大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养

目的 建立稳定的大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells, BMECs)体外培养模型,并对其生物学特性进行初步研究.方法 取Sprague-Dawley大鼠脑组织,通过匀浆、酶消化和梯度离心获得纯化的脑微血管段后,接种于涂布明胶的培养瓶进行原代培养;培养的细胞采用相差显微镜形态学观察、Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学鉴定;采用跨内皮电阻(transendothelial electrical resistance, TEER)检测单层细胞通透性;Cell Counting Kit-8(CCK-8)方法测定细胞生长曲线.结果 细胞从贴壁的脑微血管段周围长出,呈短梭形和多角形,区域性单层生长,5～7 d细胞融合,经Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学检测证实培养的细胞是血管内皮细胞,原代培养的脑微血管内皮细胞表现出很强的屏障特性,随着传代次数的增加脑微血管内皮细胞的跨内皮阻抗减弱.结论 提示该方法能成功进行纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养,原代培养的脑微血管内皮细胞是研究脑部微血管和血脑屏障的可靠技术手段.     

LPS诱导小鼠脑微血管内皮细胞通透性增高的分子机制

目的：探讨脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）对小鼠脑微血管内皮细胞通透性的影响及其可能的分子机制。方法：以培养至融合的小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3为实验对象,利用跨内皮细胞电阻抗（transendothelial electrical resistance,TEER）检测LPS对bEnd.3细胞屏障功能的改变及C3转移酶预处理后对其的影响。Pull down法和报告基因法分别测定RhoA和NF-κB活性。直接荧光染色法观察bEnd.3细胞F-actin的分布变化。结果：LPS作用3 h后,bEnd.3细胞TEER值明显下降［（53.67±2.01) Ω·cm2］,作用12 h后达最低［（37.67±3.05) Ω·cm2］,3,6,12 h组与正常对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。C3转移酶预处理后,LPS作用3,12 h时细胞TEER值分别为(60.67±4.05) Ω·cm2和(40.60±2.33) Ω·cm2,均比相应时间点未预处理细胞的TEER值高,差异有统计学意义（P＜0.05）。LPS作用bEnd.3细胞0.5 h后RhoA明显活化,NF-κB活性增加,C3转移酶预处理后其NF-κB活性明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。直接荧光染色发现在LPS作用3 h后细胞出现明显的F-actin重构,其程度随LPS作用时间的延长而加重,而C3转移酶预处理细胞F-actin重构发生较晚且程度较轻。结论：LPS通过使F-actin重组增加脑微血管内皮细胞的通透性,RhoA和NF-κB均参与此过程,且NF-κB信号分子受RhoA调控。     

豚鼠血迷路屏障通透性的体外模型

目的 研究豚鼠血迷路屏障通透性体外模型的建立方法及其通透性特征。方法 （1）用组织块贴壁培养法分离培养豚鼠耳蜗微血管内皮细胞，免疫组化法进行鉴定；（2）用小池技术建立起内皮细胞通透性的体外模型，并研究该模型中耳蜗、脑及肺3种内皮细胞对^125I-牛血清白蛋白的通透性；（3）研究豚鼠血迷路屏障对^125I-牛血清白蛋白的通透性。（3）研究豚鼠血迷路屏障对^125I-牛血清白蛋白的通透性。结果 （1）培养细胞致密融合对具有内皮细胞培养时典型的“铺路石样”外观，经免疫组化检测其内皮细胞标志性抗原Ⅷ因子，95％以上的培养细胞的胞质中呈棕黄色阳性反应；（2）耳蜗、脑及肺3种内皮细胞的体外模型中加入^125I-牛血清白蛋白后，贝克－时间变化图均呈抛物线型上升曲线，90min内几乎呈直线；（3）豚鼠血迷路屏障对^125I－牛血清白蛋白的通透性曲线与体外模型相似。结论 血迷路屏障的体外模型能大体反映在体时的通透性特征。     

