扫描电子显微镜下SD（Sprague-Dawley）大鼠舌乳头的形态观察

目的 观察大鼠舌乳头在扫描电子显微镜下的形态.方法 取健康大鼠舌组织,充分清洗,制成扫描电子显微镜样品.结果 扫描电子显微镜下,大鼠舌背侧粘膜表面可见四种类型舌乳头:即丝状乳头、菌状乳头、轮廓乳头和叶状乳头,其中丝状乳头在舌的不同部位其形态不同.结论 丝状乳头是SD大鼠的特征性舌乳头.     

肝细胞生长因子/扩散因子和血管内皮生长因子对肿瘤血管再生的影响

目的：探讨肝细胞生长因子/扩散因子(HGF/SF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)联合应用对肿瘤血管再生的影响。方法：用血管内皮细胞增殖和毛细血管形成实验检测HGF/SF和VEGF对培养皿中人脐动脉血管内皮细胞(HUAECs)增殖和血管形成的影响。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养基中HGF/SF和VEGF的含量, 检测这两种细胞因子是否相互影响。用大鼠角膜血管形成实验检测HGF/SF和VEGF对大鼠体内血管形成的影响。结果：HGF/SF和VEGF对血管内皮细胞增殖和毛细血管形成均有明显的促进作用,并且含HGF/SF的培养基中检测到VEGF的存在。结论：HGF/SF和VEGF的联合应用对肿瘤血管形成有协同作用,HGF/SF可能具有刺激血管内皮细胞产生VEGF的作用。     

高血糖对大鼠丝状乳头、菌状乳头及味蕾的影响

目的 探讨高血糖对丝状乳头、菌状乳头及味觉感受器的影响,为临床糖尿患者味觉功能紊乱的诊断、评估与治疗提供形态学资料.方法 30只健康雄性SD大鼠按体质量随机分为正常对照组(n=14)和糖尿病组(n=16).以链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性腹腔注射建立1型糖尿病模型.普通饲料喂养12周后取舌组织,以亚甲蓝染色光镜下观察两组大鼠舌菌状乳头数目以及类型.采用HE染色并在光镜下观察两组大鼠菌状乳头、味蕾的组织学变化.采用Phtoshop软件测量味蕾的大小、面积,并以SPSS15.0统计软件进行数据分析.结果 与对照组比较,糖尿病组大鼠味蕾数目减少、味蕾面积显著缩小(P<0.01),但两组间乳头总数差异无统计学意义(P>0.05);对照组大鼠菌状乳头91.1%为有孔菌状乳头,8.9%为无孔菌状乳头,未发现丝状样变的菌状乳头;与对照组比较,糖尿病组大鼠有孔菌状乳头数仅占59.1%,无孔菌状乳头数目显著增多,差异有显著统计学意义(P<0.01),并且出现丝状样变的菌状乳头.结论 1型糖尿病大鼠味觉感受器表现出一系列萎缩的形态学改变特征;菌状乳头味蕾的面积与味觉敏感性相关.     

人舌背表面的扫描电镜研究

用扫描电镜观察清除了细胞外物质后的人舌表面细微结构:丝状乳头遍布舌背,略呈前外-后中方向排列,轻度向后倾斜。菌状乳头在丝状乳头之间,顶部呈火山口状。叶状乳头在舌后部侧缘。轮廓乳头顶部也呈火山口状,外周有1～2条深沟环绕。表层细胞脱落后乳头表面仍见到细胞之间的连接,乳头表面的微皱折清楚。     

