淋巴细胞肿瘤病人外周血单个核细胞中Elf-1基因表达特点

目的　了解T细胞特异性转录因子Elf-1基因在T细胞和B细胞肿瘤病人中的表达特点。方法　采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测20例健康人外周血及49例淋巴细胞肿瘤病人[急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）7例、T细胞非霍奇金淋巴瘤（T-NHL）6例、急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）10例、慢性B淋巴细胞白血病（B-CLL）7例和B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）19例]外周血单个核细胞中Elf-1基因表达情况,以β2微球蛋白基因（β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算Elf-1基因表达水平。结果　与健康对照组（2.044±1.321%）相比,T细胞肿瘤组（12.050±10.334%）与B细胞肿瘤组（14.144±21.576%）患者外周血Elf-1基因表达均明显上升（P<0. 01,P<0. 01）。T细胞肿瘤组Elf-1基因表达水平与B细胞肿瘤组的差异无统计学意义（P>0.05）。但五种类型淋巴细胞肿瘤Elf-1基因表达水平有所不同,其中以B-ALL最高,T-ALL次之,而B-NHL组的Elf-1基因表达水平最低。结论　Elf-1基因在T细胞和B细胞肿瘤病人外周血单个核细胞中均呈高表达状态,其表达上调可能与机体T细胞免疫缺陷相关。     

淋巴细胞白血病免疫学分型的研究

本文用绵羊红细胞花环(ES)方法检测T细胞,用OKT_(10)单克隆抗体间接免疫荧光法检测前T (胸腺)细胞,用直接免疫荧光法检测膜表面免疫球蛋白阳性的B细胞和细胞浆内μ链阳性的前B细胞等四种方法,对淋巴细胞白血病患者的外周血淋巴细胞进行五型法免疫学分型。其结果在15例急性淋巴细胞白血病(ALL)中有9例属于无标志型,3例属于前B细胞型,3例属于B细胞型。未发现T细胞和前T细胞型。6例慢性淋巴细胞白血病(CLL)均属于B细胞型。     

正常人不同淋巴细胞的酸性非特异性酯酶染色

本文采用混合花环试验(Zy-C+E)结合ANAE染色法测定了30名献血员外周血T、B、N、D四群淋巴细胞的ANAE活性,以探讨ANAE活性与T细胞的关系.结果证明绝大多数(88.55±2.5%)T细胞(E花环形成细胞)ANAE阳性,E花环形成率(65.1±4.4%)与淋巴细胞ANAE阳性率(65.3±4.5%)呈明显正相关(γ=0.82,P<0.0005).鉴于ANAE染色法简便易行,因此,可作为检测T细胞的方法应用于临床及实验研究.     

慢性淋巴细胞白血病的临床免疫分型和细胞周期分析

15例慢性淋巴细胞白血病(CLL)用一组单克隆抗体作免疫分型。13例为B-CLL,主要表型为CD20~+、HLA-Dr~+、SmIg~+、CD5/Em~+。2例T-CLL,1例Ts-CLL,1例为Dr~+的T-CLL。CLL骨髓中Go+G_1期细胞为91.1±2.3％(对照76.0±5.1％),S+G2M期细胞为8.9±2.3％(对照23.9±5.1％),外周血中各种周期的细胞比例与骨髓无显著差别。3例CLL在病程中发生幼淋样变。对CLL的临床过程,细胞化学,和免疫学改变作了分析。     

淋巴细胞白血病30例免疫学分型研究

本文应用一组抗淋巴细胞膜分化抗原单克隆抗体,对30例急、慢性淋巴细胞白血病进行免疫学分型研究。结果表明,23例急性白血病中有8例为T细胞型(T-ALL),12例为前B细胞型(preB-ALL),3例为未分化型白血病。8例慢性淋巴细胞白血病可以分为两个亚型。     

白血病患者IL-2活性水平的定量分析

采用依赖白细胞介导素2(IL-2)的 CTLL-2建株细胞作为检测系统,用人重组 IL-2作对照(参照 NCI 所定的 u/ml),对15例白血病初发期患者、6例缓解期患者和26例正常人的外周血单个核细胞用 PHA-M 刺激,定量测定其 IL-2产量。结果表明:(1)正常人群中 IL-2活性水平为359.6±37.7u/ml;(2)白血病初发期患者 IL-2活性水平为251.5±184u/ml,其中11例低于或接近正常水平,占73%;(3)白血病缓解期患者 IL-2活性水平高于正常人群和初发期患者,为521±316u/ml。以上结果对研究白血病患者的免疫状态和选用适当的治疗方案有实际意义。     

