心肌肽对阿霉素诱导心肌细胞H9c2损伤的影响

目的探讨心肌肽(cardiomyopeptide,Car)对阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的大鼠心肌细胞H9c2损伤的保护作用及其可能机制。方法 MTT法检测不同浓度(0、10、20、40 mg·L~(-1))心肌肽分别预处理6、8、12 h后,对DOX损伤心肌细胞存活率的影响; Western blot法检测心肌肽对DOX诱导心肌细胞中caspase-3、Bcl-2、Bax、IGF~(-1)R和IGFBP-3蛋白表达影响。结果随着心肌肽预处理时间增加,细胞存活率明显提高,且呈剂量依赖性;心肌肽40 mg·L~(-1)预处理8 h,使DOX的IC50值由(1. 2±0. 4)μmol·L~(-1)右移至(2. 3±0. 2)μmol·L~(-1); Western blot分析表明,经心肌肽处理后,Bax、caspase-3和IGFBP-3蛋白表达降低,Bcl-2和IGF~(-1)R蛋白表达增加,呈明显的剂量依赖性。结论心肌肽能保护心肌细胞,对抗DOX诱导的心肌细胞损伤,其机制可能与下调Bax和IGFBP-3,上调Bcl-2和IGF~(-1)R蛋白表达,抑制caspase-3活性有关。     

人参皂苷Rb1改善心力衰竭的研究进展

心力衰竭是常见的临床综合征,其典型特征是高发病率、住院率和死亡率。人参皂苷Rb₁是人参中重要的活性成分之一,可通过抑制心肌细胞凋亡、抑制心肌肥大、调节心肌钙离子浓度、提高心肌抗缺血作用、调节心肌细胞的自噬功能、改善心肌脂肪酸β氧化功能、调控磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白质激酶B（Akt）信号通路等多种作用机制对心力衰竭发挥防治作用,总结了人参皂苷Rb₁改善心力衰竭的作用机制,为人参皂苷Rb₁的临床使用提供参考。     

黄芪甲苷通过激活Sirt3抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大及氧化应激

目的研究Sirt3在黄芪甲苷抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大和氧化应激中的作用。方法α-actinin染色检测心肌细胞大小;MitoSOX染色检测ROS;Real time PCR检测心肌肥大标记物ANP、BNP和β-MHC的mRNA水平;Western blot法检测心肌细胞肥大信号通路蛋白水平。结果100nmol·L-1血管紧张素Ⅱ处理心肌细胞48 h,心肌细胞面积与ANP、BNP、β-MHC mRNA水平显著增加,ROS水平及NOX-2、NOX-4表达显著增加,Sirt3表达显著降低;黄芪甲苷预处理心肌细胞1 h显著抑制血管紧张素Ⅱ诱导的上述效应。Sirt3-siRNA干预Sirt3蛋白水平,显著抑制黄芪甲苷的心肌肥厚抑制作用以及抗氧化作用,上调ROS水平,促进心肌肥大。结论黄芪甲苷通过激活Sirt3抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大以及氧化应激。     

辛伐他汀对过氧化氢损伤的心肌细胞的保护作用

目的观察辛伐他汀对过氧化氢（H2O2）损伤的心肌细胞的保护作用，阐明此作用与其诱导心肌抗氧化酶活性、减少氧活性物质的生成间的关系。 方法用培养的新生SD大鼠心肌细胞做实验。用H2O2建立细胞损伤模型，细胞培养前用不同浓度辛伐他汀和甲羟戊酸进行预处理。测定心肌细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH )浓度及丙二醛(MDA)水平，用荧光探针DCF-DA测定细胞内活性氧(ROS)水平，反映心肌损伤及氧活性物质的生成情况。测定心肌细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性，反映抗氧化酶活性。 结果辛伐他汀预可剂量依赖性地提高H2O2损伤心肌细胞的细胞活力(P＜0.01)，并减少损伤时LDH的漏出(P＜0.01)，MDA的生成量也明显减少(P＜0.01)，心肌ROS明显下降；而心肌细胞SOD活性较H2O2损伤组增高(P＜0.01)。甲羟戊酸(100 μmol·L^-1)能完全阻断辛伐他汀预处理的保护作用。 结论辛伐他汀可能通过MVA通路，使SOD等有抗氧化作用的酶合成增加，对H2O2引起的心肌细胞损伤起心肌保护作用。     

