血浆联合复方甘草酸苷注射液对LPS/D-GalN诱发的小鼠肝损伤的影响

目的:探讨血浆联合复方甘草酸苷注射液对肝损伤小鼠模型肝损伤的影响。方法:将40只清洁型ICR雄性小鼠随机分为4组(n=10):对照组:仅用生理盐水处理;LPS/D-galN组:仅用LPS/D-GalN处理(LPS50mg/ml,D-GalN 500mg/ml);LPS/DgalN+复方甘草酸苷(CG)组:在LPS/D-GalN诱导后2,4,8h腹腔注射5mg/ml的CG注射液3次;LPS/DgalN+复方苷草酸苷和血浆(CG和Plamsa)组:在LPS/D-GalN诱导后2,4,8h尾静脉注射150μl血浆3次,并腹腔注射CG注射液3次。12h后牺牲小鼠,收集血清和肝组织样本,利用AST和ALT检测试剂盒检测血清中AST和ALT的水平,ELISA法检测肝组织中IL-6、TNF-α和NF-κB的表达变化;肝组织进行HE染色,显微镜下观察肝组织病理学变化。结果:与LPS/D-GalN组对比,LPS/D-GalN+CG组和LPS/D-GalN+CG和Plasma组能够显著降低血清中AST和ALT水平(P0.05);炎症相关因子IL-6和TNF-α,转录因子NF-κB水平也明显降低(P0.05)。结论:血浆联合复方甘草酸苷注射液通过抑制炎症相关因子IL-6和TNF-α,并降低转录因子NF-κB的表达,改善LPS/D-GalN诱发的小鼠肝损伤。     

小鼠暴发性肝衰竭肝细胞凋亡形态学及其调控机制

目的:研究在实验性暴发性肝衰竭(fulminant hepatic failure,FHF)中肝细胞凋亡的形态学变化以及一氧化氮(nitric oxide,NO)、Fas和Bcl-2对肝细胞凋亡的调控作用．方法:脂多糖(LPS)和D-氨基半乳糖(D-GalN)联合应用制备FHF小鼠模型;采用免疫组化方法检测肝组织Fas 及Bcl-2表达,分别采用硝酸还原酶法和RT-PCR法检测血清NO水平及肝组织iNOS mRNA表达;TUNEL法检测肝细胞凋亡;在用药后动态观察Fas及Bcl-2表达、血清NO水平及肝组织iNOS mRNA表达及肝细胞凋亡的变化,并对模型鼠给予iNOS的抑制剂L-NMMA,动态观察上述指标的变化．结果:在FHF模型小鼠中,用药后2 h开始血清NO水平及iNOs mRNA的表达即升高,于4 h达高峰;用药后2 h 开始Fas有少量表达,至8 h和12 h表达均明显增多,与 2 h组比较差异显著(100％ vs 20％,P<0．01),与4 h组比较差异也比较显著(100％ vs 40％,P<0．05)．模型组2 h Bcl-2有较多表达,4 h表达最多,4 h与2 h比较差异显著 (90％ vs 60％,P<0．05),与8,12h比较差异非常显著(90％ vs 20%,均P<0．01)．8 h可出现典型的肝细胞凋亡表现．与模型组各时间点比较,给予iNOS的抑制剂L-NMMA 后血清NO水平及iNOs mRNA的表达均为正常水平, Fas及Bcl-2表达均无显著差异(P>0．05),阻断后8 h亦可见典型的肝细胞凋亡表现,阻断NO可使病变较模型组更为严重．结论:在FHF中,Fas及Bcl-2的表达均增加,Fas的表达与肝细胞凋亡相一致,而Bcl-2的表达与肝细胞凋亡呈负相关．单纯应用NO拮抗剂对肝细胞凋亡及肝损伤无保护作用．     

