蚕虫草不同部位营养与活性成分分析

目的:明确蚕虫草不同部位的营养与活性成分,以便开发利用。方法:对蚕虫草、子座、菌核和蚕粉进行分析研究。虫草素和腺苷测定采用高效液相色谱法,虫草多糖测定采用3,5二硝基水杨酸比色法,虫草酸测定采用高碘酸钠比色法,蛋白质测定采用考马氏亮蓝比色法,粗脂肪测定采用索氏提取法。结果:蚕虫草的多糖含量达86.49mg·g^-1;子座的腺苷含量达6.82mg·g^-1;菌核的虫草素和虫草酸含量分别达到13.28mg·g^-1和44.07mg·g^-1。结论:不同活性成分在蚕虫草及其不同部位的含量不同,其中蚕虫草活性成分总量最高,菌核虫草素和虫草酸含量最高;研究还表明蛹虫草菌对蚕体脂肪和蛋白质的分解利用能力很强。     

人工培育北虫草培养基的筛选及优化

目的：为工厂化培育北虫草提供优质液体发酵菌种,保证并提高人工培育北虫草的质量。方法：以生物转化率、虫草素和腺苷含量为指标,从碳源、氮源、C/N比、微量元素硒的影响等因素,通过正交实验确定优化培养基的组成成分。结果：优化培养基的组成成分为：土豆汁20%、葡萄糖2%、蛋白胨1%、蚕蛹粉0.5%、KH2P04 0.1%、MgS04·7H2O 0.05%、FeSO4·7H2O 0.002%、VB18mg·L-1,发酵初始pH7.0。结论：采用优化后的培养基,提高了北虫草子实体培育的生物转化率和子实体中的有效成分含量。     

正交实验优化蛹虫草培养成分提高虫草菌素含量

目的 通过正交实验优化蛹虫草培养成分,提高虫草菌素含量.方法 以蛹虫草的无性型Peacilomyces militaris 08-03为材料,进行正交实验.结果 通过正交实验优选出的最佳培养基成分为:蛋白胨2%、酵母膏3%、麦牙糖3%、蔗糖4%、KH2PO4 0.1%、NaNO3 0.1%、NH4Cl 0.2%,140 r/min,27℃,摇瓶发酵8 d;虫草菌素含量为(0.98±0.08) mg/g.结论 优化的培养基比用查氏液体培养基培养的虫草菌素产量[(6.51±0.22) mg/g]提高了近6.6倍.     

HPLC-ESI-MS测定冬虫夏草和蚕蛹虫草中腺苷和虫草素含量

目的 :建立测定冬虫夏草及蚕蛹虫草中腺苷和虫草素的方法。方法 :HPLC-ESI-MS法 ,用甲醇为提取溶剂 ,采用选择性离子检测 (SIM)和电喷雾离子化 (ESI) ;色谱条件 :ShimadzuVP-ODS色谱柱 ;流动相水 甲醇 甲酸(94∶5∶1) ,以 2 氯腺苷为内标。结果 :腺苷回归方程Y=0 .1346X +0.0129,r=0.9984 ,线性范围 0.5～124.5mg·L^-1;虫草素回归方程Y=0.2164X +0.0215 ,r=0.9991,线性范围 0.5～ 136 .5mg·L^-1;腺苷和虫草素加样回收率分别为 95 .8%及 98.1%。结论 :方法灵敏、快速和选择性好 ,可用于冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的分析及质量控制。     

冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的LC-MS-MS定量分析研究

目的：建立定量测定冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的LC-MS-MS方法。方法：HPLC-ESI-MS-MS法,用90%甲醇为提取溶剂,采用多反应监测(MRM)模式测定。结果：腺苷的回归方程Y＝89.04X+506.85,r=0.999 7,虫草素的回归方程Y＝99.66X+1 251.34,r=0.998 8,线性范围均为5.0～1 000.0 μg·L-1；腺苷和虫草素的检出限(LOD)分别为0.44,0.31 μg·L^-1,加样回收率分别为98.12%,97.94%。结论：该法灵敏、选择性好、快速,可用于冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的定量测定和质量控制。     

液体菌种栽培蛹虫草的效果观察

蛹虫草 ( Cordyceps militaris( L.ex Fr.) Link)为我国目前研究和开发较多的药用菌之一。目前生产上普遍采用常规试管母种或固体原种栽培蛹虫草 ,蛹虫草子实体发生率低 ,且生长不整齐 ,产量极低 ,甚至有的难以长出正常子实体。针对这种情况 ,我所用液体菌种栽培蛹虫草 ,取得了较为满意的效果 ,现将有关情况报告如下。1　供试菌株为我所从北京农业大学引进的 Cm- 0 0 1蛹虫草菌株。2　试验材料及方法2 .1　菌种制作　A.试管母种 :培养基为常规 PDA培养基 ,菌种亦按常规方法制作。B.固体原种 :培养基配方为 :大米 98% ,葡萄糖 1 % ,奶粉 …     