牙龈卟啉单胞菌在体外可破坏脐静脉内皮屏障功能：基于下调ZO-1、occludin和VE-cadherin的表达

目的 通过体外实验探讨牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）破坏内皮屏障功能的分子机制。方法 人脐静脉内皮细胞（HUVECs）体外培养形成屏障后,使用感染复数（MOI）100的P. gingivals感染细胞,对照组为未感染P. gingivals的HUVECs;通过跨膜电阻值（TEER）,异硫氰酸荧光素（FITC）-右旋糖酐通透性实验和细菌易位实验来评估内皮屏障功能;并使用实时荧光定量聚合酶链式反应（q RT-PCR）和Western blot实验检测P. gingivals对构成内皮屏障结构的主要蛋白紧密连接蛋白1(ZO-1),occludin和VE-cadherin表达的影响。结果 HUVECs在接种培养后第5天,其跨膜电阻值趋于稳定,体外内皮屏障形成。与对照组相比,感染P. gingivals后0.5 h,内皮屏障功能即会发生改变,并且随着感染时间的延长,屏障功能障碍更加显著,主要表现为：跨膜电阻值下降、40 000/70 000 FITC-Dextran通透性上升以及易位细菌的数量增加;MTT结果显示P. gingivals对HUVECs的增殖能力没有影响（P>0...     

黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠脑微血管内皮细胞屏障功能的影响

目的 观察黄芪甲苷（astragalosideⅣ, ASTⅣ）配伍三七总皂苷（Panax notoginseng saponins, PNS）对氧糖剥夺后再复糖复氧（oxygen-glucose deprivation/reperfusion, OGD/R）大鼠脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells, r BMECs）屏障功能的影响。方法 原代培养并鉴定r BEMCs,取第3代rBMECs,采用ASTⅣ与PNS高（100μmol/L+60μmol/L）、中（50μmol/L+30μmol/L）、低（25μmol/L+15μmol/L）剂量配伍预处理24 h,以OGD/R建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组和模型组。CCK-8检测细胞存活情况,利用跨内皮细胞电阻（transendothelial electrical resistance, TEER）检测细胞屏障功能的改变,免疫荧光检测血脑屏障连接蛋白Occludin和ZO-1蛋白含量,Western blot检测黏附分子ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达及NF-κB-p65的活...     

体外血脑屏障模型的建立与鉴定

目的应用原代分离培养BALB／c小鼠脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells，BMVEC）建立体外血脑屏障模型，探讨跨血脑屏障（blood brain barrier，BBB）电阻与屏障渗透功能的动态关系以及最佳构建条件。方法用酶消化、机械分离结合密度离心的方法得到原代BALB／c小鼠脑血管内皮细胞，通过培养在具有特殊质材和孔径的Transwell小室上建立BBB体外实验模型，采用倒置显微镜、电镜观察细胞形态结构和生长规律，紧密连接ZO-1蛋白免疫组化检测，比较血脑屏障形成前后膜两侧电阻动态变化与1H葡萄糖通透性的关系等方法，探讨血脑屏障模型的建立及生长特性。结果BMVEC培养至汇合后具有典型的“铺路石”样外观；扫描电镜显示细胞形成致密单层，透射电镜、ZO-1蛋白免疫组化证实细胞问形成光滑、连续、高密度的紧密连接；1H葡萄糖的通透量与实时电阻呈负相关，内皮细胞电阻随着通透性的增加而降低，通透率最低时跨细胞电阻为（346±10）Ω／cm2。结论建立的BBB体外模型在形态学、电阻和通透性方面具备了BBB的基本特性。     

血小板活化因子引起肠上皮细胞屏障非凋亡依赖性的通透性增高

 目的 研究血小板活化因子对肠上皮细胞屏障通透性的影响,并探讨其作用位点。方法 体外培养Caco-2细胞建立肠上皮细胞屏障模型。不同浓度PAF(0, 50, 100, 200nM)作用24h,应用TEER和荧光黄透过量检测肠上皮细胞屏障通透性;应用Annexin V和Hoechst染色,用荧光显微镜和流式细胞仪检测肠上皮细胞凋亡情况;透射电镜下观察紧密连接。结果 Caco-2细胞培养21天左右可形成类似人肠黏膜上皮细胞屏障结构,给予50nM PAF即可引起TEER的下降和荧光黄透过率的增加,PAF100nM组肠上皮屏障通透性增加达到高峰,与对照组相比,差异显著(P<0.01)。实验并未发现PAF引起明显的细胞凋亡增加,但透射电镜下出现了紧密连接的断裂和细胞超微结构的破坏。结论 PAF可直接引起肠上皮细胞屏障通透性增加,该作用是凋亡非依赖性的,作用位点在旁细胞途径。     