Toll样受体-4小干扰RNA预处理防治小鼠急性肝损伤

目的 观察Toll样受体(TLR)-4小干扰RNA(siRNA)对D-氨基半乳糖盐酸盐/月旨多糖(D-GalN/LPS)诱导的肝损伤小鼠的保护作用.方法 150只雄性C57BL/6小鼠均分为PBS预处理组、阴性对照质粒预处理组、TS4预处理组、TS6预处理组和TS7预处理组.腹腔内联合注射LPS(10 ng/g)及D-GalN(1 mg/g)诱导小鼠急性肝损伤.在D-GalN/LPS联合注射前24及48 h通过尾静脉高压水注射法导人siRNA质粒50 mg/L.末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记术(TUNEL)检测细胞凋亡水平,免疫组织化学法检测肝组织中TLR-4表达,RT-PCR检测TLR-4、TNF-α及巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2 mRNA水平,ELISA检测小鼠血清中MIP-2及TNF-α水平,标准自动分析仪检测血清中ALT及AST水平,苏木精-伊红染色观察肝脏组织学变化,Fisher确切概率法比较各组间小鼠存活率.结果 TLR-4 siRNA可减轻肝细胞坏死、减轻炎性反应,并可显著降低血清转氨酶水平.TS4预处理组(0.065±0.015)比PBS预处理组(0.346±0.062)的TUNEL标记指数(LI)明显降低(t=9.796,P<0.05).TLR-4 siRNA预处理下调TLR-4 mRNA及蛋白表达水平,显著降低TNF-α及MIP-2 mRNA表达及细胞因子水平,显著降低D-GalN/LPS联合诱导的急性肝损伤C57BL/6小鼠的死亡率和肝损伤.结论 TLR-4 siRNA抑制TLR-4表达在防治肝损伤方面可能具有潜在应用价值.     

Pim-3对暴发性肝功能衰竭大鼠的肝组织修复效应及机制分析

目的 探讨Pim-3基因对暴发性肝功能衰竭(FHF)大鼠的肝组织修复效应.方法 将32只大鼠分为4组,健康对照组和3组处理组,每组8只.3组处理组分别以林格液、空载质粒(pEGFP-N2)和重组质粒(pEGFP-N2/Pim-3)溶液预处理大鼠,1 d后予脂多糖(LPS)/D-半乳糖胺(D-GalN)腹腔注射诱导FHF.8 h后或濒死期处死大鼠,采集血清和肝组织标本,检测血清转氨酶水平,RT-PCR和ELISA分别检测TNF-α和IL-1β基因表达及其血中浓度,原位末端凋亡(TUNEL)分析评估肝细胞凋亡水平,检测肝组织损伤程度.组间比较采用方差分析.结果 重组质粒注射能诱导目的 基因Pim-3和报告基因绿色荧光蛋白(GFP)在肝内高表达;与其他处理组相比,重组质粒组大鼠的生存率显著提高,血清转氨酶水平明显降低,且肝组织内出血坏死和炎性细胞浸润程度也明显减轻;重组质粒组肝凋亡指数为(10.2±6.9)%,显著低于林格液组的(83.1±12.6)%和空载质粒组的(79.9±13.4)%(P＜0.01);外源Pim-3基因的应用显著降低了肝组织内TNF-α和IL-1β mRNA的表达,以及血清TNF-α和IL-1β蛋白的分泌水平.结论 Pim-3基因有助于保护大鼠免于LPS/D-GalN诱导暴发性FHF的发生,其机制可能是抑制肝内炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的表达和分泌.     

肝纤维化能够保护小鼠抵抗D-GalN/LPS诱导的致死性损伤

目的:证明四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化小鼠对致死性D-氨基半乳糖/脂多糖(D-galactosamine and lipopolysaccharide,D-GalN/LPS)攻击的耐受性.方法:建立CCl4诱导的肝纤维化小鼠模型,于纤维化6 wk时以致死剂量的D-GalN(700 mg/kg)/LPS(50μg/kg)进行攻击,以同样处理的正常小鼠作为对照,即实验共分为4组:正常对照组(Nor)、急性损伤组(Nor+D-GalN/LPS)、肝纤维化组(Fib)、肝纤维化+急性攻击组(Fib+D-GalN/LPS).根据攻击前后小鼠生存率、转氨酶水平及肝组织学的变化来评估正常和纤维化小鼠对致死性D-GalN/LPS损伤的耐受性.结果:生存分析显示,Fib+D-GalN/LPS组的生存率显著高于Nor+D-GalN/LPS组(100%vs20%).血清转氨酶结果表明,Fib+D-GalN/LPS组肝损伤程度明显轻于Nor+D-GalN/LPS组,其sALT水平分别为(6630 U/L±1675 U/L)和(22429 U/L±5446 U/L)(P<0.01).接受攻击的纤维化和正常小鼠的sALT分别升高了14.3倍和455.9倍.肝组织学检查结果也证明,接受致死性D-GalN/LPS攻击的纤维化小鼠的肝损伤较同样处理的正常小鼠明显减轻.结论:CCl4诱导的肝纤维化可保护小鼠抵抗致死性D-GalN/LPS损伤的攻击.     

