桩蛋白在大鼠星形胶质细胞中的表达

目的：初步探讨桩蛋白（paxillin）在大鼠星形胶质细胞及神经元中的表达。方法：通过组织切片、细胞培养、免疫荧光和RT-PCR方法,观察桩蛋白在大脑皮层及体外培养的星形胶质细胞以及神经元中的表达。结果：桩蛋白在大鼠脑皮质的星形胶质细胞中表达,神经元未见明显表达;在体外培养的星形胶质细胞以及神经元中的表达情况与体内一致,主要表达于星形胶质细胞的胞浆及突起中。结论：桩蛋白主要表达于星形胶质细胞而非神经元中。本实验结果为进一步研究桩蛋白在星形胶质细胞中的生物学作用奠定了基础。     

星形胶质细胞对氨引起培养胚鼠大脑神经元形态改变的影响

研究氨对培养神经元形态的影响及星形胶质细胞与神经元形态改变的关系。应用胚鼠神经元纯培养、神经元与星形胶质细胞的混合培养及联合培养技术，结合ＨＥ和免疫组化染色，观察神经元的形态改变。应用定量分析比较不同培养条件下神经元的存活率。结果：①氨可引起神经细胞的肿胀，空泡变和颗粒变及坏死脱落；②神经元的病变与星形胶质细胞的病变严重程度呈正相关，７０．８％的形态正常神经元分布在病变较轻的星形胶质细胞领近；③混合组中神经元的存活率明显高于神经元纯培养组（Ｐ＜０．０１），而联合培养组细胞的变性坏死最轻。结论：氨对培养的神经细胞具有直接毒性作用，而星形胶质细胞对神经元有部分保护作用，成熟的星形胶质细胞的保护效应更强。     

脑缺血再灌注损伤及其星形胶质细胞相关机制研究进展

脑缺血再灌注损伤的机制尚未完全阐明,炎症反应、氧化应激、兴奋性氨基酸毒性、细胞内钙超载、能量代谢障碍和细胞凋亡等多方面机制互相影响、错综复杂。星形胶质细胞广泛分布于神经元之间,起支持、分隔、调控等作用,对神经系统具有重要功能,如吸收突触外的谷氨酸,调节K+ 体内平衡,缓冲活性氧过多产生等。该文通过综述近年来脑缺血再灌注损伤中有关星形胶质细胞的机制研究,为以星形胶质细胞为调控靶点改善脑缺血再灌注损伤的研究提供依据和新思路。     

AMPK激动剂AICAR抑制糖氧剥夺损伤后星形胶质细胞的炎性反应及对神经元损伤的保护作用

目的:探讨AMPK激动剂AICAR对糖氧剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）损伤后原代星形胶质细胞炎性反应的影响及对损伤神经元的保护作用。方法:通过构建原代培养星形胶质细胞和神经元的OGD模型,在正常培养的原代星形胶质细胞中加入对照溶剂和AICAR（0.5 mmol/L）,后给予OGD处理,在复氧第12小时通过ELISA检测促炎因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6和IL-1β的表达变化,通过Western blotting方法检测磷酸化p38的蛋白表达;再将上述对照组和AICAR组OGD处理后的星形胶质细胞培养液,加入OGD损伤后的原代培养神经元中,通过LDH检测及免疫荧光双标方法,检测AICAR对缺糖缺氧损伤神经元的保护作用。结果:在原代培养神经元及星形胶质细胞OGD损伤模型中,与对照组比较,AICAR组显著地降低了OGD损伤后星形胶质细胞分泌的促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β（P<0.01）,抑制p38磷酸化,且明显降低了缺糖缺氧造成的神经元损伤（P<0.01）,促进损伤的神经突起修复。结论:AICAR抑制OGD损伤后星形胶质细胞炎性因子的释放,对OGD损伤神经元具有保护作用。     

