中国上海汉族人群NAD(P)H氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性与脑卒中相关性

目的:研究NAD(P)H氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性与脑卒中的相关性?方法:收集118例脑出血患者?125例脑梗死患者和147例正常对照组,研究对象均来自上海地区汉族人群,3组在年龄?性别构成比?体质指数(BMI)等基线指标均没有明显差异,分别进行血糖?血脂等各项指标的测定,用聚合酶链反应?限制性片段长度多态性分析(PCR－RFLP)和基因测序方法比较其在不同人群中的基因突变频率?结果:脑出血组?脑梗死组CT + TT基因型(9.3%?9.6%)和T等位基因(4.7%?5.2%),均明显高于对照组(2.0%和1.0%,P < 0.05),脑梗死组中发现1例TT基因型,出血组与正常对照组均未发现TT基因型,与基因测序结果一致?采用二分类Logistic回归分析p22phox亚基C242T基因多态性与脑出血的相关性(β = 1.712,OR = 5.537,95%CI:1.120~27.381,P = 0.036),与脑梗死的相关性(β = 1.432,OR = 4.187,95%CI:0.934~18.774,P = 0.061),表明C242T基因多态性可能是脑出血?脑梗死的危险因素?结论:NAD(P)H氧化酶p22phox亚基C242T多态性与脑出血?脑梗死均有一定的相关性,可能是脑卒中的一个危险因素?但与高血压和饮酒等传统危险因素相比,C242T多态性对脑梗死的影响并不显著?     

广东汉族人细胞色素C242T p22phox基因多态性观察

目的调查广东汉族人是否存在细胞色素C242T p22phox基因多态性。方法应用聚合酶链反应-限制性长度多态性法(PCR-RFLP)检测122名广东籍汉族人C242T p22phox基因多态性。结果CC基因型频率为0.877,CT TT基因型频率为0.123,C等位基因频率为0.934,T等位基因频率为0.066。结论广东汉族人存在C242T p22phox基因多态性,该基因多态性存在种族差异。     

广东汉族人细胞色素C242T p22phox基因多态性观察

目的 调查广东汉族人是否存在细胞色素C242T p22phox基因多态性。方法 应用聚合酶链反应-限制性长度多态性法(PCR-RFLP)检测122名广东籍汉族人C242T p22phox基因多态性。结果 CC基因型频率为0．877，CT TT基因型频率为0．123，C等位基因频率为0．934，T等位基因频率为0．066。结论 广东汉族人存在C242T p22phox基因多态性，该基因多态性存在种族差异。     

吞噬细胞NAD(P)H氧化酶P22Phox mRNA表达与高血压病氧化应激的关系

目的旨在探讨高血压病人及家系中血吞噬细胞NAD(P)H氧化酶P22phoxmRNA的表达及其与高血压病氧化应激时抗活性氧单位、一氧化氮(NO)水平变化间的关系.方法研究对象分为有高血压家族史的高血压组(FH)和正常组(FN),无高血压家族史的高血压组(NFH)和正常组(N).通过密度梯度离心法获取血中吞噬细胞,采用Rt-PCR技术检测吞噬细胞NAD(P)H氧化酶P22phoxmRNA的表达量;比色法检测血清中NO含量及抗活性氧单位水平.结果FH组、NFH组分别较FN组、N组P22phoxmRNA高表达(P＜0.01),FH组较NFH组、及FN组较N组P22phoxmRNA高表达,组间有显著性差异(P＜0.01).高血压组血清NO含量、抗活性氧单位水平较正常组降低.统计学相关性分析4组人群血清NO含量、抗活性氧单位水平与相应的吞噬细胞NAD(P)H氧化酶P22phoxmRNA表达量呈直线相关.结论高血压组血吞噬细胞NAD(P)H氧化酶P22phoxmRNA较正常组有显著的高表达,且其表达可能受遗传因素的影响;高血压患者血清NO含量、抗活性氧单位水平的变化与吞噬细胞NAD(P)H氧化酶P22phoxmRNA表达密切相关.     

p22phox基因C242T多态性与糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨NADPH氧化酶亚基（P^22 phox）基因C242T多态性与糖尿病肾病（DN）的相关性．方法采用Taqman PCR（Three—star）法在中国昆明汉族人群中，对192例2型糖尿病患者（其中正常白蛋白尿组即DN0组70例，微量白蛋白尿组即DNI组57例，临床白蛋白尿组即DN2组65例）的P^22 phox基因C242T多态性进行检测．并比较分析各组间基因型频率和等位基因频率以及相关临床资料．结果DN组（DNI＋DN2）的CT＋TT基因型频率和T等位基因频率高于DN0组（P〈0．05），DNI和DN2组间基因型频率和等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05）．logistic回归分析表明舒张压、p^22 phox基因C242T多态性与DN相关．结论在昆明地区汉族人中，p^22 phox基因242T阳性基因型可能与DN相关．     

