厚朴干皮"发汗"(加工)前后的毒性实验研究

目的比较厚朴干皮未发汗品、发汗品毒性的大小;方法采用小白鼠灌胃及腹腔注射LD50测定方法,观察厚朴未发汗品、发汗品水煎剂对小鼠的毒性;结果厚朴干皮未发汗品、发汗品60g/kg口服3天均安然无恙,腹腔注射LD50厚朴干皮未发汗品为24.21±4.5g/kg,发汗品为2.67±0.45g/kg;结论厚朴干皮未发汗品、发汗品口服毒性小,厚朴干皮未发汗品的毒性低于发汗品.厚朴干皮有无发汗(加工)的必要,值得商榷和进一步研究.     

厚朴干皮"发汗"(加工)前后抗菌镇痛作用的比较研究

目的比较厚朴干皮未发汗品、发汗品抗菌、镇痛作用的强弱;方法采用试管稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);用热板法观察对小鼠的镇痛作用.结果厚朴干皮的未发汗品、发汗品对金黄色葡萄球菌、伤寒、痢疾、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用.未发汗品组、发汗品组均能提高小鼠痛阀值与生理盐水组比较均有明显镇痛作用(P＜0.01＜0.001).结论厚朴干皮未发汗品、发汗品均有一定的抗菌、镇痛作用,且厚朴干皮未发汗品作用强于发汗品.建议<药典>对厚朴干皮省去"发汗"环节,而与其枝皮、根皮一同直接阴干入药.     

厚朴“发汗”工艺的研究

目的研究厚朴中主要成分及水分的含有量在不同"发汗"(堆放和自然干燥)工艺下的变化。方法以20年树龄的厚朴干皮为研究对象,以厚朴酚及和厚朴酚为评价指标,采用HPLC-MS法分析其主要成分。结果厚朴中厚朴酚及和厚朴酚的总含有量为1.93%,"发汗"8 d后增至4.55%。覆膜水微蒸"发汗"时,两者含有量最高,并且水分显著下降。样品经HPLC-MS分析,鉴定出8个主要成分。结论厚朴的最佳"发汗"工艺为水蒸15 min后,以塑料薄膜包裹,"发汗"8 d。     

“发汗”对厚朴药材质量影响的研究及其工艺的建立

目的:明确厚朴"发汗"处理的必要性,建立厚朴优良稳定的"发汗"工艺,为同类药材发汗工艺的优化提供参考。方法:通过单因素考察法对比不同"发汗"方法及不同"发汗"条件厚朴药材与阴干厚朴药材厚朴酚与和厚朴酚的含量差异,得到厚朴最优"发汗"工艺。结果:建立了优良稳定的厚朴"发汗"工艺,即将厚朴鲜品药材于25℃,75%相对湿度下水煮3 min后,堆积"发汗"9 d,之后取出摊开阴干。此时两酚含量平均增长率达到50.56%。结论:所建立的厚朴"发汗"工艺优良稳定,可用于指导厚朴药材的"发汗"处理,也可为同类药材发汗工艺的优化提供参考。     