Study on the mechanism of denuded tongue coating due to yin deficiency

Denuded tongue coating is an important sign of serious Yin deficiency. The total number of exfoliated cells increased in the imprint of a Yin-deficient tongue. Not only the cells of the superficial layer but those of the middle layer appeared. Many necrotic cells could also be seen. This picture showed that the cell exfoliation rate of a Yin-deficient tongue was faster than in a normal tongue, caused chiefly by the degeneration and necrosis of the epithelial cells. It is believed that cell necrosis is the principal feature of the Yin-deficient tongue. This is in accordance with the TCM theory that denuded tongue coating is due to exhaustion of Yin fluid. Study on lingual morphology: The filiform papillae disappeared in slices of Yin-deficient tongue. The fungiform papillae had atrophied, the number of strata of epithelial cells reduced, and there were no complete keratinocytes or granules, tonofilaments and membrane coating granules in the cytoplasm. Observation of the microcirculation of fungiform papillae of a Yin-deficient tongue showed: the structure of vessels was abnormal, blood flowed slowly, red blood cells aggregated and the vessels dilated. Microcirculation of the blood was stagnant. The disturbance of microcirculation could accelerate the abnormal metabolism of lingual epithelial cells and cell necrosis, resulting in denuded tongue coating. Analysis of salivary zinc level: The salivary zinc level (0.232 micrograms/ml) of the patients with Yin-deficient tongue was significantly higher than that of healthy subjects (0.099 micrograms/ml). Zinc can affect the formation and function of nuclear spindle in cellular mitosis. The change of zinc level may be a pathogenic factor in Yin-deficient tongue.     

转染逆转录病毒的VEGF在兔骨髓基质干细胞内的表达

目的 :检测逆转录病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF1 65)基因转染兔骨髓基质干细胞 (BMSC)后目的基因表达情况及促血管生成作用 ,为进一步将其用于血管化组织工程骨构建奠定基础 .方法 :构建含VEGF基因的逆转录病毒表达载体 ,通过感染兔BMSC 使其获得稳定表达 ,使用免疫组化的方法检测其蛋白表达 ,并通过新生血管计数观察其促血管生成作用 .结果 :成功构建VEGF逆转录病毒表达载体 ,免疫组化方法显示经感染的BMSC 胞质中有阳性棕色颗粒出现 ,且动物实验显示新生血管计数明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) .结论 :采用逆转录病毒介导的基因转移技术可将VEGF基因转染至BMSC 中 ,可获得外源性蛋白的表达 ,且有明显的促血管生成作用 .     

舌黏膜血管铸型扫描电镜观察及其临床意义

目的 为中医舌诊和外科舌瓣设计提供解剖学依据。方法 6具新鲜的胎儿尸体经血管铸型后在扫描电镜下观察。结果 舌深动脉长支和舌背动脉终支在舌黏膜下形成一完整的致密动脉网,跨越舌中线,成为一整体。由动脉网发出微动脉支进入舌黏膜内,形成黏膜内的毛细血管网和各种乳头毛细血管丛。结论 舌黏膜两侧血管吻合丰富,可选用舌黏膜肌瓣修复创面,并为舌诊提供了形态学基础。     

Relationship between Eukaryotic Translation Initiation Factor 4E and Malignant Angiogenesis in Non-Hodgkin Lymphoma

The relationship between angiogenesis and eukaryotic translation initiation factor 4E （EIF4E） expression level in non Hodgkin lymphoma （NHL） was studied. Mean microvessel density （MVD） and EIF4E were detected in 52 lymph node samples paraffin sections of patients with newly diagnosed NHL by the way of immunohistochemistry. Antisense EIF4E cDNA was cloned into plasmid pcDNA3.1 （＋） and transfected into Raji cells. A series of angiogenesis related factors,including vascular endothelial growth factor （VEGF）, matrix metalloproteinases 9 （MMP-9） and tissue inhibitor of metalloproteinases-2 （TIMP-2） proteins were detected by Western blot. The results showed that： （1） The Expression of EIF4E and MVD was higher in aggressive lymphomas than in indolent lymphomas（P〈0.05）and the expression of EIF4E was positively correlated with MVD in lymph node of NHL（r=0. 695, P〈0.01）. （2） Antisense EIF4E eukaryocytic expression vector （pcDNA3. 1-EIF4Eas） was constructed successfully. （3） EIF4E, VEGF and MMP-9 were expressed at high levels in Raji cells as compared to normal human peripheral blood monocular cells （NHPMC）, and blockage of EIF4E expression brought down the expression of VEGF and MMP-9. However, TIMP-2 was undetectable in Rail cells, although a moderate level of TIMP-2 was detected in NHPMC. It was concluded that the increased EIF4E expression was associated with aggressive property of NHL.     

