草乌甲素对大鼠胶原诱导性关节炎的作用

探究草乌甲素对大鼠胶原诱导性关节炎的作用。方法 20只雄性SPF级SD大鼠随机选取5只作为对照组,剩下的15只SD大鼠用来建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型,根据关节炎评分表评估CIA模型,建模成功后再随机分成模型组、低剂量草乌甲素治疗组（50 μg/kg）、高剂量草乌甲素治疗组（100 μg/kg）,此后每组大鼠连续给药干预30 d,第31天后处死大鼠。酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠TNF-α、IL-6、IL-17、MMP-3水平,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定关节滑膜组织中MMP-3 mRNA表达水平,蛋白印迹法（Western Blot）检测关节滑膜组织中MMP-3蛋白水平,HE染色观察滑膜组织病理变化。结果 与对照组比较,模型组及草乌甲素治疗组TNF-α、IL-6、IL-17、MMP-3水平明显升高（P＜0.05）;同时,与模型组比较,草乌甲素治疗组TNF-α、IL-6、IL-17、MMP-3水平明显降低（P＜0.05）。与对照组相比,模型组MMP-3 mRNA、MMP-3蛋白表达水平明显升高;同时,与模型组比较,草乌甲素治疗组MMP-3 mRNA、MMP-3蛋白表达水平降低（P＜0.05）。组织病理结果显示草乌甲素治疗组的关节滑膜处的炎症细胞浸润及滑膜增生情况均减轻。结论 草乌甲素可以抑制炎症因子分泌和降低MMP-3的表达,对大鼠胶原诱导性关节炎具有一定的治疗作用     

C57小鼠脊髓损伤区白细胞介素-17的表达变化

目的探讨C57小鼠脊髓钳夹区IL-17表达的变化规律,为临床治疗脊髓损伤（SCI）提供新的靶点。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,即SCI模型组、假手术组和IL-17中和抗体组。模型组制作小鼠脊髓钳夹模型,假手术组只剪开硬脊膜不伤及脊髓;IL-17中和抗体组在脊髓钳夹1 h即刻尾静脉给予IL-17中和抗体。小鼠后肢功能变化按Basso提出的小鼠后肢行为学评分（BMS）于1～7 d进行,实时荧光定量PCR检测脊髓损伤区IL-17 mRNA各时间点表达变化,HE染色观察各组小鼠脊髓损伤第7天脊髓组织病理学变化。结果小鼠SCI后行为学显示,假手术组小鼠BMS在1～7 d均为9分;模型组小鼠BMS第1天为0分、第7天达2.9分;IL-17中和抗体组小鼠BMS第1天为0分、损伤第7天BMS评分达3.5分。实时荧光定量PCR显示,损伤区IL-17 mRNA的表达在损伤3 h升至最高,与假手术组相比具有统计学差异（P<0.05）,随后其表达水平开始下降,其他时间点与假手术组相比没有统计学差异（P＞0.05）,损伤第7天IL-17 mRNA的表达最低。HE染色结果显示,SCI后7 d,假手术组小鼠脊髓组织形态完整;模型组小鼠大量神经细胞坏死、凋亡,大量细胞空泡状形成;中和抗体组小鼠部分神经元核固缩,有细胞空泡状形成,但部分细胞仍保持完整形态。结论 IL-17参与了SCI的继发性免疫炎症进程,可能是SCI治疗的干预靶点。     

膝骨关节炎关节液和滑膜中IL-18与MMP-13的表达及临床意义

目的：探讨膝骨关节炎(KOA)患者的关节液和滑膜中白细胞介素(IL)-18与基质金属蛋白酶(MMP)-13的表达及其临床意义。方法选取2011年1月至2013年12月期间我院收治的76例KOA患者作为观察组,76例患者中,轻度30例,中度26例,重度20例。所有受试者软骨损伤分度为Ⅱ度26例,Ⅲ度28例,Ⅳ度22例;另选择32例膝关节半月板损伤患者为对照组。检测受试者膝关节关节液、滑膜中IL-18、MMP-13表达情况。结果观察组患者的膝关节关节液和膝关节滑膜中的IL-18、MMP-13水平均高于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01);随着KOA程度的加重,关节液和滑膜中的IL-18、MMP-13水平呈上升趋势,差异均有显著统计学意义(P<0.01);随着KOA分度的增加,关节液和滑膜中的IL-18、MMP-13水平呈上升趋势,差异均有显著统计学意义(P<0.01);关节液IL-18、MMP-13水平与滑膜IL-18、MMP-13水平分别呈正相关(r=0.361,0.371,P=0.021,0.016);关节液IL-18水平与关节液MMP-13水平呈正相关(r=0.369,P=0.019);滑膜IL-18水平与滑膜MMP-13水平呈正相关(r=0.378,P=0.015);关节液和滑膜中IL-18、MMP-13水平与KOA程度、KOA分度均呈正相关(P<0.05)。结论 MMP-13、IL-18在KOA关节液和滑膜中均高表达;两者呈现出显著正相关,共同在KOA的发病及病情进展中起作用。     

