miR-215-5p调控YY1通过TGF-β1/Smad信号通路对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的 探究MicroRNA-215-5p(miR-215-5p)在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的表达及其对卵巢颗粒细胞(GC)凋亡的影响,并分析潜在机制。方法 采用脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组(control组)、sh-NC组、sh-YY1组、sh-YY1+LY2109761组、miR-NC组、miR-215-5p mimic组、miR-215-5p mimic+pc-NC组、miR-215-5p mimic+pc-YY1组。TUNEL法检测PCOS大鼠卵巢组织GC凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测卵巢组织/GC中miR-215-5p、阴阳-1(YY1)mRNA表达;CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测PCOS大鼠卵巢组织/GC中YY1、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad4蛋白表达。结果 miR-215-5p在PCOS大鼠卵巢组织中低表达,YY1 mRNA和蛋白水平在PCOS大鼠卵巢组织中显著升高(P<0.05);敲低YY1或上...     

PCOS合并甲状腺抗体阳性患者外周血T细胞亚型和CD4+CD25+调节性T细胞研究

目的分析多囊卵巢综合征（PCOS）合并甲状腺抗体阳性患者外周血T细胞亚型分布情况和CD4+CD25+调节性T细胞数量及功能,探讨患者的机体免疫状态。方法选取PCOS患者、PCOS合并甲状腺抗体阳性患者、甲状腺抗体阳性患者及身体健康的女性体检者（正常对照）各50例,采用免疫发光法检测甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）和胰岛素（INS）水平,全自动生化分析仪检测空腹血糖,爱威全自动粪便分析仪检测粪球杆菌比;流式细胞术检测外周血T细胞亚型分布及CD4+CD25+调节性T细胞比例;采用实时荧光定量PCR检测Th1、Th2的效应因子IFN-γ、IL-4以及反映CD4+CD25+调节性T细胞功能的叉状头/翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）mRNA表达情况;Pearson法分析Foxp3mRNA表达水平与其它指标的相关性。结果与正常对照组相比,甲状腺抗体阳性组患者除粪便球杆菌比升高外（P＜0.05）,BMI、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、LH/FSH、T均无统计学差异（均P＞0.05）。与甲状腺抗体阳性组相比,PCOS组及PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者的BMI、HOMA-IR、LH/FSH及T均升高（均P＜0.05）,而PCOS组粪便球杆菌比降低（P＜0.05）。与PCOS组相比,PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者BMI、HOMA-IR、LH/FSH及粪便球杆菌比均升高（均P＜0.05）。与正常对照组相比,甲状腺抗体阳性组、PCOS组和PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者的CD4+T细胞比例及CD4+T细胞/CD8+T细胞比例均升高（均P＜0.05）,CD8+T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞比例均降低（均P＜0.05）;与PCOS组相比,PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者CD4+T细胞比例及CD4+T细胞/CD8+T细胞比例升高,CD8+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞比例降低（均P＜0.05）。与正常对照组相比,甲状腺抗体阳性组、PCOS组及PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者IFN-γmRNA和Foxp3mRNA表达均下调（均P＜0.05）,IL-4mRNA表达均上调（均P＜0.05）。与PCOS组相比,PCOS合并甲状腺抗体阳性组IFN-γmRNA和Foxp3mRNA表达下调,IL-4mRNA表达上调（均P＜0.05）。PCOS合并甲状腺抗体阳性患者Foxp3mRNA表达水平与HOMA-IR、BMI、LH/FSH、CD4/CD8和IL-4均呈负相关（均P＜0.05）,而与IFN-γ呈正相关（P＜0.05）。结论T细胞亚群分布失衡和CD4+CD25+调节性T细胞功能降低可能是PCOS合并甲状腺抗体阳性患者发病的重要环节,而肠道菌群失调可能是发病的危险因素。     

