纤维蛋白原七种测定方法评价(摘要)

血浆纤维蛋白原测定报道方法很多,本文用七种不同方法测定血浆中纤维蛋白原.并以消化定氮法为基准,与其它六种方法进行比较.其结果经统计学处理:亚硫酸钠比浊法、快速比浊法P>0.2,亚硫酸钠沉淀双缩尿比色法P>0.5.热沉淀比浊法、单一试剂浊度法、硫酸铵-EDTA比浊法P<0.01。说明热沉淀比浊法等三种方法与消化定氮法差异较大,而亚硫钠沉淀双缩脲法比缩法差异最小。纤维蛋白原七种测定方法评价(摘要)@李正求$空军沈阳医院检验科!110042     

纤维蛋白原分子异常的临床意义

纤维蛋白原(Fg)的异常可分为质的缺陷(异常Fg血症)和量的异常(Fg缺乏症)，两者均可分为先天性和获得性。异常Fg血症的特征是Fg分子结构异常改变了其功能特性，先天性异常Fg大多是基因点突变导致的个别氨基酸被置换。Fg缺乏症则可分为低Fg血症和无Fg血症。先天性无Fg血症是一种罕见的常染色体隐性遗传病，特征是Fg合成不足或完全缺乏，而其代谢过程正常。迄今已发现30余种导致该病的基因突变。本文就先天性Fg分子异常的临床意义进行综述。     

纤维蛋白原分子异常的临床意义

纤维蛋白原(Fg)的异常可分为质的缺陷(异常Fg血症)和量的异常(Fg缺乏症),两者均可分为先天性和获得性。异常Fg血症的特征是Fg分子结构异常改变了其功能特性,先天性异常Fg大多是基因点突变导致的个别氨基酸被置换。Fg缺乏症则可分为低Fg血症和无Fg血症。先天性无Fg血症是一种罕见的常染色体隐性遗传病,特征是Fg合成不足或完全缺乏,而其代谢过程正常。迄今已发现30余种导致该病的基因突变。本文就先天性Fg分子异常的临床意义进行综述。     

一种新的FGA基因无义突变导致遗传性无纤维蛋白原血症

目的　对 1例遗传性无纤维蛋白原血症患者及其家系成员进行基因分析,探讨遗传性无纤维蛋白原血症发病的分子机制。方法　凝血酶法与免疫比浊法测定血浆纤维蛋白原 (Fg)含量,提取先证者及其家系成员外周血基因组DNA,PCR法扩增其Fg的FGA、FGB和FGG基因所有外显子和侧翼序列,DNA序列分析Fg的基因异常。将先证者突变序列、家系成员和 50名正常人相应序列的PCR产物用限制性内切酶RsaⅠ消化,以进一步确定基因突变位点并排除基因多态性。结果　用Clauss法检测不到先证者及其父亲的血浆Fg,用免疫比浊法测定时,Fg含量均<0. 02g/L。两人FGA基因外显子 4第 3108位核苷酸发生C→T纯合性改变,使Fg的Aα链第 150位密码子 (CAG,编码Gln)突变为终止密码TAG。先证者及其父亲的FGA基因外显子 4和侧翼序列的PCR产物,不能被RsaⅠ酶切,其母亲及部分家系成员的PCR产物被部分酶切,而正常人和该家系中的 5个成员的PCR产物可被完全酶切。结论　FGA基因(外显子 4)Q150X无义突变导致该家系先证者及其父亲遗传性无Fg血症,家系中部分成员为携带者,此突变是一种国际上尚未报道的新的突变类型。     

聚乙烯吡咯烷酮:一种新的人凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原的沉淀剂

广泛用于沉淀血浆凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原的分离方法是乙醇法、冷沉淀法和聚乙二醇法。用这类方法的工艺需要一些补充的步骤。因为凝血因子Ⅷ是和纤维蛋白原在同一组分里共同沉淀,所以,还需要一些试剂例如鞣酸或皂土等来降低纤维蛋白原的浓度。     