血管内皮生长因子受体结合肽介导颗粒酶B靶向性抗肿瘤血管生成

目的　观察血管内皮生长因子受体 (VEGFR)结合肽 -颗粒酶 B(Gra B)融合蛋白抗血管生成的作用 .方法　抽提人外周血淋巴细胞总 RNA,进行 RT- PCR克隆 Gra B c DNA;抽提 L o Vo细胞总 RNA,进行 RT- PCR克隆 VEGFR结合肽c DNA,用限制性酶切和 DNA测序进行鉴定 ;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)分析表达产物 .表达产物经亲和层析纯化后 ,以人血管内皮细胞 (ECV30 4 )和鸡胚尿囊膜血管测定其生物学活性 .结果　表达产物以可溶性分子形式存在于菌体中 ,具有良好的抗原性和特异性 ,且具有抑制血管内皮细胞增殖及破坏鸡胚尿囊膜血管形成的活性 .结论　 VEG-FR结合肽 - Gra B融合蛋白具有抑制血管生成的功能 ,在肿瘤生物靶向治疗中有一定潜在价值     

MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF自分泌及体外成管作用的影响

 目的 研究人乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)自分泌及体外成管作用的影响,探讨肿瘤细胞源exosome在肿瘤微环境中对血管内皮细胞血管生成的调控作用。方法 低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF的变化水平;Western blot技术检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF、VEGFR2及p VEGFR2的蛋白表达情况;RT PCR法检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达情况;观察HUVEC与exosome共培养24 h后的体外成管能力。 结果 HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF为(110.851±18.404)pg/mL,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);Western blot结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF和p VEGFR2的蛋白表达水平均增加(P＜0.05);RT PCR结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达水平增加(P＜0.05);体外成管实验显示,exosome显著提高了HUVEC的管腔形成能力(P<0.05)。结论 乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome促进了血管内皮细胞VEGF的表达及分泌,激活了血管内皮细胞VEGF/VEGFR2自分泌环并提高了血管内皮细胞的体外成管能力,对促肿瘤血管生成有一定的调控作用。     

人轮廓乳头处味孔的扫描电镜观察

目的:观察味蕾的味孔超微结构并讨论其与味觉感受性的可能关系。方法:扫描电镜观察成人轮廓乳头。结果:味孔多分布于轮廓乳头环沟侧壁下部近沟底处,呈卵圆形或圆形,味孔下方为味小管,呈漏斗状或管状,管底部中央有圆形小孔。电镜下可见部分味毛较短,止于味凹;另有少部分味毛较长,伸出味凹且止于味孔。结论:成人轮廓乳头处,味孔多分布在环沟侧壁下部近沟底处,以卵圆形居多。味孔形态及分布与味觉功能密切相关。     

皮肤血管瘤的组织学分型和鉴定

目的 :探讨皮肤血管瘤的组织学分型标准。方法 :采用组织学常规切片技术和HE染色法对临床皮肤血管瘤标本进行病理复检 ,用免疫组织化学方法检测复检后各期血管瘤和血管畸形中血管内皮生长因子 (vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)的表达 ,结合图像分析技术对组织学分型后的标本进行分析鉴定。结果 :将 35例标本分为血管瘤 2 0例 ,其中增生期 8例 ,退化期 12例 ;血管畸形 15例。增生期血管瘤表现出明显的血管内皮细胞增殖、血管生成 ,VEGF表达强阳性 ;退化期血管瘤血管管腔扩张、退化 ,管壁细胞数减少 ,VEGF表达极弱 ;血管畸形中血管极度扩张 ,VEGF表达极弱。结论 :血管瘤和血管畸形组织形态学上的变化反映了各自的功能活动状态     