MicroRNA-27b在高血压脑出血大鼠脑组织中的表达及对星形胶质细胞生物学功能的影响

目的 探讨microRNA-27b(miR-27b)在高血压脑出血（HICH）大鼠脑组织中的表达及对星形胶质细胞生物学功能的影响。方法 选取15只健康WKY大鼠作为对照组,15只自发性高血压大鼠作为HICH组。HICH组通过自体血脑内注射法复制HICH大鼠模型,对照组进行假手术但不注射自体血。HE染色和TUNEL染色检测大鼠脑组织损伤和凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-27b mRNA相对表达量。将星形胶质细胞分为NC组、miR-27b mimic组及miR-27b inhibitor组,分别转染miR-27b mimic和miR-27b inhibitor质粒,过表达和抑制miR-27b水平。qRT-PCR检测各组细胞miR-27b mRNA相对表达量,CCK-8法检测各组细胞增殖及凋亡情况。结果 HICH组大鼠出血脑组织出现显著损伤,凋亡指数（35.91±3.24）高于对照组（2.75±0.36）(P <0.05);HICH组miR-27b mRNA相对表达量（3.45±0.48）高于对照组（1.00±0.12）(P <0.05);miR-...     

抗苗勒管激素与多囊卵巢综合征相关性研究

目的研究并分析抗苗勒管激素（AMH）与多囊卵巢综合征（PCOS）的相关性。方法选取PCOS组和对照组育龄妇女各60例作为研究对象,测量研究对象的身高、体重,计算体重指数（BMI）,测定研究对象的血清AMH、雌二醇（E2）、促黄体生成激素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、泌乳素（PRL）、睾酮（T）、雄烯二酮水平（A）,计算LH／FSH,分析各指标与AMH的相关性;测定双侧卵巢卵泡数（FN）,分析其与AMH的相关性;测定空腹血糖（FPG）、血清空腹胰岛素（FIN）,计算稳态模型胰岛素抵抗（HOMA—IR）指数,分析其与AMH的相关性。结果PCOS组患者BMI、LH、LH／FSH、睾酮、雄烯二酮、FIN、HOMA—IR、FN、AMH值均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;2组的血清AMH水平均与FN呈正相关,PCOS组患者血清AMH水平还与睾酮、雄烯二酮、FIN、HOMA—IR呈正相关。结论PCOS患者的血清AMH水平显著高于非PCOS者;PCOS患者AMH水平与睾酮、雄烯二酮、FN、FIN、HOMA—IR呈正相关。     

MicroRNA-486 和TGF-β1 对人主动脉瓣膜 钙化的影响及其机制研究

目的 研究microRNA-486（miRNA-486）对人主动脉瓣膜间质细胞（VICs）钙化的影响及作 用机制。方法 体外培养VICs,经成骨诱导后用双荧光素报告基因检测miRNA-486 靶基因。转染miR-486 mimic、miR-486 Inhibitors 后,将细胞分为miR-486 mimic 组、miR-486 mimic NC 组、miR-486 Inhibitors 组、miR-486 Inhibitors NC 组。采用茜红素染色、ALP 试验分析各组钙化程度,实时荧光定量聚合酶链反应 （qRT-PCR）、免疫荧光试验检测miR-486 靶基因及成骨相关因子mRNA 和蛋白的表达水平。结果 双荧 光素报告基因检测和Western blot 检测结果显示,转录生长因子-β1（TGF -β 1）为潜在靶基因。茜红素染 色、ALP 试验结果显示,miR-486 mimic 组钙化程度高于miR-486 Inhibitors 组。qRT-PCR、免疫荧光试验 结果表明,miR-486 mimic 组TGF-β1、SMAD3 mRNA 和蛋白表达水平较低（P <0.05）;miR-486 mimic 组RUNX2、骨钙素mRNA 表达水平较miR-486 Inhibitors 组高（P <0.05）。结论 miR-486 可通过下调 TGF-β1 的表达,促进RUNX2、骨钙素的表达和活性,诱导间质细胞向成骨细胞分化。     