血脑脊液屏障RAGE/LRP1转运体及神经血管单元与阿尔茨海默病关系的研究进展

血脑脊液屏障（blood cerebrospinal fluid barrier,blood-CSF barrier）是介于外周和中枢神经系统之间的一道生理屏障,对维持中枢神经系统的稳态起着重要作用。研究表明,血脑脊液屏障与阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的发生发展密切相关。本文重点论述血脑脊液屏障晚期糖基化终产物受体（receptor for advanced glycation end products,RAGE）/低密度脂蛋白受体相关蛋白1（low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1）受体转运系统及以血脑脊液屏障为核心组分的神经血管单元（neurovascular unit,NVU）介导的中枢β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein,Aβ）水平调控与AD发病机制的关系,为AD防治提供新思路。     

双重介导脑靶向脂质体增强荷载阿霉素的体外血-脑脊液屏障渗透率

目的 探讨双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为递送载体对阿霉素(doxorubicin, DOX)血-脑脊液屏障(blood brain barrier, BBB)渗透率的影响,为脑部药物递送提供新的策略。方法 利用前期构建的双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为载体包载DOX(DOX@RVGPR9-SSL)。培养脑毛细血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells, BMVEC),在体外构建BBB模型,通过4h渗漏实验、跨膜电阻值(transmembrane resistance value, TEER)测量、扫描透射电镜(scanning transmission electron microscope, SEM)观察细胞间的紧密连接等,鉴定体外BBB模型构建是否成功。在BBB模型构建成功后,利用荧光共振能量转移(fluorescence a resonance energy transfer, FRET),通过激光共聚焦显微镜,考察RVGPR9-SSL体跨越BBB后的完整性。通过对比分析脂质体给药前后,BBB的形态以及TEER值,考察RVGPR9-SSL跨越BBB后对BBB完整性的影响。通过荧光分光光度计,考察DOX@RVGPR9-SSL的BBB渗透率。结果 RVGPR9-SSL的包封率为97.25％。构建的BBB模型的TEER值均>200Ω·cm²,并通过SEM观察到BMVEC细胞排列紧密,存在着明显的紧密连接,说明体外BBB模型成功建立,可用于考察BBB渗透率。DOX@RVGPR9-SSL4h累积BBB渗透率>10%,显著高于游离DOX的4h累积BBB渗透率。给药后BBB与DOX@RVGPR9-SSL均能保持较好的完整性。结论 RVGPR9-SSL可以显著提高所包载的DOX的BBB渗透率,并且具有较好的安全性,是非常有前景的脑部药物递送载体。     

脑内皮细胞趋化因子受体5 参与β-淀粉样蛋白引起的T细胞跨内皮迁移

 目的利用血-脑屏障的体外模型,分析脑内皮细胞上的趋化因子受体5（CCR5）在β淀粉样蛋白（Aβ）引起的T 细胞跨内皮迁移过程中的作用。方法培养人脑微血管内皮细胞（HBMEC）,建立体外血-脑屏障模型,分析T 淋巴细胞跨内皮迁移的能力。结果Aβ能够促进T淋巴细胞穿过体外血-脑屏障模型,HBMEC 中CCR5 过表达能够促进T淋巴细胞穿过体外血脑屏障模型,HBMEC 中CCR5 缺失突变能够抑制T淋巴细胞穿过体外血-脑屏障模型。结论HBMEC 中CCR5 参与Aβ引起的
T淋巴细胞的跨内皮迁移。     

