水平>0.0001,复发率为50%(12例中有6例复发),而MRD阴性组复发率为7.5%(40例中有3例复发)(P=0.000).结论利用FCM进行MRD跟踪监测可预测复发,治疗初期患者MRD>0.0001,复发的危险性较高.而在掌握了正常B祖细胞抗原表达规律的基础上,可不完全依赖于发病时的免疫表型资料. 相似文献
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目的探讨CD56在非M3急性髓系白血病(AML)中的表达及在微小残留病(MRD)检测的意义。方法应用流式细胞术分析145例非AML-M3 AML患者免疫表型,以CD56、CD19、CD117、CD34、CD33为标志,CD45设门MRD分析。结果 145例AML患者中CD56阳性37例,占25.52%,CD19阳性17例,占11.72%,分布在M1、M2、M4、M5。CD56或/和CD19阳性的AML患者共49例,其中CD56和CD19同时阳性5例,均为M2亚型。P170蛋白阳性36例,占24.83%,其表达率与CD56呈显著正相关(P<0.01)。48例AML患者在诱导治疗结束和维持治疗第14、32、56周作MRD检测。单纯CD56+组MRD阳性率93.55%,复发率77.41%,与单纯CD19+组(MRD阳性率25.00%,复发率0)比较,差异有统计学意义(P均<0.01)。CD56+CD19+组MRD阳性率100.00%,复发率80.00%,与单纯CD56+组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与单纯CD19+组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CD56、CD19在非M3 AML有较高的... 相似文献
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目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)病人Mcl—l基因和Bcr/Abl融合基因的表达水平及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术检测了4l例cML病人(包括慢性期15倒、加速期6例、急变期6例、伊马替尼治疗后遗传学完全缓解8例及非伊马替尼治疗的未缓解的CML病人6例)骨髓标本Mel—l基因、Ber/Abl融合基因的表达水平,以10例正常人作为对照。结果CML各组Mcl—I和Bcr/AblmRNA的表达水平差异均有显著性(X2=19.12—36.08,P〈0.05)。伊马替尼治疗组与正常对照组Mel—lmRNA的表达明显低于其他各组(z=2.547—3.254,P〈0.05);加速期、急变期及非伊马替尼治疗组之间Mcl—lmRNA的表达水平差异无显著性(z=0.481一1.922,P〉0.05),但均明显高于慢性期(z=2.65—3.465,P〈0.05)。Ber/AblmRNA在慢性期、加速期、急变期及非伊马替尼治疗组之间表达差异无显著性(z=0.48—1.196,P〉0.05)。CML患者Mel—l与Bcr/AblmRNA的表达水平呈正相关(r=0.68,P〈0.05)。结论Mcl—l和Ber/Abl与CML的病情密切相关,参与cML的发生和发展,是判断病情进展及预后的分子标记物。 相似文献
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目的 探讨动态监测儿童白血病微量残留病(MRD)对指导B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)治疗的临床意义.方法 以2004年1月至2009年12月确诊并完成诱导治疗的81例B-ALL患儿作为研究对象.初诊时用流式细胞术(FCM)筛选白血病细胞标志,随后定时随访.结果 81例患儿中80例诱导治疗获缓解,5年无事件生存(EFS)率为(76.80±5.70)%,其中标危组(89.40±5.90)%,中危组(66.99±13.60)%.81例患儿中68例筛选出特异性白血病细胞抗原作为MRD监测标志,13例未筛选出特异性白血病细胞抗原标志,两者5年EFS率分别为(79.10 ±6.20)%和(62.50±15.10)%,差异无统计学意义(P>0.05).诱导治疗第35天MRD检测显示68例患儿中MRD阴性(残留白血病细胞<0.01%)52例,5年EFS率为(88.50±4.90)%;MRD阳性(残留白血病细胞≥0.01%)16例,5年EFS率为(42.10±20.10)%,差异具有统计学意义(P<0.05),单因素分析提示MRD监测结果与危险度分层相关.诱导治疗第55天MRD监测显示,诱导第35天MRD阴性的52例患儿中,51例仍为阴性,1例阳性;而16例MRD阳性患者中14例(87.50%)转为阴性,2例仍阳性(后经加强治疗转为阴性).68例缓解患儿1年内MRD阳性9例(3例复发),1年后MRD阳性4例(2例复发),持续MRD阴性55例(4例复发).差异有统计学意义(P<0.05).