多囊卵巢综合征患者血清microRNA-27a、microRNA-320的表达及其临床意义

目的 探讨血清microRNA-27a（miR-27a）、microRNA-320（miR-320）在多囊卵巢综合征（PCOS）患者中的表达及临床意义。方法 选取2017年1月—2020年8月海南西部中心医院收治的180例PCOS患者,根据胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）分为IR组113例（HOMA-IR≥ 2.58）和NIR组67例（HOMA-IR< 2.58）;另选取该院体检的健康女性80例作为对照组。于月经第3～5天采集静脉血,检测血清miR-27a、miR-320的表达,以及性激素、糖脂代谢、胰岛素抵抗指标。经阴道超声测量卵巢体积并计数卵泡数。分析miR-27a、miR-320表达与BMI、性激素、糖脂代谢、胰岛素抵抗、卵巢体积、卵泡数的相关性及PCOS发病的影响因素。结果 IR组BMI、血清睾酮（T）、总胆固醇（TC）、胰岛素抵抗（HOMA-IR）、miR-27a mRNA的相对表达量高于NIR组和对照组（P <0.05）,miR-320 mRNA的相对表达量低于NIR组和对照组（P <0.05）。NIR组BMI、血清T、TC、HOMA-IR、miR-27a mRNA的相对表达量高于对照组（P <0.05）,miR-320 mRNA的相对表达量低于对照组（P <0.05）。血清miR-27a的表达与BMI、卵泡数、卵巢体积、T、TC、HOMA-IR呈正相关（r =0.749、0.835、0.764、0.867、0.907和0.882,均P <0.05）,血清miR-320表达与卵泡数、卵巢体积、T、HOMA-IR呈负相关（r =-0.791、-0.808、-0.768和-0.752,均P <0.05）。卵泡数增加［R=1.865（95%CI：1.252,2.776）］、T水平升高［R=1.536（95% CI：1.179,2.001）］、HOMA-IR增加［R=1.702（95% CI：1.185,2.446）］、miR-27a高表达［R=1.933（95% CI：1.278,2.923）］、miR-320低表达［R=0.610（95% CI：0.467,0.796）］是PCOS易感因素（P <0.05）。联合miR-27a、miR-320诊断PCOS的AUC为0.917（95% CI：0.869,0.964）,高于单独诊断的0.708（95% CI：0.637,0.779）和0.676（95% CI：0.602,0.750）。结论 PCOS患者血清miR-27a表达上调,miR-320表达下调,miR-27a高表达、miR-320低表达与PCOS易感和胰岛素抵抗有关,可作为PCOS诊断指标。     

维生素D对PCOS大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的 探讨维生素D（vitamin D，VD）对多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）大鼠卵巢颗粒细胞（granulosa cells，GCs）凋亡的影响。方法 选取3周龄SD雌性大鼠21只，采用随机数字表法分为对照组（n=6）和造模组（n=15），建立PCOS大鼠模型。造模组采用来曲唑[1mg/（kg·d），溶于0.5%羧甲纤维素钠溶液]灌胃联合高脂饲料喂养，对照组采用等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃，给予普通饲料喂养，将12只造模成功的大鼠（3只造模失败），采用随机数字表法分为PCOS组（n=6）和PCOS+VD组（n=6），两组灌胃同等剂量玉米油，普通饲料喂养，连续21d。比较对照组、PCOS组和PCOS+VD组大鼠的动情周期、卵巢形态学变化，以及血清25羟维生素D[25 hydroxyvitam D，25-（OH）D]、睾酮（testosterone，T）、黄体生成素（luteinizing hormone，LH）、促卵泡激素（follicle-stimulating hormone，FSH）水平。造模结束后，分离GCs进行体外培养，根据培养方式分为GCs对照组（n=6）、GCs-PCOS组（n=6）、GCs-（PCOS+VD）组（n=6）、GCs-（PCOS+ VD+LY294002）组（n=6）。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，透射电镜观察细胞凋亡小体，蛋白免疫印迹法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果 与对照组比较，PCOS组大鼠血清中T、LH水平升高，FSH、25-（OH）D水平降低，动情周期紊乱，卵巢呈多囊样改变，差异均有统计学意义（P<0.05）；与PCOS组比较，PCOS+VD组大鼠血清T、LH降低，FSH及25-（OH）D水平升高，动情周期恢复正常，囊状卵泡数量减少，差异均有统计学意义（P<0.05）。与GCs对照组比较，GCs-PCOS组GCs凋亡率及Bax蛋白表达增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达减少，差异均有统计学意义（P<0.05）；与GCs-PCOS组比较，GCs-（PCOS+VD）组的GCs凋亡率及Bax蛋白表达降低，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达增加，差异均有统计学意义（P<0.05）；与GCs-（PCOS+VD）组比较，GCs-（PCOS+VD+LY294002）组的p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 VD可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制GCs凋亡。     