血清乙型肝炎病毒-DNA载量对乙型肝炎患者肝功能及外周血内质网应激相关指标的影响研究

目的　分析血清乙型肝炎病毒（HBV）-DNA载量对乙型肝炎（以下简称乙肝）患者肝功能及外周血内质网应激（ERS）相关指标的影响,为乙肝的临床诊治提供依据。方法　选取2016年7月—2017年6月在唐山市传染病医院治疗的乙肝患者136例。按血清HBV-DNA载量将患者分为阴性组（血清HBV-DNA载量<1.0×103 copies/ml）、低拷贝组（1.0×103 copies/ml≤血清HBV-DNA载量<1.0×105 copies/ml）、中拷贝组（1.0×105 copies/ml≤血清HBV-DNA载量<1.0×107 copies/ml）、高拷贝组（血清HBV-DNA载量≥1.0×107 copies/ml）。同期选取在唐山市传染病医院治疗的非HBV感染患者82例为对照组。检测并比较5组血清HBV-DNA载量、肝功能指标〔丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）、碱性磷酸酶（ALP）〕、ERS相关指标〔葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白（CHOP）、天冬半胱氨酸特异性蛋白酶-12（caspase-12）〕,分析肝功能指标与血清HBV-DNA载量及ERS相关指标的相关性。结果　5组ALP比较,差异无统计学意义（P>0.05）;低拷贝组、中拷贝组、高拷贝组ALT、AST高于对照组、阴性组（P<0.05）;中拷贝组、高拷贝组ALT、AST高于低拷贝组（P<0.05）;高拷贝组ALT、AST高于中拷贝组（P<0.05）;阴性组、低拷贝组、中拷贝组、高拷贝组γ-GT高于对照组（P<0.05）。阴性组、低拷贝组、中拷贝组、高拷贝组GRP78、CHOP、caspase-12高于对照组（P<0.05）;低拷贝组GRP78低于阴性组（P<0.05）;中拷贝组GRP78高于低拷贝组（P<0.05）。ALT、AST与血清HBV-DNA载量均呈正相关（P<0.05）;γ-GT、ALP与血清HBV-DNA载量无直线相关关系（P>0.05）。ALT、AST、γ-GT、ALP与GRP78、CHOP、caspase-12均无直线相关关系（P>0.05）。结论　乙肝患者血清HBV-DNA载量可对肝功能产生影响,且可诱发外周血ERS,这对乙肝的发病机制研究及临床诊治有一定的现实指导意义。     

血脑屏障体外实验模型的建立

目的:应用培养的CBA/J小鼠脑血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMVEC)构建血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的体外实验模型.方法:将BMVEC种植在明胶包被的24孔板细胞插入器的微孔滤膜上培养至汇合状态,通过4 h液面渗漏实验、扫描和透射电镜、血脑屏障形成前后膜两侧的电阻以及辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)的通透性和RMP-7对血脑屏障通透性的调控作用来证实BBB的形成.结果:BMVEC培养至汇合后,4 h液面渗漏实验成为阳性;扫描电镜显示细胞形成单层,透射电镜证实细胞间形成紧密连接;跨细胞电阻(the transendothelial electrical resistance,TEER)分别为汇合前和人脐静脉内皮细胞的3.2倍和7.7倍;对HRP的通透率分别为前对照组的13.4%和6.7%;RMP-7处理使HRP在BBB的通透率增加了2.7倍.结论:构建的BBB体外模型在形态学、电阻和通透性方面具备了BBB的基本特性,适用于中枢神经系统药物跨BBB能力的研究.     

