不同规格怀牛膝不同极性部位HPLC指纹图谱

目的研究并比较不同规格怀牛膝不同极性部位的HPLC指纹图谱,探索其内部质量差异,为该药材的规格标准完善及临床用药提供参考。方法将怀牛膝用体积分数75%乙醇水浴回流提取,得体积分数75%乙醇回流提取物,用40 mL水溶解后,依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到各萃取相及萃取后的水相,浓缩至浸膏,采集各部位HPLC指纹图谱;运用相似度、综合聚类法进行数据分析,同时对其不同部位的指纹图谱进行比对分析。结果石油醚、氯仿部位均标定了11个共有峰,乙酸乙酯部位标定了10个共有峰,正丁醇部位标定了19个共有峰,水部位标定8个共有峰;氯仿部位指纹图谱相似度差异较大,其他部位指纹图谱相似度差异较小,均在0.9以上;石油醚部位指纹图谱差异主要体现在峰高,乙酸乙酯部位、氯仿部位、水部位的化学成分种类及峰高均存在差异;综合聚类分析能将不同规格怀牛膝区分开。结论不同规格怀牛膝内部质量存在差异;实验中所建立的HPLC指纹图谱可以全面反映不同规格怀牛膝的化学成分分布,为不同规格怀牛膝的整体质量评价提供参考。     

高乌头不同溶剂萃取部位HPLC多波长指纹图谱研究

目的建立一种评价多波长色谱指纹图谱的新方法——均谱法(MFM),用于高乌头药材不同极性部位HPLC指纹图谱研究,为全面评价高乌头药材的质量提供参考。方法采用系统溶剂法对不同产地高乌头药材95%乙醇提取物进行萃取,依次得到石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水6个不同的溶剂萃取部位;采用HPLC法分别于235,254,280,290,308 nm紫外波长下检测,将每个萃取部位5个波长下HPLC图谱的信号加和后求平均值作为该部位的均谱;采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)对10批高乌头药材不同溶剂萃取部位HPLC均谱进行共有峰确认及相似度评价。结果建立了高乌头药材不同溶剂萃取部位的多波长指纹图谱(MWCF),高乌头石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇及水提部位MWCF分别确定了36,26,34,24,16,19个共有峰,均指认了2个指纹峰(高乌甲素和冉乌头碱)。不同产地高乌头药材同一极性部位MWCF相似度较高,说明10批不同产地高乌头药材基源一致,且提示提取和萃取工艺相对稳定;不同极性部位之间化学成分有明显差异,共有峰数目从多到少,高乌甲素和冉乌头碱从有逐渐变到无,充分表征了有效成分在各个萃取部位的分布特征。结论所建的均谱法能够使高乌头药材化学指纹信息最大化,能够最大限度地表征高乌头药材指纹图谱特征,不同溶剂萃取部位MWCF可以全面反映高乌头药材的化学成分分布,为高乌头药材的整体质量评价提供参考。     

黄药子醇提物肝脏毒性部位筛选研究

目的：通过其毒性作用机制分析中药薯蓣科植物黄药子可能含有的肝毒性组分。方法：将黄药子75%乙醇提取物依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取,采用SD雄性大鼠进行体内筛选和研究,观察不同组分对肝毒性的影响,分析其致毒机理。结果：氯仿部位肝毒性作用强于其它部位。结论：黄药子氯仿萃取物具有显著的肝毒性,且与自由基损伤有关。     

虎耳草乙酸乙酯部位高效液相色谱指纹图谱研究

目的:建立虎耳草药材的乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱分析方法.方法:以Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5 μm),流动相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长256 nm,柱温30℃.结果:建立了虎耳草药材的乙酸乙酯部位指纹图谱,确定了15个共有峰,并用对照品指认了7个峰,精密度和重复性实验中各共有峰相对保留时间RSD均小于3％,11批不同产地虎耳草相似度存在差异.结论:虎耳草药材乙酸乙酯部位指纹图谱的建立为药材质量控制提供了科学依据.     

强肝胶囊HPLC指纹图谱研究

目的 建立强肝胶囊HPLC指纹图谱并对其进行化学模式识别.方法 采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),在230 nm波长下,以乙腈-0.05％磷酸水溶液进行梯度洗脱,测定了44批强肝胶囊样品;应用相似度分析软件建立强肝胶囊指纹图谱的共有模式,并对色谱峰进行了指认.结果 建立强肝胶囊HPLC指纹图谱,在确定的方法下,得到44批强肝胶囊的色谱图,并获得了44批样品的相似度;确定共有峰14个,其中13个归属到各药材,11个已确认成分.结论 强肝胶囊的HPLC指纹图谱的构建和共有色谱峰成分的确定为强肝胶囊药品质量控制提供参考.     

