灌胃养阴通脑颗粒大鼠血浆中川芎嗪的HPLC法测定

目的建立HPLC测定大鼠灌胃养阴通脑颗粒有效部位组合后血浆中川芎嗪质量浓度的方法。方法以乙腈提取处理血浆,以安眠酮为内标,甲醇-水(55∶45)为流动相,ODSC18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)为固定相,体积流量为1.0mL/min,以紫外检测器在279nm波长下测定血浆中川芎嗪。结果川芎嗪在0.11~22μg/mL线性关系良好,平均回收率为102.98%,RSD<10%,最低检测限为0.21ng,血浆中最低检测质量浓度为0.042μg/mL。结论此法灵敏、可靠,可较好地用于口服养阴通脑颗粒有效部位组合后血浆中的川芎嗪的测定,为测定中药复方体内有效成分提供方法。     

亲水作用液相色谱串联质谱法测定头发中尼古丁和可替宁

目的 建立亲水作用色谱串联质谱法测定头发中的尼古丁和可替宁的方法。 方法 样品在氢氧化钠溶液中水解,二氯甲烷萃取,氮气吹干,流动相复融后注入色谱-质谱系统分析。采用亲水作用色谱柱分离,甲醇-0.1%氨水为流动相,电子喷雾电离-三重四极杆质谱完成定量检测。采用建立的方法测定602例孕妇头发样品、31例志愿者头发和尿样中尼古丁和可替宁含量。 结果 采用本实验建立的亲水作用液相色谱串联质谱法检测样品,尼古丁和可替宁在0.030~100.000 μg/L范围内线性良好,方法检出限分别为0.007 6 μg/g和0.004 4 μg/g。日间和日内精密度小于10%。样品加标回收率为81.0%~102.0%。602例孕妇头发样品中非暴露二手烟孕妇头发中的尼古丁和可替宁质量浓度为0.020~0.260 μg/g和0.004 8~0.069 0 μg/g,二手烟暴露孕妇头发中的尼古丁和可替宁质量浓度为0.029~0.350 μg/g和0.005 6~0.085 0 μg/g。志愿者报告的吸烟状态与样品中的尼古丁和可替宁含量均具有相关性(P < 0.05);暴露的吸烟支数与头发中尼古丁含量关系密切,两者具有线性关系。 结论 本研究建立的方法准确灵敏,适用于头发中尼古丁和可替宁检测。头发中的尼古丁水平可能是评估烟草暴露剂量的特定生物标志物。     

RP-HPLC法测定盐酸齐拉西酮的含量

目的　建立RP HPLC法测定盐酸齐拉西酮的含量。方法　以C18柱 (4 .6mm× 15 0mm ,5 μm)为固定相 ,甲醇 -水 (5 0mmol/L醋酸钠 ,用冰醋酸调节 pH至 6 .0 ) (75 :2 5 ,V/V)为流动相 ,流速 1.2mL/min ,检测波长 2 5 4nm ,柱温 2 5℃。结果　盐酸齐拉西酮的最低定量限为 10 .10ng ,线性范围 1.0 10～ 10 10 μg/mL ,r=1.0 0 0 ,日内、日间精密度RSD均 <2 %。结论　本方法简便、灵敏、准确 ,可用于盐酸齐拉西酮的含量测定及质量控制     

高效液相色谱法测定人血浆中甲苯咪唑含量

目的建立固相萃取、反相高效液相色谱测定人血浆中甲苯咪唑的方法。方法血浆加入阿苯哒唑为内标,以0.5mol/L的硼砂NaOH缓冲液3ml碱化后经乙醚提取,固相萃取,进行HPLC测定,采用HypersilBDSC18(4.6mm×200mm5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1mmol/L(NH4)2SO4溶液(60∶40,V/V);流速1.0ml/min;检测波长310nm。结果甲苯咪唑血药浓度为0.05～1.6μg/ml,峰面积与血药浓度呈线性关系,方法平均回收率为97.21%。平均RSD为3.56%;最低检测限为0.02μg/ml。结论该方法符合生物样品分析要求,为甲苯咪唑的体内含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法。     

