滋阴与温阳法对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠病程及其血浆细胞因子的影响

目的探讨左归丸、右归丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠病程及其血浆白细胞介素(IL-1α、IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法用髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫Lewis大鼠诱导EAE模型,随机分为模型组、激素组、左归丸组、右归丸组及正常对照组,研究各组间发病率、死亡率、潜伏期、病程、体重及神经功能评分的差异,并分别在急性期(免疫后第15天)和缓解期(免疫后第27天)采集血样,检测血浆细胞因子水平。结果右归丸组发病率低于其他各处理组(P<0.05);急性期和缓解期,右归丸组体重减轻程度最轻,体重均高于激素组和左归丸组(P<0.05);急性期神经功能评分左归丸组和右归丸组均低于模型组和激素组(P<0.05);急性期左归丸组血浆IL-4水平高于正常对照组和激素组,IFN-γ和TNF-α水平高于正常对照组、模型组和激素组(P<0.05);缓解期右归丸组血浆IL-4和TNF-α水平高于正常对照组和模型组,IFN-γ水平高于正常对照组(P<0.05);缓解期模型组血浆IL-1α水平高于正常对照组(P<0.05);模型组缓解期血浆IL-1α水平高于急性期(P<0.05);左归丸组缓解期血浆IL-4、IFN-γ、TNF-α水平低于急性期(P<0.05)。结论右归丸可降低EAE发病率;左归丸和右归丸均能减轻EAE疾病严重程度,治疗效果优于醋酸泼尼松;右归丸具有减轻EAE大鼠体重下降的作用;IL-1α在EAE疾病过程中发挥重要作用,醋酸泼尼松、左归丸和右归丸可下调EAE缓解期血浆IL-1α水平;左归丸可上调EAE急性期血浆IFN-γ、TNF-α、IL-4水平;右归丸可上调EAE缓解期血浆IFN-γ、TNF-α、IL-4水平。     

补肾对脑脊髓炎大鼠生长相关蛋白-43及微管相关蛋白-2的影响

目的观察补肾对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠生长相关蛋白-43(GAP-3)及微管相关蛋白-2(MAP-2)的影响,探讨其对轴突损伤的保护作用。方法应用髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂按1∶1(体积比)制成抗原并注射于大鼠双后足皮下,建立大鼠EAE模型。以醋酸泼尼松作对照,用苏木素-伊红染色(HE)观察各组大鼠造模后14 d、28 d脑和脊髓的组织病理变化,用轴突染色及免疫组织化学染色法观察脑和脊髓轴突损伤及再生情况。结果EAE模型组大鼠脑和脊髓组织中可见大量炎性细胞浸润,轴突存在明显损伤。脑和脊髓GAP-43及MAP-2表达显著降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01),分别用补肾方剂(左归丸和右归丸)干预后,大鼠炎症反应及轴突损伤较EAE模型组明显减轻,GAP-43及MAP-2表达明显高于模型组(P<0.05或0.01),以左归丸更为明显。结论补肾方剂能够上调GAP-43及MAP-2的表达,具有促进和增强轴突再生的作用。     

左旋咪唑对实验性过敏性脑脊髓炎大鼠脊髓IL—1、IL—2及IL—6mRNA表达的影响

目的了解左旋咪唑(LMS)对实验性过敏性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内白细胞介素(IL)-1、IL-2及IL-6mRNA表达的影响,为探讨LMS性白质脑病的发病机制提供实验依据。方法用豚鼠全脊髓匀浆免疫wistar大鼠建立EAE模型,EAE+LMS组大鼠分别于免疫后0、24、48hipLMS10mg/kg;大鼠免疫后第16天处死,采用RT-PCR的方法检测大鼠脊髓内IL-1α、IL-1β、IL-2和IL-6mRNA表达的相对量。结果和正常对照组相比,EAE组大鼠脊髓内IL-1α(P＜0.05)、IL-1β(P＜0.05)、IL-2(P＜0.01)和IL-6(P＜0.05)mRNA的表达量均明显升高。EAE+LMS组大鼠脊髓内IL-1α、IL-1β、IL-2和IL-6mRNA的表达量和EAE组相比则分别升高131％(P＜0.05)、121％(P＜0.05)、95％(P＜0.05)和28％(P＞0.05)。结论LMS能明显促进EAE大鼠脊髓内IL-1α、IL-2β、IL-2mRNA的表达,提示该作用可能是LMS促发EAE的机制之一。     