假单胞菌菌株ZL8发酵培养基及发酵条件的优化

目的 课题组前期从猪苓菌核中分离得到对丹参枯萎病等植物病原真菌具有广谱抑制作用且对植物生长有促进作用的假单胞菌菌株ZL8，该研究在此基础上对假单胞菌菌株ZL8的发酵培养基和发酵条件进行优化，以提高单位体积发酵液中菌体数量，为此菌株的开发和应用提供基础。方法 测定ZL8菌株在LB培养基中的生长曲线，明确其在液体培养基中的生长规律；以ZL8菌株发酵液中活菌数、菌体干重和菌悬液A₆₀₀值为检测指标，对不同种类的氮源、碳源及无机盐进行单因素考察以确定最适培养基组分，并进行正交试验优化培养基配比，以筛选最优发酵培养基；对ZL8菌株的接种量、培养温度、时间和转速等4个方面进行单因素和正交试验考察以确定最优培养条件。结果 假单胞菌菌株ZL8的液体发酵最佳培养基为蛋白胨15 g·L^-1、葡萄糖7.5 g·L^-1、氯化钾10 g·L^-1，发酵48 h后，发酵液活菌数可达8.93×10⁹ cfu·mL^-1，为LB液体培养基的3.93倍（P<0.01）；最佳发酵条件为接种量3%、温度28 ℃、时间72 h、转速220 r·min^-1，发酵液中活菌数可达6.37×10¹⁰ cfu·mL^-1。结论 优化后的培养基配方和发酵条件相对LB培养基和初始发酵条件，不仅可有效提高单位体积中假单胞菌ZL8菌株的菌体量及延长菌株生长的稳定期，而且可降低培养基成本，为假单胞菌ZL8的高效发酵和应用提供理论基础。     

基于均匀设计法分析铁元素对虫草素产量的影响

目的:利用均匀设计法分析铁元素对虫草素产量的影响。方法:采用均匀设计实验,以虫草素含量为检测标准,考察Fe2+添加量、Fe3+添加量及添加时间对虫草素产量的影响,并确定最佳方案。结果:利用均匀设计法得到的最佳实验方案为当Fe2+浓度为1.5 g·L~(-1),Fe3+浓度为1.3 g·L~(-1),第10天添加时可在每升蛹虫草发酵培养液中得到910.7 mg虫草素,与空白对照组相比含量提高了36.32%。结论:在培养基中添加铁元素会提高液体发酵蛹虫草产虫草素的产量。     

RP-HPLC法测定不同北虫草子实体和培养基中腺苷和虫草素含量的比较

目的:比较九种北虫草子实体以及3种培养基中腺苷和虫草素的含量。方法:超声水提法提取样品中腺苷和虫草素,用RP-HPLC法测定其含量。结果:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量都存在差异,腺苷含量为(1.054±0.259)-(2.931±0.356)mg·g-1;虫草素含量差异较大,为(0.435±0.016)-(4.981±0.212)mg·g-1。3种不同培养基中虫草素和腺苷也存在差异,其中3号培养基虫草素含量最高,达1.046 mg·g-1,1号培养基腺苷最高,为0.612 mg·g-1。结论:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量差异较大;三种培养基中腺苷和虫草素含量也存在差异。     

虫草及其发酵制品抗氧化能力研究

目的：考察天然冬虫夏草、蛹虫草及其发酵制品水和乙醇提取物体外抗氧化活性。方法：测定样品的6个抗氧化指标：抑制亚油酸氧化的能力；清除DPPH自由基、羟自由基、过氧化氢和超氧阴离子的活性以及螯合金属离子(Fe²⁺)的效果。结果：各样品具有不同程度的抗氧化能力,没有一种提取物在所有测试中均显示出很强的活性,但可以认为天然蛹虫草水提物的抗氧化能力为8个样品中最高,它在抑制亚油酸氧化,螯合金属离子以及清除DPPH自由基和羟自由基的实验中都显示了很高的活性。研究同时表明天然及发酵虫草水和醇提物中多酚类的含量差异很大。结论：虫草及其发酵制品可作为一种潜在的天然抗氧化剂,发酵培养能够影响虫草制品的抗氧化活性,而天然与发酵虫草的抗氧化能力与其含有的多酚类的量没有显著相联。     

人工培育北冬虫夏草主要有效成分分布特点的研究

目的:研究人工培育北冬虫夏草主要有效成分的分布特点。方法:以虫草素、腺苷和虫草多糖的含量为主要评价指标,采用HPLC和苯酚-硫酸法,分别研究了这三种活性物质在人工北冬虫夏草子实体上部、中部、下部和培养基中的分布情况。结果:人工北冬虫夏草整个生长过程中,腺苷、虫草素和虫草多糖在培养基中的含量都远远低于其他三个部分。结论:人工北冬虫夏草子实体的活性物质主要分布在子实体中,在培养基中的含量极少。     

工业化培育北虫草生物活性成分含量变化的研究

目的:明确工业化培育北虫草的主要生物活性成分在不同生长时期含量变化的规律.方法:采用HPLC和苯酚硫酸法,分别对不同生长时期的工业化培育的北虫草的虫草素、腺苷和虫草多糖含量的变化进行了跟踪.结果:培养周期内虫草素含量随生长期增长而不断增高,而腺苷和虫草多糖含量均在第40d达到最高值.结论:本研究结果对工业化生产,合理有...     

