CMH为KBv_(200)耐药相关中性鞘糖脂

为了研究耐药细胞株KBv2 0 0 中性鞘糖脂表达的规律 ,采用改良的Hakomori法提取、纯化了KB及其耐药细胞株KBv2 0 0 的中性鞘糖脂 ,行高效薄层层析 ,分析其含量的异同 ;并以糖脂合成抑制剂PPMP抑制KBv2 0 0 中性鞘糖脂的合成 ,观察了其对KBv2 0 0 耐药性的逆转作用。结果发现 ,KBv2 0 0 的CMH和CDH表达较KB强 ,尤以CMH为著 ,PPMP能抑制KBv2 0 0 细胞CMH的合成 ,并能逆转KBv2 0 0 对长春新碱 (VCR)的耐药性。说明CMH为KBv2 0 0 耐药相关中性鞘糖脂 ,抑制耐药细胞CMH的合成可能是逆转肿瘤多药耐药的一种新方法。     

CMH为KBv200耐药相关中性鞘糖脂

为了研究耐药细胞株KBv200中性鞘糖脂表达的规律，采用改良的Hakomori法提取、纯化了KB及其耐药细胞株KBv200的中性鞘糖脂，行高效薄层层析，分析其含量的异同；并以糖脂合成抑制剂PPMP抑制KBv200中性鞘糖脂的合成，观察了其对KBv200耐药性的逆转作用。结果发现：KBv200的CMH和CDH表达较KB强，尤以CMH为著，PPMP能抑制KBv200细胞CMH的合成，并能逆转KBv200对长春新碱（VCR）的耐药性。说明CMH为HBv200耐药相关中性鞘糖脂，抑制耐药细胞CMH的合成可能是逆转肿瘤多药耐药的一种新方法。     

辐射促进多药耐药反义寡核苷酸逆转耐药的实验研究

目的探讨辐射促转染的多药耐药基因（mdr1）反义寡核苷酸（ASON）逆转肿瘤细胞KBv200的耐药效果。方法应用MTT法比较脂质体介导的ASON直接转染与联合辐射转染的情况下KBv200细胞对长春新碱（VCR）的半数抑制量（IC50），再利用RT-PCR方法和流式细胞仪检测两种不同的转染方法对KBv200细胞的mdr1-mRNA及其表达产物P-糖蛋白（P-gp）的调控情况。采用耐药细胞株KBv200移植于裸鼠皮下，肿瘤局部2Gy^60Coγ射线照射后1h，瘤内注射脂质体介导的mdr1ASON，经VCR联合化疗。结果联合照射的ASON组明显优于未照射组（P〈0．05）。KBv200细胞的IC50、mdr1-mRNA的表达水平及P-gp的阳性率，均明显低于未照射组（P〈0．05）。联合照射组与未照射组肿瘤体积和肿瘤重量差异有统计学意义（P〈0．01）。结论辐射促转染的mdr1 ASON对肿瘤细胞具有较强的耐药逆转作用。     

三氧化二砷逆转乳腺癌细胞株MCF-7/ADM多药耐药的研究

目的探讨三氧化二砷（As2O3）体外逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用及机制。方法采用MTT法检测As2O3的细胞毒作用和处理前后耐药细胞对化疗药物的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内阿霉素浓度,通过RT-RCR检测MDR1基因的表达。结果 As2O3在0.25mg/L以下剂量时对MCF-7和MCF-7/ADM耐药细胞株的抑制率均小于15%,半数抑制率（IC50）分别为1.01m/L和1.28mg/L,无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能部分逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性。同时无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能使MCF-7/ADM细胞内阿霉素浓度明显增加,MDR1表达下降。结论 As2O3具有体外部分逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用,可能与增加细胞内药物积累、下调MDR1表达有关。     

