芍药苷通过激活Nrf2/Keap1信号通路改善脓毒症急性肺损伤的研究

  目的  探讨芍药苷（paeoniflorin, PF）对脓毒症所致急性肺损伤的影响及其与转录因子NF-E2相关因子2（nuclear factor erythyroid 2-related factor 2, Nrf2）/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）信号通路的关系。  方法  采用盲肠结扎穿孔（CLP）术诱导建立脓毒症大鼠模型。将大鼠随机分成假手术组（Sham）、模型组（Model）、低剂量PF组（L-PF,50 mg/kg）、高剂量PF组（H-PF,150 mg/kg）及高剂量PF+Nrf2抑制剂组（H-PF+ML385,150 mg/kg PF+30 mg/kg ML385）,每组10只。采用改良的脓毒症严重程度评分标准对大鼠脓毒症严重程度进行评分;HE染色观察大鼠肺组织病理变化;黄嘌呤氧化酶法测定大鼠肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性;硫代巴比妥酸法测定大鼠肺组织丙二醛（MDA）含量;ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白介素（IL）-1β和IL-6水平;Western blot和qRT-PCR分别检测肺组织中Nrf2、Keap1、血红素氧合酶1（HO-1）蛋白和mRNA的表达水平。  结果  与Sham组比较,Model组大鼠出现严重的脓毒症;肺组织出现严重炎症浸润,出现大量巨噬细胞,肺间质肿大;肺组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6及氧化指标MDA含量均上升（P<0.05）,而抗氧化指标SOD含量下降（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均降低（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达增加（P<0.05）。与Model组比较,PF给药组大鼠脓毒症程度均降低,肺组织损伤均得到改善,肺组织中IL-1β、TNF-α、IL-6及MDA含量均下降（P<0.05）,SOD活性均增加（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均增加（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达降低（P<0.05）。与H-PF组比较,Nrf2抑制剂ML385干预后可抑制PF对脓毒症大鼠上述指标的改善。  结论  PF通过激活Nrf2/Keap1信号通路,降低组织氧化应激与炎症水平,改善脓毒症所致的急性肺损伤。     

人参皂甙Rb1对机械通气大鼠肺组织NF-资B和iNOs表达的影响

目的观察人参皂甙Rb1对机械通气肺损伤（VILI）大鼠炎症信号通路蛋白NF-资B及诱导型一氧化氮合酶（iNOs）的影响。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组（C组）、VILI组和人参皂甙Rb1预处理组（Rb1组）,每组10只。后两组大鼠潮气量40ml/kg机械通气4h建立大鼠VILI模型,Rb1组在通气前30min尾静脉注射40mg/kg人参皂甙Rb1,其他两组予等容量0.9%氯化钠溶液。观察各组大鼠肺组织病理改变,肺组织湿／干重比（W/D）,收集肺泡灌洗液（BALF）,采用ELISA法测定BALF中TNF-α、IL-6水平,硝酸盐还原酶法检测一氧化氮（NO）水平;RT-PCR测定肺组织中iNOsmRNA的表达水平,Westernblot检测肺组织的NF-资B蛋白水平。结果与C组相比,VILI组肺组织病理损伤严重,肺组织W/D显著增加,BALF中TNF-α、IL-6、NO水平增加,iNOsmRNA表达增加,NF-资B蛋白表达上调;与VILI组比较,Rb1组肺组织病理损伤程度减轻,肺组织W/D降低,BALF中TNF-α、IL-6、NO水平降低,iNOsmRNA表达降低,NF-资B蛋白表达下调。结论人参皂甙Rb1可下调机械通气大鼠NF-资B及iNOs活性,降低促炎因子TNF-α、IL-6、NO释放,减轻肺损伤。     