IL-17中和抗体对小鼠脊髓损伤的抑制作用及其机制

目的：探讨IL-17参与脊髓损伤后免疫炎症反应的作用机制,在细胞因子水平为临床治疗脊髓损伤提供新的靶点。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：模型组制作小鼠脊髓钳夹模型,假手术组只剪开硬脊膜不伤及脊髓, IL-17中和抗体组在脊髓钳夹1 h即刻尾静脉给予IL-17中和抗体,溶剂对照组在脊髓钳夹1 h尾静脉给予0.01μmol/L无菌PBS。小鼠后肢的行为学评分（mouse scale for locomotion, BMS）观察各组小鼠1～7 d后肢行为学变化,免疫组织化学技术观察各组小鼠脊髓损伤第7天脊髓NeuN神经元的形态学变化,实时荧光定量PCR检测脊髓损伤区第7天IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达变化。结果小鼠脊髓损伤后,行为学检测结果显示：假手术组小鼠BMS评分1～7 d均为9分,模型组、IL-17中和抗体组、溶剂对照组小鼠脊髓损伤第1天BMS评分为0分,随着时间的延长,各组小鼠的后肢运动功能均有改善,且IL-17中和抗体组小鼠后肢运动功能改善情况呈优于假手术组以外其他各组趋势。免疫组织化学染色显示：脊髓损伤后第7天,假手术组脊髓灰质内可见大量结构完整的NeuN染色阳性细胞;模型组和溶剂对照组小鼠脊髓灰质中,NeuN染色阳性细胞明显皱缩、突起消失,大量NeuN神经元呈细胞空泡状,数量大幅度减少;IL-17中和抗体组可见部分神经元细胞形态正常,具有完整的NeuN神经元胞体和分支的突触,且NeuN神经元染色阳性细胞数量回升。脊髓损伤后第7天实时荧光定量PCR显示：与假手术组相比,模型组、PBS溶剂对照组IL-1βmRNA显著升高（P＜0.01）;与模型组、PBS溶剂组相比, IL-17中和抗体组IL-1βmRNA明显下降（P＜0.05）;与假手术组相比,模型组TNF-αmRNA显著升高（P＜0.01）;与假手术组相比,PBS溶剂对照组TNF-αmRNA明显升高（P＜0.05）;与模型组相比, IL-17中和抗体组TNF-αmRNA表达明显下降（P＜0.05）;IL-17中和抗体组 IL-6 mRNA水平呈下降趋势,但各组IL-6 mRNA的表达未见统计学差异。结论 IL-17和IL-1β、IL-6、TNF-α共同作用加重了脊髓损伤的免疫炎症进程,抑制IL-17可减轻小鼠脊髓损伤。     

半乳凝集素3在小鼠肺缺血再灌注损伤中的表达

目的：探讨半乳凝集素3(Gal3)在小鼠肺缺血再灌注损伤（LIRI）模型中的表达情况。方法：将20只C57BL/6J雄性小鼠随机分为假手术组和4个实验组（即LIRI后2 h组、LIRI后6 h组、LIRI后12 h组、LIRI后24 h组）,每组4只。假手术组只开胸不夹闭肺门,实验组夹闭肺门60 min并分别于松开血管夹后2 h、6 h、12 h、24 h收集左肺标本。采用苏木精—伊红（HE）染色法和肺组织湿干重比（W/D）观察肺组织病理学变化,酶联免疫吸附法（ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（BALF）炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、western blotting、免疫荧光染色法检测Gal3 mRNA与Gal3蛋白的表达水平。结果：与假手术组相比,LIRI后各实验组出现肺组织损伤,组织结构破坏明显,肺损伤评分和W/D均升高,炎症因子IL-1β和TNF-α水平升高（均P<0.05）,在LIRI后6 h肺组织病理学损伤程度和炎性因子水平达到峰值（P<0.05）,随后逐渐降低。与假手术组...     