血管生成因子在脑血管畸形的表达

对实验组 2种不同类型脑血管畸形〔脑动静脉畸形 (AVMs)及海绵状血管瘤 (CMs)〕标本、对照组正常脑组织血管标本、阳性对照组血管网状细胞瘤标本进行免疫组化染色 ,观察 2种血管生成因子〔血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)〕在AVMs和CMs中的表达 ,按照血管同一部位着色强度将结果分为 3级。结果发现 :4 4例试验标本中VEGF表达均为阳性 ,VEGF在AVMs与CMs中的表达不同 ,存在显著性差异 (P <0 .0 1 )。VEGF表达与AVMs经否术前栓塞、有无出血无关 ,与CMs有无出血有关 (P <0 .0 5)。提示血管生成因子在所有类型脑血管畸形都有表达 ,血管发生机制可能是广泛弥散激活 ,而与各种血管类型无关。     

建立仿人类胚胎早期血管发生的芽生类胚体模型

目的 以分化后人胚胎干细胞为材料,建立仿人类早期胚胎血管发生的芽生类胚体模型.方法 将未分化人胚胎干细胞以类胚体(EB)的形式诱导分化,再以不同的血管生成刺激因子作用于类胚体、进行芽生类胚体的二次诱导,摸索芽生类胚体的最佳培养条件;并以LDL吞噬法、免疫荧光抗体标记以及培养体系中加入血管生成抑制因子等方法检测芽生类胚体中是否存在人胚胎干细胞分化后的早期血管内皮细胞.结果 (1)分化第11天的类胚体已能够在胶原基质中形成芽状分支,彼此间还能互相连接形成网络状结构.(2)在含有血管内皮生长因子(VEGF)、酸性成纤维细胞生成因子(FGF)的胶原基质中,从EB中伸展出的芽状分支能吞噬Dil-AcLDL、表达CD31、具有类似于血管腔的三维中空结构,称为芽生EB.刺激芽生EB发生的细胞因子最佳浓度为:VEGF50ng/ml,FGF 100 ng/nd.(3)芽生EB间的网络状结构,能被血管生成抑制因子内皮抑素和PF4抑制.结论 芽状结构中含有由人胚胎干细胞分化而来的内皮细胞,芽生EB是研究人类胚胎发育过程中早期胚胎血管生成的一种模型.     

人脑星形胶质细胞瘤血管内皮生长因子表达、血管生成及细胞增殖活性的研究

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)在星形细胞瘤中的表达,探讨VEGF与肿瘤血管生成和细胞增殖的关系.方法 SP免疫组化法对64例星形细胞瘤的VEGF和PCNA表达进行观察.CD31单克隆抗体免疫组化染色显示微血管,用微血管计数(MVC)测定肿瘤血管生成.结果 VEGF蛋白主要分布在高级别胶质瘤组织的瘤细胞和内皮细胞,低级别胶质瘤呈低表达,且与PCNA的表达成显著正相关(r=0.991,P＜0.01);高级别胶质瘤MVC显著高于低级别胶质瘤.结论 VEGF可能参与胶质瘤血管生成,对胶质瘤的恶性进展起促进作用,PCNA较能客观地反映肿瘤的恶性程度.     

人血管内皮生长因子165的克隆和在大肠杆菌中的表达

克隆和在大肠杆菌中表达人血管内皮生长因子１６５（ＶＥＧＦ１６５）。方法利用ＰＣＲ的方法从胎脑ｃＤＮＡ库扩增得到人ＶＥＧＦ１６５的全长ｃＤＮＡ并测定其核酸序列。利用基因重组技术构建ＶＥＧＦ１６５的原核表达载体，并在大肠杆菌中进行表达，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达产物。结果经测序表明，克隆的ＶＥＧＦ１６５与文献报道相符，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果表明经用ＩＰＴＧ诱导后，ＶＥＧＦ１６５在大肠杆菌中表达出。结论克隆和表达出ＶＥＧＦ１６５，为以后进一步研究ＶＥＧＦ１６５的功能奠定了基础     