99TCm-MIBI显像评价肿瘤多药耐药及其逆转效果

目的　探讨99Tcm 甲氧基异丁基异腈 (MIBI)在肿瘤细胞的摄取与肿瘤多药耐药蛋白P 糖蛋白 (P gp)表达水平的关系 ,评价化疗增敏剂对肿瘤多药耐药性的逆转效果。方法　采用人乳腺癌耐药细胞株MCF 7 Adr建立荷瘤鼠动物模型 (n =10 ) ,以维拉帕米 (VRP)为逆转剂 ,随机分为逆转剂组和对照组 ,进行逆转前后 15、6 0、90、12 0min99Tcm MIBI显像 ,对照组裸鼠在逆转前显像后处死 ,逆转剂组在逆转后显像后处死 ,检测逆转前后肿瘤P gp的表达水平和多药耐药基因mdr1的mRNA水平 ,以及各重要脏器的每克组织百分注射剂量率 (%ID g)。结果　除 12 0min外 ,余各时间点肿瘤与对侧正常相应部位放射性计数比值 (T N)差异有显著性 ,逆转后肿瘤T N由 1上升为 >1 2。逆转后耐药基因mdr1mRNA表达水平明显下降 (t=4 873,P =0 0 0 8)。逆转前、后肿瘤P gp表达水平分别为 0 10 38±0 0 0 78和 0 0 0 96± 0 0 0 5 9,差异有显著性 (t=3 5 79,P =0 0 2 3)。逆转后肿瘤、肝脏、肾脏对99Tcm MIBI的摄取明显增加 ,%ID g变化百分比分别为 10 6 83%、4 0 35 %、16 6 0 7% ,心脏对99Tcm MIBI的摄取略有下降 ,为 - 12 82 %。结论　99Tcm MIBI显像可较好评价和显示肿瘤由P gp所致多药耐药性 ,以及化疗增敏剂的逆转效果。     

补骨脂素对MCF-7/ADR耐药细胞内ADR及Ca2+浓度的影响

目的 研究补骨脂素对MCF-7/ADR耐药细胞逆转作用及对耐药细胞内Ca2 浓度影响,探讨其可能作用机制.方法 采用MTT法测定补骨脂素对细胞增殖抑制作用,高效液相色谱法检测细胞内ADR的浓度,激光共聚焦显微镜测定细胞内不同时段的Ca2 浓度.结果 补骨脂素在1～20 μmol/L浓度下能不同程度降低ADR对MCF-7/ADR细胞的IC50,并不同程度提高细胞内ADR浓度;1～20 μmol/L补骨脂素在不同作用时段(24、48、96 h)对MCF-7/ADR细胞内Ca2 浓度与作用时间呈负相关.结论 补骨脂素能逆转MCF-7/ADR细胞的MDR,其作用机制与影响耐药细胞内Ca2 浓度,故而增加细胞内ADR浓度有关.     

青蒿琥酯逆转Eca109/ABCG2细胞对阿霉素耐药的作用及机制

目的研究青蒿琥酯(Art)逆转食管癌耐药细胞Eca109/ABCG2对阿霉素(ADM)耐药的作用及其机制。方法采用不同浓度的青蒿琥酯(Art,0、0.01、0.1、1μmol/L),阿霉素(ADM,0、0.02、0.2、2、20mg/L),Art(0.01、0.1、1μmol/L)+ADM(0.02、0.2、2、20mg/L)处理Eca109/ABCG2细胞48h,然后以MTT法检测细胞生长抑制率。采用ADM(0、0.02、0.2、2mg/L),Art(0、0.01、0.1、1μmol/L)和ADM(0.2mg/L)+Art(0.01、0.1、1μmol/L)处理细胞,48h后以流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞内ADM含量,72h后检测细胞内ABCG2蛋白的表达。结果与单独应用Art或ADM相比,Art+ADM处理后,Eca109/ABCG2细胞的生长抑制率、凋亡率和细胞内ADM含量均显著增加(P<0.05),而细胞内ABCG2蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 Art可通过下调Eca109/ABCG2细胞ABCG2蛋白表达,增加细胞内ADM的药物浓度,从而增强疗效、逆转耐药。     