延边地区朝鲜族糖尿病肾病患者NADPH氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性的相关性研究

目的:研究延边地区朝鲜族糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者NADPH氧化酶p22phox亚基242位点基因多态性分布,探讨延边地区朝鲜族DN患者该基因多态性与DN发病相关情况。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术对延边地区人群中186例朝鲜族DN患者及139名朝鲜族正常对照组者NADPH氧化酶p22phox亚基242位点进行基因型分析,并将住院治疗的186例朝鲜族DN患者分为男性和女性两组,分析两者基因型频率、等位基因频率的差异。结果:①NADPH氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性在朝鲜族正常对照组和朝鲜族DN患者中的分布差异无统计学意义(χ2=1.854,P>0.05);②在男性和女性DN的患者中,NADPH氧化酶p22phox亚基242位点纯合子CC基因频率与杂合子CT及纯合子TT基因频率相比,差异有统计学意义(χ2=5.278,P<0.05);结论:①NADPH氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性与延边朝鲜族DN患者的发病无关;②CC纯合子基因可能是男性朝鲜族DN患者的易感基因。     

高血压病患者NAD(P)H氧化酶P22phoxmRNA表达与抗活性氧单位、NO水平变化实验研究

目的 探讨高血压病人血吞噬细胞NAD（P）H氧化酶P^22phoxmRNA的表达水平，及其与高血压氧化应激时抗活性氧单位、一氧化氮（NO）水平变化间的关系。方法 研究对象分为原发性高血压组（EH）和正常组（N）。通过密度梯度离心法获取血中吞噬细胞，采用Rt—PCR技术检测吞噬细胞NAD（P）H氧化酶P^22phoxmRNA的表达量，比色法检测血清中NO含量及抗活性氧单位水平。结果 高血压组血吞噬细胞P^22phoxmRNA较正常组高表达，高血压组血清NO含量、抗活性氧单位水平较正常组降低。统计学相关性分析两组人群血清NO含量、抗活性氧单位水平与相应的吞噬细胞NAD（P）H氧化酶P^22phoxmRNA表达量呈直线相关。结论 高血压组血吞噬细胞NAD（P）H氧化酶P^22phoxmRNA较正常组有显著的高表达，高血压患者血清NO会号、抗活性氢单位水平的变化与吞噬细胞NAD（P）H氧化酶P^22phoxmRNA表达密切相关。     

抑制NAD(P)H氧化酶表达和活性对大鼠糖尿病肾病的影响

[目的]探讨NAD(P)H氧化酶在糖尿病肾病发病中的作用和防治方法.[方法]链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠糖尿病模型随机分为糖尿病组NAD(P)H氧化酶抑制剂apocynin治疗组(0.2 g·kg-1·d-1)和血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利治疗组(10 mg-kg-1·d-1),疗程8周.用RT-PCR检测肾NAD(P)H氧化酶亚基p22phox mRNA表达;组织病理学检查观察肾病变程度;测定血肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)、24 h尿蛋白排泄量、肾质量指数等.[结果]糖尿病大鼠肾p22phox mRNA的表达较正常大鼠明显升高(P＜0.05),apocynin 治疗不影响肾p22phox mRNA的表达;福辛普利治疗4周,明显降低了肾p22phox mRNA表达(P＜0.05);apocynin和福辛普利均显著降低了肾小球细胞外基质蛋白、Scr、尿蛋白和肾质量指数(P＜0.05),提高了Ccr(P＜0.05),但对血糖和血压均没有显著影响.[结论]糖尿病大鼠肾组织中,NAD(P)H氧化酶的表达明显升高并参与了糖尿病肾病发病;抑制NAD(P)H氧化酶活性和表达的治疗措施可延缓糖尿病肾病的发生和发展.     

NAD(P)H氧化酶在血管紧张素Ⅱ损伤人胰岛细胞功能中的作用

目的 探讨分离纯化的人胰岛细胞是否表达NAD(P)H氧化酶亚基p22phox,通过体外实验了解该酶在血管紧张素Ⅱ损伤胰岛细胞功能中所起的作用.方法 对分离纯化后的胰岛分别进行p22phox亚基和胰岛素免疫荧光检测;使用化学发光法检测不同浓度血管紧张素Ⅱ、AT1受体拮抗剂及NAD(P)H氧化酶抑制剂干预下胰岛细胞胰岛素分泌功能.结果 免疫荧光标记胰岛p22phox亚基和胰岛素均呈强阳性;血管紧张素Ⅱ抑制高糖刺激下胰岛细胞胰岛素的分泌,使用AT1受体拮抗剂或者NAD(P)H氧化酶抑制剂能拮抗血管紧张素Ⅱ的抑制作用.结论 分离纯化的人胰岛细胞表达NAD(P)H氧化酶;血管紧张素Ⅱ可能通过激活细胞表面NAD(P)H氧化酶使胰岛细胞发生氧化应激,从而损伤胰岛细胞的分泌功能.     