急性肝衰竭TNF-α、Caspase-3及TGF-β1 mRNA的表达及罗格列酮的干预

目的: 观察D-氨基半乳糖(D-Ga lN)联合脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肝衰竭TNF-α、Caspase-3、TGF-β1 mRNA的表达,并探讨罗格列酮的干预作用.方法: ♂昆明小鼠随机分为3组: 正常组、对照组、干预组.对照组和干预组以D-Ga lN/LPS腹腔注射构建小鼠急性肝衰竭模型,正常组则相应予以生理盐水腹腔注射;干预组于造模前2 h予以罗格列酮灌胃,正常组和对照组则相应予以生理盐水灌胃.比较各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织病变程度及肝组织TNF-α、Caspase-3,TGF-β1 mRNA的表达水平.结果: D-GalN联合LPS腹腔注射成功构建了小鼠急性肝衰竭模型,对照组肝组织中TNF-α、Caspase-3、TGF-β1 mRNA的表达较正常组明显增高( P＜0.001);干预组小鼠血清ALT,AST水平明显低于对照组(403.6±76.1 U/L vs 3664.8±646.1 U/L,464.6±63.0 U/L vs 3514.0±468.9 U/L,均P＜0.001),肝组织中TNF-α、Caspase-3、TGF-β1 mRNA表达水平明显低于对照组(0.270±0.042 vs 0.459±0.072,0.388±0.033 vs 0.553±0.033,0.261±0.031 vs 0.403±0.042,均P＜0.001);与对照组比较,干预组肝组织炎性细胞浸润明显减少,肝细胞以变性为主,未见明显坏死.结论: 罗格列酮可能通过下调T N F - α、Caspase-3、TGF-β1的表达对D-GalN/LPS小鼠急性肝衰竭起保护作用.     

罗格列酮对D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用

目的 观察罗格列酮对D-氨基半乳糖(D-GalN)联合脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肝衰竭的保护作用,并研究其可能的作用机制.方法 雄性昆明小鼠随机分为3组:正常组、对照组、治疗组.对照组和治疗组以D-GalN/LPS腹腔注射构建小鼠急性肝衰竭模型,正常组则相应予以生理盐水腹腔注射;治疗组于造模前2 h予以罗格列酮灌胃,正常组和对照组则相应予以生理盐水灌胃.比较各组小鼠24 h存活率、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平、肝组织病变程度及肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和天冬氨酸特异半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达水平.结果 治疗组小鼠24 h存活率明显高十对照组(P<0.05),血清ALT、AST水平明显低于对照组(P<0.05);治疗组与对照组比较,肝组织炎性细胞浸润明显减少,肝细胞以变性为主,未见明显坏死;治疗组小鼠肝组织TNF-α、Caspase-3 mRNA表达水平明显低于对照组(P<0.05).结论 罗格列酮对D-GalN/LPS小鼠急性肝衰竭有保护作用,可改善肝细胞炎症和坏死.降低急性肝衰竭死亡率,其机制可能与罗格列酮下调TNF-α、Caspasc-3表达有关.     

析因实验法建立规范化小鼠暴发性肝衰竭模型

目的:建立稳定有效的小鼠D-氨基半乳糖(D-GalN)和内毒素(LPS)致暴发性肝衰竭(FHF)模型.方法:采用析因实验法,选择两个影响模型成功率的因素:D-GalN和LPS的攻击剂量.两者各选取三个水平,以小鼠24 h病死率为评价指标,观察实验鼠的血清肝功能和肝组织病理学改变.结果:优选出两种较理想的给药方案:D-Ga1N600 mg/kg联合LPS 0.5 mg/kg和D-GalN 800mg/kg联合LPS 0.04 mg/kg腹腔注射.不同剂量的D-GalN和LPS对模型的病死率均有影响(F=36.878,P=0.000;F=32.386,P=0.000),均存在量效关系;而且D-Ga1N和LPS间存在交互作用(F=5.226,P=0.005),两种试剂合用可以明显提高模型的病死率.结论:建立了D-GalN和LPS致小鼠FHF的规范化模型.     