2-BFI对EAE大鼠的脊髓TGF-β和IL-10免疫组化表达的影响

目的 探讨2-BFI对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓转化生长因子-β(TGF-β)和白介素-10(IL-10)表达的影响.方法 50只雌性SD大鼠根据随机数字表法随机分为5组:对照组、EAE组、低剂量2-BFI干预组(1.5mg/kg)、中剂量2-BFI干预组(3mg/kg)和高剂量2-BFI干预组(6mg/kg),每组10只,采用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)免疫诱导SD大鼠建立EAE模型,观察每组大鼠发病情况并进行临床症状评分,采用常规HE染色和LFB髓鞘染色观察中枢神经系统(CNS)的病理变化,免疫组化法检测TGF-β和IL-10表达.结果 与EAE组比较,大、中、小剂量2-BFI干预组大鼠EAE发生率下降,临床症状减轻,潜伏期延长,CNS内炎性细胞浸润减少,但仅中等剂量2-BFI在EAE临床症状和CNS内炎性细胞浸润方面差异有统计学意义(P＜0.05);与EAE组比较,中等剂量2-BFI干预组脊髓中TGF-β和IL-10表达明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 中等剂量2-BFI对EAE大鼠的神经保护作用最佳,其作用推测与上调TGF-β和IL-10的表达有关.     

雷公藤多甙对实验性自身免疫性脑脊髓炎核因子-κB和IL-2的影响

目的探讨雷公藤多甙(TWP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)Lewis大鼠核因子-κB(NF-κB P65)和IL-2的影响。方法雄性Lewis大鼠随机分为正常对照组(n=10)、TWP治疗组(n=10)及模型组(n=10)。用髓鞘蛋白(MBP)免疫雄性Lewis大鼠制作EAE模型。观察TWP对大鼠发病率、神经功能评分、发病时间和组织病理改变的影响,采用免疫组织化学法检测发病急性期脑组织NF-κB表达的情况,ELISA法检测血浆中IL-2的水平。结果与EAE模型组相比,TWP治疗组神经功能评分降低(3.36±0.64 vs 2.10±0.43,P<0.05),但发病率无明显差异,平均发病时间推迟[(10.13±0.76)d vs(12.22±0.81)d,P<0.05],脑和脊髓的病灶数目也减少(26.21±0.72 vs 12.41±0.56,P<0.05),血清中IL-2的含量减少[(62.56±8.53)pg/ml vs(41.46±6.56)pg/ml,P<0.05],脑组织NF-κB P65阳性细胞数减少(72.46±2.41 vs 32.56±1.56,P<0.05)。结论 TWP能有效干预Lewis大鼠EAE的发病,改善病理变化,其机制可能与下调NF-κB及IL-2表达有关。     

左归丸和右归丸对自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑组织中凋亡蛋白Fas、Bax表达的影响

目的：观察左、右归丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）大鼠脑组织中凋亡蛋白Fas、Bax表达的影响。方法：用髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein68-86,MBP68-86）免疫Lewis大鼠建立EAE模型。观察各组大鼠体重体温变化,饮食和饮水变化,神经功能评分,发病率、死亡率、潜伏期及病程变化。取脑和脊髓,HE染色后进行病理观察;用免疫组化法检测大鼠脑组织中Fas、Bax的表达情况。结果：左归丸组和右归丸组明显减轻病灶区域的炎性细胞浸润,对Fas、Bax的表达均有一定的抑制作用,与激素组类似。结论：左、右归丸均有防治小鼠EAE的作用,其作用机制可能与调节细胞凋亡蛋白Fas、Bax的表达有关。     

阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血清TNF-α和IL-10的影响

目的探讨阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠血清TNF-α和IL—10的影响。方法120只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、EAE模型组、泼尼松治疗组及阿托伐他汀治疗组,每组30只,每组再分为免疫后第7、14、21天亚组,每亚组10只。正常对照组大鼠不造模及用药。后三组大鼠于四肢足垫皮下注射新鲜豚鼠全脊髓匀浆＋完全弗氏佐剂制作EAE模型。自免疫后第1天开始泼尼松治疗组按3．9mg／（kg·d）给予泼尼松灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀10mg／（kg·d）灌胃,EAE模型组给予生理盐水灌胃。观察各组大鼠发病率及神经功能评分。各组大鼠于免疫后第7d、14d、21天处死,HE染色并于光镜下观察脊髓内病变情况,ELISA方法测定TNF—α和IL—10水平。结果与EAE模型组比较,阿托伐他汀治疗组及泼尼松治疗组大鼠的发病率均明显降低,神经功能评分、脊髓内病灶数减少,差异有统计学意义（P〈0．05）。阿托伐他汀治疗组及泼尼松治疗组免疫后第14、21天TNF-α表达水平较EAE模型组降低,免疫后第7、14、21天时IL—10表达水平较EAE模型组升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。阿托伐他汀治疗组与泼尼松治疗组在大鼠发病率、神经功能评分、病灶数、TNF-α和IL-10表达水平方面差异无统计学意义（P〉0．05）。结论阿托伐他汀能改善EAE大鼠的临床症状,抑制脊髓内炎症反应,其机制可能与降低血清TNF-α和升高IL-10水平有关。     

加味温胆汤对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠病程及其血清细胞因子的影响

目的：探讨加味温胆汤对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠病程及血清干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-10（IL-10）的影响。方法：以豚鼠全脊髓匀浆（GPSCH）为抗原免疫W istar大鼠建立EAE的动物模型,随机分为模型组、醋酸泼尼松组（激素组）、加味温胆汤组（中药组）及正常对照组,研究各组间发病情况,并分别在发病早期（免疫后第14 d）、高峰期（免疫后21 d）和缓解期或二次复发期（免疫后第28 d）采集血样,检测IFN-γ、IL-10水平。结果：中药组与模型组比较二次复发动物只数明显减少,中药组和激素组的神经功能评分低于模型组。整个病程中激素组和中药组与正常组比较,IFN-γ水平升高,激素组和中药组与模型组比较,IFN-γ水平显著降低。免疫后21 d和28 d时激素组和中药组的IL-10与正常组比较升高;免疫后28 d时中药组的IL-10含量较模型组升高。中药组免疫后28 d比14 d时的IL-10含量高。结论：加味温胆汤能降低炎性细胞因子IFN-γ的浓度,增加免疫抑制细胞因子IL-10的浓度,调节免疫应答,抑制炎症的进展,改善临床症状,并减少复发。     

不同剂量阿托伐他汀钙对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓内NF-κB表达及血清炎性因子的影响

目的探讨不同剂量阿托伐他汀钙对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内NF-κB表达及血清炎性因子的影响。方法 82只Wistar大鼠随机抽取10只为健康对照组,余72只以50%豚鼠全脊髓匀浆诱发建立EAE模型,而后随机分为EAE模型组、大剂量阿托伐他汀组(大剂量组)、小剂量阿托伐他汀组(小剂量组)各24只,采用量化评分法,比较造模后14d、21 d不同剂量阿托伐他汀钙对EAE大鼠血清白介素-2(IL-2)、同型半胱氨酸(Hcy)及脊髓内核转录因子-κB(NF-κB)水平的影响,同时对其发病率及潜伏期进行比较。结果造模后高剂量组发病率及病死率明显低于低剂量组及EAE模型组,14 d及21 d时神经功能评分均低于低剂量组及EAE模型组(P<0.05),而低剂量组与EAE模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。造模后14 d及21 d,EAE模型组血清IL-2、Hcy水平及脊髓NF-kB阳性表达水平均较健康对照组升高(P<0.05),高剂量组低于低剂量组与EAE模型组(P<0.05),而低剂量组与EAE模型组差异无统计学意义(P>0.05)。21 d时,高剂量组、低剂量组、EAE模型组上述各项指标均较14 d时下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高剂量阿托伐他汀钙能降低大鼠EAE的发病率及病情严重程度,可能与其抗炎及免疫调节机制有关。     

硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠细胞间粘附分子-1和肿瘤坏死因子-a表达的影响

目的:探讨硫辛酸(lipoic acid LA)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomy-elitis,EAE)大鼠的免疫抑制作用及其机制。方法:制备EAE动物模型,随机分为EAE组、LA治疗组和佐剂组。LA治疗组从免疫后(post-inoculation,免疫后)0d~5d每日腹腔内注射LA(100mg/kg)一次。在免疫后6d、8d、10d、12d、14d、16d处死动物,取脑和脊髓用免疫组化技术检测不同部位细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-a TNF-a)的表达。结果:LA治疗组临床症状评分(0.66±0.89)较EAE组(2.35±1.78)降低(P<0.05);LA治疗组体重减轻(7.63±3.47)较EAE组(12.60±3.53)减少(P<0.05);LA治疗组发病率(26%)较EAE组(67%)降低(P<0.05)。在免疫后10d~16d,LA治疗组ICAM-1的表达较EAE组降低(P<0.05),LA治疗组TNF-a的表达较EAE组降低(P<0.05)。结论:LA能够有效抑制EAE,其抑制机制与LA下调ICAM-1、TNF-a的表达有关。     

咖啡因对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的干预作用及机制探讨

目的探讨咖啡因对大鼠实验性自身性免疫性脑脊髓炎(EAE)的干预作用及其药理作用机制.方法将40只雌性 Wistar 大鼠随机分为空白对照组、EAE 模型组、咖啡因10mg/kg 组、咖啡因30mg/kg 组,后3组制作 EAE 模型,于足垫皮下注射豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)―完全弗氏佐剂(CFA)乳剂,激发自身免疫反应,咖啡因10、30mg/kg 组于免疫前7d 开始和免疫后一直饮用咖啡因.观察并评估动物的运动神经功能和中枢神经组织病理变化,采用 RT-PCR 法检测发病高峰期颈髓 TNF-α、TGF-β1和腺苷A1、A2A 受体 mRNA 的表达水平.结果与 EAE 模型组相比,咖啡因10、30mg/kg 组发病率虽降低,但差异无统计学意义(P >0.05),神经症状评分明显减低(P<0.05),炎症细胞浸润和髓鞘脱失程度明显减轻,TNF-α的 mRNA 表达水平明显下降(P<0.05), TGF-β1的 mRNA 表达水平明显升高(P<0.05或0.01).结论低剂量的咖啡因(10、30mg/kg)能减轻 EAE 的病情和中枢神经组织的炎症病理改变,其神经保护作用很可能是通过上调 A1受体水平从而调控中枢炎症反应来实现的.     

针刺对急性期脑出血大鼠脑组织IL-10、TGF-β蛋白表达的影响

目的探讨针刺百会穴透曲鬓穴对急性期脑出血大鼠脑组织IL-10、TGF-β蛋白表达的影响。方法将54只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺+模型组(简称针刺组),每组按1 d、3 d、7 d分为3个亚组,每组6只。自体血注入法建立脑出血大鼠模型,采用百会穴透曲鬓穴针刺干预,在1 d、3 d、7 d 3个时间点采用Longa评分法对脑出血后大鼠神经功能进行评估;免疫组化法检测血肿组织IL-10、TGF-β的表达。结果神经行为学:模型组大鼠出现不同程度的神经功能缺损症状。各时间点针刺组大鼠与同时间点模型组大鼠相比神经功能缺损明显减轻(P 0. 05)。免疫组化结果:在各时间点假手术组大鼠脑组织可见少量IL-10、TGF-β蛋白表达;模型组在各时间点IL-10、TGF-β蛋白表达均高于假手术组(P 0. 05);针刺组在3 d、7 d IL-10、TGF-β蛋白表达与模型组比较明显下调(P 0. 05)。结论针刺百会穴透曲鬓穴可以抑制IL-10、TGF-β蛋白的表达,降低血肿组织中炎症因子IL-10、TGF-β的含量,减轻脑出血后炎性损伤,改善大鼠神经功能缺损。     