厚朴"发汗"对大鼠胃动力和抗溃疡作用研究

目的:考察厚朴“发汗”对大鼠胃动力的影响和抗溃疡作用.方法:SD大鼠ip左旋精氨酸(L-Arg)5 d建立大鼠胃动力异常模型.胃动力异常大鼠连续5d分别ig厚朴提取物(厚朴量10 g·kg-1)、“发汗”厚朴提取物(“发汗”厚朴量10 g·kg-1),ip西沙必利(0.004 g·kg-1),测定胃残留率,观察厚朴“发汗”前后对胃动力异常大鼠胃动力的改善作用.昆明种小白鼠每只ig 0.35 mL 0.6 mol·L-1盐酸,建立盐酸性溃疡;每只ip吲哚美辛(10 g·kg-1)和ig0.15 mL 50％乙醇,建立吲哚美辛-乙醇性溃疡模型,连续3d分别ig厚朴提取物(厚朴量10 g·kg-1)、“发汗”厚朴提取物(“发汗”厚朴量10 g·kg-1),盐酸雷尼替丁0.04 g.kg-1;观察厚朴“发汗”前后对小白鼠的抗溃疡作用.结果:大鼠ip L-Arg造成大鼠胃动力减缓、血浆胃动素减少.厚朴、“发汗”厚朴提取液均能有效抑制L-Arg引起的大鼠胃残留率和胃动素的下降(P＜0.05),“发汗”厚朴组与厚朴组、西沙必利组之间比较有显著性差异(P＜0.05).厚朴组、“发汗”厚朴组、西沙必利组的胃残留率分别为(70.2±14.1)％,(61.5±12.8)％,(71.3±12.4)％;胃动素分别为(84.8±11.6),(92.9±11.7),(85.4±12.1)nmol·L-.厚朴、“发汗”厚朴均能减小盐酸性溃疡指数、吲哚美辛-乙醇性溃疡指数(P＜0.01),“发汗”厚朴组盐酸性溃疡指数、吲哚美辛-乙醇性溃疡指数要小(P＜0.01).厚朴组、“发汗”厚朴组、盐酸雷尼替丁组盐酸性溃疡指数分别为(36.8±10.4),(29.5±8.2),(17.5±10.1)mm;吲哚美辛-乙醇性溃疡指数分别为(45.4±11.7),(33.8±11.0),(20.3±4.9) mm.结论:厚朴“发汗”后改善大鼠胃动力障碍和抗溃疡作用更强.厚朴“发汗”炮制工艺是必要的.     

基于成分变化研究厚朴“发汗”过程中颜色与酶促反应的关系

该研究为探索厚朴“发汗”过程中酶促反应对药材颜色的影响,通过Q Exactive测定厚朴“发汗”不同时期的主要代谢产物,对厚朴“发汗”过程中药材颜色指标进行量化,并通过ELISA法测定“发汗”不同时期多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、酪氨酸酶等酶活性,采用灰度关联法对药材颜色、化学成分和酶活性进行灰度关联分析。研究结果表明厚朴药材在不同方法“发汗”过程中代谢物质变化规律相近,其中变化较为明显的初级代谢产物为氨基酸类、核苷酸类和糖类等化合物,次级代谢产物为酚类和苯丙素类等化合物,不同“发汗”方法共同上调化合物包括L-谷氨酸、乙酰精氨酸、次黄嘌呤、黄嘌呤等11种化合物,共同下调化合物包括L-精氨酸、L-天冬氨酸、苯丙氨酸、胞苷等6种化合物。厚朴“发汗”过程中明度值(L^*)、红绿色值(a^*)、黄蓝色值(b^*)持续降低;“发汗”期间PPO与POD的活性变化与药材颜色参数值变化规律一致。主要差异化合物、粉末色度参数与酶活性的灰度关联分析结果表明氨基酸、酚类等主要差异代谢物与色度参数L^*、a^...     

人工神经网络优化厚朴提取工艺及其“发汗”前后的含量测定

目的:优化厚朴提取工艺,从厚朴提取物的化学成分变化,阐释厚朴"发汗"的必要性。方法:采用正交设计结合人工神经网络模型的方法,以提取物干膏得率、厚朴酚、和厚朴酚三个指标的综合评分为评价指标,对厚朴提取时的溶剂浓度、料液比、提取时间和提取次数进行优化,确定最佳提取工艺;采用HPLC法对"发汗"及"未发汗"厚朴提取物进行含量测定,对比其"发汗"前后的厚朴酚与和厚朴酚的含量变化。结果:筛选的最佳提取工艺为加入厚朴样品100 g,加入70%乙醇提取,料液比为1∶8,提取时间为90 min,提取次数为2次;"发汗"后厚朴的厚朴酚提取率提高45.04%,和厚朴酚含量提高32.27%。结论:正交设计结合BP人工神经网络模型的方法稳定可行,具有良好重复性;"发汗"能增加厚朴中厚朴酚及和厚朴酚的提取率,从化学成分角度阐释了厚朴"发汗"的科学性与必要性。     