肝脾调补方对小鼠免疫性肝损伤的防护作用

目的:观察中药肝脾调补方对小鼠免疫性肝损伤的防护作用并探讨其药理学机制。方法:采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)建立小鼠免疫性肝损伤模型,通过肝脾调补方高、中、低剂量灌胃,观察肝脾调补方对各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化。结果:肝脾调补方可明显降低免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TNF-α水平;减少肝组织匀浆的MDA含量,升高肝匀浆SOD、GSH-Px含量。结论:肝脾调补方对BCG+LPS尾静脉注射造成的小鼠免疫性肝损伤有明显的防护作用,其作用与抗脂质过氧化有关。     

氧化苦参碱对小鼠暴发型肝衰竭的保护作用

研究氧化苦参碱(oxym-atrine,OM)对脂多糖(LPS)加氨基半乳糖(GalN)诱导的小鼠暴发型肝衰竭(fulminant hepatic failure,FHF)的保护作用及其机理.实验分三组OM组(100mgkg-1d-1×3,ip),模型组及正常组.注射CaIN/LPS后7.5小时,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,同时取肝组织作HE染色和Fas及其配体(FasL)的免疫组化检测.OM组小鼠ALT及TNF-α水平明显低于模型组(P＜0.01和0.05).OM组肝损害程度及Fas、FasL表达强度均较模型组减轻(P＜0.01).OM可能通过抑制TNF-α活性及Fas、FasL表达,从而阻断LPS所致肝细胞凋亡及坏死.     

PPARα激活保护小鼠急性肝衰竭对CHOP的调节作用研究

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)激活对小鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)肝损伤保护过程中对内质网应激凋亡蛋白标志物CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号分子的影响。方法以C57BL/6小鼠为研究对象,腹腔注射D-氨基半乳糖(D-GalN)联合脂多糖(LPS)建立小鼠ALF模型。PPARα激活剂Wy-14643及siRNA分别对ALF小鼠模型进行干预,检测小鼠肝脏病理改变、血清转氨酶ALT、AST评价肝脏功能,免疫印迹、实时荧光定量PCR及免疫荧光方法检测CHOP的基因及蛋白表达水平。结果 D-GalN/LPS诱导ALF小鼠中,肝损伤程度及转氨酶水平随着时间延长逐渐加重,PPARα水平下降,CHOP水平上升。Wy-14643干预降低肝组织CHOP的表达水平,PPARαsiRNA干预增加肝组织CHOP的表达水平。结论 ALF肝损伤过程中,PPARα可通过调节CHOP参与内质网应激诱导的肝细胞凋亡,PPARα-CHOP信号通路可能是ALF致病分子机制之一。     

罗格列酮对D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭的保护作用

目的观察罗格列酮对D-氨基半乳糖(D-GalN)联合脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肝衰竭的保护作用,并研究其可能的作用机制。方法雄性昆明小鼠随机分为三组:正常组、对照组和治疗组。对照组和治疗组以D-GalN/LPS腹腔注射构建小鼠急性肝衰竭模型,正常组则相应予以生理盐水腹腔注射;治疗组于造模前2 h予以罗格列酮灌胃,正常组和对照组则相应予以生理盐水灌胃。比较各组小鼠24 h存活率,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织病变程度及肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和天冬氨酸特异半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达水平。结果治疗组小鼠24 h存活率明显高于对照组(P0.05),血清ALT、AST水平明显低于对照组(P0.05);治疗组与对照组比较,肝组织炎性细胞浸润明显减少,肝细胞以变性为主,未见明显坏死;治疗组小鼠肝组织中TNF-α、Caspase-3 mRNA表达水平明显低于对照组(P0.05)。结论罗格列酮对D-GalN/LPS小鼠急性肝衰竭有保护作用,可改善肝细胞炎症和坏死,降低急性肝衰竭的死亡率,其机制可能与罗格列酮下调TNF-α、Caspase-3的表达有关。     