纤维蛋白原α链Arg16His突变导致遗传性异常纤维蛋白原血症

目的 对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析.方法 用血凝仪检测先证者家系3代6人外周血活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT).纤维蛋白原活性和抗原分别用Clauss法和免疫比浊法检测,Western blot检测血浆纤维蛋白原及其片段分布.PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序进行基因分析.结果 先证者APTT、PT正常,而TT明显延长;纤维蛋白原抗原正常,而纤维蛋白原活性降低,先证者母亲和胞姐表型与之相似.基因分析显示先证者纤维蛋白原FGA基因2号外显子g1233→a杂合碱基改变(密码子GGT→CAT),导致Arg16His错义突变,该突变来源于母系.结论 纤维蛋白原α链Arg16His杂合错义突变是遗传性异常纤维蛋白原血症的分子基础之一.     

介绍一种简便纤维蛋白原测定水浴板

纤维蛋白原热沉淀法微量测定时 ,毛细玻璃抗凝管中血液的血浆层必须全部浸没在 5 6°C水浴中 2 0 min。但是在操作中常遇到毛细玻璃管被折断 ;毛细玻璃管中血浆层没有完全浸没于 5 6°C水浴中 ;由于毛细玻璃管纤细而不易垂直放置及不易编号等等原因。为此 ,我们利用废弃的“V”型血凝板制作了简便纤维蛋白原微量测定水浴板 ,经多年使用 ,特别在体检标本量多时 ,感到极为方便 ,现报告如下 :1　材料　废弃的“V”型血凝板 ;长 7cm的细螺丝 ;一次性注射器针头护帽 ;打孔器等。2　制作方法　取“V”型血凝板两块 ,用打孔器在其中一块“V”型…     

纤维蛋白原γ链Arg275His突变所致异常纤维蛋白原的功能研究

目的 对两个遗传性异常纤维蛋白原血症家系的突变纤维蛋白原(Fg)进行功能研究.方法 常规筛查凝血功能;Fg抗原和活性分别用免疫比浊法和Clauss法测定;抽提DNA,对Fg 3个基因(FGA、FGB和FGG)以及抗凝血酶基因(AT3)所有外显子及侧翼序列进行PCR扩增、测序及分析;采用常规血栓弹力图(TEG)和功能性FgTEG检查对家系B先证者及其父亲进行凝血功能的综合评价及血浆功能性Fg评估;应用Western blot检测血浆Fg肽链分子量;采用Fg动态聚集曲线和纤维蛋白溶解曲线实验检测血浆Fg的功能.结果 2例先证者凝血酶原时间(TT)和爬虫酶凝固时间(RT)明显延长,Fg活性仅为0.5 g/L和0.6 g/L,但其抗原均正常,分别为2.32 g/L和2.66 g/L.两个家系先证者均存在γ链Arg275His杂合突变,家系B先证者的祖父和姑母同时检出AT3 g.5876T＞C(Ser116Pro)杂合突变.家系B先证者及其父亲TEG检测结果中α值分别接近和低于正常参考值范围下限,但最大波幅(MA值)均为正常;在功能性Fg TEG检测中,MA值明显偏低.Fg动态聚集曲线中先证者和家系患者的起跳时间明显延长、峰值明显降低.纤维蛋白溶解曲线中多数患者的纤维蛋白在特定时间内不能被纤溶酶原完全溶解.结论 首次发现遗传性异常纤维蛋白原血症合并AT缺陷的患者.γ链Arg275 His突变使Fg在纤维蛋白单体聚合以及纤维蛋白溶解方面出现异常.联合应用常规TEG和功能性TEG检测,可以更好地评估异常纤维蛋白原血症患者Fg的功能.     