ZNRD1基因的克隆及其反义核酸对胃癌耐药细胞阿霉素蓄积的影响

为获得ZNRD1基因的编友区序列，构建反义真核表达载体，通过检测ZNRD1基因反义核酸转染对胃癌长春新碱耐药细胞SGC7901／VCR阿霉素（ADM）积蓄能力的影响，评价ZNRD1在抗胃癌细胞多药耐药性方面的应用前景。用PCR方法扩增目的基因序列，PCR产物经DNA序列测定证实后，采用分子克隆技术，将所获目的基因全长cDNA片段按反方向克隆入真核表达载体pcDNA3.1^ 的多克隆位点之间，对重组质粒进行酶切鉴定。用脂质体介导法将ZNRD1反义核酸转染SGC7901／VCR，流式细胞仪（FACS）检测SGC7901／VCR细胞内阿霉素的蓄积量。结果应用PCR反应扩增出特异性片段，经DNA序列,下实与文献报道的ZNRD1基因编码区序列一致；构建了反义真核表达载体pcDNA3.1-ZNRD1；转染SGC7901／VCR细胞后，可提高细胞内ADM蓄积量。ZNRD1反义核酸转染后，胃癌多药耐药细胞株SGC7901／VCR对抗肿瘤药物ADM的积蓄作用提高，提示ZNRD1反义核酸具有提高耐药细胞株细胞内药物浓度、恢复其药物敏感性、逆转多药耐药性的作用。     

人卵巢癌拓扑替康耐药细胞株SKOV3/TPT的建立及生物学特性的研究

目的建立人卵巢癌拓扑替康（TPT）耐药细胞株（SKOV3／TPT）,研究其生物学特性和耐药特点。方法模拟临床用药特点,采用大剂量TPT（2160ng／ml）冲击建成人卵巢癌SKOV3／TPT耐药细胞株。MTT法检测多药耐药性,流式细胞仪测定细胞周期、胞内药物的积聚及P糖蛋白（Pgp）表达,从生长曲线、光镜下形态、超微结构等方面比较耐药细胞和SKOV3细胞某些生物学特性的差异。结果成功建立了SKOV3/TPT耐药株,耐药指数为10．67,对喜树碱、米托蒽醌及长春新碱有明显的交叉耐药,对紫杉醇、顺铂、5氟尿嘧啶、足叶乙甙和甲氨蝶呤敏感。与SKOV3细胞相比,SKOV3/TPT耐药细胞倍增时间延长;G2＋M期的比例明显增加（P〈0．01）;细胞内TPT浓度明显减少（P〈0．05）;无Pgp过表达。结论SKOV3/TPT细胞株呈中等水平耐药,耐药性稳定,呈非典型的多药耐药特征;对TPT耐药的主要原因可能与细胞内药物浓度降低和细胞周期改变及凋亡有关,与Pgp的过表达无关。     

外源性白介素12逆转绒毛膜癌细胞JAR/MTX耐药的作用

目的探讨外源性白介素12(IL-12)对绒癌耐药细胞株JAR/MTX的逆转耐药效应。方法将体外培养的绒癌耐药细胞株JAR/MTX分为四组:(1)对照组;(2)化疗组;(3)细胞因子组;(4)化疗+细胞因子组。加药后培养12、24 h,用MTT法检测药物的细胞毒性,用RT-PCR及Western Blot法检测MDR1mRNA和P-gp的表达情况,用流式细胞术检测细胞内底物萤光值强度的变化。结果 (1)外源性IL-12对JAR/MTX的生长抑制作用明显强于甲氨蝶呤(MTX),两药联用后细胞对MTX的敏感性增强。(2)四组细胞MDR1mRNA及P-gp的表达量比较没有明显差别(P>0.05)。(3)加入外源性IL-12的细胞株,胞内底物荧光值强度显著增加(P<0.05)。结论外源性IL-12可通过下调细胞内P-gp的活性来逆转绒癌耐药细胞株JAR/MTX对MTX的耐药效应。     