星形胶质细胞的活化机制及功能研究

星形胶质细胞与神经元之间存在复杂的相互作用,以维持神经系统内环境的稳定.近年随着膜片钳及分子生物学技术的应用,人们发现星形胶质细胞表面不仅具有电压依赖的Na^＋、K^＋及Ca^2＋通道,而且分布着许多神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体[1],并能合成及分泌多种神经活性物质,在维持神经元内外环境、免疫调节及信号转导等方面具有重要作用,与中枢神经系统（central nervous system,CNS）疾病密切相关,因此星形胶质细胞对神经元生存起重要作用[2～4].在病理条件下,星形胶质细胞从静息状态快速向活化状态转变,其活化具有瀑布效应,活化的星形胶质细胞对神经元起保护或毒性作用,从而发挥“双刃”效应.进一步探讨星形胶质细胞的活化机制及功能,对认识脑的奥秘具有重要意义.     

星形胶质细胞在脑缺血损伤中的保护作用及中药干预作用

脑缺血损伤后,通常认为主要是对神经元的损伤,但缺血的梗死区包括着其它细胞,如星形胶质细胞（astrocytes,AS）、脑微血管内皮细胞、小胶质细胞等。在脑中风损伤初期AC支持神经元的存活,所以对AS功能完整性的保护将在今后的研究中将受到进一步的重视。文章将探讨AS在脑缺血导致的神经损伤的发病机制中的基础作用及中药对其的保护作用。     

山楂叶总黄酮对大鼠艮l生脑缺血时星形胶质细胞GFAP表达的影响

中枢神经系统主要由神经元和神经胶质细胞组成,其中星形胶质细胞数量最多,约占胶质细胞总数的70％。它不仅对神经元起支持、保护和营养作用,更能促进神经元的生长,提高神经元兴奋活性。但当慢性脑缺血时,星形胶质细胞过度反应性增生,可产生多种细胞因子和炎性介质,并可通过释放细胞毒性物质和炎症介质发挥神经毒性作用,抑制神经的再生功能,加重神经元的损伤。     

脑栓通对脑缺血再灌注大鼠神经血管单元的保护作用

目的：观察中药脑栓通对脑缺血再灌注大鼠神经血管单元主要成分神经元、星形胶质细胞以及脑血管内皮细胞的保护作用。方法：30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和1g/（kg·d）脑栓通组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血损伤模型,1.5h后拔出线栓实施再灌注。再灌注24h时后进行大鼠神经功能缺损评分,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷原位末端标记法结合神经元核抗原、胶质纤维酸性蛋白及CD31免疫荧光双染检测缺血再灌注24h时缺血灶周边的神经元、星形胶质细胞以及脑血管内皮细胞的凋亡情况。结果：脑栓通能显著改善脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损,减少缺血灶周边星形胶质细胞、脑血管内皮细胞和神经元的凋亡。结论：脑栓通通过保护脑缺血再灌注后大鼠的神经血管单元促进神经功能的改善。     

阿魏酸钠对β-淀粉样肽所致大鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制

目的 研究阿魏酸钠（sodium ferulate, SF）对Aβ25-35引起的大鼠学习记忆障碍和海马CA1区锥体神经元损伤的保护作用.方法 大鼠灌胃给予SF（50,100,250mg/kg）三周,脑室内注射凝聚态Aβ25-35（5μl, 2 mmol/L）,2d后,进行Morris水迷宫定位航行实验,连续训练五天,第六天开始进行空间探索实验.行为学实验结束后,取脑组织,制成石蜡切片,进行尼氏（Nissl）染色和胶质纤维酸蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫组织化学染色,研究海马CA1区锥体神经元形态学改变和星形胶质细胞的活化浸润情况.结果 脑室内注射Aβ25-35可引起大鼠学习和记忆的障碍,表现为大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长,大鼠在平台所在象限游泳距离百分比较对照组降低,这些行为学改变伴随着海马CA1区星形胶质细胞的浸润和锥体神经元的损伤.SF（50,100,250mg/kg）治疗组能剂量依赖的减轻Aβ25-35所致的学习记忆损伤,SF也能明显减轻海马CA1区锥体神经元的损伤和星形胶质细胞的浸润.结论 阿魏酸钠能对抗Aβ25-35引起的海马锥体神经元的损伤和星形胶质细胞的活化浸润,从而改善大鼠的学习记忆能力.     