制动致兔关节软骨损伤修复过程中IL-17和MMP-3表达的研究

目的研究制动造成兔关节软骨损伤的修复过程中IL（白细胞介素）-17及MMP（基质金属蛋白酶）-3在关节液中的表达水平及二者的相关性,探讨IL-17及MMP-3对关节软骨修复的影响。方法通过兔伸膝制动动物模型,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测制动4周（A）组、解除制动自由活动2周（B）组、4周（C）组、6周（D）组及空白对照（E）组兔关节液中IL-17及MMP-3的含量,且在HE染色光镜下观察关节软骨的组织形态学变化。结果随解除制动后自由活动时间的延长,关节软骨破坏逐渐减轻,软骨修复越明显,且关节液中IL-17及MMP-3的含量逐渐降低（P〈0.05）,二者呈明显的线性相关性（r=0.981,P〈0.05）。结论 IL-17及MMP-3在关节液中的含量与损伤软骨的修复程度密切相关,二者可作为评测关节软骨损伤修复程度的重要参考指标。     

骨性关节炎中白介素-7及基质金属蛋白酶-13的表达

目的探讨细胞因子白介素－7（IL-7）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在骨性关节炎发生发展中的作用及意义。方法应用免疫组织化学技术及酶联免疫吸附方法对骨性关节炎29例、半月板及交叉韧带损伤患者17例（对照组）检测IL-7及MMP-13在滑膜组织中的表达情况及关节滑液中的蛋白含量,分析检测结果。结果IL-7及MMP-13在骨性关节炎滑膜组织中表达强度及滑液中蛋白含量高于对照组（P〈0．01）,IL-7及MMP—13在滑液中的蛋白含量显著相关（r=0．511,P〈0．01）,且两者与年龄也有相关性（r=0．454;r=0．583,P〈0．01）。结论IL-7及MMP-13与骨性关节炎的发生发展有关,IL-7可能通过刺激滑膜细胞分泌MMP-13发挥关节破坏作用。     

CCR5基因沉默对RA大鼠滑膜细胞炎症反应的影响

【摘要】 目的 探讨CCR5基因沉默对类风湿关节炎（RA）大鼠滑膜细胞炎症因子TNF-α、IL-6、MMP-1及MMP-3 的影响。方法 将SPF级Wistar雄鼠饲养一周后随机分为Control(WC)组与RA模型组,采用胶原诱导法构建RA大鼠模型,然后分离和培养RA大鼠滑膜细胞,再将细胞分为4组：RA组（RA大鼠滑膜细胞）、RA+NC组（加入脂质体包裹的NC siRNA）、RA+mock组（加入脂质体）、RA+siRNA组（加入脂质体包裹的CCR5 siRNA）。利用RNA干扰技术干扰大鼠滑膜细胞CCR5的表达,干扰后用qRT-PCR检测各组滑膜细胞CCR5及炎症因子TNF-α、IL-6、MMP-1及MMP-3 mRNA相对表达水平,用Western Blot检测其CCR5蛋白表达情况,并用ELISA方法检测各组滑膜细胞上清液中TNF-α、IL-6、MMP-1、MMP-3的水平。结果 干扰大鼠滑膜细胞CCR5的表达后,与RA组比较,RA+siRNA组CCR5 mRNA及TNF-α、IL-6、MMP-1、MMP-3 mRNA及蛋白水平均显著降低（P＜0.05）,而RA+NC组、RA+mock比较组差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 沉默CCR5可抑制CCR5 mRNA及其蛋白的表达,并有助于降低RA大鼠滑膜细胞的炎症因子TNF-α、IL-6、MMP-1及MMP-3的表达,减轻大鼠滑膜细胞的炎症反应,并为以后利用RNA干扰技术沉默CCR5用于RA的治疗提供新的方向。     

跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨MMP-13、Ⅱ型胶原mRNA表达的影响

目的：观察跌打通痹膏对兔膝骨性关节炎关节软骨基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、Ⅱ型胶原mRNA （COL-Ⅱ mRNA）表达的影响。方法选用65只新西兰兔随机分成正常对照组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组13只。模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组采用改良Hulth造模法,正常组、假手术组不予处理,模型组、跌打通痹膏组、骨痛贴组分别用胶带、跌打通痹膏、骨痛贴膏贴敷4周,观察治疗后各组实验兔关节软骨改变情况,并检测关节软骨中 MMP-13、COL-Ⅱ mRNA的表达。结果（1）组织学关节软骨评分：跌打通痹膏组评分较模型组低（P<0.05）。（2）MMP-13mRNA检测：模型组MMP-13表达较正常对照组显著提高（P<0.01),跌打通痹膏组MMP-13 mRNA表达较模型组降低（P<0.01)。（3）COL-ⅡmRNA检测：跌打通痹膏组COL-Ⅱ表达较模型组升高（P<0.01）。结论跌打通痹膏能通过降低Ⅱ型胶原降解,抑制MMP-13 mRNA表达,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,延缓关节软骨退变。     

低氧和IL-1β联合刺激对类风湿 关节炎成纤维样滑膜细胞基质 金属蛋白酶表达的影响及机制 研究

探讨低氧和IL-1β联合刺激对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLS）基质金属蛋白酶（MMP）-1、MMP-3、MMP-9水平的影响,并分析缺氧诱导因子1α（HIF-1α）通路和NF-κB通路在其中的调控作用。方法应用组织块法从临床RA患者滑膜组织分离原代FLS,一阶段实验中,细胞分为常氧组、低氧组、IL-1β组、IL-1β+低氧组;二阶段实验中,细胞分为IL-1β+低氧组、YC组、BAY组、YC+BAY组。采用ELISA法和Real-timePCR法分别检测MMP-1、MMP-3、MMP-9水平及MMP-1、MMP-3、MMP-9mRNA表达水平,采用Westernblot法检测HIF-1α和磷酸化NF-κBp65(p-p65)的表达,采用免疫荧光法检测p-p65的表达及核移位。结果与常氧组比较,IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高（均P＜0.05）;而与IL-1β组比较,IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高（均P＜0.05）。与常氧组比较,低氧组、IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-9mRNA表达水平均升高（均P＜0.05）;而与IL-1β组、低氧组比较,IL-1β和IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高（均P＜0.05）。与常氧组比较,低氧组、IL-1β组HIF-1α和p-p65核移位明显增加,而IL-1β+低氧组HIF-1α和p-p65蛋白表达水平及核移位进一步增加。YC或BAY预处理细胞后,IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平和mRNA表达水平均下降（均P＜0.05）。结论低氧和IL-1β能协同促进RA关节滑膜组织中FLS生成MMP,而HIF-1α和NF-κB通路在RA炎症缺氧微环境病变机制中起重要作用。     

共培养下后交叉韧带成纤维细胞中MMPs的基因表达

目的研究后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)成纤维细胞与滑膜细胞共培养下,2种细胞之间的交流对PCL成纤维细胞中基质金属蛋白酶MMP-1、2、3表达及活性的影响。方法分为共培养组和单培养组:①用显微镜观察共培养24 h后细胞的活性和迁移率。②分别培养6 h后,提取总RNA,逆转录PCR;实时荧光定量PCR对人后交叉韧带成纤维细胞MMP-1、2、3基因的表达进行半定量和定量分析。③共培养处理1、2、3 d后收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性。结果共培养使PCL细胞和滑膜细胞较单层细胞培养迁移率分别增高了(43.1±0.1)%和(76.2±0.2)%(P<0.01)。与单培养相比,共培养组明显增加了MMP-2的基因表达,但降低了MMP-1、3的基因表达。酶谱结果表明共培养增加了MMP-2活性(P<0.05)。结论共培养能够促进细胞的迁移以及调节细胞中MMP-1、2、3的表达情况。     

