肾纤维化信号通路的中医药研究进展

肾纤维化可表现为肾小球硬化、肾小管-间质纤维化、肾血管硬化及肾细胞外基质(ECM)堆积,与炎性细胞浸润,促炎因子分泌异常,以及肾脏固有细胞的损伤、活化,增殖,凋亡密切相关。肾纤维化涉及包括TGFβ1-Smad、MAPK、Wnt/β-catenin、PI3K/Akt/m TOR等多条信号通路,共同的效应分子又使各通路间有串话机制,目前尚无有效的药物控制。近10年来中医药在防治肾纤维化方面积累了丰富的经验,肾纤维化信号通路研究也成为筛选和研究中药作用机制和靶点手段。     

真武汤对肾间质纤维化大鼠ILK信号通路影响的实验研究

目的：探讨真武汤对肾间质纤维化的治疗作用及机制。方法：将大鼠随机分为模型组、假手术组、尿毒清对照组以及真武汤低、中、高剂量组;采用单侧输尿管结扎的方法建立大鼠肾间质纤维化模型,分别在术后2周、3周和4周前一天进行大鼠股动脉取血,分离血清,采用ELISA法检测Ang-Ⅱ和ILK蛋白表达情况。结果：真武汤能够降低单侧输尿管结扎模型大鼠血清中Ang-Ⅱ和ILK蛋白含量,以中剂量组合量最低,与尿毒清组的含量相当。结论：真武汤能够减轻肾脏病理损害,降低肾小管的损害,抗肾间质纤维化,其作用机制可能是通过抑制Ang-Ⅱ和ILK蛋白的表达,抑制了肾间质纤维化的进展。     

肾间质纤维化主要信号通路与治疗的研究进展

正肾间质纤维化是慢性肾脏疾病和慢性肾衰竭共同途径。临床试验研究表明,肾衰竭与肾间质纤维化存在直接相关性,慢性肾脏疾病特别是慢性肾衰的治疗效果依赖于肾间质纤维化的程度。在肾间质纤维化过程中存在各种信号通路,它们对各种肾脏损伤起到了促进和修复作用。随着研究的深入,关于肾间质纤维化的发病机制正逐渐走向     

生发片通过激活PKA信号通路促进小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成实验研究

目的:探讨生发片组方水提物对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑素合成的影响及作用机制。方法:采用MTT法筛选合适的药物浓度,L-多巴氧化法检测酪氨酸酶活性,氢氧化钠裂解法检测黑素生成,Western blotting检测MITF、TYR及p-CREB蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,在0.25~1g·L-1浓度范围内,生发片组方水提物可明显促进酪氨酸酶活性和黑素合成,上调MITF、TYR及p-CREB蛋白的表达。结论:生发片水提物可能通过PKA信号通路促进黑素的合成。     

肾衰合剂治疗慢性肾衰临床观察

目的观察肾衰合剂治疗慢性肾衰的疗效.方法对66例慢性肾衰患者随机分为治疗组36例和对照组30例,分别给予肾衰合剂及普通治疗.结果治疗组比对照组总有效率(P＜0.01)、内生肌酐清除率(P＜0.01)均明显提高;血清尿素氮(P＜0.01)、血肌酐(P＜0.01)均明显下降.结论肾衰合剂疗效理想,应用方便.     