手背深度烧伤早期治疗不当的原因分析

手为暴露部位 ,烧伤机会多 ,约占 4 4 % 〔1〕。临床上以手背烧伤最多见 ,深度烧伤后如果早期治疗不当常造成严重畸形和功能障碍。我科自 1996年以来共收治手背深度烧伤 98例 ,其中 11例因早期治疗不当造成不良后果。现报告如下 :1　临床资料1 1　一般资料　本组 11例 ,男 7例 ,女 4例 ;年龄2 0岁～ 4 8岁。火焰烧伤 7例 ,热液烫伤 4例 ;手背烧伤为深Ⅱ度～Ⅲ度。入院后手部创面均采用暴露疗法 ,涂ＳＤ—ＡＧ液 ,手的姿势任患者自由摆置。 5例手背深Ⅱ度～Ⅲ度烧伤患者于伤后 3周行创面切削痂游离点状植皮术 ;6例手背深Ⅱ度烧伤患者任其自然…     

毛细支气管炎免疫机理及干扰素疗效研究

本文测定50例毛细支气管炎患儿T淋巴细胞亚群,同时观察干扰素(INF)治疗前后的变化并判定临床疗效,结果表明急性期呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿CD_8细胞明显升高,CD_4/CD_8比值明显降低(P<0.01),CD_3、CD_4细胞与正常对照组比较无明显差异(P>0.05);INF治疗后CD_8细胞显著降低,CD_4/CD_8比值明显升高(P<0.01);且临床疗效及病程均明显优于未用INF组。作者对本病发病机理及INF作用机制进行了讨论。     

八种动物甲状腺组织几何学参数的定量分析(一)

用图象分析仪测定了8种动物甲状腺随机切片的显微照片(经涂墨加工),获得了该组织胶体的二维平面的图象数据。根据体视学原理计算了与胶体有关的几何学参数值,包括体积密度、表面积密度、平均自由程、数密度、平均体积、平均表面积、平均半径以及三维空间截线平均长度。结合对滤泡上皮细胞高、宽的测量结果,进一步计算了与滤泡有关的上述参数值。分析表明,甲状腺对碘的代谢功能与表征胶体结构的5项参数值显著相关。综合胶体的8项参数,各类动物可构成各自的种系星座图;分类判别有很高的正确判别率。     

胰腺囊性肿瘤15例分析

作者报告了该院３０年来经手术及病理证实的１５例胰腺囊性肿瘤，男５例，女１０例，其中囊腺瘤３例，囊腺瘤恶变３例，囊朱癌９例，肿瘤位于胰尾部８例，体尾部６例，胰头部１例。２例有肝转移，１例肿瘤浸润胃后壁，根治生切除１０例，单纯肿瘤切除、肿瘤切除加肝转移瘤局部切除、囊腺癌内外引流、肿瘤活检各１例。术后死亡１例。随访１２例，１０例效果满意，２例囊腺癌行内外引流者术后６、９个月死亡。文中讨论了胰腺囊性肿瘤的     

大规模猪肝细胞低温保存方法的建立

目的　建立大规模猪肝细胞的低温保存方法以满足生物型人工肝治疗的需要。方法　用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离出猪肝细胞 ;加入本实验室配制的含有 10 %二甲基亚砜 (dimethylsulfoxide,DMSO)的营养液中 ;分别采用两种降温方法使 (12 )× 10 10 猪肝细胞保存在 - 196℃液氮中 ;1个月后复温 ,观察在同一条件下培养不同时间后猪肝细胞形态、存活率和白蛋白、尿素、葡萄糖合成功能及对利多卡因的转化功能。结果　用两种降温方法保存的肝细胞 ,复温后细胞的存活率均较高 (梯度降温组和程控降温组存活率分别较冻存前降低了 4 7%和 8 6 %) ,其中前者肝细胞的尿素、葡萄糖合成功能较后者高。结论　所建立的冻存方法简单易行 ,可保存大量的猪肝细胞。     