饱和氢气生理盐水对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的干预作用及可能机制

目的探讨氢气对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的干预作用及可能机制。方法采用豚鼠脊髓匀浆和完全弗氏佐剂（CFA）混合的油包水乳剂诱导SD大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型;在EAE模型诱导后的第5～17天腹腔注射饱和氢气生理盐水（6ml/kg）,对照组大鼠腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液;观察并记录各组大鼠体重,行为学评分;在模型诱导后的第20天处死动物并作脑、脊髓HE染色,CD3免疫组化染色,光学显微镜下观察炎症情况,并用酶联免疫吸附法检测脊髓IL-17、INF-γ、IL-10表达,在模型诱导后第7、12、17天检测各组动物血清SOD水平。结果（1）H- EAE组大鼠诱导后体重下降度及神经行为缺损评分严重度均较EAE组轻;（2）H- EAE组大鼠中枢炎症细胞浸润较EAE组少;（3）H- EAE大鼠脊髓IL-17、INF-γ表达水平较EAE组低,但IL-10无明显差异;在EAE模型诱导后的第12天H- EAE大鼠血清SOD水平较EAE组高,在第7、17天则无明显差异。结论饱和氢气生理盐水可以减轻SD大鼠EAE的中枢炎症,可能与氢气在EAE炎症暴发过程中的抗氧化作用有关,即与提高SOD水平及抑制IL-17、INF-γ在炎症部位的释放有关。     

RhoA和Rock-Ⅱ在Lewis大鼠EAE模型中的表达

目的研究RhoA和Rock-Ⅱ在Lewis大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中的表达,探索其在EAE模型中的作用。方法把36只Lewis大鼠随机分为两组:A组(空白对照组),B组(EAE模型组)。以豚鼠全脊髓为抗原混合福氏完全佐剂(CFA),诱导Lewis大鼠EAE模型,观察实验动物神经功能损害的情况;采用免疫组织化学染色法观察实验动物各组脑、脊髓组织中RhoA、Rock-Ⅱ的表达。结果成功建立Lewis大鼠EAE模型,RhoA和Rock-Ⅱ在EAE模型组的表达较空白对照组明显增加,差异有统计学意义(P0.01)。结论 RhoA和Rock-Ⅱ在EAE模型中过量表达,可能在EAE模型的发病过程中起关键作用。     