两种纤维蛋白原测定方法比较

随着自动血凝仪的推广应用,PT-演算法检测纤维蛋白原（FIB）被越来越多的医院使用.该法的特点是不加任何试剂,仪器通过测定PT,根据浊度变化换算出FIB的含量,省钱省时.国内不少学用此法与美国国家临床检验标准委员会推荐的国外最常用的克劳斯法（Clauss法）进行比较,多数认为PT-der法与Clauss法在FIB正常范围内结果较为接近,而不在正常范围内结果相差较大.为此,本用美国IL公司生产的ACL-200血凝仪进行了PT-der法与Clauss法的比较,结果发现不同年龄段PT-der法检测结果存在显差异.现将结果报告如下.     

纤维蛋白(原)降解产物检测及临床研究进展

<正>纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物(FDP)是在纤溶酶的作用下,血液中的纤维蛋白/纤维蛋白原被溶解所产生的各种降解产物的总称[1]。FDP是纤溶系统作用的结果,机体在病态时激发了纤溶系统,随着一系列纤溶蛋白的活化,对体内纤维蛋白原水解生成了FDP。血栓发生时,纤溶系统也被激活,纤溶酶降解纤维蛋白单体形成了较小的片段即为FDP。所以FDP既是纤溶系统活性的筛选指标之一,也是体内凝血系统继发纤溶时较灵敏的实验指标,常和D-二聚体联合检测,判断临床一些由于凝血和纤溶失衡而导致的疾病诊断[2]。目前,     

遗传性异常纤维蛋白原的结构和功能关系

纤维蛋白原（Fibrinogen，Fg）是各种脊椎动物血浆和组织内存在的一种由多个亚基组成的糖蛋白，其分子量为34．0万。Fg的3条多肽（Aα，Bβ，γ）分别由3条独立的mRNA转录。此三条基因均为单一拷贝基因。它们相联成簇，共同位于4号染色体长臂1／3处。Aα链和γ链基因转录方向相同，而与Bβ链相反[1]。纤维蛋白原是一个同二聚体，由两个完全相同的单体构成，每个单体由三个不同的亚单位多肽组成，分别称为Aα、Bβ和γ链，它们通过二硫链连接在一起作为止血血栓和伤口处纤维蛋白基质的主要成分，Fg发挥多种功能，其功能部位位于其分子…     

纤维蛋白原三种测定方法的比较

纤维蛋白原（Fib）测定是临床中常用的一种试验,而测定方法较多,凝血酶凝固法是目前较常用的一种方法,该法快速、简便、准确,本文对双缩脲法、热沉淀比浊法与凝血酶凝固法进行比较,目的在于评价该三种方法的精密度及相互差异。１材料与方法１．１仪器１．１．１SysmexCA１００血凝仪１．１．２BT－２２４生化分析仪１．２方法与试剂１．２．１凝血酶凝固法,采用DadeBehring公司试剂。１．２．２双缩脲法,见《全国临床检验操作规程》第二版犤１犦。１．２．３热沉淀比浊法,见《全国临床检验操作规程》第二版犤１犦。１．３样本１…     

二种纤维蛋白原测定方法的评价

目的对Vonclauss法和PT衍算法(PT-der法)定量测定纤维蛋白原(Fbg)进行实验评价。方法低、中、高值质控血浆的批内精密度实验,对临床样本测定的统计学分析。结果Vonclauss法和PT-der法对样本的测定只有Fbg含量在2～3g/L时,测定结果才无统计学差异,在2g/L＞Fbg＞3g/L时均有显著性差异,PT-der法测得的结果偏高。结论建议在临床应用中不要以PT-der法代替Vonclauss法进行Fbg测定。     

两种测定纤维蛋白原方法比较

血浆纤维蛋白原（Fib）是所有凝血因子中含量最高的一种凝血蛋白，它的定量测定是临床上广泛应用的一项实验。由于Fib的水平变化与许多疾病有关，因而在临床上倍受重视，应用越来越广泛，同时对方法的准确性要求也越来越高，其测定方法较多，目前，最常用的是凝血酶凝固法（Clauss法）和PT衍生法（PT-Der法），下面就其在不同的测定条件下，两种测定方法的结果作比较，旨在选择最佳的Fib测定方法。     