苏拉明对肺癌血管生成的抑制作用

目的　研究苏拉明对肺癌血管生成的抑制作用及其机制。方法　采用细胞培养和免疫组织化学的方法离体研究肺癌A5 49细胞、人血管内皮ECV 30 4细胞VEGF及其受体 (Flt、KDR)的表达及苏拉明的影响。结果　苏拉明对肺癌细胞产生和分泌VEGF无影响 ;ECV 30 4细胞KDR、Flt的蛋白表达在苏拉明浓度为 0 .2 5ng/ml和 2 .5ng/ml时 ,受到显著抑制 ;而苏拉明浓度为 0 .2 5ng/ml和 2 5ng/ml时Flt的表达 ,以及苏拉明浓度为 2 .5ng/ml和 2 5ng/ml时KDR的表达则无明显变化 (与对照组比较 ,P >0 .0 5 ) ;苏拉明对A5 49、ECV 30 4细胞增生无影响。结论　苏拉明抑制肺癌血管生成的作用机制可能是通过抑制血管内皮细胞上的VEGF受体表达 ,减少VEGF与其受体结合所致。     

血管内皮生长因子受体KDR胞外区基因对裸鼠人膀胱癌生长的影响

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)受体KDR胞外区基因对肿瘤新生血管的抑制作用.方法采用脂质体转染技术,将KDR胞外区基因的真核表达质粒pcDNA3.1/KDRn7转入人膀胱癌EJ细胞,用G418筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞克隆,经固相结合实验筛选得到表达与VEGF特异结合的目的蛋白的细胞克隆,阳性细胞克隆进行了RT-PCR鉴定.结果鸡胚测活表明,EJ细胞表达rKDRn7的能抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管形成;表达rKDRn7的EJ细胞株对裸鼠人膀胱癌生长及血管生成明显抑制,实验组的微血管密度(MVD)为12±4,阴性对照组62±11.结论阻断VEGF/KDR信号传导途径能够抑制肿瘤新生血管的形成,延缓肿瘤的生长速度.     

LNG-IUS对腺肌症子宫内膜VEGF、Ang-1、Ang-2的影响

目的研究子宫腺肌症患者放置左炔诺孕酮宫内缓释系统（LNG-IUS）后子宫内膜血管内皮生长因子（VEGF）、促血管生成素（Ang-1、Ang-2）表达的变化,从血管生成及血管稳定性方面探讨子宫腺肌症患者放置LNG-IUS后不规则出血的发生机制。方法收集41例放置LNG-IUS腺肌症患者的子宫内膜,应用免疫组化染色（DAKO EnvisionTM System法）检测其子宫内膜VEGF、Ang-1、Ang-2的表达水平,同时设立子宫腺肌症对照组（16例）。结果放置LNG-IUS后异常出血组（16例）子宫内膜VEGF、Ang-2表达较无异常出血组（25例）增高,差异有统计学意义（P〈0.05）;而Ang-1在异常出血组与无异常出血组子宫内膜的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。根据LNG-IUS放置年限不同,将放置LNG-IUS的患者分为放置1年内组、放置1～2年组、放置2年以上组。放置1～2年组、放置2年以上组子宫内膜VEGF、Ang-2表达比放置1年内组低,差异有统计学意义（P〈0.05）。Ang-1在不同放置年限组间差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 VEGF、Ang-1、Ang-2可能通过影响微血管生成及血管稳定性参与LNG-IUS的出血副反应。     

血管内皮生长因子及其受体Flt-1在乳腺癌中的表达及意义

目的　试图揭示血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (Flt 1)在乳腺癌组织中的表达规律 ,探讨其与血管生成和肿瘤浸润、转移等生物学行为的关系。方法　应用原位杂交和免疫组织化学技术 ,检测 4 8例乳腺癌组织中VEGF和Flt 1的mRNA和蛋白表达特性。结果　乳腺癌细胞高表达VEGFmRNA和蛋白 ,阳性率分别为 75 %、70 8% ,而血管内皮细胞几乎不表达 ;血管内皮细胞主要表达受体Flt 1mRNA和蛋白 ,阳性血管数分别为 2 6个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 、2 4个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 ,而少数癌细胞有少量表达 ;VEGF和Flt 1高表达组血管密度明显高于低表达组 ;VEGF和Flt 1表达与组织学分级和淋巴结转移密切相关。结论　VEGF以旁分泌途径促进乳腺癌血管形成 ,并参与肿瘤浸润和淋巴道转移过程 ,检测VEGF和Flt 1表达可做为判定乳腺癌血管生成、恶性度以及浸润转移等生物学行为的可靠指标。