硫酸锌对大鼠破骨细胞形成的影响

目的 探讨硫酸锌对大鼠破骨细胞形成的影响.方法 采用全骨髓细胞培养系,将大鼠全骨髓细胞在α-MEM培养液中培养7 d,在1.25(OH)2D3存在下,实验组加入硫酸锌,每组浓度分别为10-8、10-7、10-6和10-5mol/L,对照组不加任何试剂.用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法确定破骨细胞.结果 实验组破骨细胞数分别为(105.50±2.08)个/孔、(89.25±0.96)个/孔、(70.00±1.63)个/孔、(66.25±1.71)个/孔;对照组为(120.50±3.42)个/孔,实验组与对照组比较,破骨细胞数明显减少(P<0.01).结论 硫酸锌对大鼠破骨细胞的形成有抑制作用.     

应用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察体外培养破骨细胞的生存时间

抗酒石酸醚性磷酸酶（ＴＲＡＰ）是破骨细胞（ＯＣ）的标志酶，为ＯＣ所特有。本研究应用改良的ＶａｎＤｅＷｉｊｎｇａｅｒｔ和Ｍｏｓｔａｆａ方法对培养在骨片上的ＯＣ进行ＴＲＡＰ染色，成功地观察了体外培养ＯＣ的形态与生存时间。该方法简便、特异性高，能准确计数体外培养的ＯＣ数，所用底物为萘酚ＡＳ－ＢＩ，原料易获得，培养在骨片上的ＯＣ生存时间可长达２４０小时。     

血小板衍生生长因子-BB体外促进破骨细胞样细胞形成

目的 获得大量和高纯度破骨细胞样细胞。方法 从急性单核细胞性白血病(M5a亚型)患者骨髓中分离前体单核细胞，与血小板衍生生长因子(PDGF)-BB共同培养，获得多核细胞；利用免疫电镜、免疫荧光、扫描电镜等技术鉴定多核细胞的生物学特性。结果 多核细胞表达抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)，细胞膜具有Vitronectin受体，能够形成骨吸收陷窝。结论 所获得的多核细胞是破骨细胞样细胞，PDGF-BB能够促进前体破骨细胞向破骨细胞转化。     

白细胞介素-4对破骨细胞的分化作用

目的:观察IL-4对诱导骨髓干细胞分化形成破骨细胞的作用.方法:用终浓度为10-8 mol.L-1的1,25(OH)2D3诱导成年小鼠骨髓干细胞分化形成破骨细胞,在此过程中加入不同质量浓度梯度的 IL-4(0、0.1、1、10 μg.L-1) 以及用IL-4的抗体中和IL-4.取IL-4(1 μg.L-1)处理过的第6天的培养上清液,先用抗IL-4抗体中和残余IL-4,再以体积分数1%,10%,20%,0加入另一新培养4 d含有骨片的骨髓细胞培养体系中,计数骨片上骨吸收陷窝数及面积,玻片上抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase, TRAP)阳性多核细胞和单核细胞数.结果:随IL-4(质量)浓度的增加,骨片上形成的骨吸收陷窝及面积数,玻片上的TRAP阳性细胞数呈量的依赖性的减少,加抗体组抵消了IL-4的抑制作用,加条件培养液组和未加组上述参数没有显著差别.结论:IL-4具有抑制骨髓干细胞分化形成破骨细胞的作用,这种作用不是通过使其它细胞形成可溶性因子,可能是直接作用于靶细胞(能分化为破骨细胞和巨噬细胞的前体细胞),使定向分化为TRAP阳性单核细胞的前体细胞转向分化为巨噬细胞, 破骨细胞数目减少,从而抑制了骨吸收.     