基于化学计量学的通草水提物三氯甲烷部位 UPLC指纹图谱研究北大核心

目的:建立通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱,并结合化学计量学进行分析。方法:采用Waters CORTECS T3(150 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;流速为0.2 mL/min;检测波长为320 nm;柱温为35℃;进样量为3μL。通过聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对16批通草进行质量评价和差异性分析。结果:建立的通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱共标定17个共有峰;聚类分析和主成分分析结果一致;利用正交偏最小二乘判别分析筛选出7个差异性成分,可作为通草药材质量控制的标志物。结论:该研究建立的通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱可较全面的表征其化学质量特征,指纹图谱的化学计量学分析可为通草质量标准的制定提供依据。     

复方脑脉通有效部位与药材指纹图谱相关性研究

目的:建立脑脉通(大黄、人参、葛根)有效部位的HPLC指纹图谱,研究复方与组方药材指纹图谱色谱峰相关性。方法:采用HPLC-PDAD方法,建立脑脉通有效部位及各药材在203nm检测波长下的指纹图谱,以色谱峰保留时间为考察指标,对复方指纹图谱色谱峰归属进行分析。结果:建立了脑脉通复方有效部位的HPLC对照指纹图谱,标示出36个共有指纹峰,对复方特征峰进行了归属分析,确定了14个特征峰的药材归属。结论:该指纹图谱有助于提高脑脉通有效部位的质量控制水平。     

河南连翘不同极性部位的HPLC指纹图谱

目的:建立河南连翘饮片不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价河南连翘饮片的质量提供参考。方法:将河南连翘饮片用75%乙醇制备总提取物后,分别用石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、正丁醇、水依次萃取,浓缩至浸膏,减压干燥制得粉末样品,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果:连翘饮片石油醚部位HPLC指纹图谱确定了18个共有峰,指认了3个指纹峰;三氯甲烷部位HPLC指纹图谱共确定了25个共有峰,指认了4个指纹峰;乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱共确定了20个共有峰,指认了3个指纹峰;正丁醇部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了3个指纹峰;水部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了2个指纹峰。连翘饮片同一极性部位指纹图谱相似度较高,不同极性部位之间化学成分有明显差异。结论:该实验方法准确、可靠、重复性高,所建指纹图谱可以全面反映连翘饮片的化学成分分布,为连翘饮片的整体质量评价提供参考。     

白芍药材UPLC特征指纹图谱研究

目的:建立白芍药材的UPLC特征指纹图谱分析方法,为快速评价白芍药材的质量,完善白芍的质量控制方法提供依据.方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm × 100 mm,1.8 μm),流动相乙腈-0.05%磷酸水溶液,检测波长230 nm.结果:建立了白芍药材的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了15个共有峰,指认了其中5个共有峰,15批白芍药材的相似度为0.891～0.9960结论:该方法快速,可用于评价白芍药材质量.     

牡丹皮药材UPLC特征指纹图谱研究

目的:建立牡丹皮药材的超高效液相色谱特征指纹图谱分析方法.方法:采用ACQUITY UPLC HSS 13色谱柱(2.1 mm × 100 mm,1.8 pn);流动相乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱,检测波长254 nm.结果:建立了牡丹皮UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了20个共有峰,并指认了10个主要色谱峰,15批牡丹皮药材的相似度为0.973～0.998.结论:本方法快速、高效,可用于牡丹皮药材的质量评价.     

Role of ethanol in kava hepatotoxicity

Kava is known for its recreational, ceremonial and medicinal use in the Pacific. The aqueous non‐alcoholic drink of kava rhizome produces intoxicating, relaxing and soothing effects. While kava's medicinal effects receive worldwide recognition, kava‐containing products came under scrutiny after over 100 reports of spontaneous adverse hepatic effects. Many mechanisms have been postulated to explain the unexpected toxicity, one being pharmacokinetic interactions between kavalactones and co‐administered drugs involving cytochrome P450 enzyme system. Alcohol is often co‐injested in kava hepatotoxicity cases. This review evaluates the possible hepatotoxicity mechanisms involving alcohol and kava. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