鬼针草水提物对脂多糖诱导肝损伤小鼠肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的影响

目的研究鬼针草水提物对脂多糖(LPS)诱导小鼠肝损伤的保护作用及对小鼠细胞因子的影响。方法一次性腹腔注射LPS(400μg/kg)建立小鼠化学性肝损伤模型,鬼针草水提物灌胃,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷酰转肽酶(GGT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的水平和肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,肝组织HE染色作病理切片分析。结果鬼针草水提物可明显改善LPS引起的小鼠肝组织病理损伤,降低LPS致小鼠血浆ALT、GGT、TNF-α和IL-6的水平,GSH-Px活性明显增高,肝细胞水肿、变性等损伤程度明显减轻。结论鬼针草水提物能够明显降低急性肝损伤小鼠TNF-α、IL-6水平,减轻氧化应激损伤,具有较强的保肝作用。     

SOCS-1在内毒素血症及耐受小鼠肝组织中的表达变化及意义

目的:观察内毒素血症及内毒素耐受模型小鼠对LPS刺激的反应性,以及肝组织中SOCS-1表达的变化,试图从机体水平探讨SOCS-1与内毒素耐受状态之间的关系.方法:通过脂多糖(LPS)预处理建立内毒素血症及内毒素耐受动物模型,并与对照组进行比较.分时点用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中TNF-α水平,逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)检测肝组织中TNF-αmRNA的表达水平以及肝组织中SOCS-1mRNA的表达,并观察肝组织病理改变及超微结构改变,免疫组织化学检测SOCS-1在肝脏的表达.结果:在LPS刺激后,LPS组血清TNF-α水平、TNF-αmRNA、SOCS-1mRNA均在1h开始升高,至3h时达到峰值,随后又逐渐下降正常水平;PBS组血清TNF-α水平及TNF-αmRNA表达几乎没有明显变化,且无SOCS-1mRNA表达,与LPS组比较有统计学意义(P<0.01);但是耐受组(ETT)的3h血清TNF-α水平较非耐受组(NETT)低(693.38ng/L±95.2ng/Lvs1110.24ng/L±164.33ng/L,P<0.01);3h肝组织TNF-αmRNA表达峰值较NETT组低(97.96±19.67vs139.14±31.17,P<0.05);而肝组织SOCS-1mRNA表达峰值较NETT组高(91.58±12.94vs 52.82±6.96,P<0.01);肝组织可见脂肪变性、坏死等病理改变,超微结构表现为Kupffer细胞激活,吞噬功能增强;免疫组织化学可见肝组织中SOCS-1的表达.结论:内毒素耐受状态下,肝组织中的SOCS-1mRNA表达却明显增强,肝组织中的SOCS-1mRNA表达、Kupffer细胞的激活以及机体的内毒素耐受状态三者间可能有着紧密的联系.     

Urotensin Ⅱ在急性肝衰竭小鼠肝组织中的表达及损伤作用

目的:探讨Urotensin Ⅱ(UⅡ)在急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)小鼠肝组织中的表达及损伤作用.方法:♂Balb/c小鼠随机分成4组(每组6只):正常对照组(A组)、预处理对照组(B组)、模型组(C组)和预处理模型组(D组).模型动物以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)/D-半乳糖胺(D-galactosamine,D-GalN)腹腔注射,预处理动物在造模前30min,用UⅡ受体拮抗剂Urantide0.6mg/kg尾静脉注射.LPS/D-GalN攻击12h后,采集血清和肝组织标本,并观察24h小鼠存活情况;采用Reitman-Frankel法检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate amino-transferase,AST)活性水平;采用HE染色显微镜观察肝组织损伤程度;RT-PCR法检测UⅡ及其受体UTmRNA的表达;ELISA法检测血清UⅡ多肽分泌水平;免疫组织化学方法检测肝组织UⅡ多肽及其UT受体蛋白质表达.结果:C组小鼠死亡率为66.7%,A、B和D组所有动物均存活;LPS/D-GalN攻击引起C和D组小鼠血清ALT和AST水平显著升高(P<0.01),而D组较C组显著降低(2271.09U/L±102.24U/Lvs1160.67U/L±258.32U/L,1569.42U/L±204.04U/Lvs1030.31U/L±108.09U/L,P<0.01);C组小鼠肝组织结构破坏明显,见大片出血性坏死及炎症表现,D组肝组织结构保持完整,仅有局灶性出血坏死,炎症明显减轻;C和D组小鼠血清UⅡ多肽水平较A和B组高(P<0.01),但D组较C组明显降低(3.73g/L±0.52g/Lvs1.90g/L±0.27g/L,P<0.01);LPS/D-GalN诱导了C和D组小鼠肝组织UⅡ和UT的mRNA及蛋白质高水平表达,而D组的表达水平较C组显著降低(P<0.01).结论:LPS/D-GalN可诱导ALF小鼠肝组织表达和分泌UⅡ,并促进肝组织UT受体的表达;UⅡ的表达与分泌可能存在正反馈调控机制;UⅡ/UT受体介导了LPS/D-GalN诱导的ALF的发生.     