炎症细胞因子在膝关节骨性关节炎滑液中的表达及临床意义

目的 探讨炎症细胞因子(IL-1、TNF-α、IL-6)在膝关节骨性关节炎(KOA)滑液中的表达及其与KOA临床分期的关系。方法 选择行膝关节镜和人工膝关节置换术的50例KOA患者为研究对象,并以30例单纯半月板损伤患者为对照组,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法分别测定滑液中IL-1、TNF-α、IL-6含量。结果 与对照组比较,KOA组滑液中IL-1、TNF-α、IL-6水平显著上升,相比较有显著性差异(P＜0.05)。IL-1、TNF-α水平随着临床分期的增加而逐渐升高,滑液中IL-1、TNF-α水平为:晚期＞中期＞早期,相比较均有显著性差异(P＜0.05);IL-6水平随着临床分期的增加而下降,滑液中IL-6水平为:早期＞中期＞晚期,相比较均有显著性差异(P＜0.05)。IL-1、TNF-α与KOA临床分期呈正相关性(r=0.567,0.583,P＜0.05),IL-6与KOA临床分期呈负相关性(r=-0.486,P＜0.05)。结论 KOA患者滑液中存在IL-1、TNF-α、IL-6水平的高表达,IL-1、TNF-α随着临床分期的增加其含量逐渐上升,而IL-6随着临床分期的增加其含量逐渐降低。IL-1、TNF-α与骨性关节炎病变有密切关系,而KOA患者关节液中IL-6的含量不能直接反映出骨性关节炎的严重程度,但并节液中IL-6水平在诊断早期病变有一定的参考价值。     

医用三氧关节腔注射对老年膝关节骨性关节炎患者IL-1β的影响

目的 观察医用三氧对老年膝骨性关节炎患者关节腔滑液和血浆中白细胞间介素IL-1β的影响.方法 老年膝骨性关节炎患者72例,随机均分为3组,分别为医用三氧组（O组）、玻璃酸钠组（H组）和未注药组（N组）.O组膝关节内注入30 μg/ml医用三氧20 ml,H组膝关节内注入玻璃酸钠25 mg,N组未进行膝关节内注药.每周2次,4周1个疗程.于治疗前和治疗1疗程后1周时,抽取治疗侧膝关节滑液和外周静脉血,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-1β的含量.3组患者均口服盐酸曲马朵缓释片进行疼痛治疗.并选择健康志愿者24例为对照组（C组）.根据ISOA进行病情和疗效评估.结果 3组患者治疗前ISOA评分、滑液及治疗前后血浆中IL-1β含量均高于C组（P＜0.05）;治疗后O组和H组ISOA评分、滑液中IL-1β含量均比N组及治疗前降低（P＜0.05）.KOA患者IL-1β表达量与膝关节ISOA评分呈明显正相关（r=0.58,P=0.008）.结论 膝骨性关节炎患者关节腔内注射医用三氧与玻璃酸钠均可抑制关节炎的炎性反应,减少关节腔炎性因子的释放,降低关节滑液IL-1β的含量.     

右美托咪定对缺血-再灌注大鼠肠黏膜屏障功能的影晌

目的观察右美托咪定对肠缺血-再灌注损伤（IRI）大鼠肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）及炎症因子的影响,并探讨其作用机制。方法建立大鼠肠IRI模型,随机分为假手术组、模型组、右美托咪定组。分别于缺血一再灌注后2h和6h时间点抽取大鼠腹主动脉血,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清I-FABP水平;于实验终点留取肠组织,ELISA法检测白介素-6（IL-6）和IL-10的含量,苏木精-伊红（HE）染色后经Chiu六级评分法判定大鼠小肠组织损伤程度。结果与假手术组比较,模型组和右美托咪定组再灌注2h和6h时血清I-FABP水平明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;与模型组比较,右美托咪定组血清I-FABP含量显著下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。模型组和右美托咪定组肠组织中IL-6和IL-10的含量均明显高于假手术组,差异有统计学意义（P〈0．05）;与模型组比较,右美托咪定组肠组织中IL-6含量降低,IL．10含量升高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。右美托咪定组Chiu评分显著低于模型组,但高于假手术组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论右美托咪定可有效减少肠缺血-再灌注后炎症因子的产生,降低血浆中I-FABP水平,具有肠道保护作用。     