慢性胃炎患者胃粘膜T细胞及IgG-、IgM-、IgA细胞的分布

作者用ANAE组化和免疫组化法,观察慢性胃炎53例及正常对照19例,胃粘膜T细胞及IgG-、IgM-IgA细胞的分布。Ig细胞为115±45/mm~2,T细胞为19±10/mm~2,成6:1。B细胞中IgG-,IgM-和IgA细胞之比为31:14:55。浅表性胃炎IgM-和IgA细胞增加2.7和2.4倍。B型萎缩性胃炎T细胞和IgG细胞增     

南京地区健康成年人外周血淋巴细胞亚群正常值调查

目的 :建立健康成年人外周血淋巴细胞亚群正常参考值。方法 :使用美国Becton Dickinson(B D)公司生产的双标荧光抗体 ,分别对 2 98例健康成年人外周血淋巴细胞亚群进行标记 ,用B D公司的FACSCaliburTM型流式细胞仪进行检测并分析结果 ,SPSS 10 0软件进行统计学处理。结果 :18～ 5 7岁健康成年人外周血中CD3 + 、CD3 -、CD19+ 、CD3 +CD4+ 、CD3 + CD8+ 及CD3 -CD(16+ 56) + 细胞数分别为 6 6 6± 8 7、11 3± 4 1、35 9± 6 7、2 9 7± 7 9及 2 1 2± 9 1。CD3 +CD4+ 与CD3 + CD8+ 的比率为 1 35± 0 75。男女之间CD3 + 、CD3 + CD4+ 及CD3 -CD(16+ 56) + 细胞数有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :在相同地域、相同种族 ,可以建立健康成年入外周血淋巴细胞亚群正常参考值。     

118例儿童急性白血病免疫分型特点分析

目的:探讨儿童急性白血病免疫分型特点。方法:采用流式细胞术对郑州市儿童医院118例初治儿童急性白血病患者进行白血病细胞表面抗原检测,并分析其免疫学特点。结果:①118例儿童初治白血病患者中,其免疫学分型与FAB分型符合率为94.9%(112/118)。②在118例儿童初治急性白血病中,58.5%(69/118)的患儿为急性B淋巴细胞白血病(B-ALL),CD19、CD22、CD10及CD20的表达率分别为98.6%、92.9%、87.1%和51.4%;34.7%(41/118)的患者为急性髓系白血病(AML),其CD13、CD33、CD117及CD64的表达率分别为92.6%、92.6%、87.8%和26.8%。在118例初治白血病中,急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)7例占5.9%,主要表达CD2、CD7、CD5、CD3,表达率分别是100%、100%、85.7%、71.4%。③41例急性髓系白血病伴淋巴系抗原表达占26.8%(11/41),主要是CD7、CD19;急性淋巴细胞白血病伴髓系抗原表达占23.2%(16/69),主要表达CD13、CD33。结论:应用流式细胞术对儿童急性白血病进行免疫分型诊断能够弥补FAB分型的不足,为个体化治疗和评估预后提供信息。     

急性白血病免疫分型与FAB分型的相互关系

目的 探讨急性白血病的FAB分型与免疫学分型的相互关系,分析并确立免疫分型在急性白血病分型诊断中的临床价值及意义.方法 对依据FAB分型初诊的72例患者进行流式细胞术(FCM)的免疫分型,对两种方法进行了比较分析.结果 1.在40例经FAB分型诊断为AML的病例中,有38例细胞形态学诊断与免疫表型相符合.2.28例FAB分型诊断为ALL的病例中,通过免疫表型的分析检测可明确的区分为T-ALL(9例)和B-ALL(18例)以及T、B混合型ALL(1例).结论 比较FAB与免疫学分型,在AML中白血病抗原表达的专一性不如ALL强,不如细胞学直观、分型仔细;在ALL中,免疫学分型显示出其独特的价值和不可替代的作用.     

急性髓细胞白血病的免疫表型异质性及治疗特点

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)的免疫表型异质性及治疗特点。方法111例初发的成人AML,常规骨髓细胞瑞氏染色及细胞化学染色进行FAB分型,用单克隆抗体标记经流式细胞仪对骨髓细胞进行白血病细胞免疫分型。每个病例用标准方案诱导1个疗程后复查血液学缓解情况。结果111例FAB分型为AML的病例中,免疫学分型为Ly-AML79例(71.2%),Ly -AML30例(27%),急性混合细胞白血病(acute mixed-lineage leukemia,AMLL)2例(1.8%)。在Ly -T-AML中,T细胞表面抗原以CD7表达率(89.5%)最高,CD2(22.2%)次之。在Ly -B-AML中,B细胞表面抗原以CD19表达率(66.7%)最高,CD10(33.3%)次之。用标准诱导缓解方案治疗后,Ly-AML患者CR率63.3%,Ly -AML患者CR率40%,两者CR率差异有显著性(P=0.028)。结论白血病细胞免疫分型可客观反映细胞来源及分化阶段,经标准诱导缓解后,Ly-AML患者CR率高于Ly -AML患者。     