中药厚朴发汗过程中微生物群落结构及特征的分析

目的 分析厚朴鲜树皮直接“发汗”的前中后3个时期的微生物群落结构及特征。方法 将厚朴鲜皮直接堆放“发汗”后,分别取“发汗”第0、3、6 d的样品进行高通量测序,运用美吉生信云分析平台(https://cloud.majorbio.com)进行微生物群落结构及特征分析。结果 “发汗”前中后3个时期共检测到6个真菌菌门,子囊菌门Ascomycota在“发汗”整个过程中处于绝对优势地位。担子菌门Basidiomycota、未分类的真菌门Unclassified＿k＿Fungi和接合菌门Zygomycota在“发汗”中丰度明显升高。壶菌门Chytridiomycota和隐真菌门Rozellomycota仅在“发汗”中出现,且丰度极小。共检测到10个门水平细菌,变形菌门Proteobacteria在整过“发汗”过程中处于绝对优势地位且在中后期丰度进一步提高。浮霉菌门Planctomycetes、酸杆菌门Acidobacteria、装甲菌门Armatimonadetes及Saccharibacteria门在“发汗”中后期消失,且整过“发汗”过程中无新增优势菌门出现。结论 真菌物种丰度和多样性在整个...     

发汗前后厚朴对IBS-C大鼠肠道菌群分布及5-HT、SP水平的影响

目的：研究发汗前后厚朴对便秘型肠易激综合征（IBS-C）大鼠的作用机制。方法：采用冰水灌胃法建立IBS-C大鼠模型。将大鼠随机分为空白组、模型组、莫沙必利组（1 mg·kg-1）、未发汗厚朴组（以下简称“厚朴组”,10 g·kg-1）及发汗厚朴组（10 g·kg-1）。观察大鼠体质量、粪便含水量、粪便数量变化;采用16S rRNA测序检测大鼠粪便肠道菌群的结构变化;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定大鼠结肠组织中5-羟色胺（5-HT）及P物质（SP）水平。结果：与模型组比较,给药后莫沙必利组、厚朴组、发汗厚朴组的粪便含水量和粪便数量明显升高（P<0.05）。16S rRNA测序结果显示,菌群门水平丰度前4种分别为厚壁菌门、拟杆菌门、螺旋体门、变形菌门,与空白组比较,模型组厚壁菌门相对丰度明显降低（P<0.05）,螺旋体门相对丰度明显增加（P<0.05）;与模型组比较,厚朴组及发汗厚朴组的厚壁菌门、螺旋体门比例趋近于空白组,且发汗厚朴组螺旋体门相对丰度低于厚朴组;在科水平上,菌群丰度前4种分别为乳酸菌科、S24＿7、瘤胃球菌科、拟杆菌科,与空白组比较,模型组的乳酸...     

多基原郁金的性状、显微及气味差异性研究

目的 对不同基原的郁金进行性状特征、显微特征和气味信息进行差异分析，建立对不同基原郁金的快速判别方法。方法 利用感官总结比较郁金的性状，运用显微成像系统观察比较郁金的横切面及粉末特征，同时采用电子鼻对4种郁金进行挥发性成分分析。结果 4种郁金的性状、横切面及粉末鉴别特征差异较为明显。结合特征雷达图分析、主成分分析、气味综合值分析对4种郁金检测区分效果显著。结论 本研究结合性状、显微、气味特征，建立郁金基原快速判别方法，对临床用药品质提供保障。     

厚朴药材高效液相指纹谱实验研究

目的:对市场流通的不同产地的厚朴及其代用品、伪品进行高效液相指纹谱(HPLC-FPS)的研究,以求找到不同产地的厚朴及其代用品、伪品的异同点。方法:应用(HPLC-FPS)建立厚朴的指纹图谱。结果:二种正品厚朴的HPLC-FPS具有相似性、特征性,且易与代用品和伪品相区别。结论:建立厚朴HPLC-FPS能为厚朴质量与植物来源的评估提供有用的信息。     