饲补肾中药大鼠血清对成骨细胞-破骨细胞共育系中破骨细胞功能的影响

目的探讨喂饲补肾中药大鼠血清在成骨细胞-破骨细胞培养体系中对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法取SD大鼠的胎鼠颅骨与四肢骨分别分离、培养成骨细胞和破骨细胞,利用共育系使二者生活在同一环境中,施加高、中、低剂量的饲补肾中药大鼠血清,并与对照组及单独培养的破骨细胞进行比较,酶动力学法测定培养上清中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的活性,利用甲苯胺蓝对骨吸收陷窝染色并在Leica Quantimet 500图像分析仪下测定骨吸收陷窝的面积和数目。结果共育系中对TRACP活力的抑制及骨陷窝面积与数目的减少以中剂量组作用最为明显(与对照组比较P<0.01),单独培养3个剂量组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),以中剂量组作用最为明显(P<0.01)。结论饲补肾中药大鼠血清可以抑制共育系中破骨细胞的骨吸收功能。     

RANKL浓度对破骨细胞形成与活性的影响

目的 探讨不同浓度RANKL对骨髓单核细胞向破骨细胞分化和活性的影响.方法 50、100和150 μg/L三种RANKL浓度诱导骨髓单核细胞向破骨细胞分化.抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞形态并计数,抗酒石酸酸性磷酸酶活性检测试剂盒检测上清中的抗酒石酸酸性磷酸酶活性,骨板吸收实验检测破骨细胞骨吸收活力.结果 100 μg/L和150 μg/L RANKL浓度组在破骨细胞数量、细胞大小、核数目,抗酒石酸酸性磷酸酶活性和骨吸收率方面均明显高于50 μg/L组（P＆lt;0.01）,而100 μg/L和150 μg/L组间没有明显差异.结论 100 μg/L RANKL浓度下破骨细胞形成和活性能力强且相对较经济,是破骨细胞诱导培养的理想浓度值.     

氟化钠对体外培养大鼠破骨细胞的影响

目的:探讨氟对体外培养的破骨细胞的作用.方法:体外分离培养大鼠乳鼠四肢长骨破骨细胞,于分离后2 h加入氟化钠(NaF)4、6、8和10 mg@L-1,对其进行形态学的动态观察.结果:破骨细胞形态多样,含多个核,体外培养存活时间短,24 h大部分细胞凋亡.加入NaF后,破骨细胞数目减少,体积变小,空泡增多,甚至崩解坏死.结论:在一定的剂量和时间范围内,氟对体外培养的破骨细胞有直接的损伤作用.     

巨噬细胞集落刺激因子对破骨细胞生物作用的实验研究

目的　探讨在实验条件下巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)在骨代谢过程中对破骨细胞的生物作用。方法　用不同浓度的M CSF和活化核因子κB的受体配体 (RANKL)与鼠骨髓细胞培养 ,在加入或不加入牛骨片的情况下诱导产生破骨细胞。分别用抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)染色法和骨小坑染色法检测TRAP阳性的破骨细胞量及破骨细胞功能。结果　在一定范围内 ,M CSF在RANKL存在的条件下诱导TRAP阳性破骨细胞成熟 ,并随M CSF剂量的增加TRAP阳性细胞数明显增加 (r =0 .75 0 4,P <0 .0 1) ;且骨小坑数量也与M CSF剂量呈明显正相关 (r=0 .93 65 ,P≤ 0 .0 0 0 1)。缺乏M CSF或RANKL均不能诱导TRAP阳性的破骨细胞产生 (P =0 .0 191)。结论　破骨细胞的增殖、分化及成熟是由M CSF和RANKL共同调节的。M CSF是破骨细胞代谢过程中的关键因子 ,具有促进破骨细胞对骨吸收的作用。M CSF对骨代谢的主要作用之一是上调破骨系统。     

从股骨近端骨髓分化为破骨细胞能力的改变探讨激素性股骨头的坏死机制

目的从股骨近端骨髓体外分化为破骨细胞能力的改变来探讨激素性股骨头坏死的发病机制。方法取激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓,建立人骨髓基质干细胞诱导分化为破骨细胞的培养体系,通过观察多核细胞的形态、抗酒石酸酸性磷酸酶染色以及进一步培养于牛薄骨片扫描电镜观察以检测骨髓形成破骨细胞的能力。结果与正常组相比,多核细胞的形态、抗酒石酸酸性磷酸酶染色（P〈0.01）以及进一步培养于牛薄骨片扫描电镜观察表明激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓体外分化为破骨细胞的能力及活性上升。结论激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓基质干细胞体外分化为破骨细胞的能力和活性上升。     