调控miR-642a-5p表达对宫颈癌HeLa细胞生物学行为的影响及机制研究

目的:探究调控微小RNA(miR)-642a-5p表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法:通过转染不同质粒将Hela细胞分为miR-642a-5p mimic组、miR-642a-5p mimic NC组,以未做任何处理的Hela细胞作为对照组。RT-qPCR法检测miR-642a-5p、NF-κB mRNA的表达水平,Western blot法检测NF-κB p65蛋白的表达水平,MTT法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:与对照组、miR-642a-5p mimic NC组比较,miR-642a-5p mimic组miR-642a-5p的表达量及细胞凋亡率升高,NF-κB mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平及转染24、48 h的细胞增殖活性、侵袭细胞个数、划痕愈合率降低(均P<0.05);对照组与miR-642a-5p mimic NC组miR-642a-5p、NF-κB mRNA、NF-κB p65蛋白的表达水平及转染24、48 h细胞增殖活性、侵袭细胞个数、划痕愈合率、细胞凋亡率比较,...     

急性白血病肺部感染病原菌分布情况及药敏研究

目的 探讨维生素D（vitamin D，VD）对多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）大鼠卵巢颗粒细胞（granulosa cells，GCs）凋亡的影响。方法 选取3周龄SD雌性大鼠21只，采用随机数字表法分为对照组（n=6）和造模组（n=15），建立PCOS大鼠模型。造模组采用来曲唑[1mg/（kg·d），溶于0.5%羧甲纤维素钠溶液]灌胃联合高脂饲料喂养，对照组采用等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃，给予普通饲料喂养，将12只造模成功的大鼠（3只造模失败），采用随机数字表法分为PCOS组（n=6）和PCOS+VD组（n=6），两组灌胃同等剂量玉米油，普通饲料喂养，连续21d。比较对照组、PCOS组和PCOS+VD组大鼠的动情周期、卵巢形态学变化，以及血清25羟维生素D[25 hydroxyvitam D，25-（OH）D]、睾酮（testosterone，T）、黄体生成素（luteinizing hormone，LH）、促卵泡激素（follicle-stimulating hormone，FSH）水平。造模结束后，分离GCs进行体外培养，根据培养方式分为GCs对照组（n=6）、GCs-PCOS组（n=6）、GCs-（PCOS+VD）组（n=6）、GCs-（PCOS+ VD+LY294002）组（n=6）。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，透射电镜观察细胞凋亡小体，蛋白免疫印迹法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果 与对照组比较，PCOS组大鼠血清中T、LH水平升高，FSH、25-（OH）D水平降低，动情周期紊乱，卵巢呈多囊样改变，差异均有统计学意义（P<0.05）；与PCOS组比较，PCOS+VD组大鼠血清T、LH降低，FSH及25-（OH）D水平升高，动情周期恢复正常，囊状卵泡数量减少，差异均有统计学意义（P<0.05）。与GCs对照组比较，GCs-PCOS组GCs凋亡率及Bax蛋白表达增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达减少，差异均有统计学意义（P<0.05）；与GCs-PCOS组比较，GCs-（PCOS+VD）组的GCs凋亡率及Bax蛋白表达降低，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达增加，差异均有统计学意义（P<0.05）；与GCs-（PCOS+VD）组比较，GCs-（PCOS+VD+LY294002）组的p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 VD可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制GCs凋亡。     