三七总皂甙通过Smads 信号通路减缓慢性肾衰竭大鼠肾间质纤维化进程的作用研究

目的探讨三七总皂甙（panax notoginseng saponins,PNS）通过Smads 信号通路减缓慢性肾衰竭（chronic renal failure,CRF）大鼠肾间质纤维化进程的作用。方法60 只大鼠随机留取10 只设为假手术组,其余50 只 采用5/6 肾切除术复制CRF 模型,将建模成功的44 只大鼠随机分为慢性肾衰竭组、尿毒清组、三七总皂甙低 剂量组（LPNS 组）、三七总皂甙高剂量组（HPNS 组）,每组11 只。尿毒清组灌胃2.2 g·kg-1 的尿毒清溶液,三 七总皂甙低剂量组和三七总皂甙高剂量组灌胃25、100 mg·kg-1 的三七总皂甙溶液,假手术组和慢性肾衰竭组 灌胃等量生理盐水溶液,连续4 周。干预结束后,检测各组肾功能指标：血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24 h 尿蛋白,HE 和Masson 染色观察残余肾组织病理学改变及肾组织纤维化面积占比,RT-qPCR 和Western Blot 法检测残余肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad2/3、Smad6 mRNA 表达量及TGF-β1、Smad2/3、 p-Smad2/3、Smad6 蛋白表达量。结果与慢性肾衰竭组比较,尿毒清组、三七总皂甙低剂量组、三七总皂甙高剂 量组血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白水平均降低,三七总皂甙高剂量组低于三七总皂甙低剂量组和尿毒清组（均 P＜0.05）。HE 染色显示,慢性肾衰竭组可见肾小球、肾小管明显病变,肾间质纤维化增生,大量炎性细胞浸 润;尿毒清组、三七总皂甙低剂量组、三七总皂甙高剂量组上述病变减轻,其中三七总皂甙高剂量组病变最 轻。与慢性肾衰竭组比较,尿毒清组、三七总皂甙低剂量组、三七总皂甙高剂量组肾组织纤维化面积占比、 TGF-β1 mRNA 相对表达量及TGF-β1、p-Smad2/3 蛋白相对表达量均降低,三七总皂甙高剂量组低于三七总 皂甙低剂量组和尿毒清组（均P＜0.05）。与慢性肾衰竭组比较,尿毒清组、三七总皂甙低剂量组、三七总皂甙 高剂量组Smad6 mRNA 和蛋白相对表达量升高,三七总皂甙高剂量组高于三七总皂甙低剂量组和尿毒清组（均 P＜0.05）。结论三七总皂甙可有效减缓慢性肾衰竭大鼠肾间质纤维化进程,可能通过抑制Smad2/3 磷酸化水 平,激活Smad6 发挥调控作用。     

苦参碱抑制大鼠肾间质纤维化的实验研究

探讨苦参碱对梗阻性大鼠肾间质纤维化的影响。方法 :采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为 5组 :假手术组、模型组、苦参碱 5 0mg·kg 1·d 1治疗组、苦参碱10 0mg·kg 1·d 1治疗组及苯那普利治疗组。术后第 10天处死各组大鼠 ,经免疫组化法、western蛋白印迹分析法检测各组转化生长因子 β1(TGF β1)、结缔组织生长因子 (CTGF)的表达部位及蛋白表达水平。用免疫组化法检测各组α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)、增殖细胞核抗原 (PCNA)、Ⅰ型胶原 (ColⅠ )的表达。行HE和Masson染色 ,观察肾脏病理学变化 ,通过Masson染色评定各组肾小管间质胶原面积比。经透射电镜观察肾小管上皮细胞的超微结构的变化。结果 :术后 10天 ,病变肾组织中有大量炎性细胞的浸润、肾小管扩张、坏死、肾间质面积增宽、间质纤维化。透射电镜下病变肾小管上皮细胞内线粒体扩张、空泡变性 ,细胞间胶原纤维束状表达。模型组TGF Β1、CTGF、α SMA、PC NA、ColⅠ的表达、肾小管间质胶原面积比明显高于假手术组 (P <0 0 1) ,而苦参碱 5 0mg·kg 1·d 1治疗组、苦参碱 10 0mg·kg 1·d 1治疗组及苯那普利治疗组明显低于模型组 (P <0 0 1) ,对于上述指标苦参碱 10 0mg·kg 1·d 1治疗组及苯那普利治疗组亦低于苦参     

mTOR信号通路与肾纤维化及中医药对该通路影响研究进展

肾功能逐渐丧失及细胞外基质沉积导致的广泛肾纤维化是慢性肾脏病的主要生理病理特征。其发病机制十分复杂,涉及众多生长因子、细胞因子、炎症因子与信号通路的相互作用。中医药具有多组分、多途径、多靶点治疗的特点,并且许多研究已经表明中医药对PI3K/Akt/m TOR信号通路具有抑制作用。因此,本文就m TOR信号通路与肾纤维化及中医药对该通路影响的研究概况进行综述,旨在了解中医药抗肾纤维化的分子机制,为中医药抗肾纤维化提供新的理论基础。     