星形胶质细胞低氧预适应对缺氧神经元的保护作用

目的：观察星形胶质细胞低氧预适应对神经元缺氧损伤的影响及机制。方法：收集低氧预适应后星形胶质细胞条件培养液（ACM）用于神经元培养。用MTT比色法检测细胞活性，Western Blot法分析星形胶质细胞促红细胞生成素的表达。结果：星形胶质细胞缺氧0．5h和3h后，活性升高，促红细胞生成素表达增多；神经元缺氧后活性明显降低，但低氧处理的ACM可阻止此变化的发生。结论：低氧预适应的ACM对神经元缺氧具有明显的保护作用，其机制可能是星形细胞表达促红细胞生成素增多，通过培养液作用于神经元，从而抑制神经元缺氧后活性的降低。     

混合培养神经元和星形胶质细胞对活性氧的应激性

目的 研究混合培养脑神经元与星形神经胶质细胞对活性氧叔丁基脂氢过氧化物（ｔｂＯＯＨ）的应激性,以探讨神经元与星形神经胶质细胞的相互作用。方法 采用ＭＴＴ比色法测定单独培养的大鼠大脑皮层神经元与星形神经胶质细胞在分别遭受ｔｂＯＯＨ攻击后的细胞存活率,及用形态学方法评估二者混合培养时遭受ｔｂＯＯＨ攻击时的细胞形态变化。结果 单独培养进遭受ｔｂＯＯＨ攻击后的细胞存活率无显著性差异（Ｐ〉０．０５）,但二乾混合培养时,神经元比星形神经胶质细胞损伤、死亡严重。结论 神经元和星形神经胶质细胞共同存在时,星形神经胶质细胞较神经元对活性氧有较强的抵抗力。     

星形胶质细胞钙调蛋白在损伤后胶质瘢痕形成中的作用

目的:探讨钙调蛋白对星形胶质细胞损伤后增生及胶质瘢痕形成的影响.方法:体外纯化培养星形胶质细胞,机械划痕法构建星形胶质细胞损伤模型,动态观察星形胶质细胞损伤前后钙离子浓度的变化,以及损伤后应用钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪(Trifluoperazine dihydrochloride,TFP)处理,星形胶质细胞增生的主要标志物GFAP表达的变化.采用激光共聚焦观察细胞内游离钙离子浓度动态变化,免疫组织化学染色方法检测星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(Glia fibrillary acidic protein,GFAP)表达量的变化.结果:星形胶质细胞损伤后细胞内钙离子浓度迅速上升,2 min后明显下降至接近基础水平.星形胶质细胞损伤后钙调蛋白抑制剂能够抑制星形胶质细胞GFAP蛋白表达量的增加.结论:星形胶质细胞损伤后钙离子浓度明显变化,激活细胞内钙离子信号传导并参与星形胶质细胞损伤后的增生反应,而钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪对星形胶质细胞损伤后的增生反应有显著的抑制作用.     

混合培养神经元和星形胶质细胞对活性氧的应激性

目的研究混合培养脑神经元与星形神经胶质细胞对活性氧叔丁基脂氢过氧化物（ｔｂＯＯＨ）的应激性,以探讨神经 元与星形神经胶质细胞的相互作用。方法采用ＭＴＴ比色法测定单独培养的大鼠大脑皮层神经元与星形神经胶质细 胞在分别遭受ｔｂＯＯＨ攻击后的细胞存活率,及用形态学方法评估二者混合培养时遭受ｔｂＯＯＨ攻击时的细胞形态变 化。结果单独培养时遭受ｔｂＯＯＨ攻击后的细胞存活率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,但二者混合培养时,神经元比星形神 经胶质细胞损伤、死亡严重。结论神经元和星形神经胶质细胞共同存在时,星形神经胶质细胞较神经元对活性氧有 较强的抵抗力。     