北虫草废弃培养料多糖提取条件优化研究

虫草人工栽培产生的大量废弃培养料,采用正交设计,确定从提取多糖的条件为提取温度80℃,提取2次,浸提时间120 min,料液比(w/v)1 20.本项实验结果可为北虫草的清洁生产及综合利用资源提供参考.     

紫外诱变选育北虫草新菌种的研究

针对野生菌种在人工培养基上容易丢失产生子实体的能力,稳定性差,且野生型菌种虫草菌素等生理活性物质含量较低等影响北虫草规模化人工栽培的问题,本文探索利用紫外线对出发菌株P进行诱变处理,以生物转化率、虫草素、腺苷含量为指标,筛选出高产菌株89,其有性子实体中虫草素含量和腺苷含量分别是出发菌株的2.5倍和3.6倍.进一步对其...     

Effects of Cordyceps sinensis, Cordyceps militaris and their isolated compounds on ion transport in Calu-3 human airway epithelial cells

AIM OF THE STUDY: The traditional Chinese medicine Cordyceps sinensis (CS) (Clavicipitaceae) improves pulmonary function and is used to treat respiratory disease. Here, we compare the efficacy and mechanisms of action of Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris (CM) (Clavicipitaceae) in Calu-3 human airway epithelial monolayer model. MATERIAL AND METHODS: The extracts of Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris, as well as their isolated compounds, cordycepin and adenosine, stimulated ion transport in a dose-dependent manner in Calu-3 monolayers. In subsequent experiments, transport inhibitor bumetanide and carbonic anhydrase inhibitor acetazolamide were added after Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris extracts to determine their effects on Cl- and HCO3- movement. RESULTS: The results suggested that Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris extracts may affect the anion movement from the basolateral to apical compartments in the airway epithelia. CONCLUSIONS: Basolateral Na+-K+-2Cl- cotransporter and apical cAMP-dependent cystic fibrosis transmembrane conductance regulator Cl- channel are involved in the process. The results provide the first evidence for the pharmacological mechanism of Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris on respiratory tract.     

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??Cordycepin is a main active constituent of the famous traditional Chinese medicines Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris. The antitumor activities and molecular mechanism of cordycepin on leukemia cells, lung cancer cells, hepatoma cells, prostatic carcinoma cells, cervical-cancer cells, colon cancer cells, leydig tumor cells, glioma cells and thyroid carcinoma cells were summarized.     

活体柞蚕蛹复壮北虫草菌种初探

目的：对北虫草菌株进行复壮处理以提高菌种活力。方法：用一株人工培育的北虫草菌株P感染刚化蛹的活体柞蚕蛹,蛹体近头部长出子实体后,待子实体近成熟期时采集孢子进行有性繁殖对原菌株进行复壮。结果：复壮后菌株10-2的子实体产量和生物转化率分别是原来菌株P的1.2倍和1.5倍。结论：在表面消毒过的活体柞蚕蛹上接种液体菌株活化复壮菌种的方法是可行的。     

虫草素晶体的红外光谱及粉末X射线衍射图谱分析研究

目的:建立虫草素晶体的标准图谱和特征图谱。方法:采用红外光谱及粉末X射线衍射法对两种虫草素晶体化合物进行分析,获得了两种虫草素晶体的特征峰值、标准红外光谱及粉末X射线衍射图谱。结果:证实了虫草素的多晶型现象,且不同虫草素晶体之间红外光谱及粉末X射线衍射图谱差异明显。结论:本方法为今后虫草素固体药物的深度开发和生产提供鉴定依据,同时为制定和规范固体药物晶型研究的有效方法和检测分析技术提供了借鉴。     

10-membered macrolides from the insect pathogenic fungus Cordyceps militaris BCC 2816

Three new 10-membered macrolides (1-3) have been isolated from the entomopathogenic fungus Cordyceps militaris BCC 2816, together with six known compounds, cepharosporolides C (4), E (5), and F (6), 2-carboxymethyl-4-(3'-hydroxybutyl)furan (7), cordycepin (8), and pyridine-2,6-dicarboxylic acid. The structures were determined by analysis of NMR data, and an X-ray analysis was performed to confirm the structure of 1. The antimalarial activity of 1-4 and 8 against Plasmodium falciparum K1 was evaluated.