抗纤灵冲剂对慢性肾衰实验兔肾纤维化的影响

本研究通过慢性肾衰动物模型研究抗纤灵冲剂的疗效及其机理,现报道如下。材料和方法1 材料抗纤灵冲剂(丹参30g 桃仁15g 当归15g 制大黄15g 牛膝15g等组成),由本院制剂室制备,每克含生药量为9g。雄性新西兰大耳白兔20只,6月龄,体重(2.0±0.1)kg,由上海中医药大学实验动物中心提供。层粘连蛋白(LN,用ELISA 法)试剂盒由第二军医大学长征医院全军临床免疫中心提供。纤维联结蛋白(FN,用琼脂扩散法)抗血清由上海生物制品研究所提供。Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ,用 RIA 法)试剂盒由重庆肿瘤研究所提供。Ⅳ型胶原(C-Ⅳ,用 RIA 法)试剂盒由上海海研     

排毒合剂对慢性肾衰竭纤维化指标和肾功能影响的临床研究

目的:观察排毒合剂对慢性肾衰竭(CRF)患者血清纤维化指标、肾功能的作用。方法:将50例惠者随机分为2组,同时给予基础治疗,治疗组30例配合排毒合剂(组成:生地黄、山茱萸、熟大黄、黄芪、山药、牡丹皮、茯苓皮、桃仁、白术、丹参、当归、鱼腥草、车前子)治疗;对照组20例配合药用炭片治疗。观察肾功能指标血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和纤维化指标血清人层粘连蛋白(LN)、血清Ⅳ型胶原(CL-Ⅳ)的影响。结果:显效率及总有效率2组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。2组治疗后肾功能指标变化比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。2组治疗后纤维化指标比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。治疗组均明显优于对照组。结论:排毒合剂可明显改善CRF的临床症状及实验指标,其作用可能与该药能抑制肾纤维化有关。     

抗纤灵抗大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的探讨中药复方抗纤灵治疗大鼠单侧输尿管结扎（unilateral ureteral obstruction,UUO）所致肾纤维化的作用及机理。方法雄性SD大鼠18只随机分为3组,每组6只。用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,抗纤灵治疗2周后检测血肌酐、尿素氮含量等指标;HE染色和六胺银染色观察肾组织病变;采用RT-PCR和Western印迹分别检测转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）mRNA和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、TGF-β1受体（TβRⅠ及TβRⅡ）及肝细胞生长因子受体（C-Met）蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血肌酐、尿素氮均有明显上升;肾小球毛细血管基底膜明显增厚;肾组织TGF-β1 mRNA及α-SMA、TβRI、TβRⅡ、C-Met蛋白袁达显著上调,而HGF mRNA水平显著下调。中药干预后,血尿素氮含量显著降低,肾小球和肾小管基底膜仅见轻度增厚;肾组织α-SMA、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白表达明显减少,HGF mRNA水平明显上调。结论抗纤灵可抑制肾组织α-SMA、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白表达并增加肾纤维化保护性因子HGF mRNA的表达,从而改善梗阻性大鼠的肾间质纤维化及肾功能。     

健脾补肾、和解泄浊法抑制肾间质纤维化的实验研究

目的 观察补肾排毒合剂对单侧输尿管梗阻（UUO）后大鼠肾间质α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）表达的影响及对肾间质纤维化的保护作用。方法 采用UUO诱导肾间质纤维化的动物模型，将48只Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（UUO）和补肾排毒合剂治疗组（REM），每组分别于造模后3、10、20、30d各处死4只，取左肾组织行HE染色，动态观察肾脏病理学变化，评定各组肾小管间质损害程度，以免疫组化方法测定肾组织中α—SMA、Col Ⅳ。结果 与UUO组比较，REM组大鼠肾间质病变程度明显减轻，α-SMA、Col Ⅳ在肾间质中的表达也有明显降低。结论 补肾排毒合剂可通过降低α—SMA、Col Ⅳ的表达，减少肾间质细胞外基质合成，延缓肾间质纤维化的进展。     