RAM-HPLC在线富集技术检测脑脊液中利福平的浓度

目的建立大体积直接进样的限进性液相色谱（RAM-HPLC）法,实现脑脊液样品的在线直接进样富集并检测脑脊液中的
利福平。方法以自制限进性填料柱为前处理柱,Luna C18为分析柱,前处理流动相为水―甲醇（95∶5,V/V）,流速为1 mL/min,分
析流动相为甲醇-乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液（60∶5∶35,V/V/V）,柱温为25 ℃,检测波长为254 nm。结果选择100 μL为进样体
积,其峰面积是进样量为20 μL时的5.33倍,有效提高了HPLC的检测灵敏度。利福平在0.25~8 μg/mL的浓度范围内浓度和峰
面积具有良好的线性关系（r=0.9997）,LOD和LOQ分别为0.07 μg/mL和0.25 μg/mL,日内日间精密度均小于5%,低中高3个浓
度下的空白加样回收率为87.69%~102.11%,测定给药（剂量为10 mg/kg）2 h后的人脑脊液中利福平浓度为0.29 μg/mL。结论
该方法简单快速,适用于脑脊液中利福平的富集检测,满足临床个体化用药指导。
     

反向高效液相色谱测定法同时测定人血浆中5种镇静催眠药浓度

目的：建立人血浆中地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑的反向高效液相色谱测定法（RP-HPLC）。方法：以血浆为基质,配制含有5种镇静催眠药的混合标准品,取1 mL样品加入50 mg/L卡马西平10 μL为内标,乙酸乙酯萃取后用100 μL流动相溶解,进样20 μL,通过高效液相色谱仪检测人血浆基质中5种镇静催眠药浓度。色谱条件：色谱柱为C18柱（4.6 mm×250 mm）,柱温30 ℃,流动相为甲醇:水（65∶35）,流速1.0 mL/min,紫外检测波长为230 nm。结果：地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑在5～1 200 μg/L 范围内线性关系良好(r≥0.9966, P<0.05) ,加样回收率在95.5%~105.6%,萃取回收率均在75%以上,日内及日间变异相对标准偏差(RSD)均小于10%（n=5）。 结论：RP-HPLC方法简便、准确、灵敏,适用于人血浆中地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑的血药浓度的同时检测。     

基于RAM-HPLC在线富集技术检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米

目的通过柱切换技术建立限进性填料柱-高效液相色谱法,实现在线直接进样并检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米。方法
以自制限进填料柱为预处理柱,Luna C18柱为分析柱,预处理流动相为水-甲醇（95∶5,V/V）,含体积百分数为0.1%的甲酸,流速
为1 ml/min;分析流动相为血浆：甲醇- 水（65∶35,V/V）,尿液：甲醇-水（55∶45,V/V）,均含体积百分数为0.1%的甲酸,流速均为
1 ml/min,柱温为25 ℃;检测波长为274 nm。结果呋塞米血浆样品在进样100 μl时,富集效果良好,在0.1~3.2 μg/ml的浓度范
围内具有良好的线性关系（r=0.9995）,尿液进样20 μl,呋塞米浓度在0.5~32 μg/ml范围内具有良好的线性关系（r=0.9991）,血样
及尿样的三个加标水平下的平均回收率分别为101.82%~113.36%,98.75%~112.27%,日内日间精密度均小于5%。结论药代
动力学参数AUC0→24为6.265 μg/（ml·h）,t1/2为2.447 h,Cmax为1.414 μg/ml;24 h内呋塞米的累积排泄率为32.50%~39.08%。本
方法简单快速,适用于血浆及尿液中呋塞米的直接进样检测。
     

固相萃取-高效液相色谱法同时测定减肥功能食品中五种违禁药物

目的 建立同时测定减肥功能食品中违禁添加药物双氢克尿噻、呋噻米、克罗帕米、布美他尼和盐酸西布曲明的固相萃取-高效液相色谱法.方法 样品经2%磷酸-甲醇混合溶液(1:1,V/V)超声提取并高速离心后,上清液经MCX固相萃取柱净化,然后经弱氮气流吹至近干,用2%磷酸-甲醇(1:1,V/V)混合溶液定容、漩涡混匀、12000 r/min离心后取上清液进样分析.色谱条件:分离柱为Phenomenex C18(250×4.60mm,5 μm)色谱柱;流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液-乙腈,梯度洗脱;柱温40℃;流速1.0 mL/min.标准曲线法定量.结果 5种违禁添加药物在0.25～100μg/mL范围内呈良好线性关系(r≥0.999),检出限为5.2～108 μg/kg,平均回收率范围为86.5%～113.1%,相对标准偏差(RSD)为1.6%～8.9%.结论 本法选择性好、灵敏度高、重现性好,适用于减肥功能食品中5种违禁药物的同时检测.     