二磷酸盐对破骨细胞的影响

二磷酸盐自30多年前被发现对破骨细胞有抑制作用以来,已成为临床上重要抗骨吸收药物。二磷酸盐分为含氮二磷酸盐和不含氮二磷酸盐两类。含氮二磷酸盐对抑制破骨细胞骨吸收机制是通过抑制甲羟戊酸途径实现的,而不含氮二磷酸盐则通过竞争性抑制ADT/ATP移位酶而发挥作用。同时二磷酸盐对成骨细胞与破骨细胞间信号的调节也有重要作用,但其对破骨细胞的具体调节机制尚存在较大争议,仍有待进一步研究。     

慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢的影响

目的：探讨过量氟对大鼠心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分成5组（每组8只）：常规食对照组、常规食加氟组（加氟100 mg ·L^-1）、低钙偏食对照组、低钙偏食加低量氟组（加氟50 mg·L^-1）和低钙偏食加高量氟组（加氟100 mg·L^-1）。采用苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜观察以及免疫组织化学法检测氟中毒大鼠心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达。结果：图像分析显示苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜下显示的Ⅰ型、Ⅲ型胶原面积百分比,各加氟组其Ⅰ型、Ⅲ型胶原均较其对照组稍有增高趋势,但差异无显著性(P＞0.05)。免疫组化观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达量0%~10%,各加氟组与其对照组相比差异亦无显著性(P＞0.05)。结论：慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢无明显影响,心肌胶原可能不是氟化物作用的靶子。     

吡非尼酮对实验性大鼠肝纤维化的作用

目的研究吡非尼酮（PFD）对实验性大鼠的抗肝纤维化作用。方法45只雄性Wistar大鼠随机均分为3组。模型组腹腔注射1%二甲基亚硝胺（DMN）10?mg/(kg·d),每周连续3d,共4周,制作肝纤维化模型;干预组除应用DMN外,同时给予PFD 500?mg/(kg·d)灌胃,1次/d,共4周;模型组及正常组以等体积生理盐水灌胃作对照。4周试验结束时进行组织学检查、电镜观察、血清肝纤维化指标、肝功能及转化生长因子 β1（TGF β1）检测。结果与模型组相比,干预组大鼠体质量下降较少(P＜0.05)、肝脾肿大较轻（P＜0.05）,血清透明质酸、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原浓度均明显低于模型组（P＜0.05）;干预组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素及TGF β1含量与模型组相比明显降低（P＜0.001）;MASSON染色显示,干预组肝脏纤维化及炎症反应明显减轻,无明显假小叶;透射电镜观察证实干预组大鼠肝细胞损伤明显减轻,肝窦及Disse腔内胶原纤维沉积明显减少。结论PFD对实验性大鼠肝纤维化模型具有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制TGF β1的产生有关,PFD有可能用于肝脏疾病的抗纤维化治疗。     

腺苷三磷酸氯化镁对失血性休克大鼠血压和血酸性磷酸酶活性的影响

[目的 ]观察腺苷三磷酸 氯化镁对失血性休克大鼠血压及酸性磷酸酶活性的影响 .[方法 ]将 36只Wistar大鼠随机分为腺苷三磷酸 氯化镁组、腺苷三磷酸组、氯化镁组、对照组 .各组均用微量输液器从股静脉给药 .在实验的不同时期 ,以血浆酸性磷酸酶、平均动脉压做为指标探讨腺苷三磷酸 氯化镁抗大鼠失血性休克效应机理 .[结果 ]腺苷三磷酸 氯化镁抑制休克大鼠血酸性磷酸酶的活性 ,并对动脉血压有明显的回升作用 .[结论 ]腺苷三磷酸 氯化镁抗失血性休克效应明显 ,单用腺苷三磷酸或氯化镁效应不佳     