三种纤维蛋白原测定方法的比较

目的 探讨溶栓药物降纤酶治疗的病人血浆纤维蛋白原(Fib)的结果在不同测定方法间的差异。方法 亚硫酸钠盐分析法、免疫比浊法与克劳斯法分别对40例健康人和20例降纤酶治疗后病人的血浆进行测定。结果 三种方法对40例正常血浆测定结果无显著性差异，而对降纤酶治疗后病人的血浆测定结果有显著性差异。结论 亚硫酸钠盐析法、免疫比浊法对纤维蛋白测定结果偏高，克劳斯法比较准确。     

四种血浆纤维蛋白原测定方法比较

为了评价血浆纤维蛋白原微量热沉淀高速离心测定法，文中以双缩脲比色定量纤维蛋白原为依据，将微量热沉淀高速离法与双缩脲比色、盐析双缩脲显色及盐析比浊血浆纤维蛋白原测定方法进行了比较，发现出量热沉淀高速离心法和双缩脲比色法测定纤维蛋白原结果呈明显的正相关（r＝0．963、P＜0、001）；重复性与双缩脲比色法测定结果最接近，优于盐析双缩脲显色和盐析比浊法；且具有测定快速、简便、不受抗凝剂影响的优点。比较还发现，微量热沉淀高速离心法、盐析双缩脲显色法及盐析比浊法纤维蛋白原测定结果均略高于双缩脲比色法，但热沉淀高速离心法测定偏差最小。并对250例健康人血浆用微量热沉淀高速离心法进行纤维蛋白原测定，确定正常参考值为2．2～4．4g／L。     

两种纤维蛋白原测定方法的探讨

在仪器上测定纤维蛋白原方法主要有两种,一是Clauss法[1],另一是PT导出(PT-derived)纤维蛋白原法。我们就与上述两种测定方法有关的几个问题进行了探讨。一、材料和方法1.仪器　IL公司ACL-200型全自动凝血分析仪。2.试剂　纤维蛋白原-C试剂盒,PT试剂盒,参比血浆,均为IL公司产品。3.方法　在全自动凝血仪上进行测定。二、结果1.对比试验　在自动凝血仪上分别用纤维蛋白原-C法,PT导出法测定同一份样品的纤维蛋白原含量,共30份。结果分为纤维蛋白原≥4g/L(12份,和纤维蛋白原<4g/L(18份)两组,经统计分析高值组P<0.01,低值组P>0.05。2.…     

三种纤维蛋白原测定方法的比较

目的 探讨溶栓药物降纤酶治疗的病人血浆纤维蛋白原(Fib)的结果在不同测定方法间的差异：方法 亚硫酸钠盐分析法、免疫比浊法与克劳斯法分别对40例健康人和20例降纤酶治疗后病人的血浆进行测定：结果 三种方法对40例正常血浆测定结果无显著性差异，而对降纤酶治疗后病人的血浆测定结果有显著性差异。结论 亚硫酸钠盐析法、免疫比浊法对纤维蛋白测定结果偏高，克劳斯法比较准确。     

5种纤维蛋白原测定方法的比较

对我国裳睡的纤维蛋白原测定方法－－亚硫酸钠盐析法、热浊度法、免疫浊度法地和ＰＴ－ｄｃｒ法与ＮＣＣＬＳ推荐的克劳斯法进行了比较。研究表明盐析法、热浊度法等物理化学方法与克劳斯法结果存在较大差异，免疫浊度法差异也较大，ＰＴ－ｄｅｒ法与克劳斯法差异较小，建议我国临床实验室应尽快采用准确、快速和简便的克劳斯法。