结论 动态监测B-ALL患儿MRD,可判断预后,及时调整治疗方案,具有重要临床意义.Abstract: Objective To study the clinical significance of sequentially monitoring minimal residual disease( MRD)in childhood B-cell acute lymphoblastic leukemia( B-ALL). Method Eighty one B-ALL cases were enrolled in the study from January 2004 to December 2009. Leukemia cell markers were detected by flow cytometry at diagnosis, then regularly followed-up. Results Of 81 cases, 80 achieved complete remission (CR) after induction therapy, 5-year event-free survival (EFS) was (76.80 ±5.70)%. Among them, the EFS was (89.40±5.90) % in standard risk group and(66.99 ±13.60)% in intermediate risk group. Eight cases were screened for leukemia markers for MRD monitoring and identified in 68; and 5-year EFS was (79. 10 ±6.20) % and (62.50 ± 15. 10) % (P>0.05, respectively). MRD detection at day 35 in induction therapy showed that 52 of 68 cases were MRD negative (leukemia cells < 0.01%), the 5-year EFS being (88. 50 ± 4. 90)% , and 16 were MRD positive (leukemia cells ≥ 0. 01% ), the 5-year EFS being (42. 10±20. 10)% (P>0. 05). Univariate analysis confirmed that there was a correlation between MRD monitoring and risk stratification. MRD detection at day 55 showed that among the 52 day 35 MRD negative cases, 51 were still negative, 1 positive, among 16 day 35 MRD positive cases, 14(87. 50% ) turned negative, 2 still positive. Of the 68 cases, 9 were MRD positive within one year after CR (3 relapsed), 4 MRD positive after one year (2 relapsed) and 55 MRD negative (4 relapsed) (P > 0.05). Conclusions Sequential monitoring MRD can find out treatment outcome and adjust therapy in time. 相似文献
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中期因子在急性白血病中的表达及其意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 检测中期因子(Midkine,MK)基因在白血病患者中的表达,初步探讨其与白血病的关系.方法 应用实时定量逆转录PCR(RQ-RT-PCR)方法,对181例急性白血病(AL)患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测.结果 中期因子在初治和复发AL患者、AL完全缓解(CR)患者及正常人骨髓细胞均有表达.初治和复发AL患者中期因子表达明显高于正常人及CR患者(P<0.01及P<0.05).而正常人与CR患者相比差异无统计学意义.中期因子的表达在B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)各亚型(包括pro-B-ALL,common-B-ALL,pre-B-ALL)及各年龄段均有显著升高(P<0.01),且与T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)、急性杂合性白血病及急性髓系白血病(AML)各FAB亚型问差异均有统计学意义(P值均<0.01);与正常人相比,M2型患者中期因子表达明显升高(P<0.01),与AML其他FAB亚型相比差异亦有统计学意义(P值均<0.05);M3患者中期因子表达也较正常人明显升高(P<0.05),但与除B-ALL和AML-M2外的其他白血病亚型间差异无统计学意义.CD34+患者较CD34-患者中期因子表达显著升高(P<0.01),AML1-ETO融合基因阳性的M2患者较阴性的M2患者中期冈子表达显著升高(P<0.05).结论 B-ALL、AML-M2和AML-M3型白血病患者中均存在中期因子基因不同程度的表达升高,为白血病诊断及其发病机制的研究提供了新的方向. 相似文献