MT蛋奶粉对铅中毒大鼠的排铅作用

目的：观察富含金属硫蛋白（MT）的蛋奶粉对铅中毒大鼠的驱铅效果。 方法：将60只Wistar大鼠随机分为对照组（20只）、空白组（10只）和铅中毒组（30只）。铅中毒组大鼠饮服0.2％醋酸铅水溶液3周造成实验性铅中毒后,再分成铅中毒组（10只）和MT蛋奶粉处理组（20只）。灌服MT蛋奶粉3周后,采集血液、肝脏、肾脏、股骨、脑、粪便及尿液,分别用原子吸收分光光度法测定铅含量。 结果：与对照组大鼠比较,铅中毒组大鼠各组织铅含量均显著升高(P<0.01)。与铅中毒组比较,MT蛋奶粉组大鼠脑铅含量明显降低(P<0.01),肾铅、骨铅含量亦有降低趋势,但肝铅含量显著增加(P<0.01),粪排铅量显著增加(P<0.01),尿排铅量有增加趋势。结论：MT蛋奶粉能不同程度降低组织内铅含量,具有一定的驱铅效果。     

血液样本处理方式对Wistar大鼠血液生化指标检测结果的影响

目的观察血液样本处理方式对大鼠血液生化指标检测结果的影响。方法取体重180~220 g的SPF级Wistar大鼠40只,雌雄各半,禁食不禁水12 h后,用3%戊巴比妥钠麻醉后取全血和肝素抗凝血各3 m L。将每种血样分别置于3个1.5 m L的离心管和肝素抗凝管中各1 m L,并分别在室温放置1 h、2 h、4 h后进行离心,测定血糖、血脂、蛋白、肝功能、肾功能、心肌酶等指标。结果血液样本类型和采集后离心前的放置时间对Wistar大鼠的血清或血浆TC、TG、TP、ALB、ALT、ALP、BUN和CREA等指标均无明显影响(P0.05)。但血浆的GLU值显著高于血清(P0.05,P0.01),并随着采集后离心前放置时间的延长持续下降。血清AST和CK、LDH值则均显著高于血浆(P0.05,P0.01),且随采集后离心前放置的延长呈现持续显著的上升(P0.05,P0.01)。而采集后离心前放置时间对Wistar大鼠血浆AST和CK、LDH值均无明显影响(P0.05)。结论血液样本类型对血脂、蛋白和肾功能指标无明显影响,但对GLU、AST、CK、LDH等检测结果有一定影响。采集后离心前的放置时间延长可导致血清血浆GLU下降,血清AST、CK、LDH升高,但对血浆AST、CK、LDH指标无明显影响。     

脑舒康胶囊对大鼠血液流变学及血栓形成的影响

目的：探讨脑舒康胶囊（NSK）对血液流变学及血栓形成的影响,初步阐明NSK对脑缺血的治疗作用机制。方法：将40只Wistar大鼠随机分为5组(每组8只)：空白对照组、NSK 2、8和16 g/kg组及步长脑心通（BCNXT）2 g/kg组,观察电刺激颈动脉血栓形成的时间。另取Wistar大鼠40只随机均分为血瘀模型组、NSK 2、8和16 g/kg组及BCNXT 2 g/kg组,建立血瘀模型后测量体外血栓的长度及干、湿质量,测定ADP诱导的血小板聚集率、凝血时间、全血及血浆黏度。结果：与空白对照组比较,NSK 8和16 g/kg组体内血栓形成时间显著延长（P<0.05或 P<0.01）;与血瘀模型组比较,NSK 8及16 g/kg组体外血栓的长度变短,血栓的干、湿质量降低（P<0.05或P<0.01）,血小板聚集率降低（P<0.05）,凝血时间延长,全血及血浆黏度降低（P<0.05或P<0.01）。结论：NSK具有抗血栓形成及改善血液流变学特性的作用。     

过量氟对电解铝工人血清微量元素及钙调节激素的关系

目的 :探讨过量氟与降钙素 (CT)、甲状旁腺素 (PTH)及微量元素的关系及意义。方法 :对某铝厂工人 (车间空气氟化物浓度波动在 0 63～ 1.3 1mg/m3 )及对照各 5 0名进行了血清CT、PTH、Ca、Mg、Cu、Zn、Se、F及尿F的测定。结果 :血清F及尿F均高于对照组 (P <0 0 1) ,CT及PTH低于对照组 (P <0 0 1) ,而血清Ca、Mg、Cu、Zn、Se与对照组无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :过量氟可抑制钙调节激素的分泌 ,也可能对甲状腺及甲状旁腺造成直接的损伤。     