白藜芦醇对星形胶质细胞ATP释放的影响

目的研究白藜芦醇对体外培养的星形胶质细胞牵拉损伤后三磷酸腺苷(ATP)释放的影响,探索其对中枢神经保护作用的可能机制。方法采用不同剂量的白藜芦醇与星形胶质细胞共同培养12h后,进行牵拉损伤,检测不同实验组星形胶质细胞内、外ATP含量,并进行乳酸脱氢酶(LDH)漏出量的测定。结果牵拉损伤使星形胶质细胞分泌ATP明显增加,相反细胞内ATP含量明显下降(P<0.05);1μmol白藜芦醇能够使星形胶质细胞损伤后ATP分泌进一步增加(P<0.05);而100μmol白藜芦醇能减少损伤后ATP分泌(P<0.05)。对细胞进行LDH漏出量的检测发现,牵拉损伤能够使星形胶质细胞的LDH漏出量增加(P<0.05),1μmol白藜芦醇进一步加剧了LDH漏出(P<0.05),100μmol白藜芦醇能够有效减少星形胶质细胞的LDH漏出(P<0.05)。结论星形胶质细胞受到牵拉损伤后,100μmol白藜芦醇能够减少其ATP释放,且能够减少LDH漏出,进而对星形胶质细胞起到保护作用。     

大鼠脊髓损伤后神经丝蛋白及胶质纤维酸性蛋白表达的变化及意义

目的 研究脊髓损伤后神经元中神经丝蛋白（NF200）及星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化及其关系，探讨不同细胞在再生修复中的作用。方法 SD大鼠30只，分为正常，伤后1d,3d,7d,14d,21d 6组，每组5只，用免疫组化染色及图象分析方法观察神经元NF200及星形胶质细胞GFAP的表达，并对二者进行相关性分析。结果 脊髓损伤后NF200及GFAP的表达均呈进行性增高，二者有显著的相关性；GFAP表达的增高早于NF200的增高，而前角神经元NF200的表达早于后角神经元。结论 脊髓损伤后，星形胶质细胞可能是刺激神经元功能活跃，促进神经纤维再生的一个重要因素，不同类型神经元对损伤的反应存在着差异。     

星形胶质细胞机械性损伤后内皮性脂酶的表达

目的研究星形胶质细胞划痕损伤后内皮性脂酶（EL）的表达情况。方法取新生大鼠脑皮质,体外分离培养、纯化星形胶质细胞,对其进行划痕损伤,取损伤后不同时间点0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h及正常对照,用Western blot和免疫组化标记检测EL的表达变化及其与凋亡促进因子caspase-3的关系。结果与正常对照组比较,胶质细胞在损伤后6 h EL的表达增高十分明显（P〈0.01）,在损伤后1h出现caspase-3的表达增高（P〈0.01）。结论星形胶质细胞机械性损伤后1 h出现caspase-3表达增高,随后出现EL表达增高,提示星形胶质细胞于损伤后早期即出现凋亡现象,EL在中枢神经系统损伤后修复与再生过程中起重要作用。     

星形胶质细胞对PC12细胞的分化及突触素和生长相关蛋白43表达的影响

目的：体外观察星形胶质细胞对PC12细胞向神经元分化的作用，以及对PC12细胞突触素和生长相关蛋白43（GAP-43）表达的影响，探讨星形胶质细胞促进非神经元细胞形成神经突触的可能性。方法：采用PC12细胞与新生大鼠皮层组织来源的星形胶质细胞共同孵育，分为共育组和对照组，应用免疫荧光技术检测星形胶质细胞对PC12细胞分化、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、突触素和GAP-43表达的影响。结果：共育组培养4d，大部分PC12细胞已具备神经元形态，PC12有突细胞／总细胞数目比率、突起长度和突触数目明显高于对照组（P〈0．01）；NSE、突触素和GAP-43免疫荧光染色强阳性的PC12细胞明显增多，与对照组比较具有统计学意义（P〈0．01）。结论：提示星形胶质细胞有助于促进非神经元细胞形成神经突触。     