健脾泄浊化瘀合剂治疗早中期慢性肾衰临床观察

为观察自拟健脾泄浊化瘀合剂对早中期慢性肾衰的治疗作用。将50例患者同分为中药治疗组（25例）和西药对照组（25例）。结果治疗组血清肌酐、尿素氮、甘油三酯、磷均较治疗前明显下降（均为P＜0．05）;而对照组血清肌酐、尿素氮、甘油三酯、磷较治疗前无明显变化（P＞0．05）。治疗组总有效率76％,对照组总有效率24％,治疗组总有效率明显优于对照组（P＜0．05）。表明本文确能有效地延缓早中期慢性一肾功能衰竭的进展速度。     

健脾泄浊化瘀合剂治疗早中期慢性肾衰临床观察

为观察自拟健脾泄浊化瘀合剂对早中期慢性肾衰的治疗作用,将50例患者随机分为中药治疗组(25例)和西药对照组(25例).结果治疗组血清肌酐、尿素氮、甘油三酯、磷均较治疗前明显下降(均为P＜0.05);而对照组血清肌酐、尿素氮、甘油三酯、磷较治疗前无明显变化(P＞0.05).治疗组总有效率76%,对照组总有效率24%,治疗组总有效率明显优于对照组(P＜0.05).表明本方确能有效地延缓早中期慢性肾功能衰竭的进展速度.     

基于16S rDNA测序探讨大黄䗪虫丸调控肠道菌群抑制大鼠肾纤维化的作用机制

目的 从肠道菌群角度研究大黄?虫丸（DHZCW）对腺嘌呤诱导的肾纤维化大鼠的作用及机制。方法 将36只SD大鼠随机分为6组：空白组、模型组、大黄?虫丸高、中、低剂量组（0.168、0.084、0.042 g·kg^-1）、吡非尼酮组（200 mg·kg^-1）,每组6只。除空白组外,其余各组用腺嘌呤混悬液250 mg·kg^-1灌胃造模28 d,再进行药物干预4周,在代谢笼中收集大鼠尿液,测定肾功能指标尿素氮（BUN）、尿素（Urea）、尿肌酐（Crea）、胱抑素C（Cys C）、24小时尿蛋白（24 h TP）。收集肾脏样本并对其苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色,观察各组大鼠肾组织病理变化,采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测关键效应蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、Ⅲ型胶原（ColⅢ）蛋白的表达量。收集大鼠粪便运用高通量测序16S rDNA技术对大鼠菌群进行物种差异性分析。结果 与空白组比较,模型组BUN、Urea、Crea、Cys C、24 h TP含量显著升高（P<0.01）,与模型组比较,DHZCW高、中、低剂量组和吡非尼酮组BUN、Urea、Crea、Cys C、24 h TP均显著降低（P<0.01）。与空白组比较,模型组肾组织中出现明显纤维化改变,α-SMA、ColⅠ、ColⅢ蛋白含量也显著升高（P<0.01）;与模型组比较,DHZCW高剂量组和吡非尼酮组组织结构基本正常,未见明显病理损伤改变,DHZCW中、低剂量组可见纤维化改变,低剂量组较为明显;DHZCW高、中、低剂量组和吡非尼酮组中的α-SMA、ColⅠ、ColⅢ蛋白含量显著降低（P<0.01）,说明DHZCW能有效减少胶原异常沉积而抑制肾纤维化。肠道菌群来看,门水平上,与空白组比较,模型组中厚壁菌门（Firmicutes）的丰度明显增加,拟杆菌门（Bacteroidetes）丰度减少,二者比例明显失调。科水平上,模型组降低了毛螺菌科（Lachnospiraceae）、前蹄菌科（Prevotellaceae）、未分类拟杆菌科（Bacteroidota_unclassified）,增加了瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）、乳杆菌科（Lactobacillaceae）、颤螺旋菌科（Oscillospiraceae）菌群的丰度。属水平上,模型组的未分类厚壁菌（Firmicutes_unclassified）、未分类拟杆菌属（Bacteroidota_unclassified）、普雷沃氏菌属_UCG-001（Prevotellaceae_UCG-001）等菌群丰度显著降低,UCG-005、梭状芽孢杆菌（Clostridia_UCG-014_unclassified）等菌群丰度增加。与模型组比较,DHZCW能降低潜在致病菌而升高有益菌丰度,调节肠道菌群。结论 DHZCW能有效改善肾功能和抑制肾纤维化,其作用机制可能与调节肠道菌群有关。     