R59022调节心肌细胞自噬促进ET-1诱导的乳鼠心肌细胞肥大

目的研究甘油二酯激酶(DGK)的抑制剂R59022对心肌细胞自噬及内皮素1(ET-1)诱导的心肌肥大的影响,并探讨其可能机制。方法原代培养乳鼠心肌细胞,ET-1诱导乳鼠心肌细胞肥大;Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、beclin-1、p62的表达以及Akt的磷酸化及非磷酸化蛋白表达;RT-PCR技术检测心肌肥大基因脑钠肽(BNP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA表达水平;细胞免疫荧光检测心肌细胞表面积。结果 ET-1作用乳鼠心肌细胞24 h明显促进心肌细胞肥大,并诱导自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、beclin-1的表达增强,p62表达减弱。自噬抑制剂氯喹(CQ)、3-甲基腺嘌呤(3-MIA)减小心肌细胞表面积,下调肥大基因BNP、β-MHC的mRNA表达,改善ET-1诱导的心肌细胞肥大,而自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)则促进ET-1诱导心肌细胞肥大;R59022预处理增加ET-1诱导的LC3-Ⅱ/Ⅰ、beclin-1的表达,增强ET-1诱导的心肌细胞自噬,同时进一步促进ET-1诱导的心肌细胞表面积的增大,BNP、β-MHC的mRNA表达水平的增加,促进ET-1诱导的心肌细胞肥大;对Akt表达的结果显示,ET-1明显下调Akt的磷酸化水平,R59022对此有促进作用。结论 R59022增强ET-1诱导的心肌细胞自噬,促进心肌细胞肥大,其机制可能与抑制Akt的激活,从而抑制mTOR通路的活化有关。     

心肌营养素1与心肌梗死

心肌营养素I(CT-1)是白介素6(IL-6)家族细胞因子,它与糖蛋白130/白血病抑制因子受体异二聚体相结合,诱导心肌细胞肥大,促进心脏成纤维细胞增生,抑制心肌细胞凋亡,与许多心脏疾病密切相关.本文就CT-1与心肌梗死之间的关系作一综述.     

中华眼镜蛇毒组分F/H对大鼠心肌细胞缺氧-再给氧损伤的作用探讨

以Laarse方法建立大鼠心肌细胞缺氧-再给氧模型．缺氧缺糖60min．再给氧1h．探讨组份F和H对实验性心肌细胞缺血再灌注的保护作用。实验结果显示,缺氧后心肌细胞成活率显著减少,心肌释放LDH含量显著增加．细胞膜流动性下降,缺氧再给氧后上述各指标改变加剧。组份F和H能明显提高心肌细胞成活率,减少LDH的释放．增加细胞膜流动性．减少心肌细胞膜的损伤,实验结论,组份F和H有明显抗心肌细胞缺氧-再给氧损伤的作用,尤以组份F作用更显著。     

κ-阿片受体激动对异丙肾上腺素诱导的乳大鼠心肌细胞肥厚的抑制作用

目的通过观察选择性κ-阿片受体(κ-OR)激动剂U50488H抑制异丙肾上腺素(Iso)诱导乳大鼠心肌细胞肥厚的作用及其对细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)瞬变及钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)表达的影响,研究κ-OR激动抑制Iso诱导的大鼠心肌细胞肥厚的信号传导机制。方法以体外培养的乳大鼠心肌细胞为模型,应用β肾上腺素受体激动剂Iso10μmol.L-1诱导心肌肥大,观察U50488H1μmo.lL-1的作用,并进一步探讨在CaMKⅡ特异性抑制剂KN930.2μmol.L-1,普萘洛尔2μmol.L-1及L-钙通道阻滞剂维拉帕米1μmol.L-1存在情况下,κ-OR的激活对心肌肥厚的作用。用Lowry法检测心肌细胞蛋白含量;消化分离法及计算机图像分析系统检测心肌细胞体积;[3H]亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白的合成;采用Till阳离子测定系统,以Fura-2/AM为荧光探针,观察心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化;用Western蛋白印迹法测定CaMKⅡδB表达。结果Iso10μmol.L-1使心肌细胞总蛋白含量、体积和蛋白合成明显增加,U50488H1μmol.L-1抑制Iso诱导的心肌肥大,且抑制程度与KN930.2μmol.L-1,普萘洛尔2μmol.L-1及维拉帕米1μmol.L-1相似,在KN93存在的情况下,U50488H抑制Iso诱导的心肌肥大作用增强;U50488H能降低Iso引起的心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化升高;Iso能明显增强心肌细胞内CaMKⅡδB的表达,U50488H能降低其表达。结论κ-OR激动剂U50488H可能通过降低心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化和减少心肌细胞内CaMKⅡδB的表达,抑制Iso诱导的乳大鼠心肌细胞肥厚。     