反相高效液相色谱法同时测定血清中5种水溶性维生素

目的 建立血清中水溶性维生素B_1(VB_1)、B_6(VB_6)、烟酸、烟酰胺和叶酸的高效液相色谱同时测定方法.方法 取全血40 μL,用200 μL甲醇沉淀蛋白,冰箱冷冻(-18℃)30 min后离心(8000 r/min,8 min),上清液通过固相萃取柱进一步净化,收集洗脱液,50℃水浴中氮气吹至0.20 mL,取50 μL进样色谱柱分析.对样品的固相萃取条件和色谱条件进行优化后,用于测定人血清样品中5种水溶性维生素的含量.结果 优化后的固相萃取条件;固相萃取柱AGT cleanert~(TM) ODSC_(18)柱;洗脱液:甲醇(2.4 mL)-水(0.6 mL)混合液;洗脱流速:0.5 mL/min.本法的色谱分离条件为:分离柱Phenomenex C18 Luna色谱柱(250×4.6 mm,5 μm);柱温:室温(20℃);流动相:0.05 mol/L KH_2PO_4溶液(pH6.0)-甲醇梯度洗脱;流速:0.9 mL/min;紫外检测波长:266 nm.5种水溶性维生素标准曲线的线性范围为0～100 ng,相关系数均大于0.999,相对标准偏差(RSD)小于5%,方法 检出限(信噪比S/N=2)为0.076～0.170 μg/mL,加标回收率为80.2%～115.0%.人血清样品中除烟酰胺未检出外,其余4种均检出.结论 所建立的方法 快速、简便、灵敏、准确,可用于人血清中水溶性维生素VB_1、VB_6、烟酸和叶酸的同时测定,但烟酰胺的检测灵敏度有待提高.     

RP-HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度

目的:建立测定人血浆中氯氮平高效液相色谱法。方法:血浆样品经适当处理,色谱柱为Luna C18(250×4.6mm,5μm)柱,流动相为乙腈:30mmol/L醋酸铵(46:54,V/V),柱温40℃,流速0.9mL/min,检测波长243nm,艾司唑仑为内标。结果:测定方法在0.05-1.6μg/mL范围内线性良好(r=0.9992,n=6),高、中、低浓度加样回收率均在98.8%~104.0%之间,日内、日间RSD在2.96%~11.5%之间,最低检测浓度为0.01μg/mL(S/N=3)。结论:本方法快速、简便、准确,适用于临床氯氮平浓度监测。     

固相萃取-高效液相色谱串联质谱测定人体尿液中芳香化合物代谢物的方法研究

  目的  建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱（high performance liquid chromatographic tandem mass spectrometric, HPLC-MS/MS）同时测定尿液中8种芳香化合物代谢物（苯巯基尿酸、甲基马尿酸、N-乙酰基-S-苯基-L-半胱氨酸、苯乙醛酸、苯乙醇酸、对氨基酚、对硝基酚和1-羟基芘）的方法。  方法  取1 mL尿液,加入20 μL β-葡萄糖醛酸酶和1 mL乙酸铵缓冲溶液,在37 ℃孵箱中酶解20 h。酶解后混匀,取适量酶解液注入PrimeHLB 固相萃取柱净化,4 mL乙腈洗脱,洗脱液氮吹至干,用0.20 mL甲醇复溶后进样HPLC-MS/MS系统分析。高效液相色谱分离采用反相C₁₈色谱柱（2.1 mm×150 mm,3.5 μm）,流动相A为含体积分数0.1%甲酸的水,流动相B为甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.2 mL/min。质谱采用正、负离子交替扫描方式,多反应监测（multiple reaction monitoring, MRM）模式检测,内标标准曲线法定量。  结果  8种代谢物在 1~100 ng/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995,测定的精密度（relative standard deviation, RSD）在0.05%～9.95%之间,8种代谢物的检出限在0.041~0.12 ng/mL范围内。将所建立的方法用于尿样分析,加标回收率为80.1%～114.0%。  结论  所建立的方法灵敏、快速、准确,适用于普通人群和职业人群的芳香化合物生物监测评估。     

HPLC法测定气血双补口服液中芍药苷的含量

目的建立气血双补口服液中芍药苷含量的测定方法,为提高该制剂的质量标准提供研究依据。方法采用高效液相色谱法,流动相：甲醇-0.1%磷酸（29∶71）;色谱柱：汉邦ODS-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;体积流量：1.0mL/min;柱温：室温;检测波长：230 nm;进样量：10μL。结果芍药苷在10.00～80.00μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为99.45%,相对标准偏差（RSD）为0.63%。结论该方法简便、可靠、重现性好,可用于气血双补口服液的质量控制。     