ALP、γ-GT和CHE检测在慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌、胆道疾病中的临床意义

探讨碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、胆碱酯酶(CHE)3项检测指标对肝胆疾病诊断的临床意义。方法搜集2008年3月至2010年12月住院病例295份,其中慢性乙型肝炎78例,乙型肝炎肝硬化74例,原发性肝癌71例,胆道疾病(包括胆管结石、胆囊炎)72例,检测这些病例的ALP、γ-GT、CHE 3项指标,并随机抽查51例健康体检者作为对照,观察比较ALP、γ-GT、CHE在不同肝胆疾病中的水平。结果各组肝胆疾病患者血清中ALP和γ-GT水平均较正常对照组高(P<0.001,P<0.01);且肝癌组ALP和γ-GT水平较其他组升高更显著;肝硬化组和肝癌组与正常对照组比较CHE明显降低(P<0.001),慢性乙型肝炎组和胆道疾病组与正常对照组比较CHE无显著差异(P>0.05)。结论 ALP、γ-GT、CHE在慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌和胆道疾病中均有不同程度的差异。测定ALP、γ-GT有助于诊断慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌和胆道疾病。测定CHE有助于肝硬化和肝癌的诊断,并可评估病情的严重程度及预后。     

Effect of Tongluojiunao injection made from Sanqi (Radix Notoginseng) and Zhizi (Fructus Gardeniae) on brain microvascular endothelial cells and astrocytes in an in vitro ischemic model

ObjectiveTo explore the effect of Tongluojiunao injection (TLJN) prepared with Sanqi (Radix Notoginseng) and Zhizi (Fructus Gardeniae) on the interaction between brain microvascular endothelial cells (BMECs) and astrocytes in an in vitro ischemic model.MethodsFirst, an in vitro model of cerebral ischemia in BMECs or astrocytes was established by oxygen-glucose deprivation (OGD). TLJN was used as a medicine of intervention. The OGD-injured BMECs were cultured in various astrocyte-conditioned media. Cell activity, alkaline phosphatase (AKP) and γ-glutamyl transpeptidase (γ-GT) activity, interleukin-1 beta (IL-1β), and tumor necrosis factor alpha (TNF-α) content in BMECs were determined. Additionally, OGD-injured astrocytes were cultured in various BMEC-conditioned media. Cell activity, as well as expression of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and glial cell-derived neurotrophic factor (GDNF) in astrocytes, were detected.ResultsThe results of paracrine signaling of normal BMECs or astrocytes showed a protective effect on each other: conditioned media from normal astrocytes improved cell viability, AKP, and γ-GT activity, and reduced IL-1β and TNF-α content of injured BMECs; conditioned media from normal BMECs improved cell viability and expression of BDNF and GDNF in injured astrocytes. However, once the BMECs or astrocytes were injured by OGD, the protective effect decreased or disappeared. The above-mentioned protective induction was effectively recovered by TLJN intervention.ConclusionThe therapeutic benefit of TLJN was achieved by recovering two-way induction between BMECs and astrocytes, enhancing activity of injured BMECs and astrocytes, stabilizing enzymatic barriers, promoting expression of neurotrophic factors, and inhibiting inflammatory cytokines.     

NF-κB在炎症介质诱导的大鼠脑微血栓形成分子发病机制中的作用△

目的以脂多糖（LPS）诱导下高表达组织因子（tissue factor，TF）的大鼠脑微血管内皮细胞（BMECs）为大鼠脑微血栓形成的细胞模型，探讨核因子kB（NF-kB）在炎症介质导致的脑微血栓形成中的作用。方法制备大鼠脑微血管内皮细胞培养模型，分别用LPS刺激1／4、1／2、1、2、4、16h，以NF-kB特异性抑制剂PDTC（pyrrilidine dithiocarbam-ate）预处理组和空白对照组作为对照，采用流式细胞术特异性检测经BMECs膜表面TF定位表达丰度的变化，同时检测胞浆中TF的mRNA水平的变化，并进行计算机定量分析。结果TF在BMECs细胞中的表达与LPS作用呈现时间依赖关系，10μg／ml LPS刺激1／2h时TF表达开始升高，1h时达到最高值；100μmol/L PDTC预处理的BMECs在LPS刺激下，TF表达水平不升高。结论LPS可以显著诱导BMECs中TF的表达，NF-kB是LPS诱导的BMECs TF表达的关键性转录调控分子，是炎症介质诱导的脑血栓形成发病分子机制中的重要因素。     