甲状旁腺激素对心肌细胞PGI_2释放的影响

为探讨甲状旁腺激素PTH心肌毒性的可能机制,我们对心肌细胞释放6-keto-PGF_(-1α)进行了测定。结果表明,bPTH(1-34)明显增加心肌细胞释放PGI_2,该作用与剂量有关;钙载体A_(23187)也能刺激心肌细胞释放PGI_2;钙离子络合剂EDTA,钙通道阻断剂维拉帕米明显抑制之;维拉帕米还可阻断bPTH(1-34)对PGI_2释放的增加作用。提示PTH促进心肌细胞合成PGI_2的作用受细胞内外钙离子的影响。bPTH(1-34)增加心肌细胞PGI_2合成的意义可能与其干扰能量代谢进而使细胞损伤有关。     

卡维地洛预处理对缺血再灌注心肌钙调磷酸酶和心肌凋亡的影响

目的研究卡维地洛预处理对大鼠在体心肌缺血再灌注(I/R)后钙调磷酸酶(CaN)水平和细胞凋亡率的影响,探讨卡维地洛心肌保护作用的机制。方法Wistar雄性大鼠24只,随机分为4组(均n=6):伪手术组、L/R组、卡维地洛A组及卡维地洛B组,前2组大鼠灌胃给予生理盐水5mL·kg~(-1)·d~(-1),卡维地洛A组和B组则分别给予卡维地洛20、60mg·kg~(-1)·d~(-1)。7d后建立大鼠在体心肌I/R模型,I/R组及卡维地洛A、B组结扎左冠状动脉前降支30min复灌3h,伪手术组仅穿线,不结扎。RT-PCR法检测心肌CaNmRNA的表达水平,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率。结果I/R后CaNmRNA的表达水平上升,心肌细胞凋亡率增加。卡维地洛可降低I/R心肌CaNmRNA的表达水平及心肌细胞凋亡率,以60mg·kg~(-1)·d~(-1)组更为明显(均P<0.05)。结论预防性使用卡维地洛对大鼠I/R心肌具有明显的保护作用,使CaNmRNA表达及心肌细胞凋亡率均降低。     

膜修饰脂质体的制备及对心肌细胞的靶向作用

目的制备 3- {4 - [2- 羟基 (1- 甲基乙胺基 )丙氧基 ]辛基 }丙酸十六醇酯 (PAC)膜修饰脂质体 ,并对其体外心肌细胞靶向性进行研究。方法合成 β1 受体配体亲脂性化合物 (PAC)并制备PAC膜修饰的脂质体 (PAC- L) ;将荧光标记的脂质体加入体外培养的心肌细胞中 ,分别在常氧及缺氧条件下共同培养一定时间后 ,用荧光分光光度计测定心肌细胞摄取荧光脂质体的量。结果体外心肌靶向性研究表明PAC- L与心肌细胞有较强的亲和力 ,在常氧状态下心肌细胞对PAC L的摄取较Plain -L高约 3. 2倍 ,而在缺氧状态下心肌细胞对PAC- L的摄取较Plain- L高达 5 1倍。结论可初步判断PAC膜修饰脂质体具有较强的缺血心肌靶向性     

丹参酮ⅡA磺酸钠对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大反应中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2的作用

目的从细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)激活角度研究丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡ Asulfonate,STS)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌肥大反应中的作用。方法培养新生大鼠心肌细胞,考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量、[3H]-亮氨酸参入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标;用免疫荧光标记法和Western blot测定磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达。结果(1)AngⅡ(1μmol·L-1)处理24h,心肌细胞[3H]-亮氨酸参入率、蛋白含量明显增加,STS能明显抑制AngⅡ介导心肌细胞[3H]-亮氨酸参入率、蛋白含量的增加;(2)AngⅡ刺激心肌细胞可见胞核内出现磷酸化ERK1/2荧光染色,丹参酮ⅡA可阻断AngⅡ引起的ERK1/2活化、入核过程;(3)用AngⅡ(1μmol·L-1)处理心肌细胞5min,磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达即开始增加,10min左右时最明显。以AngⅡ(1μmol·L-1)处理心肌细胞10min,磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达为标准,预先以STS(2,10,50μmol·L-1)处理心肌细胞30min,发现STS可明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达;(4)预先以不同浓度STS处理心肌细胞30min,发现STS对AngⅡ诱导的心肌细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达的抑制作用存在剂量依赖性。结论STS可以抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚,其机制与抑制磷酸化ERK1/2表达有关。     