PCR-SSCP分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变及意义

目的 研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变情况。方法 采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测63例不同免疫分型ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果 63例ALL患者经PCR扩增发现41例(65.1%)FLT3基因检测阳性,其中前前B细胞ALL、前B细胞ALL、成熟B细胞ALL及T细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率分别为93.3%(14/15),77.8%(14/18),41.7%(5/12)和28.6%(4/14);前前B细胞ALL和前B细胞患者ALLFLT3基因检测阳性率84.8%,显著高于成熟B细胞ALL(41.7%,P<0.005);B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率为73.3%,显著高于T细胞系ALL患者(28.6%,P<0.001)。63例ALL患者中仅有2例(3.2%)出现FLT3/ITD基因突变,均为伴有两种髓系抗原表达、免疫学检查诊断为急性混合细胞白血病患者,均伴有外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例,预后较差。结论 B细胞系ALL和T细胞系ALL患者DNA水平均可检测出FLT3基因,但B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于T细胞系ALL;B细胞系ALL中细胞分化越成熟则FLT3基因检测率阳性越低。ALL患者一般不出现FLT3/ITD基因突变,FLT3/ITD基因突变检测可能有助于急性白血病基因分型及预后判断。     

AgNOR在淋巴细胞白血病鉴别诊断中的意义

对10例正常骨髓的淋巴细胞和25例淋巴细胞白血病的骨髓细胞进行AgNOR染色。结果正常淋巴细胞、急性淋巴细胞白血病L_1,L_2,慢性淋巴细胞白血病(慢淋)的AgNOR/核分别为1.13±0.25,4.74±0.34,6.93±0.44和1.38±0.17。因此认为AgNOR不但对淋巴细胞白血病的诊断及亚型鉴别具有重要意义,而且可望作为鉴别慢淋和幼稚淋巴细胞白血病(幼淋)提供一种快速简便的方法。     

急性淋巴细胞白血病的免疫学分型

对56例未经治疗的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血淋巴细胞进行了绵羊红细胞(SE)与猴红细胞(RhE)的自然玫瑰花形成及 EA(抗体包被牛红细胞)和 EAC(抗体和补体包被的牛红细胞)玫瑰花形成的研究。在42例儿童病例中19例的淋巴母细胞百分率>50%,其中4例 E一玫瑰花成花细胞(E-RFC)>49%,被归为 T 细胞型白血病,其余15例为 N 细胞型(E-RFC<30%;EA-和 EAC-RFC<10%)。外周血淋巴母细胞低于4.0%者23例未能分类。成年病例中28.5%为 T-细胞型,69.2%为 N-细胞型,1例成人患者无 E-玫瑰花形成,而 EA 和 EAC 玫瑰花分别为40%和31%,被划为 B 型。N-ALL 儿童患者的 RhE-RFC 高于 T-ALL,据此我们认为 RhE 玫瑰花形成可能在 ALL 免疫学分型中具有某些特别意义。     

高效液相色谱(反向法)测定尿中新喋呤对恶性肿瘤诊断价值的初探

用高效液相色谱仪测定尿中微量新喋呤(N)含量。其结果:正常人40例尿中N值为4.955±3.865μmol/L,N/C为0.505±0.535。恶性肿瘤病人(100例)尿中N含量为13.43±13.28μmol/L,N/C为1.35±0.687,P<0.01,显著高于正常人。各种癌瘤病人中以白血病及宫颈癌病人N/C比值升高最明显。尿中N含量与肿瘤的消长呈正相关。故监测尿中N含量及变化,可做为诊断指标之一及有助于疗效观察。推测N可能是效应T细胞的产物。现已用于临床预测移植排斥反应的一项指标。     

成人隐匿性自身免疫糖尿病CD4+调节性T细胞研究

目的 观察成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)患者CD4+CD25+T细胞和CD4+ T细胞的FOXP3 mRNA表达,探讨其免疫学的发病机制.方法 LADA患者67例,2型糖尿病30例,正常对照30例,通过流式细胞术检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+ CD25+ T细胞阳性细胞百分率.采用磁珠分离CD4+T细胞,用实时-PCR方法,半定量检测CD4+T细胞的FOXP3 mRNA表达水平.结果 LADA患者比正常对照组,CD4+CD25+T细胞升高(4.1±1.9 vs 2.8±1.5,P＜0.01),CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例升高(11.9±5.0 vs 8.2±3.7,P＜0.01).LADA患者CD4+T细胞FOXP3 mRNA的表达水平明显降低(0.52-fold,P＜0.01,n=10).结论 LADA患者存在调节性T细胞抑制功能缺陷.     