甲泼尼龙联合高压氧治疗对大鼠脊髓损伤的保护作用

目的探讨甲泼尼龙联合高压氧治疗对大鼠脊髓损伤的保护作用,以及对自噬基因(Beclin-1)和TGF-β蛋白表达的调节作用。方法将实验动物随机分入假手术组、模型组、甲泼尼龙组和甲泼尼龙联合高压氧治疗组(联合治疗组),每组15只。采用Allen法建立大鼠脊髓损伤模型。模型组大鼠予腹腔内注射0.9%氯化钠溶液,甲泼尼龙组大鼠予腹腔内注射甲泼尼龙30 mg/kg治疗,联合治疗组大鼠予腹腔内注射甲泼尼龙30mg/kg和0.2 MPa氧压力的高压氧治疗;3组大鼠均持续处理7d后结束实验,解剖大鼠取材,进行病理切片分析。检测大鼠血清中IL-1和IL-6水平,采用Western印迹法测定大鼠脊髓组织Beclin-1和TGF-β蛋白表达量。结果组织病理学检查结果显示,假手术组大鼠脊髓结构完整,神经细胞生长正常;模型组大鼠脊髓组织灰白质界限不清楚,神经细胞凋亡、坏死;甲泼尼龙组和联合治疗组大鼠脊髓组织灰白质界限清晰,结构完整,神经细胞发生明显的空泡样变性,甲泼尼龙组大鼠脊髓组织病理损伤程度大于联合治疗组。模型组、甲泼尼龙组和联合治疗组大鼠血清IL-1和IL-6水平,以及大鼠脊髓组织中Beclin-1和TGF-β蛋白相对表达量均显著高于假手术组(P值均<0.05);甲泼尼龙组和联合治疗组大鼠血清IL-1和IL-6水平,以及大鼠脊髓组织中Beclin-1和TGF-β蛋白相对表达量均显著低于模型组(P值均<0.05);联合治疗组大鼠血清IL-1和IL-6水平,以及大鼠脊髓组织中Beclin-1和TGF-β蛋白相对表达量均显著低于甲泼尼龙组(P值均<0.05)。结论甲泼尼龙联合高压氧治疗对大鼠脊髓损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能是通过抑制脊髓损伤后Beclin-1和TGF-β蛋白表达来减轻脊髓损伤,从而抑制脊髓损伤瘢痕产生。     

Rho激酶抑制剂及CD8+T细胞在EAE模型的作用机制研究

目的 观察Rho激酶抑制剂法舒地尔对RhoA、Rock-Ⅱ以及CD8+T细胞在脑和脊髓组织中表达的影响,探索法舒地尔在实验性自身免疫性脑脊骨髓炎(EAE)模型中的作用机制.方法 把90只Lewis大鼠随机分为5组:A组(空白对照),B组(免疫后第13天),C组(免疫后第21天),D组(免疫后第35天)及E组(法舒地尔干预组).以豚鼠全脊髓为抗原混合福氏完全佐剂(CFA)诱导Lewis大鼠EAE模型,观察实验动物神经功能损害的情况;利用免疫组织化学染色法观察实验动物组脑、脊髓组织中RhoA、Rock-Ⅱ以及CD8+T细胞的表达.结果 成功建立Lewis大鼠EAE模型,A、B、C、D、E 5组中RhoA、Rock-Ⅱ以及CD8+T细胞在脑、脊髓组织中均有表达,在免疫后21 d达高峰,在免疫后及法舒地尔干预组的脑、脊髓组织中表达较空白对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);法舒地尔干预组RhoA、Rock-Ⅱ以及CD8+T细胞在脑、脊髓组织的表达较免疫后各个时间点有所减轻,差异有统计学意义(P<0.05);免疫后第13天组与免疫后35天组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 Rho激酶抑制剂可以抑制EAE的病情进展、减轻神经元及轴索损害,其机制可能是抑制了Rho激酶参与白细胞及巨噬细胞迁移、浸润、吞噬过程;抑制Rho信号转导通路对细胞骨架的调节作用,而起到促进轴突再生、保护神经元的作用.     

RHO激酶抑制剂及CD8+T细胞在EAE模型的作用机制的研究

目的 观察RHO激酶抑制剂—法舒地尔对RHOA、ROCK-II以及CD8细胞在脑和脊髓组织中表达的影响,探索RHO激酶抑制剂-法舒地尔在EAE模型中的作用机制。 方法 把90只Lewis大鼠随机分为5组：A组（空白对照Lewis大鼠）,B组（免疫后第13天）,C组（免疫后第21天）D组（免疫后第35天）及E组（法舒地尔干预组）。以豚鼠全脊髓为抗原混合福氏完全佐剂（CFA）诱导Lewis大鼠EAE模型,观察实验动物神经功能损害的情况;利用免疫组织化学染色法观察实验动物组脑、脊髓组织中RHOA、ROCK-II、以及CD8+T细胞的表达。 结果 成功建立Lewis大鼠EAE模型,A、B、C、D、E五组中RhoA、Rock-II以及CD8细胞在脑、脊髓组织均有表达,在免疫后21天达高峰,在免疫后及法舒地尔干预组的脑、脊髓组织中表达较空白对照组明显增加,差异有显著性（P<0.05）;法舒地尔干预组RhoA、Rock-II以及CD8细胞在脑、脊髓组织的表达较免疫后各个时间点有所减轻,差异有显著性（P<0.05）;免疫后第13天组与免疫后35天组比较,差异无显著性（P>0.05）。 结论 Rho激酶抑制剂可以抑制EAE的病情进展、减轻神经元及轴索损害,其机制可能是抑制了Rho激酶参与白细胞及巨噬细胞迁移、浸润、吞噬过程;抑制Rho信号转导通路对细胞骨架的调节作用,而起到促进轴突再生、保护神经元的作用。     