miR-204-5p对卵巢早衰大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的调控机制

【摘要】目的 探讨微小RNA（miR）-204-5p对卵巢早衰（POF）大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及调控机制。方法 体外分离大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）,将含有miR-204-5p基因反义寡核苷酸序列的重组慢病毒载体转入BMSCs,获得稳定转染LV-rno-ASO-miR-204-5p的BMSCs细胞。选取动情周期正常的75只SPF级雌性Wistar大鼠,随机分为对照组、POF组、BMSCs组、shRNA组、shRNA-BMSCs组,每组各15只。除对照组外,均采用腹腔注射顺铂法制备POF模型。shRNA组、BMSCs组及shRNA-BMSCs组分别双侧卵巢注射慢病毒载体、BMSCs细胞及稳定转染慢病毒载体的BMSCs细胞,对照组和POF组注射生理盐水。观察各组动情周期恢复情况,比较各组干预前、干预28 d后血清促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）水平,观察卵巢组织形态、卵泡颗粒细胞凋亡率,检测卵巢组织miR-204-5p mRNA及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA和蛋白表达。结果 干预后,POF组大鼠动情周期未恢复;BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组动情周期均有所恢复,其中shRNA-BMSCs组动情周期恢复率均高于BMSCs组及shRNA组（P＜0.05）。病理染色显示,BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量均多于POF组,但仍少于对照组（P＜0.05）;shRNA-BMSCs组上述各级卵泡数量多于BMSCs组和shRNA组（P＜0.05）。BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清FSH水平、卵巢颗粒细胞凋亡率、卵巢组织中miR-204-5p mRNA及MAPK、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量均低于POF组,且shRNA-BMSCs组低于BMSCs组和shRNA组,但仍高于对照组（P＜0.05）;BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清E2水平及卵巢组织Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均高于POF组,且shRNA-BMSCs组高于BMSCs组和shRNA组,但仍低于对照组（P＜0.05）。shRNA组与BMSCs组比较,卵巢组织miR-204-5p mRNA相对表达量较低（P＜0.05）,各级卵泡数量、血清FSH、E2水平、卵巢颗粒细胞凋亡率及卵巢组织MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 下调miR-204-5p表达可增强BMSCs对POF大鼠卵巢结构和功能的改善作用,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,可能与下调MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3基因和蛋白表达有关。     

NFATc1对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化的影响

目的:检测活化T细胞c1核因子(NFATc1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和上皮间充质转化(EMT)的影响.方法:qRT-PCR检测NSCLC细胞H1650、H460、H1299及正常人支气管上皮细胞BEAS-2B中NFATc1表达水平,将si-NFATc质粒转染至H1650细胞中,通过CCK-8增殖及集...     

血清miR-27a水平与多囊卵巢综合征及其临床特征的相关性

目的:分析多囊卵巢综合征(PCoS)患者血清miR-27a水平及其与临床特征的相关性.方法:收集2018年10月-2019年10月在郑州人民医院就诊的PCOS患者96例(PCOS组)、健康女性60名(对照组)为研究对象,qRT-PCR检测两组血清miR-27a水平,超声检测两组受试者卵泡数和卵巢体积,采血检测卵泡刺激素...     