TLR介导的Nrf2抗氧化通路在对乙酰氨基酚药物性肝损伤中的保护作用

目的研究内毒素(LPS)及Toll样受体(TLR)在对乙酰氨基酚(APAP)药物性肝损伤中的保护作用及其相关机制。方法雄性C57BL/6小鼠40只,分为4组,每组10只。空白对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,LPS组腹腔注射LPS 10μg/kg,APAP组腹腔注射APAP 300 mg/kg,LPS+APAP组在APAP造模前16 h给予LPS 10μg/kg预处理。通过比较各组血清ALT和AST水平,并通过HE染色评价肝组织损伤程度,观察LPS对小鼠肝损伤的保护作用。测定相应时间点的肝脏组织丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的变化以及肝组织DHE染色,评价小鼠氧化应激水平。应用Western印迹及RT-PCR检测肝脏Nrf2,Gclc及HO-1的表达水平。结果 LPS预处理可明显减轻APAP所致的肝脏氧化应激反应及肝损伤程度。LPS预处理组的小鼠血清ALT(518.3±142.3对4542±498.4 U/L)、AST(643.3±105.6对5432.1±569.2 U/L)水平及肝组织MDA(78.0±14.5对141.7±26.4 mmoL/mg)水平与模型组相比明显降低,而GSH(6.2±1.7对3.5±1.0μmol/g)水平明显升高(P0.05),肝组织病理损伤明显减轻。同时,LPS预处理可明显促进Nrf2及其下游抗氧化基因的表达。结论 LPS在小鼠APAP肝损伤中起到保护作用,作用机制与Nrf2抗氧化通路的激活相关,可能成为药物性肝损伤的新的治疗策略。     

枯否细胞在高脂饮食致小鼠慢性肝损伤发生中的作用

目的探讨枯否细胞（Kupffer cell，KCs）在高脂饮食致小鼠慢性肝损伤发生中的作用。方法小鼠给予高脂饮食复制慢性肝损伤模型，实验动物随机分为对照组和模型组。12周后，小鼠腹主动脉采血测定血浆丙氨酸氨基转移酶（ALT）、内毒素（LPS）水平；肝组织用于组织病理切片的制备及肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平检测。分离培养小鼠KCs，测定其吞噬聚苯乙烯乳珠的能力及在LPS刺激下TNF-α的分泌；采用Western blot方法检测KCs CD14的表达。结果模型组小鼠血清ALT、LPS及肝组织TNF-α水平均明显高与对照组（t=2．87～30．11，P〈0．01）。KCs分离培养表明，模型组小鼠KCs呈活化状态，吞噬聚苯乙烯乳珠能力降低（t：5．04，P〈0．01），LPS刺激后TNF-α的分泌明显增加（t=4．17，P〈0．01）。Westernblot结果显示，模型组小鼠KCsCD14受体表达上调。结论在高脂饮食所致小鼠慢性损伤时，虽KCs处于活化状态，但其吞噬功能降低而分泌TNF-α能力则增强。提示KCs功能紊乱与高脂饮食致小鼠慢性肝损伤发生密切相关。     

乌司他丁对GalN／LPS引起大鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察乌司他丁（UTI）对D-氨基半乳糖（D-GaIN）／脂多糖（LPS）引起大鼠急性肝损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法72只SD雄性大鼠进行随机对照分组实验,分为正常对照组、模型组和UTI处理组,各组再分为6h、12h、24h、48h取材4个亚组。腹腔内注射D-GalN／LPS建立大鼠急性肝损伤模型,UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN／LPS后立即注射UTI。在相应时间点,门静脉采血检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、一氧化氮（NO）水平;肝组织切片观察肝脏病理形态学变化;测定肝组织丙二醛（MDA）含量,Caspase-3和Caspase-8活性。结果与模型组相比,UTI处理组血清ALT、AST水平在12h、24h和48h组均明显降低（P〈0．01）;UTI处理组TNF-α、NO水平则在6h和12h有明显降低（P〈0．01或0．05）;UTI处理组肝组织MDA含量在12h、24h和48h明显降低〈P〈0．01）;UTI处理组处理6h后Caspase-3和Caspase-8活性明显降低（P〈0．01）。结论UTI对GalN／LPS引起大鼠急性肝损伤有保护作用,主要通过其抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。     