细菌感染时新生儿CD4+T细胞表面标记物的表达

目的研究新生儿CD4+T细胞在细菌感染时的作用及作为临床应用感染性证据的可能性.方法应用流式细胞仪和单克隆抗体,分别测定19例正常足月新生儿和17例细菌感染足月新生儿治疗前后其CD4+T细胞表面的白介素-2受体α链(CD25)、β链(CD122)、γ链(CD132)和CD154的表达情况.结果 CD25、CD122、CD132和CD154在正常新生儿CD4+T细胞上的表达较低,分别为(3.84±3.61)%、(0.74±0.53)%、(12.70±8.54)%和(1.08±1.04)%,其在细菌感染组新生儿CD4+T细胞上的表达分别为(9.89±9.66)%、(5.79±11.14)%、(21.78±11.34)%和(6.69±7.87)%,较正常新生儿组明显升高(P＜0.05),且治疗前后均无显著变化(P＞0.05).结论正常新生儿CD4+T细胞的CD25、CD122、CD132和CD154表达较低,在细菌感染时表达上调,可作为新生儿细菌感染诊断的参考指标.     

宜宾地区健康新生儿淋巴细胞免疫分型研究

目的 研究宜宾地区健康新生儿的淋巴细胞免疫分型特点,探讨健康新生儿与正常成人之间淋巴细胞免疫分型的差异.方法 选取2015年1月至2016年12月在宜宾市第二人民医院分娩及儿童保健科正常体检的新生儿26例作为新生儿组,随机选取同期本院健康体检者44例作为成人组.采集新生儿足跟血60μL,成年人全血2~3 mL,所有标本均在24 h内用BD FACSCanto II流式细胞仪完成检测.结果 与成人相比,宜宾地区新生儿末梢血CD3+T淋巴细胞百分比[(81.40±6.04)%vs(70.10±5.83)%]、CD3+CD4+CD8-T淋巴细胞百分比[(57.50±8.38)%vs(38.90±4.83)%]及CD3+T淋巴细胞绝对计数[(3407.50±945.57)×106个/μL vs(1429.50±376.44)×106个/μL]、CD3+CD4+CD8-T淋巴细胞绝对计数[(2396.00±671.27)×106个/μL vs(791.70±237.18)×106个/μL]、CD3-CD19+B淋巴细胞绝对计数[(407.60±281.40)×106个/μL vs(249.50±92.46)×106个/μL]、CD3+CD4-CD8+T淋巴细胞绝对计数[(980.40±396.68)×106个/μL vs(531.70±155.51)×106个/μL]显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05),而CD3+CD4-CD8+T淋巴细胞百分比[(23.20±6.64)%vs(26.20±4.27)%]、CD3-CD16+CD56+NK细胞百分比[(6.00±2.91)%vs(16.50±5.64)%]及CD3-CD16+CD56+NK细胞绝对计数[(252.90±151.38)×106个/μL vs(325.80±129.25)×106个/μL]显著降低,差异也均有统计学意义(P<0.05);新生儿末梢血CD3-CD19+B淋巴细胞百分比与成人组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 宜宾地区健康新生儿末梢血淋巴细胞免疫分型与正常成年人之间存在差异,呈现了淋巴细胞随着人类的生长发育而表现出的不同特点.     

深低温冻存对正常人和白血病患者天然杀伤细胞杀伤活性的影响

应用深低温生物技术对正常人(N=4)和白血病患者(N=9)天然杀伤(NK)细胞冻存后,采用~(125)I 释放法,研究 NK 细胞对杀伤肿瘤细胞活性的影响。结果表明使用防冻剂二甲亚砜(DMSO),液氮(-196℃)储存,能保存 NK 细胞活性(冻前:正常人54.7±8.0%,白血病8.4±5.2%,冻后:正常人55.2±7.3%,白血病8.6±4.6%。P 值均分别>0.5。     

肝病患者所表现的T细胞与B细胞机能失常

本文对102例肝炎恢复期(肝恢)、迁延性肝炎(迁肝)、慢性肝炎(慢肝)、肝硬变患者进行了淋转测定,分别为53.50％±12.90％、47.34±13.50％、36.50±12.61％、30.20±11.70％,与对照组68.20±10.30％相比,有不同程度降低,提示此等患者有T细胞功能不足,其病情不能及时恢复可能与此有关。伴有自身免疫状态的慢性活动性肝炎(CAH)患者则既可有T细胞功能低下,亦可有B细胞反应过剧存在。狼疮样肝炎的免疫学异常与自身免疫性慢性活动性肝炎类同,两者无实质上区别。对上述患者联合使用促进T细胞功能与抑制B细胞反应的药物,对于调整T细胞、B细胞功能可望获得一定疗效。