益欣康泰胶囊对老龄小鼠体内睾酮水平的影响

目的：研究益欣康泰胶囊对老龄小鼠体内睾酮的影响。方法：选用昆明种雄性小鼠５０只,随机分为五组,即对照组,阳性药物组及益欣康泰胶囊高,中,低剂量组,分别灌服蒸馏水,红参水煎液及益欣康泰胶囊高,中低,剂量的水溶液,于第１０天时统一在颈动脉取血做Ｔ测定;结果：红参组及益欣康泰胶囊三组与对照组比较,灌服益欣康泰胶囊后Ｔ含量明显升高,益欣康泰胶囊高剂量组与红参组比较Ｔ明显升高;     

结肠息肉癌变相关因素分析

目的　更好地认识癌变息肉的临床特点 ,找出与癌变息肉相关的因素 ,为临床初步判断息肉的性质提供依据。方法　回顾整理连续 4年内资料完整可用的结肠息肉病例 ,分析性别、年龄、息肉部位、数目、是否有蒂、黏膜情况、是否分叶、病理类型、息肉大小、不典型增生程度等因素。结果　单因素分析显示癌变与未癌变息肉在大小、黏膜情况、不典型增生程度、病理类型、是否分叶状等因素方面的差别具有统计学意义。逐步Logistic分析显示与癌变息肉独立相关的因素包括息肉大小、不典型增生程度、黏膜情况、是否有蒂及病理类型。结论　息肉越大、病理为腺瘤、不典型增生程度越重、黏膜有糜烂甚至溃疡、亚蒂或无蒂是与癌变息肉独立相关的因素 ,以上因素符合的越多则该息肉为恶性的可能性越大     

Ⅲ级胎盘亚分级的显微结构观察及体视学分析

目的:探讨Ⅲ级胎盘超声亚分级显微结构改变。方法:利用光镜观察各亚级胎盘的组织显微结构形念变化,并用体视学方法进行组织计量学分析。运用电子显微镜观察各亚级胎盘的组织超微结构形态变化。结果:两组胎盘显微结构形态学上有明显变化,组织计量学分析发现血管合体膜数、合体结节数、纤维素样坏死、绒毛间隙距离、绒毛血管直径等指标两组胎盘有非常显著差异,P<0.01。结论:ⅢA亚级胎盘和ⅢB亚级胎盘在组织学改变方面有明显差异,Ⅲ级胎盘超声亚分级有足够的组织学依据支持。     

Semmes-Weinstein单丝检测糖尿病足部神经感觉的应用研究

应用５．０７／１０ｇ Ｓｅｍｍｅｓ－Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ Ｍｏｎｏｆｉｌａｍｅｎｔ（单丝）随机检测１３２例糖尿病患者右足５个部位的感觉,结合足部震颤阈值分析研究每个单丝的敏感性和特异性。同时应用弯曲力分别为５ｇ和１５ｇ的单丝随机对２００例糖尿病患者右足５个部位进行检测。     

卵巢破裂28例临床分析

我院从 1992 - 0 1～ 2 0 0 0 - 12收治 2 8例卵巢破裂出血病人。其中经手术治疗 2 3例 ,另 5例保守治疗 ,均获治愈。现分析如下 :1　临床资料1 1　一般资料　年龄 18岁～ 4 9岁 ,平均年龄 2 8 6岁。其中已婚 2 6例 ,生育 1胎 2 1例 ,2胎 1例 ,5胎 1例 ,未孕 3例 ;未婚 2例。置环 2 5例。1 2　临床表现　 2 8例患者的月经周期为 2 5ｄ～ 5 0ｄ ,>30ｄ者 3例。急腹症发生时间在月经周期第 9ｄ～60ｄ。其中卵泡囊肿破裂者在第 15ｄ～ 18ｄ ,卵巢黄体血肿破裂者在第 9ｄ～ 14ｄ 6例 ,第 15ｄ～ 2 0ｄ 4例 ,第2 2ｄ～ 30ｄ 8例 ,第 4 5ｄ～ 60ｄ…