青藤碱对膝骨性关节炎兔关节液及血清白细胞介素1β含量的影响

目的：探讨关节腔内注射青藤碱对膝骨关节炎兔关节液及血清中白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）含量的影响。方法：除正常对照组（n=4）外，36只免采用左后肢膝关节伸直位石膏管型制动法建立兔骨关节炎模型。造模6周后青藤碱组兔关节腔内注射青藤碱，1次／N，连续5周，透明质酸组关节腔内注射透明质酸，模型组关节腔内注射生理盐水，正常组不治疗。分别于治疗前及治疗后采用酶联免疫吸附测定法检测关节液及血清IL-1β含量，并对软骨组织进行Mankin评分。结果：与模型组比较，青藤碱组骨性关节炎兔血清及关节液中IL-1β含量下降（P〈0．01），且青藤碱组低于透明质酸组（P〈0．05）。青藤碱组的软骨Mankin评分明显低于透明质酸组（P〈0．05）。结论：青藤碱可能通过抑制关节液及血清中IL—1β表达降低兔骨性关节炎模型的关节退变程度。     

内热针治疗对第三腰椎横突综合征模型大鼠损伤组织炎症反应的影响

【目的】探讨内热针治疗对第三腰椎横突综合征模型大鼠损伤组织炎症反应的影响。【方法】将90只SD大鼠随机分成6组:正常组、模型组、药物组、内热针组、普通针刺组和温针灸组,每组15只。采用埋置明胶海绵的方法制作第三腰椎横突综合征模型,2周后对相应组别大鼠进行治疗。于治疗后第0、7、14、28天从大鼠颈静脉取血,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)法检测血液中炎性细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的含量;于治疗后第28天处死大鼠,取第三腰椎横突周围肌肉组织,采用HE染色观察肌肉组织病理学变化,采用实时定量逆转录—聚合酶链反应(RT-q PCR)检测肌肉组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达情况。【结果】造模后的大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量较正常组显著升高(P0.05);治疗后,各治疗组大鼠血清中上述炎性细胞因子含量较模型组显著降低(P0.05),且内热针组最为明显(P0.05)。治疗后,各治疗组大鼠损伤肌肉组织TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA水平较模型组显著降低(P0.05),且内热针组表达水平最低。内热针组大鼠肌肉组织苏木素—伊红(HE)染色结果与其他治疗组比较,炎症反应更轻,肌纤维结构更完整。【结论】内热针治疗可通过降低TNF-α、IL-1β和IL-6等炎性细胞因子的表达,改善局部炎症反应,促进组织损伤的修复。     

Diverse expression of selected cytokines and proteinases in synovial fluid obtained from osteoarthritic and healthy human knee joints

Background

Osteoarthritis (OA) is defined by signs and symptoms of inflammation within the affected joint. The aim of this study is to determine the mRNA expression levels of selected cytokines and matrix-metalloproteinases of cells found in synovial fluid (SF) obtained from osteoarthritic knee joints compared to healthy controls.

Methods

SF was obtained from 40 patients undergoing total knee arthroplasty due to evident OA and from 10 healthy controls. Expression of TNF-α, IL-1β, MMP-1 and MMP-3 was assayed among both groups by performing qPCR. Patients were configured concerning age, gender and BMI.

Results

IL-1β, MMP-1 and MMP-3 showed significantly higher expression among the OA group compared to control (P < 0.001). Strong correlation appeared between expression of MMP-1 and MMP-3 among OA patients (r = 0.856); no correlation was found between age, gender or BMI and cytokine/proteinase expression. Expression of IL-1β, MMP-1 and MMP-3 within SF was elevated in OA-patients.

Conclusion

Consequently, cells within SF expressing cytokines and proteinases may play a relevant role in the progression of joint destruction. Considering the fact that SF in an OA joint comprises abnormal amounts of detrimental bioactive proteins, temporary clearance, dilution or suppression/modulation by means of lavage or disease-modifying medication may be promising to constitute interim relief or even postpone disease progression due to decreased inflammatory and/or degrading activity within the articular environment.     