土三七致大鼠肝毒性的代谢组学

目的研究土三七致大鼠肝毒性的代谢组学。方法 20只SD大鼠随机分为空白组和给药组,每组10只,空白组灌胃给予蒸馏水,给药组灌胃给予土三七药液(7.5 g/kg),给药14 d后处死,取血和肝脏,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)水平,并进行病理组织学观察。然后,通过LC-MS法分析大鼠血清、肝组织代谢谱变化,并鉴定差异性代谢物。结果与空白组比较,给药组ALT、AST水平显著升高(P0.01),HE染色可见有不同程度的炎细胞浸润。通过正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)载荷图筛选,可找到变量权重(VIP)1、P0.05的差异性代谢物。血清样品中共有68个差异变量,其中13种代谢物差异较大;肝组织样品中共有26个差异变量,其中14种内源性代谢物差异较大。结论土三七致大鼠肝毒性机制可能与甘油磷脂、胆汁酸代谢紊乱有关,本研究可为有毒中药的毒性机制研究提供新的策略和方法。     

Prevention of thioacetamide-induced hepatotoxicity by biflavanones of Garcinia kola

Kolaviron, a mixture of Garcinia biflavonoids GB-1 (II-3-I-4′-II-4″-I-5-II-5-I-7-II-7-heptahydroxy-3,8″-biflavanone), GB-2 (II-3-II-3′-I-4′-II-4″-I-5-II-5-I-7-II-7-octahydroxy-3,8″-biflavanone) and kolaflavanone (II-3-II-3′-II-4″-I-5-II-5-I-7-II-7-heptahydroxy-3,8″-biflavanone) obtained from Garcinia kola, protected rats against the toxic effects of thioacetamide in vivo. The biflavonoid mixture at a dose of 100mg/kg i.p. reduced the thiopental-induced sleep in thioacetamide-poisoned rats, both in the chronic and acute test models. The microsomal enzyme levels in the serum of rats poisoned with thioacetamide were also significantly altered by treatment with kolaviron.     

中药制剂肝毒性的影响因素探析

中药制剂作为中药发展及质量控制的重要方面,其安全性问题日益突出。肝脏作为人体最主要的药物代谢器官,中药制剂对其带来的药物损伤也首当其冲。笔者从中药制剂的原料药到成品加工等一系列环节出发,探究其与肝毒性之间的关系,剖析制剂存在肝毒性隐患的机制,为保证药物质量、临床合理用药以及开发出优质低毒的现代化中药制剂提供依据和指导。     

Pollen extracts reduce the hepatotoxicity of paracetamol in mice

Cernitins are preparations obtained from plant pollen which contain numerous compounds of potential biological significance. This work deals with the influence of cernitins upon acute paracetamol toxicity in mice. The survival rate and indices of hepatic injury: aminotransferase and alkaline phosphatase activities, bilirubin level in serum, glutathione and cytochrome P-450 content in liver, liver weight, histopathologic picture of the liver and presence of glycogen and lipids in stained liver sections, under different experimental protocols, were determined. It was found that cernitins are able to increase the survival rate of mice and reduce liver injury in acute paracetamol poisoning. Cernitins are more effective when administered after, rather than before, a dose of paracetamol. The possible mechanism through which cernitins may act is discussed.     

叶黄素对顺铂所致大鼠急性肝损伤的防治作用

目的:观察叶黄素(LU)对顺铂(CP)诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将30只SD大鼠随机分为5组,分别为对照组、顺铂组、不同剂量叶黄素(10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg)+顺铂组。大鼠连续灌胃叶黄素10天,第7天灌胃后l h腹腔注射顺铂(5mg/kg)。顺铂处理后,在第5天采血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)。采血后处死动物,测定肝脏系数、肝匀浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,同时观察肝组织结构变化。结果:肝损伤模型组大鼠血清ALT、AST含量均明显高于对照组,肝组织匀浆中MDA及NO含量显著增加,而GSH含量及SOD活性显著下降。叶黄素可降低肝损伤大鼠血清ALT及AST水平,降低肝组织匀浆MDA及NO水平,提高组织GSH含量及SOD活性,并可改善顺铂损伤大鼠肝病理组织学变化,随着叶黄素剂量增加,其保护作用增强。结论:叶黄素通过抗氧化作用减轻顺铂诱导的大鼠肝损伤作用。     

Prophylactic effect of flaxseed oil against radiation-induced hepatotoxicity in mice