杜仲补腰合剂改善慢性肾功能不全的实验研究

目的 :观察杜仲补腰合剂对 5 / 6肾切除所致大鼠慢性肾功能衰竭模型肾功能的改善作用。方法 :将 70只雄性大鼠随机分为 7组 ,除空白组 1 0只外 ,余 60只进行造模 ,杜仲补腰合剂保护组( 1 0只 )在术后第 2天立即给药 ,余造模 1周后 ,再随机分为模型对照组 ( 1 0只 )、洛汀新组 ( 1 0只 )、杜仲补腰合剂大、中、小剂量组 (每组各 1 0只 )分别给药 8周后进行肾功能及血脂测定。结果 :杜仲补腰合剂能明显改善慢性肾衰大鼠的一般状况 ,降低血清肌酐、尿素氮水平 ,疗效与洛丁新相似 ,与模型对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1或 0 0 5 ) ;血脂方面 ,杜仲补腰合剂各剂量组及洛丁新组与模型组比较均无明显差异 ,而杜仲补腰合剂保护组与模型组比较 ,TG、TC差异有显著性(P <0 0 5 ) ,HDL -C差异有非常显著性 (P <0 0 1 )。结论 :根据古代名方“杜仲猪腰方”研制的杜仲补腰合剂具有延缓慢性肾衰进展的作用 ,并能预防性改善肾衰大鼠的血脂代谢紊乱     

盐酸青藤碱抗肾间质纤维化的实验研究

目的:探讨盐酸青藤碱在治疗肾间质性纤维化中的作用及其发生机制,为临床如何阻止、防止肾小球和肾小管间质纤维硬化提供借鉴。方法:采用小鼠单侧输尿管结扎法诱导肾间质纤维化的动物模型,用盐酸青藤碱治疗,并设对照组、假手术组(小鼠每日按10m l/kg体重用生理盐水灌胃,直至治疗结束)、治疗组(选用正清风痛宁缓释片按每日30mg/kg体重给小鼠灌胃,连续3周,),检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血清层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)的含量,免疫组化法测肾脏组织转化因子β1(TNF-β1)的表达并进行肾脏病理学的观察。结果:血BUN、SCr进行3组比较,对照组BUN、SCr指标明显高于治疗组(P<0.01),略高于假手术组,但统计学比较差异无显著性意义(P>0.05);治疗组TNF-β1及FN指标均明显低于对照组和假手术组(P<0.01);LN亦较对照组和假手术组低(P<0.05)。对照组、假手术组肾小管结构消失,代之以弥漫性纤维组织增生及单核细胞浸润;治疗组虽肾小管萎缩、扩张,但病变较轻,绝大多数肾小管结构尚存,炎性细胞浸润也多呈局灶样分布。结论:盐酸青藤碱能降低BUN、SCr、FN、LN的含量以及TNF-β1表达,抑制间质纤维化,减轻肾损害,从而延缓肾脏疾病的发展。     

防己黄芪汤防治肾间质纤维化的实验研究

目的：了解防己黄芪汤对肾间质纤维化的作用，以及去除甘草后对其作用的影响。方法：采用大鼠单侧输尿管结扎（UUO）模型，用防己黄芪汤以及防己黄芪去甘草汤干预，观察肾功能水平、肾病理以及肾α-平滑肌蛋白（α-SMA）和纤维连接蛋白（FN）蛋白和基因表达。结果：防己黄芪汤可降低UUO大鼠血尿素氮，使血白蛋白升高；减轻肾小管间质纤维化程度；同时，显著降低肾小管和肾间质仪一SMA、FN的蛋白和基因表达。去甘草汤组与防己黄芪汤一样，改善了肾间质纤维化的多项指标，而且从数据来看，有进一步下降血尿素氮、以及FN表达的趋势。结论：防己黄芪汤具有抑制肾纤维化、改善肾功能的作用。组方去除甘草后没有影响这一作用，甚至有可能更好。