大鼠上唇皮下注射Formalin后脑内星形胶质细胞的反应及其与神经元的关系-光镜研究

目的：观察大鼠脑内星形胶质细胞对上唇皮肤伤害性刺激的反应及其与神经元的关系。方法：将Formalin注入大鼠一侧上唇皮下，成活1，3，6h后，用抗FOS蛋白，抗酷氨酸羟化酶（TH）和抗胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的三重免疫组化方法显示反应神经元与星形胶质细胞的定位及其相互关系。结果：（1）FOS阳性神经元和GFAP阳性星形胶质细胞均特异地表达于与痛觉传递或镇痛相关的机能区；（2）三重免疫组化显示反应性神经元（FOS阳性）与反应性星形胶质细胞（GFAP阳性）关系密切，形成三种复合体，即TH＋／FOS＋／GFAP＋三标记复合体，TH＋／GFAP＋／FOS－二标记复合体和FOS＋／GFAP＋／TH二标记复合体。（3）Formalin注射后3h，复合体的数目达高峰。结论：神经元－星形胶质细胞复合体在口唇伤害性刺激信息处理过程中可能起着重要作用。     

星形胶质细胞在抑郁症发病机制中的研究进展

星形胶质细胞是中枢神经系统数量最多、分布最广的非神经元细胞.一般认为该类细胞主要起支持、营养、修复、隔离、绝缘、参与血脑屏障形成等作用.随着对星形胶质细胞在大脑中功能研究的深入,目前对星形胶质细胞在抑郁症发病中的认识越来越清晰.研究发现重度抑郁症患者脑中星形胶质细胞的形态和功能均有明显改变.动物实验研究发现,仅胶质纤维酸性蛋白阳性细胞丢失足以诱导大鼠出现抑郁样行为.本文就星形胶质细胞在抑郁症发病机制中的作用进行综述.     

神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响

目的：探讨不同的神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响。方法将原代培养的神经元进行缺氧处理,不同的时长（0.5、1、2、4 h）后,复氧处理24 h ,收集神经元条件培养液（neuron‐conditioned media ,NCM ）,然后将NCM刺激原代培养的小胶质细胞24 h（NCM∶小胶质细胞培养液＝1∶1,V/V ）。采用Western blot法检测小胶质细胞内的M2表型标记物精氨酸酶‐1（arginase‐1）和激活标记物离子钙结合衔接分子‐1（Iba‐1）的表达变化规律,采用免疫荧光法检测ar‐ginase‐1的表达变化规律。同时,采用 ELISA 法检测小胶质细胞培养液上清中的营养因子,如脑源性神经营养因子（BDNF）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）和炎性因子,如肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）、白细胞介素‐1β（IL‐1β）、白细胞介素‐6（IL‐6）的分泌变化规律。最后,将不同损伤度的NCM 诱导小胶质细胞形成不同表型,将小胶质细胞和缺氧处理2 h后的神经元共培养24 h ,MTT法检测神经元的活力。结果轻微损伤（缺氧0.5、1 h）的NCM 明显下调M2型标记物arginase‐1的表达水平,中度（缺氧2 h）和重度（缺氧4 h）损伤的 NCM 能够上调arginase‐1的表达,各种损伤度的NCM都能上调Iba‐1的表达水平,提示其在一定程度上激活小胶质细胞。同时,轻微损伤的NCM明显上调小胶质细胞TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的分泌,而中度和重度损伤的NCM 对这些促炎因子的释放没有影响,各种损伤度的NCM 都能明显上调营养因子的分泌。M T T法检测表明,轻微和重度损伤处理的NCM刺激的小胶质细胞进一步加重缺氧处理的神经元损伤,而中度损伤的NCM对缺氧处理后的神经元具有保护作用。结论神经元损伤度是决定小胶质细胞表型的重要因素,进而使小胶质细胞进一步发挥神经毒性或保护作用。