二黄方对EAE大鼠细胞因子及Th1/Th2平衡的影响

目的探讨二黄方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠不同时间点血浆IFN-γ、IL-4及Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)平衡的影响。方法用髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫Lewis大鼠诱导EAE模型,采用随机数字表法分为模型组、激素组、中药组及正常对照组,分别在免疫后第7天、14天和28天采集血样,检测血浆细胞因子水平。结果免疫后第28天,模型组和激素组IL-4水平均显著下降,低于正常组(P<0.01),中药组IL-4水平升高,与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫后第28天,模型组和激素组Th1/Th2水平均显著升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),中药组Th1/Th2水平降低,与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论二黄方可减轻EAE疾病严重程度,可能通过上调IL-4水平,下调Th1/Th2比值发挥对EAE的治疗作用。     

VEGF在EAE大鼠血清中的表达及意义

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及炎症相关细胞因子在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠血清中的表达及探讨与疾病进展的关系。方法:雌性Wistar大鼠30只随机分为模型组20只及对照组10只,由豚鼠脊髓匀浆及百日咳菌液作为抗原免疫模型组大鼠制作EAE模型,于发病高峰时取得大鼠血清及脑脊髓标本,用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测血清VEGF、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)及髓鞘碱性蛋白(MBP)水平,组织学切片观察脑及脊髓病理变化。结果:(1)模型组大鼠全部发病,可见明显炎细胞浸润及髓鞘脱失改变;(2)VEGF在模型组大鼠血清中表达较对照组有明显增高(P<0.05),且VEGF水平的升高与动物模型发病临床评分呈显著正相关,与血清IFN-γ、MBP水平升高及IL-4水平降低亦相一致。结论:EAE血清VEGF水平与临床症状加重、促炎因子增高、抑炎因子降低及髓鞘破坏程度一致,提示VEGF可能通过与炎症因子协同作用参与了EAE的病变进展。     

推拿对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其机制

目的 探讨推拿对神经病理性疼痛(NPP)大鼠的镇痛作用及其机制。方法 将30只SD大鼠随机分为正常组、脊神经结扎(SNL)组、假手术组、推拿组、假推拿组,每组6只。除正常组和假手术组外,其余3组均建立SNL模型。于术后第1天开始对推拿组、假推拿组进行干预,连续干预7 d,其余3组不予干预。于术前、术后1 d、术后3 d和7 d测定各组大鼠的热痛缩足反应潜伏期(PWTL)和机械性刺激缩足阈值(PWMT);于术后第7天检测大鼠L_4～6脊髓组织BRAF活化的非编码RNA(BANCR)的表达水平、L₅脊髓组织微管相关蛋白轻链3(LC3)和p62蛋白的表达水平、血清白细胞介素1β(IL-1β)的表达水平。结果 (1)术后1 d、3 d、7 d, SNL组、推拿组的PWTL和PWMT均较正常组降低,术后3 d、7 d,推拿组的PWTL和PWMT均较SNL组升高(均P<0.05)。(2)术后7 d, SNL组的血清IL-1β表达水平、脊髓组织BANCR表达水平、p62蛋白表达水平均较正常组升高,脊髓组织LC3Ⅱ蛋白表达水平较正常组降低,推拿组的血清I...