不同种源厚朴酚性成分的HPLC图谱研究

目的:研究不同种源厚朴的化学特征,有效鉴别厚朴、凹叶厚朴及中间类型,建立新的厚朴药材的质量标准。方法:Lichrospher100RP-18e色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相乙腈-水(63:37);流速1mL·min^-1;柱温为室温;检测波长294nm,记录厚朴13个种源45个个体的HPLC图谱,进行图谱特征性分析和种源HPLC图谱的相似性计算。结果:对厚朴药材HPLC图谱中的占总面积1%以上的6个峰进行了比较,提取出峰5与峰6的峰面积比值(特征Ⅰ)、峰5和峰6的峰面积之和占总峰面积的比值(特征Ⅱ)作为种源鉴别特征。结论:该方法可有效鉴别优质种源厚朴。     

炮制对厚朴主要化学成分的影响

目的:考察炮制对厚朴中主要化学成分的影响.方法:以姜炒法对厚朴进行炮制,采用高效液相色谱法对厚朴炮制前后药材中木脂素类、苯乙醇苷类、生物碱类成分的含量进行测定;以气相色谱-质谱联用技术对挥发油成分进行分析.结果:与生厚朴相比,姜厚朴中厚朴酚、和厚朴酚、木兰花碱、挥发油成分的含量相近;苯乙醇苷类成分含量降低了约50％.结论:炮制会降低厚朴中苯乙醇苷类成分的含量.     

关于厚朴药材商品规格等级标准的研究

通过市场调查和文献研究,了解厚朴药材商品状况;同时采集样品进行分析,结合生产实际,制定新的厚朴商品规格等级标准。现行的规格等级标准中,将厚朴药材按来源划分为温朴与川朴2个品别,再按取皮部位划分为4种规格,每一种规格又按长度和质量划分若干等级;判断厚朴药材质量优劣的依据主要是性状特征(外观质量)。在新制定的厚朴商品标准中,等级的划分则是以厚度、厚朴酚与和厚朴酚含量为依据,即综合外观性状与药效成分(内在品质),科学评价药材质量。由于温朴与川朴的商品性状特征基本一致,外观难以区分,不再划分品别;又因蔸朴与耳朴部位重叠,规格简化为筒朴(含枝朴)、根朴、蔸朴等3种;其中,筒朴分为3个等级,根朴、蔸朴不分等(统货)。     

不同产地厚朴药材中3 种木脂素类成分含量测定及聚类分析

目的:建立同时测定厚朴药材中和厚朴酚,厚朴酚,辣薄荷基厚朴酚的含量测定方法,为不同产地厚朴药材品质评价提供依据。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH-Cl8柱（2.1 mm × 50 mm, 1.7 μm）,0.2%甲酸溶液(A) -甲醇(B)为流动相,梯度洗脱(0-2 min,65%-65% B;2-3 min,65%-75% B;3-5 min,75%-84% B;5-9 min,84%-90% B）,柱温和流速分别为35℃和0.5 mL·min-1,波长294 nm,进样量1 μL。结果：3种木脂素成分实现完全分离,并与其他成分均能达到良好的分离;和厚朴酚,厚朴酚,辣薄荷基厚朴酚分别在20.3-406.0,15.2-304.0,5.6-112.0 ng与色谱峰峰面积呈良好线性关系;平均回收率（n=9）分别为91.75%,93.86%,95.15%;RSD 分别为1.75%,1.88%,1.91%。结论：该方法同时测定3种成分,简便快速,准确,且不同产区的厚朴药材中3种木脂素成分含量差异较大,可用于厚朴药材的质量控制。     