Ca~(2+)/CaMKⅡ信号通路在肿瘤坏死因子-α诱导心肌肥大中的作用

目的研究钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法Lowry法测心肌细胞蛋白含量;计算机图像分析系统测心肌细胞体积;[3H]-亮氨酸参入法测心肌细胞蛋白合成;Till阳离子测定系统观察胞内[Ca2+]i瞬变;Westernblot法测定CaMKⅡδB的表达。结果①TNF-α(100μg.L-1)明显诱导心肌细胞蛋白含量、蛋白合成及体积的增加,CaMKⅡ特异性抑制剂KN93(0.2μmol.L-1)明显抑制TNF-α诱导的心肌肥大,但对正常心肌细胞生长无影响。②TNF-α引起心肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)瞬间变化幅度增高,KN93明显降低TNF-α诱导的上述改变。③TNF-α明显增强心肌细胞内CaMKⅡδB的表达。结论TNF-α可能通过引起心肌细胞[Ca2+]i升高,促进CaMKⅡδB表达诱导心肌细胞肥大的。     

番茄红素对心肌细胞缺氧损伤的作用机制

目的探讨番茄红素对心肌细胞沉默信息调节因子1（Sirtl）-自噬通路的作用。方法原代培养乳鼠心肌细胞予以无血清、无糖培养及缺氧干预,模拟心肌缺血,用番茄红素和Sirtl的抑制剂尼克酰胺干预。采用Westernblot法检测Sirtl、自噬相关基因6（Atg6）Beclinl及自噬相关基因8LC3蛋白的表达;RT—PCR技术检测心肌细胞Sirtl的mRNA表达。结果①在心肌缺氧中,番茄红素提高了细胞Sirtl蛋白和mRNA的表达水平;②番茄红素增加了心肌缺氧时自噬相关基因Beelinl和LC3蛋白的表达;③Sirtl的抑制剂尼克酰胺阻断了番茄红素对白噬蛋白的作用。结论番茄红素可能通过Sirtl激活自噬,从而减少心肌缺氧损伤。     

萘甲异喹对大鼠心肌细胞Ca~(2+)内流的影响

目的研究萘甲异喹（NI）对大鼠心肌细胞外Ca(2+)内流的影响。方法：应用钙离子荧光指示剂Fura－2检测。结果：NI（3，10μmol·L(-1)）和维拉帕米（0．3μmol·L(－1)）对静息状态下心肌细胞内Ca(2+)浓度无影响，但可浓度依赖地抑制高钾（60mmol·L(-1)）和异丙肾上腺素（lμmol·L(－1)）引起的心肌细胞内Ca(2+)浓度的升高，抑制率分别为29％±6％、49％±9％和26％±6％、40％±8％；NI对两种激动剂作用的抑制百分率无明显差异，而维拉帕米对高钾作用的抑制大于对异丙肾上腺素作用的抑制。结论：NI对心肌细胞电压依赖性钙通道以及和β受体有关的钙通道有阻断作用，NI可能是非选择性钙通道阻滞剂。     

羟丁酸钠和氯胺酮对心肌细胞毒性作用的对比研究

目的对比研究羟丁酸钠和氯胺酮对原代培养大鼠心肌细胞的毒性作用。方法将经原代培养成活4d后的大鼠心肌细胞分为5组 ,每组6孔。包括对照组 ,小剂量(HL ,3×10-3mol·L -1)与大剂量(HH ,3×10 -2mol·L -1)羟丁酸钠组和小剂量(KL ,1×10 -5mol·L -1)与大剂量(KH ,1×10-4 mol·L-1)氯胺酮组。各组均于实验开始后8h终止反应 ,评定心肌细胞搏动功能、观察细胞形态学改变、测定心肌细胞酶及电解质变化。结果与对照组相比 ,KL组心肌细胞搏动频率明显加快(P<0.05) ,而KH组减慢(P<0.05)。细胞形态学亦有相应变化。KH组LDH和AST释放量增加(P<0.05) ,ALP活性下降(P<0.05)。而HL、HH组的上述指标均无明显变化。各组间电解质变化未见显著差异。结论高浓度的氯胺酮具有直接的心肌抑制作用 ,而低浓度的氯胺酮却有正性变时性和变力性作用。无论低浓度或高浓度的羟丁酸钠 ,均未见心肌细胞毒性作用。     