心肌梗死相关转录本对视网膜母细胞瘤影响机制的研究

  目的   探讨心肌梗死相关转录本(MIAT)靶向miR-145对视网膜母细胞瘤增殖和凋亡的影响。   方法   选取2015年9月—2020年9月在郑州大学附属儿童医院因视网膜母细胞瘤行眼球摘除患儿30例,收集患儿肿瘤组织及癌旁组织。培养人视网膜母细胞瘤细胞Y79,按照随机数字表法分为si-NC组、si-MIAT组、miR-NC组、miR-145组、si-MIAT+anti-miR-NC组、si-MIAT+anti-miR-145组。采用RT-qPCR检测细胞MIAT和miR-145的表达;CCK-8检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测CyclinD1、p21、Bcl-2、Bax、p-PI3K、p-Akt蛋白表达;双荧光素酶报告检测MIAT与miR-145的靶向关系。   结果   与癌旁组织比较,视网膜母细胞瘤组织中MIAT表达显著上调(3.61±0.28 vs. 1.05±0.11),miR-145表达显著下调(0.33±0.03 vs. 1.03±0.09,均P＜0.05)。与si-NC组比较,si-MIAT组细胞活力显著下调;细胞凋亡率显著上调;p-PI3K蛋白、p-Akt蛋白表达显著下调(均P＜0.05)。与miR-NC组比较,miR-145组细胞活力显著下调;细胞凋亡率显著上调(均P＜0.05)。与si-MIAT+anti-miR-NC组比较,si-MIAT+anti-miR-145组细胞活力显著上调;细胞凋亡率显著下调;p-PI3K蛋白、p-Akt蛋白表达显著上调(均P＜0.05)。   结论   抑制MIAT表达、上调miR-145表达可促进视网膜母细胞瘤凋亡,抑制增殖,其机制与PI3K/Akt通路有关。      

miR-133过表达对结肠癌细胞SW480凋亡、增殖和裸鼠成瘤的影响

目的:探究miR-133过表达对结肠癌细胞SW480凋亡、增殖和裸鼠成瘤的影响。方法:将miR-133 mimic转染至SW480细胞,将细胞分为3组:对照组、Scramble组和miR-133 mimic组。RT-PCR检测miR-133表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western 印迹检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、c-Myc蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞增殖倍数;克隆形成实验检测细胞克隆形成率;裸鼠右侧腋窝处皮下注射SW480细胞悬液建立裸鼠移植瘤模型,检测肿瘤重量,RT-PCR检测肿瘤组织miR-133表达水平,免疫组化检测Caspase-3、Ki67阳性细胞数。结果:与对照组相比,miR-133 mimic组miR-133表达升高（F=136.70,P＜0.05）,细胞凋亡率升高（F=59.995,P＜0.05）,Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3、cleaved Caspase-9/Caspase-9表达升高（F=726.85、138.76、55.85,均P＜0.05）,c-Myc蛋白表达水平降低（F=88.98,P＜0.05）,细胞活力降低（F=48.50,P＜0.05）,克隆形成率降低（F=42.63,P＜0.05）,肿瘤重量降低（t=1.788,P＜0.05）,肿瘤组织miR-133表达水平升高（t=1.043,P＜0.05）,Caspase-3阳性细胞数升高（t=1.167,P＜0.05）,Ki67阳性细胞数降低（t=1.557,P＜0.05）。结论:miR-133过表达诱导SW480细胞凋亡,抑制SW480细胞增殖和裸鼠肿瘤的形成。     

miRNA-155表达对人肺癌细胞A549增殖的影响

【目的】探讨miRNA-155在正常肺组织和非小细胞肺癌组织中的表达及miRNA-155对人肺癌细胞A549增殖的影响。【方法】采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）技术检测15例非小细胞肺癌组织及其癌旁组织中miRNA-155的表达;A549细胞分别转染miR-NC和miRNA-155 mimic ,采用Real-time PCR技术检测转染后A549细胞中的miRNA-155表达水平,同时采用MTT 技术和流式细胞技术检测转染后A549细胞增殖情况,Western印迹法检测转染后A549细胞中Akt、p-Akt（Ser473）、p27、bcl-2、bax的表达。【结果】miRNA-155在非小细胞肺癌组织中的表达情况明显高于癌旁组织（ P ＜0．05）;与转染 miR-NC 组相比, A549细胞转染miRNA-155 mimic后miRNA-155表达水平明显增高（ P ＜0．001）,MTT实验和流式细胞技术显示miRNA-155促进A549细胞的增殖;Western印迹法结果显示：转染miRNA-155的A549细胞p-Akt （Ser473）,bcl-2的表达水平增高,p27、bax的表达水平降低。【结论】miRNA-155可能通过促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,上调p-Akt（Ser473）、bcl-2表达,同时抑制p27、bax的表达来促进非小细胞肺癌的发生发展。     