Flaxseed (linseed, Linum usitatissimum, Linaceae) is widely used for its edible oil in many parts of the world. The present study investigates the radioprotective and antioxidative potential of flaxseed oil (FO). Swiss albino mice were administered FO orally once daily for 15 consecutive days, then exposed to a single dose of 5 Gy of gamma radiation. Lipid peroxide, reduced glutathione and total protein were estimated in the liver. Aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), acid and alkaline phosphatase estimations in serum were also carried out. Radiation-induced increases in the levels of lipid peroxidation (LPO), AST, ALT and acid phosphatase were significantly ameliorated by flaxseed oil pretreatment, and radiation-induced depletion in the level of glutathione (GSH) and alkaline phosphatase activities was significantly inhibited by flaxseed oil administration. The lifespan was increased in the flaxseed oil treated irradiated mice in comparison with their respective control mice, with survival data showing an LD(50/30) (lethal dose for 50% of animals after 30 days) of 7.1 and 10 Gy for control and FO treated irradiated mice, respectively, and produced a dose reduction factor for flaxseed oil (DRF) of 1.40. Radiation-induced deficits in body and organ weight were significantly reduced or prevented in flaxseed oil pretreated mice. The protection afforded by flaxseed oil may be attributed to the constituents of the oil, which include omega-3 essential fatty acids and phytoestrogenic lignans, which appear to play an important role in free radical scavenging and singlet oxygen quenching. The study does not rule out the possibility of a prophylactic potential of flaxseed oil against radiation-induced degenerative changes in liver.     

栀子对大鼠肝毒性的实验研究

目的：探讨栀子不同化学部位的肝毒性作用。方法：灌胃给药3 d后,观察大鼠外观、行为及体重变化；称量肝脏重并计算肝指数；测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性及总胆红素（TBIL）含量；对肝脏组织进行光镜的病理学观察。结果：3.08 g·kg^-11的水提物、1.62 g·kg^-1的醇提物、0.28 g·kg^-1的栀子苷导致肝重增加,肝指数增大,与空白比较P<0.05,P<0.001；ALT,AST活性增高,TBIL含量增加,与空白比较P<0.05,P<0.001；光镜下可见明显的肝细胞肿胀、坏死,大量炎症细胞浸润等形态改变。结论：栀子水提物、醇提物、栀子苷具有肝毒性,栀子苷是栀子肝毒性的主要物质基础。     

芦荟大黄素诱导斑马鱼肝毒性及作用机制研究

目的利用模式生物斑马鱼模型探索芦荟大黄素致肝毒性及作用机制。方法利用不同浓度芦荟大黄素处理斑马鱼48小时后,计算各组斑马鱼死亡率(%),用Origin 8.0软件绘制最佳的“死亡率—浓度”效应曲线,计算芦荟大黄素对斑马鱼肝脏毒性的最大非致死浓度(maximun non-lethal concentration,MNLC)和10%致死浓度(10%lethal concentration,LC 10)浓度;用NIS-Elements D 3.10高级图像处理软件进行图像分析并采集数据,计算各组斑马鱼肝脏面积、肝脏不透光度平均值和卵黄囊吸收延迟面积;利用CYP及Caspase试剂盒分别对各组斑马鱼CYP 3A4及凋亡相关酶Caspase3和Caspase9的活性进行检测,应用多功能酶标仪分析统计RLU信号强度,探讨芦荟大黄素致肝毒性的作用机制。结果(1)芦荟大黄素对斑马鱼的LC 10和MNLC浓度分别为312μM和229μM,呈现剂量—反应关系。(2)与空白组相比,各给药组斑马鱼的肝脏面积未发生明显改变,但随着芦荟大黄素剂量升高,斑马鱼的肝脏不透光度增加、卵黄囊吸收延迟面积增大。(3)芦荟大黄素能明显抑制斑马鱼体内CYP4503A4酶的表达,且能显著上调斑马鱼体内Caspase3和Caspase9蛋白的水平。结论芦荟大黄素能诱导斑马鱼肝毒性发生,作用机制可能与芦荟大黄素诱导肝细胞凋亡,主要通过激活凋亡相关蛋白实现,并且还与诱导斑马鱼Ⅰ相代谢酶的异常表达相关。     

七叶皂甙钠对实验性肝损伤的影响

目的:研究七叶皂甙钠对四氯化碳(CCl4) 导致大鼠肝损伤的影响.方法:大鼠用15?l4石蜡油溶液皮下注射4次(每隔3天一次)造模引起肝损伤.在造模前三天开始以七叶皂甙钠腹腔注射给药,直至实验结束.末次注射CCl4后16小时检测血清ALT、AST水平,第二天取肝测丙二醛(MDA) 含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并作组织病理学检查.结果:七叶皂甙钠组能保护CCl4引起的大鼠肝损伤,表现为血清ALT、AST活力和肝脏MDA含量下降,以及肝脏SOD活性增高,同时其肝脏病变较造模组为轻.结论:七叶皂甙钠对CCl4致大鼠肝损伤具有保护作用.