3磷酸肌醇激酶活化抑制心肌细胞凋亡

心肌细胞凋亡在心肌病的发展中起重要作用。近来研究表明,在实验性心力衰竭中,胰岛素生长因子1(IGF-1)可抑制心肌细胞凋亡,并改善心肌功能。本文目的在于探讨3磷酸肌醇激酶(PI3)在IGF-1抗心肌细胞凋亡的作用,以及PI3激酶活化能否抑制心肌细胞凋亡。作者使用药物dexerubicin处理及撤退血浆诱导培养心肌细胞发生凋亡后,心肌细胞PI3激酶活化,引起AKt基因丝氨酸磷酸化,同时IGF-1受体发生磷酸化,而IRS1/L和P44/42丝裂原活化蛋白激酶却     

门冬氨酸钾镁拮抗阿霉素性心肌损伤的实验观察

<正> 阿霉素的主要副作用表现为对心肌的损伤效应。门冬氨酸钾镁通过门冬氨酸的载体作用.使细胞内钾镁离子浓度明显增加。国外学者曾报道镁可使心肌组织免受药物的损伤。为此.我们分别采用体外心肌细胞培养和在体动物模型.观察门冬氨酸钾镁对阿霉素性心肌损伤的影响。以2～3 d龄Wistar大鼠的心肌细胞为实验材料.取培养3 d的心肌细胞19瓶.随机分成阿霉素组(n=10)和门冬氨酸钾镁加阿霉素组(n=9)(门冬氨酸钾镁系上海海普药厂产品.含钾10g·L~(-1).镁4g·     

腺苷对肿瘤坏死因子-α诱导乳鼠心肌细胞肥大及核因子-κB的影响

目的探讨腺苷对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac-tor,TNF-α)诱导心肌细胞肥大及核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法以原代培养乳鼠心肌细胞为模型,应用TNF-α100μg.L-1诱导心肌细胞肥大,观察不同浓度腺苷对心肌肥大的影响。用考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量;RT-PCR检测心肌细胞心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)mRNA的表达;Western blot法检测心肌细胞p65和IκBα的蛋白含量;ELISA法检测细胞外液白介素-1β(IL-1β)的含量。结果腺苷能够有效抑制TNF-α诱导的心肌肥大,表现为蛋白含量减少,ANPmRNA表达降低,并且能抑制TNF-α诱导的NF-κB活化,表现为细胞内p65蛋白表达减少,IκBα蛋白表达增加和细胞外液IL-1β表达降低。结论腺苷对TNF-α诱导的心肌肥大有保护作用,可能与腺苷抑制心肌细胞NF-κB活化有关。     

萝卜硫素对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用及色氨酸 -犬尿氨酸通路的影响

目的探究萝卜硫素( SFN)对心肌缺血再灌注( I/R)损伤大鼠色氨酸( TRP)-犬尿氨酸( KYN)信号通路及心肌损伤的影响。方法研究于 2019年 7月至 2020年 6月进行，将 SD雄性大鼠随机分为假手术组( Control)、模型组( I/R)、 SFN低( I/R+L SFN)、高( I/R+H SFN)剂量组。术后 24 h，ELISA检测各组大鼠血清中炎性因子白细胞介素( IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)含量； HE染色观察各组大鼠心肌组织病理变化； TUNEL检测各组大鼠缺血心肌细胞凋亡情况； HPLC检测各组大鼠心肌组织中 TRP、KYN浓度；蛋白质印迹法( Western blotting)检测各组大鼠心肌组织 B细胞淋巴瘤 -2相关 X蛋白( Bax)、 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、活化胱天蛋白酶 3(cleaved -capase3)、吲哚胺 2，3-双加氧酶( IDO)蛋白表达情况。结果与 Control组相比， I/R大鼠心肌细胞破碎、坏死，细胞排列不规则，心肌纤维断裂，伴有炎性细胞浸润，血清中炎性因子 IL-1β、IL-6、TNF-α含量、心肌细胞凋亡指数［( 32.85±3.13)比( 1.07±0.08)］、心肌组织 TRP［( 783.75±30.32)pmol/L比( 402.23±23.55)pmol/L］、 KYN浓度［(567.54±28.18)pmol/L比( 215.31±20.03)pmol/L］、 KYN/TRP比值、 cleaved-capase3、Bax、IDO蛋白水平显著升高( P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05)；与 I/R相比， I/R+L SFN、I/R+H SFN剂量组心肌细胞上述病理症状明显减轻，大鼠血清中炎性因子 IL-1β、IL-6、TNF-α含量、心肌细胞凋亡指数、心肌组织 TRP、KYN浓度、 KYN/TRP比值、 Bax、cleaved -capase3、IDO蛋白水平依次降低(P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著升高( P<0.05)。结论 SFN可减少心肌细胞凋亡，缓解机体炎症反应，对心肌损伤有保护作用可能与 TRP-KYN信号通路有关。