LncRNA MIAT靶向miR-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用研究

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIAT靶向微小RNA(miR)-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。方法 将食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞分为ctrl组(正常培养的ESCC细胞)、si-NC组、si-MIAT组、si-MIAT+miR-NC组和si-MIAT+miR-206 inhibitor组。实时qRT-PCR检测各组细胞MIAT、miR-206表达;CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞术分析细胞凋亡情况;蛋白质印迹技术检测PCNA、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证MIAT和miR-206的关系。结果 与ctrl组、si-NC组比较,si-MIAT组ESCC细胞中miR-206表达、细胞凋亡率升高,MIAT、OD₄₅₀值(24、48、72 h)、划痕愈合率、PCNA和MMP9蛋白表达降低(P<0.05);干扰LncRNA MIAT表达能降低ESCC细胞增殖、迁移、侵袭能力,提高细胞凋亡能力,MIAT靶向调控miR-206表达。结论 干扰LncRNA MIAT表达能够阻滞ESCC...     

NAMPT基因对肾癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的:探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在肾癌中的表达情况及对肾癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:通过TCGA在线数据库ualcan分析NAMPT在肾癌组织和正常肾组织中的表达,通过Kaplan-Meier plotter数据库分析NAMPT对肾癌预后的影响.qPCR检测NAMPT基因在肾癌细胞769P、A704、78...     

MicroRNA-155/Nrf2对体外培养雪旺细胞增殖和迁移的影响及作用机制

目的 探讨microRNA-155(miR-155)/Nrf2对雪旺细胞增殖和迁移的影响及作用机制，为坐骨神经慢性卡压损伤等临床诊断和治疗策略提供科学依据。方法 将大鼠雪旺细胞（RSC96）作为研究对象，转染miR-155 mimics、miR-155 inhibitor、si-Nrf2及其阴性对照质粒（miR-NC、inhibitor NC、si-NC）。为验证miR-155过表达/抑制质粒转染效果，探究miR-155对雪旺细胞增殖、迁移的影响，将细胞分为inhibitor NC组（细胞转染inhibitor NC质粒）、miR-155 inhibitor组（细胞转染miR-155 inhibitor质粒）、miR-NC组（细胞转染miR-NC质粒）、miR-155 mimics组（细胞转染miR-155 mimics质粒）。为了验证Nrf2沉默效果，将细胞分为si-NC组（细胞转染si-NC质粒）、si-Nrf2(1)组[细胞转染si-Nrf2(1)质粒]、si-Nrf2(2)组[细胞转染si-Nrf2(2)质粒]。为证实靶向Nrf2可实现miR-155对细胞增殖、迁移的影响和Nr...     

CXCL-14在非小细胞肺癌中的表达水平及临床意义

目的:检测CXC趋化因子配体14(CXCL-14)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平并分析其临床意义.方法:收集2017年1月-2019年1月在郑州人民医院接受手术治疗的NSCLC患者260例.检测NSCLC组织、癌旁组织、NSCLC细胞A549、H1975、PC-9和正常肺上皮细胞BEAS-2B细胞CXCL-1...     

circPTPRA靶向miR-140-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及迁移的机制研究

目的：探讨circPTPRA对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移的影响及其对miR-140-5p的调控作用。方法：原代分离培养人正常滑膜成纤维细胞与类风湿关节炎滑膜成纤维细胞,将类风湿关节炎滑膜成纤维细胞分为NC组(不转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-circPTPRA组(转染si-circPTPRA)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-140-5p组(转染miR-140-5p mimics)、anti-miR-NC+si-circPTPRA组(共转染anti-miR-NC和si-circPTPRA)、anti-miR-140-5p+si-circPTPRA组(共转染anti-miR-140-5p和si-circPTPRA)。qRT-PCR检测circPTPRA与miR-140-5p的表达量;MTT实验检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移;双荧光素酶报告基因实验检测circPTPRA与miR-140-5p的靶向关系。结果：与正常滑膜成纤维细胞比较,类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中circPTPRA的表达量升高,miR-140-5p的表达量降低(P&l...