膝骨关节炎患者滑液中炎症因子的表达及其与中医证型的相关性分析

目的分析膝骨关节炎（KOA）不同中医证型患者关节滑液中炎症因子水平及其与膝骨关节炎中医证型的相关性。方法90例KOA患者（119膝）根据中医辨证分为肾虚髓亏型、阳虚寒凝型及瘀血阻滞型。抽取关节液标本,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA法）测定基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、白介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、组织型金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）水平。Pearson相关性检验分析其与中医证型、年龄、病程之间的关系。结果阳虚寒凝型患者MMP-13、IL-1、TNF-α水平明显高于肾虚髓亏型及瘀血阻滞型（P〈0．05）,TIMP-1水平明显低于肾虚髓亏型及瘀血阻滞型（P〈0．05）;相关性分析提示MMP-13、IL-1、TNF-α水平与年龄和病程呈正相关（P〈0．05）,TMP-1水平与年龄和病程呈负相关（P〈0．05）。结论不同中医证型的KOA患者炎症因子水平存在差异,阳虚寒凝型患者炎症因子水平较肾虚髓亏及瘀血阻滞型患者高,说明此类型的患者软骨组织免疫炎症反应处于一个高度激活的状态：年龄大、病程长的患者炎症因子水平较年龄小、病程短的患者高,提示KOA患者应该注意早期防治,以减少关节腔内炎症反应对膝关节的损伤。     

三黄胶囊对急性痛风性关节炎的抗炎作用

目的 通过观察三黄胶囊对尿酸钠(MSU)致急性痛风性关节炎大鼠血清及膝关节液中白介素-β(IL-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)或环氧酶2(COX-2)水平的影响,探讨三黄胶囊治疗急性痛风性关节炎的机制.方法 将大鼠分为正常组,模型组,三黄胶囊组(6.45 g生药/kg),秋水仙碱组(0.325 mg/kg).正常组和模型组灌胃生理盐水;各给药组按剂量灌胃给药,连续14 d.末次给药1 h后,正常组右侧踝关节腔注射100 mL无菌1%磷酸盐缓冲液(PBS),其余各组注射100 mLMSU溶液,于造模后24 h用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清和关节滑液中IL-β、TNF-α 或COX-2水平;光镜下观察其对大鼠踝关节滑膜组织病理变化的影响.结果 与正常组比较,模型组MSU注射进大鼠踝关节腔24 h后,在大鼠血清中IL-β、TNF-α 和关节滑液中IL-β、TNF-α 及COX-2的含量均明显增加(P<0.05);与模型组比较,三黄胶囊组及秋水仙碱组均显著降低MSU致大鼠痛风性关节炎血清IL-β、TNF-α 及关节滑液中IL-β、TNF-α 和COX-2水平(P<0.05);造模组滑膜组织的炎性细胞浸润、纤维组织增生、滑膜细胞增生、水肿、充血的病理改变较中药组和西药组严重.结论 MSU可以增加血清IL-β、TNF-α 及关节滑液中IL-β、TNF-α 和COX-2的水平;三黄胶囊可能通过降低IL-β、TNF-α 和COX-2的水平产生抗MSU痛风性关节炎的作用.     

大鼠脊髓损伤后不同时期轴突导向因子slit-2 mRNA表达及形态学变化

目的:研究脊髓损伤后轴突导向因子slit-2的表达变化,同时观察大鼠行为学及脊髓形态学的变化特点.方法:40只成年SD大鼠随机分为正常组,假手术组和手术1、3、7、14、21、28天组,制作脊髓右侧半横断损伤模型,BBB法进行右下肢功能评分,HE染色观察损伤脊髓不同时期的形态学变化,原位杂交法观察slit-2 mRNA的表达变化,计算阳性细胞灰度值,并进行统计学分析.结果:大鼠脊髓损伤后,肢体瘫痪从第7天开始明显恢复直至第28天;形态学显示了从局部血肿形成,到周围炎性细胞浸润再到损伤位点远端和近端的脊髓组织逐渐发生空泡变性的过程;原位杂交结果为正常组和假手术组脊髓前角运动细胞slit-2 mRNA的表达较低,脊髓损伤后第3天,损伤位点近端前角运动神经元中slit-2 mRNA的表达明显增加,第7天与第14天前角运动神经元中slit-2 mRNA的表达较前一时间组明显下降,并持续表达至28天,各组较假手术组表达明显增高,同时,第7天组损伤位点周围反应性增生的细胞中slit-2 mRNA的表达明显上升.结论:成年哺乳动物脊髓损伤是一个动态变化的复杂过程,轴突导向因子slit-2可能通过介导炎性细胞的迁移及与炎性细胞分泌的若干介质和因子相互作用排斥新生轴突的生长,阻止其穿过损伤部位与远端重建突触联系;损伤切口周围反应性增生的细胞中slit-2 mRNA的表达上升提示了其可能参与损伤后的胶质瘢痕及抑制性微分子环境的形成.