梗阻性黄疸内外引流对肠黏膜屏障改变的影响及比较

目的从肠黏膜屏障功能的角度观察胆道内、外引流术对胆道梗阻的疗效,以探讨胆道内、外引流术在临床应用中的优缺点。方法胆道良恶性梗阻,胆红素明显增高患者40例,分组行鼻胆管外引流术（ENBD）和胆道塑料支架内引流术（ERBD）,动态观察术后患者血清二胺氧化酶（DAO）、内毒素和TNF-0【含量的变化,分析比较两种引流术对肠黏膜屏障功能的影响及全身炎症反应的改变。结果ERBD与ENBD组术后血胆红素,γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）,碱性磷酸酶（ALP）均呈进行性下降。ERBD与ENBD组术后1dDAO、血内毒素、TNF-α比较差异无统计学意义（P〉0．05）,术后3d和7d,ENBD组DAO、血内毒素、TNF-α值明显高于ERBD组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论（1）ERBD与ENBD对解除胆道梗阻、引流胆汁方面均有较好效果。（2）ENBD对改善肠黏膜屏障有-定局限性,而且长时间外引流可能导致肠黏膜屏障损伤的加重,并由此引发肠源性内毒素血症和全身炎症反应。     

急性布鲁菌病患者强化期治疗前后肝功能的变化

目的分析急性布鲁菌病患者治疗前肝功能损伤特点及强化期治疗后肝功能变化,为临床治疗该疾病提供理论基础。方法采用单样本t检验比较71例急性布鲁菌病患者强化治疗前各肝功能指标值与参考值均数的差异;采用配对t检验分析急性布鲁菌病患者强化期治疗前后肝功能指标的变化情况。结果 71例急性布鲁菌患者中23例（32.39%）ALT升高,最高141.32U/L;12例（16.90%）AST升高,最高75.81U/L;9例（12.68%）ALP升高;10例（14.08%）γ-GT升高;15例（21.13%）TBIL升高;17例（23.94%）DBIL升高。1项及1项以上肝功能异常的患者为38例（53.52%）。71例患者强化期治疗前肝功能指标ALT、AST、ALP、γ-GT、TBIL、DBIL均数与参考值均数比较,均有统计学差异（P均〈0.05）;强化期治疗前后ALT、AST、ALP、γ-GT水平无明显变化（P均〉0.05）,但TBIL、DBIL明显降低（P均〈0.01）。结论急性布鲁菌病患者肝功能损伤较常见,经强化期治疗TBIL、DBIL恢复最快,其余指标恢复慢。     

抗菌肽LL-37对尿路上皮细胞跨膜屏障功能破坏的作用

  目的  探索LL-37对膀胱尿路上皮细胞跨膜屏障功能破坏的具体作用,构建适于体外研究间质性膀胱炎（interstitial cystitis,IC）的细胞实验模型。  方法  分别用不同浓度的LL-37处理人尿路上皮永生化细胞SV-HUC-1,通过跨上皮电阻测量仪测量跨上皮细胞电阻,CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期和钙离子浓度,RT-qPCR和WB检测葡萄糖胺聚糖（GAGs）关键成分硫酸乙酰肝素的表达水平。  结果  体外细胞跨上皮电阻测量显示,100和200 μg/mL LL-37可显著抑制细胞的跨上皮电阻,破坏SV-HUC-1细胞的跨膜屏障功能。CCK-8和PI染色流式细胞检测显示,100 μg/mL 以上的LL-37可显著降低SV-HUC-1细胞的增殖活力,提高SV-HUC-1细胞处于G0/G1期的比例（P < 0.05）,提示细胞增值受到显著抑制。进一步流式细胞术检测SV-HUC-1细胞中的钙离子浓度显示,LL-37处理后的尿路上皮细胞内钙离子浓度显著升高（P < 0.05）,且增高量与LL-37浓度相关。RT-qPCR和WB检测证实经LL-37处理后SV-HUC-1细胞的GAGs关键成分硫酸乙酰肝素表达显著上调（P < 0.05）。  结论  抗菌肽LL-37可抑制SV-HUC-1细胞内GAGs关键成分硫酸乙酰肝素的表达,并破坏SV-HUC-1的细胞增殖和跨膜屏障功能。