厚朴枳实配伍对大鼠胃动力的影响

目的:考察厚朴枳实配伍及不同煎煮时间对大鼠胃动力的影响。方法:SD大鼠ip左旋精氨酸(L-Arg)6 d建立大鼠胃动力异常模型。胃动力异常大鼠连续5 d分别ig给予厚朴提取物(10 g.kg-1)、厚朴枳实配伍提取物(20 g.kg-1),ip西沙必利(0.004 2 g.kg-1)、观察其对L-Arg所致胃动力异常大鼠胃动力的改善作用。结果:大鼠ip L-Arg造成大鼠胃动力减缓、血浆胃动素减少。厚朴、厚朴枳实配伍提取液能有效抑制L-Arg引起的大鼠胃动力下降(P<0.05)和胃动素的下降(P<0.05),厚朴与阳性药物西沙必利之间无显著性差异,厚朴枳实配伍与厚朴、西沙必利之间有显著性差异(P<0.05)。厚朴、厚朴枳实配伍、西沙必利组的胃残留率分别为(69.3±13.7)%,(60.7±12.9)%,(70.1±12.9)%,;胃动素分别为(85.4±11.2),(93.1±10.4),(86.3±12.4)nmol.L-1。厚朴枳实煎煮90 min较煎煮60,30 min大鼠胃残留率低(P<0.05),胃动素含量高(P<0.05)。煎煮90,60,30 min胃残留率分别为(47.7±12.8)%,(59.8±12.1)%,(62.7±11.8)%;胃动素分别为(102.3±10.6),(92.9±10.1),(89.6±11.2)nmol.L-1。结论:厚朴、厚朴枳实配伍提取液能显著改善L-Arg所致的大鼠胃动力障碍,厚朴枳实配伍后作用要优于单一厚朴。两者配伍以煎煮90 min为宜。     

厚朴正交提取工艺的初步研究

[目的]探讨厚朴的提取工艺。[方法]利用正交设计法安排试验，以厚朴酚及厚朴酚的含量和收膏率为指标，考察提取工艺。[结果]最佳的工艺条件为8倍量70％乙醇，提取两次，1h／次。[结论]本研究利用最佳工艺能充分有效的提取厚朴药材中的有效成分。     

厚朴超临界提取物大鼠体内外化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术( UPLC/Q-TOF-MS)对厚朴超临界萃取( SFE)提取物进行大鼠体内外化学成分分析.方法 用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,负离子模式下采集数据.初步分析提取物的化学成分、给药后吸收入血成分及其代谢情况.结果 厚朴SFE提取物中检测到和厚朴酚、厚朴酚、龙脑基厚朴酚等5个化学成分,其中厚朴酚原型成分吸收入血,并初步鉴定其3个代谢物.结论 厚朴酚是厚朴SFE提取物在体内的直接作用物质,结合其代谢产物分析,有助于阐明厚朴SFE提取物的体内药效物质基础.     

HPLC-DAD测定厚朴中6种活性成分的含量

目的:以6种活性成分的含量为指标评价厚朴商品的质量。方法:建立了HPLC-DAD对厚朴样品中4种极性成分木兰花碱、紫丁香苷、木兰苷A及木兰苷B的含量测定方法,流动相醋酸水(p H 3.0)-甲醇梯度洗脱,流速1 m L·min-1,检测波长265,328 nm,柱温35℃。参照本课题组前期报道的方法测定了脂溶性成分厚朴酚、和厚朴酚的含量。结果:所建立4种极性成分含量测定方法平均加样回收率范围97.63%~103.84%,RSD 2.41%~4.55%。厚朴中各类成分的含量由高至低顺序为厚朴酚类、木兰苷类、木兰花碱和紫丁香苷。筒皮极性成分中除紫丁香苷外,其他成分含量均高于饮片(P<0.05);部分药材中厚朴酚与和厚朴酚含量未达到2010年版《中国药典》的要求。结论:所建立的厚朴样品中4种极性成分含量测定方法准确、可靠。不同等级厚朴商品质量不同,总体来说,"选货"中活性成分的含量较"统货"高。