C242T基因多态性与大动脉粥样硬化型脑梗死的相关性研究

目的 研究还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性与上海松江地区汉族人群大动脉粥样硬化型脑梗死(LAACI)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)、基因测序等技术对310例上海松江地区汉族人群LAACI患者(LAACI组)和330例对照组的C242T基因多态性位点进行基因型、等位基因频率检测,分析C242T基因多态性与LAACI的相关性.结果 LAACI组丙二醛(MDA)水平、NADPH氧化酶活性明显高于对照组(P＜0.05);LAACI组吸烟率、饮酒率、高血压率、收缩压、舒张压,以及血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平均比对照组高(P＜0.05),HDL-C水平比对照组低(P＜0.05);LAACI组较对照组有更高的杂合子(CT)+纯合子(TT)基因型频率及T等位基因频率(P＜0.05);Logistic回归分析显示,吸烟、血糖、高血压、收缩压、舒张压、脂蛋白a[Lp(a)]、ox-HDL水平、MDA水平、NAD-PH氧化酶活性、基因型是LAACI的独立危险因素.结论 NADPH氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性与LAACI有相关性,可能是高血压、吸烟和脂氧化之外的另一个独立危险因素.     

重组腺相关病毒-NT4p53(C22)Ant对肝癌荷瘤小鼠的治疗作用

目的 研究NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒(rAAV)对肝癌荷瘤小鼠的治疗作用.方法 构建NT4p53(C22)Ant,将其亚克隆于重组腺相关病毒载体中,经293细胞包装、扩增构成具有感染性的rAAV-NT4p53(C22)Ant,将小鼠源的H22肿瘤细胞接种于ICR小鼠皮下,成瘤后根据瘤体质量、抑制率、动物生存时间及病理组织学结果,评价rAAV-NT4p53(C22)Ant治疗肝癌细胞(H22)的移植瘤作用.结果 一次性肿瘤局部注射NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒100 μl/次(2x1011 pfu/ml)接种于ICR荷瘤小鼠皮下的H22肝癌细胞,12只小鼠7只瘤块消失,1只死亡,瘤体的质量明显减小,生存时间大于70d;而对照组中,7只小鼠均死亡,死亡率100%,生存时间约为30 d,较治疗组明显缩短.治疗组肿瘤抑制率大于90%,较未治疗和注射空病毒对照组有显著性差异,组织学观察rAAV-NT4p53(C22)Ant治疗组较对照组肿瘤细胞明显减少.结论 NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒可以有效地杀伤小鼠体内的H22肝癌细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长,生存期延长.     

动静脉二氧化碳分压差/氧含量差预测脓毒症预后的价值

目的  本研究旨在探讨动静脉二氧化碳分压差/氧含量差[P（v-a）CO2/C（a-v）O2]在预测脓毒症患者预后中的临床应用价值。方法  前瞻性选取2013年1月-2015年12月收治的脓毒症患者120例。入院时收集患者复苏前（0 h）的P（v-a）CO2/C（a-v）O2、C（a-v）O2、P（v-a）CO2、乳酸、中心静脉血氧饱和度（ScvO2）、心输出量和APACHEⅡ评分,比较上述指标在预测脓毒症患者预后中的临床价值。收集0、6、24和48 h时P（v-a）CO2/C（a-v）O2和心输出量,分析P（v-a）CO2/C（a-v）O2与心输出量的关联性。 结果  与存活组患者比较,死亡组患者入院时P（v-a）CO2/C（a-v）O2显著增高,差异有统计学意义（1.642±0.233）vs（1.183±0.186） mmHg/ml,（P =0.000）;C（a-v）O2显著降低（2.827±1.215）vs（3.349±1.074） ml,（P =0.035）;P（v-a）CO2显著增高（4.625±0.870）vs（3.945±0.781） mmHg,（P =0.000）;乳酸水平显著增高（3.452±2.216）vs（2.218±2.344） mmol/L,（P =0.024）;ScvO2显著降低（62.324±12.226）vs（67.517±10.885）%,（P =0.045）;心输出量显著降低（2.571±1.214）vs（3.569±1.345）L/min,（P =0.000）;平均APACHEⅡ评分显著增高（25.329±4.234）vs（18.763±10.565）,（P =0.000）。P（v-a）CO2/C（a-v）O2和心输出量在预测患者死亡中的曲线下面积分别高达0.925和0.920,最佳诊断界值分别为1.412 mmHg/ml和3.214 L/min。Z检验分析显示,P（v-a）CO2/C（a-v）O2和心输出量在预测患者死亡中的曲线下面积明显高于C（a-v）O2、P（v-a）CO2、乳酸、ScvO2和APACHEⅡ评分（P < 0.05）。Pearson相关性检验分析显示在0、6、24和48 h时P（v-a）CO2/C（a-v）O2和心输出量均显著相关（r = -0.854、-0.901、-0.823和-0.825,P =0.000）。结论  P（v-a）CO2/C（a-v）O2在预测脓毒症患者预后中具有良好的临床应用价值,值得进一步推广。