罗格列酮对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察罗格列酮(RSG)对大鼠急性心肌缺血再灌注(I-R)损伤心肌梗死面积、心律失常发生率和心肌病理学改变的影响。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min建立大鼠心肌I-R损伤模型,将大鼠随机分为I-R损伤模型组、RSG高剂量(6 mg•kg^-1)、低剂量(3 mg•kg^-1)组和假手术组,灌胃给药1周后行I-R损伤手术,观察心肌梗死面积、心律失常发生次数和类型、心肌组织学改变和心肌细胞超微结构的变化。结果：与模型组比较,RSG高剂量组心肌梗死面积与左心室面积百分率（IS/LV％,29.3±4.9 vs 37.6±3.2）以及心肌梗死面积与危险区面积比值(IS/AAR％,76.1±9.6 vs 93.5±7.4)减少（P<0.05或P<0.01）;RSG高量组心律失常评分（2.6±0.4）低于I-R损伤模型组（4.2±0.6）(P<0.05)。RSG组心肌病理组织学和心肌细胞超微结构损伤轻于I-R损伤模型组。结论：RSG可通过减少I-R损伤大鼠心肌梗死面积、减少恶性心律失常的发生及改善病理组织学损伤而起到对大鼠心肌I-R损伤的保护作用。     

补钙对去卵巢大鼠血糖和血脂水平的影响

目的探讨补钙对假手术和去卵巢大鼠血糖和血脂水平的影响,为绝经期后妇女合理补钙提供理论参考。方法清洁级8周龄雌性Wistar大鼠,适应性喂养1周,按体重随机分为假手术正常钙膳食(A组)、假手术高钙膳食(B组)、去卵巢正常钙膳食(C组)和去卵巢高钙膳食(D组),记录大鼠的摄食量及体重,8周后腹主动脉采血测空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平,并根据FBG和FINS计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果大鼠的进食量经单因素方差分析,F=4.54,P=0.01,其中D组大鼠的进食量显著高于A、B和C组;大鼠的体重经单因素方差分析,F=17.45,P=0.00,C组和D组的体重显著低于A组和B组;大鼠的TC、TG、FBG、FINS和ISI水平经单因素方差分析,P值均0.05,其中C组和D组的TC、C组的TG均显著高于A组和B组,D组的TG显著低于C组,C组的FBG、C组和D组的FINS和ISI均显著高于A组和B组,D组的FINS和ISI显著低于C组(P0.05)。结论去卵巢可增加大鼠的进食量,降低大鼠的体重,增加大鼠血总胆固醇、胰岛素和胰岛素敏感指数的水平;去卵巢正常钙膳食大鼠血甘油三酯和空腹血糖的水平增高,而去卵巢高钙膳食可降低甘油三酯、胰岛素和胰岛素敏感指数的水平。     

咪唑安定对大鼠血管可容性的影响及其机制研究

目的研究咪唑安定对Wistar大鼠血管可容性的影响及其机制.方法全身容量血管的顺应性(即可容性)用平均循环充盈压(Pmcf)表示[Pmcf=VPP+K(FAP-VPP)].将所有实验Wistar大鼠分为4个组对照组、六甲双胺预处理组、低血容量组及六甲双胺加去甲肾上腺素组.对4组动物分别注入咪唑安定0.1、0.3、0.5、1mg*kg-1后2min计算Pmcf.结果对照组、低血容量组、六甲双胺加去甲肾上腺素组注入咪唑安定后可导致平均动脉压(MAP)显著下降(P<0.05),但只有对照组的MAP呈剂量依存性下降.对照组和低血容量组Pmcf呈剂量依存性下降(P<0.05),六甲双胺预处理组和六甲双胺加去甲肾上腺素组的Pmcf无改变.结论咪唑安定有剂量依存性扩张血管的作用,这种作用可能主要是其对交感缩血管张力抑制的结果.