一氧化碳释放分子-2对小鼠急性肝功能衰竭保护作用的实验研究

目的探讨一氧化碳释放分子-2对小鼠急性肝功能衰竭(ALF)的保护作用及机制。方法雄性C57BL/6小鼠30只随机分为对照组、模型组和保护组,每组10只。通过一次性腹腔注射脂多糖/D-氨基半乳糖(LPS/D-GalN)构建小鼠ALF的动物模型,CORM-2于造模前30 min行尾静脉注射,造模后6 h分别留取血清、肝组织标本。生化分析仪检测血清中ALT、AST水平,HE观察肝脏病理改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TNF-α和IL-6的水平,反转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中TNF-α和IL-6 mRNA的表达。结果保护组小鼠血清ALT[(1274.60±157.24)U/L比(3499.00±136.19)U/L]和AST[(1151.50±244.58)U/L比(4079.50±481.11)U/L]水平均明显低于模型组(均t1=33.81,t2=17.16,P0.05);与模型组比较,保护组肝组织炎性细胞浸润明显减少,肝细胞坏死程度明显减轻[(0.14±0.05)比(0.37±0.05),t=10.29,P0.05];保护组小鼠血清和肝组织中TNF-α[(139.60±28.39)pg/mL比(447.34±128.17)pg/mL、(0.31±0.03)比(0.69±0.05)]和IL-6[(215.21±85.16)pg/mL比(1461.58±244.90)pg/mL、(0.33±0.03)比(0.72±0.05)]表达水平明显低于模型组(均t1=7.41,t2=20.61,t3=15.20,t4=21.15,P0.05)。结论 CORM-2能够抑制小鼠ALF时的炎性反应,减轻肝脏病理损伤,其机制可能与抑制促炎细胞因子TNF-α和IL-6的释放有关。     

原儿茶酸对刀豆蛋白A所致的免疫性肝损伤小鼠肝组织MDA、NO、SOD和GSH-PX表达的影响

目的 研究原儿茶酸对豆蛋白A(ConA)所致的免疫性肝损伤小鼠肝组织丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平的影响。方法 随机将60只小鼠分为对照组、模型组、小、中、大剂量(2.5 mg.kg^-1.d^-1、5 mg.kg^-1.d^-1、10 mg.kg^-1.d^-1)原儿茶酸和(0.2 g.kg^-1.d^-1)联苯双酯处理组。在对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,在药物处理组分别给予不同剂量的药物灌胃,连续10 d。在末次给药1 h,一次性经尾静脉注射ConA,诱导免疫性肝损伤模型。分别检测血清白介素-4(IL-4)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和肝组织匀浆MDA、NO、SOD和GSH-PX活性。结果 不同剂量原儿茶酸和联苯双酯处理组动物肝、脾指数显著降低,血清ALT和AST水平显著降低,血清IL-4、IL-6和TNF-α水平显著降低(P<0.05);模型组肝匀浆MDA和NO水平分别为(5.2±0.5)nmol/mg和(8.0±0.9)μmol/L,经小、中、大剂量原儿茶酸处理后,分别降至【(4.7±0.4)nmol/mg、(4.3±0.3)nmol/mg和(3.9±0.3)nmol/mg及(6.8±0.8)μmol/L、(6.2±0.7)μmol/L和(5.8±0.7)μmol/L,P<0.05】;模型组肝匀浆SOD和GSH-PX水平分别为(59.4±3.6)U/mg和(85.2±9.6)U/mg,经小、中、大剂量原儿茶酸处理后,分别升高至【(74.2±4.4)U/mg、(85.2±5.3)U/mg和(99.2±5.9)U/mg及(107.3±13.4)U/mg、(115.2±12.8)U/mg和(139.3±12.9)U/mg,P<0.05】。结论 原儿茶酸可以减轻ConA引起的小鼠免疫性肝损伤,可能是通过提高了肝组织内源性抗氧化酶活力,增强了对氧自由基的清除能力有关。