固相萃取－高效液相色谱手性流动相添加剂法测定血浆中氧氟沙星对映体

目的：建立固相萃取-高效液相色谱法（high performance liquid chromatogoraphy,HPLC）拆分及测定血浆中氧氟沙星对映体的方法。方法：以L-异亮氨酸为配合剂,Cu2＋为配合离子,采用HPLC手性流动相添加剂法测定血中氧氟沙星对映体的含量。色谱柱为ODS—BP柱（250mm×4．6mm,5μm）,内标物为环丙沙星,流动相为手性添加剂溶液（含1．31g／LL-异亮氨酸和0．80g／LCuSO。）-甲醇（81．5：18．5）,激发波长为330nm,发射波长为504nm,流速为0．8mL／min。其中,应用C18固相萃取小柱萃取血浆中的氧氟沙星。结果：在经过优选的色谱条件下,对映体可以良好分离,分离度达到1．5以上;S-（-）-与R-（＋）-氧氟沙星的线性范围均为0．08～20μg／mL（r分别为0．9945和0．9947）,最小检测限均为4ng／mL,平均萃取回收率分别为89．77％和88．07％,平均回收率分别为97．19％和98．39％,日内RSD分别为2．9％和3．0％,日间RSD为2．0％和2．2％。结论：该法血样处理简单,干扰小,灵敏度高,精密度好,可以作为对血浆中左、右旋氧氟沙星分别测定的方法。     

RP-HPLC同时测定克银颗粒中的靛蓝和靛玉红

目的建立克银颗粒中靛蓝和靛玉红含量的测定方法。方法采用HPLC法定量分析,色谱柱为Phenomenex C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（80∶20,V/V）,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃;靛蓝的检测波长为287 nm,靛玉红为292 nm。结果靛蓝在0.329～32.900μg/mL范围内线性关系良好,Y=56.94C-1.749（r=0.999 8）,靛玉红在0.390～39.000μg/mL（r=0.999 9）范围内线性关系良好,Y=119.1C＋19.71（r=0.999 9）,其平均回收率分别为99.89%（RSD=1.00%,n=5）、99.18%（RSD=0.48%,n=5）。结论所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于克银颗粒的质量控制。     

叶酸口腔速溶膜剂的质量控制

目的:建立叶酸口腔速溶膜剂的质量控制方法。方法:利用HPLC法测定叶酸口腔速溶膜剂的含量及膜剂的含量均匀度。色谱条件:Innoval ODS-2 C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）;流动相:甲醇-0.054 mol/L磷酸二氢钾溶液（调节pH=6.3±0.1）（8:92）;检测波长:λ=254 nm;流速1.0 mL/min;进样量为20 μL;柱温为(30±1 )℃。结果:叶酸在40.0～260.0 μg/L的浓度范围内线性关系良好（R=0.999 8）,平均加样回收率为99.02%,RSD为0.41%。结论:该色谱测定条件及含量测定方法能够简单有效地测定叶酸口腔速溶膜剂的含量及含量均匀度。     

HPLC法测定盐酸莫西沙星含量及其有关物质

采用HPLC法对盐酸莫西沙星含量及其有关物质进行检测,色谱柱为Sepax BR-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-四丁基硫酸氢铵磷酸缓冲液(28∶72),检测波长为293 nm,柱温为45℃,流速为1.3 mL/min。在所建立的色谱条件下,盐酸莫西沙星与各杂质分离良好,盐酸莫西沙星浓度在38.55～57.82μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8),最低检测限为0.006 25μg/mL,定量限为0.025μg/mL。结果表明,所建立的方法专属性好,操作简便,可用于盐酸莫西沙星含量及其有关物质的含量测定。     

固相萃取逐步分离果蔬保鲜防腐剂噻苯咪唑、邻苯基苯酚残留检测的研究

目的建立固相萃取逐步分离测定果蔬中残留的噻苯咪唑、邻苯基苯酚的检测方法。方法样品经石油醚∶乙酸乙酯(2∶1)提取,30%甲醇溶液上样,C18固相柱富集、净化、分离2种残留防腐剂,分别采用30%乙醇-酸溶液(pH 2.5)、55%甲醇-碱溶液(pH 11.5)依次洗脱分离固相柱中被保留的噻苯咪唑、邻苯基苯酚,对洗脱液进行紫外分光光度法检测。结果这2种防腐剂在1～10μg/mL的范围内呈良好线性关系,相关系数r>0.999 2。样品加标回收率为83.3%～105.5%,相对标准偏差为1.2%～7.3%,最低检测限分别为0.09、1.0μg/mL。结论本方法适用于果蔬中残留防腐剂的检测。     

反相高效液相色谱法测定盐酸美普他酚(2-氨基-6-甲基)-苯甲酸酯的含量

目的 建立反相高效液相色谱法(reversed phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定盐酸美普他酚(2-氨基-6-甲基)-苯甲酸酯的含量。方法 采用C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,0.02 mol/L醋酸铵水溶液(氨水调节pH...