柚皮素预处理通过抑制NLRP3炎症小体通路减轻小鼠机械通气相关性肺损伤

目的 探讨柚皮素(NAR)对机械通气相关性肺损伤(VILI)的改善作用及其可能作用机制.方法 将60只C57BL/6小鼠随机分成假手术组(sham组)、机械通气模型组(Model 组)、NAR 低剂量组(L-NAR 组,15 mg/kg)和 NAR高剂量组(H-NAR组,60 mg/kg),每组15只.于造模前7 d开始灌胃给药,每天1次,连续7 d,随后采用机械大潮气量通气法建立VILI模型.于插管即刻和机械通气4 h时颈内动脉采血,测定氧合指数(OI).机械通气4 h后处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法测定BALF中TNF-α、IL-1β和IL-18含量;取肺组织,测定肺组织湿重/干重比(W/D);HE染色观察肺组织病理学改变并评分;RT-PCR和Western blot分别检测肺组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)mRNA及蛋白表达水平.结果 与sham组比较,Model组小鼠肺组织损伤严重,肺组织病理评分、W/D值、BALF中TNF-α、IL-1β和IL-18含量以及肺组织中NLRP3、ASC和Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平均增加(P＜0.01),而OI 值降低(P＜0.01);与 Model 组比较,H-NAR组小鼠肺组织损伤程度得到明显改善,肺组织病理评分、W/D值、BALF中TNF-α、IL-1β和IL-18含量以及肺组织中NLRP3、ASC和Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平均降低(P＜0.01),OI 值升高(P＜0.01),而 L-NAR 组与 Model 组比较,相关指标差异无统计学意义.结论 NAR预处理能减轻小鼠VILI,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体活化有关.     

基于miR-223-3p/NLRP3轴研究右美托咪定对机械通气肺损伤大鼠炎性反应的影响

目的 本研究通过建立机械通气性肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠模型,探究右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对其炎性反应及微小RNA-223-3p/核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白3(NLRP3)轴的影响。 方法 将60只成年健康6周龄SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为5组:对照组(NC组)、模型组(M组)、低(L-DEX组)、中(M-DEX组)、高(H-DEX组)剂量DEX组,每组12只;L-DEX组、M-DEX组、H-DEX组在机械通气中分别以静脉滴注0.5、2.5、5.0μg/(kg·h)DEX。4 h末处死,检测各组大鼠肺通透指数(lung permeability index,LPI)、肺组织湿重/干重(wet weight/dry weight,W/D)比值、肺组织miR-223-3p、NLRP3 mRNA及蛋白、caspase-1蛋白表达水平及肺组织匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18水平。 结果 与M组比较,L-DEX组、M-DEX组、H-DEX组大鼠LPI、W/D比值、NLRP3 mRNA(4.04±0.38、2.12±0.32、1.98±0.25)及NLRP3蛋白(0.92±0.11、0.58±0.06、0.39±0.02)、caspase-1蛋白、IL-1β、IL-18水平依次降低(M组NLRP3 mRNA为5.47±0.62,NLRP3为1.31±0.27),miR-223-3p水平依次升高(均P<0.05)。 结论 DEX可能通过上调miR-223-3p表达,下调NLRP3、caspase-1蛋白及下游炎症因子表达,与miR-223-3p/NLRP3轴密切相关,减轻大鼠VILI及炎症反应。      

雷公藤甲素对关节炎大鼠心功能的影响及其作用机制探讨

  目的  观察关节炎大鼠心功能的变化及雷公藤甲素的干预作用,探讨其可能的作用机制。  方法  将40只大鼠随机分为正常对照（NC）组、模型对照（MC）组、来氟米特（LEF）组和雷公藤甲素（TP）组。除NC组外,其余各组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备关节炎模型,制模第12天开始给药干预,TP组、LEF组大鼠分别灌胃其混悬液（TP 0.1 mg/mL,LEF 0.5 mg/mL）1 mL/100 g （体质量）,NC组、MC组大鼠相应时间灌胃等量的生理盐水,给药30 d。末次用药24 h后,采用左心室插管术检测大鼠心功能;应用酶联免疫吸附实验法测定血清超氧化物歧化酶(SOD）、丙二醛(MDA）、活性氧(ROS）、总抗氧化能力(T-AOC）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。采用荧光定量PCR法检测心组织Keap样蛋白1（Keap1）、肌腱膜纤维肉瘤(maf）、核因子-E2相关因子2(Nrf2）mRNA表达;采用Western blot法检测心组织Keap1、maf、Nrf2蛋白表达。  结果  ① 与NC组比较,MC组大鼠的心功能指标中心率（HR）、心脏指数（HI）、左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末压（LVEDP）升高,左心室压力上升和下降最大变化率（±dp/dtmax）降低(P均<0.01)。SOD、MDA、ROS、T-AOC、TNF-α升高,IL-10降低 (P均<0.01)。心组织Keap1、maf、Nrf2 mRNA和蛋白表达均升高（P<0.01）。② 与MC组比较,TP组大鼠HR、LVSP、HI、LVEDP降低,±dp/dtmax升高(P<0.01)。TNF-α、T-AOC、MDA、SOD、ROS下降,IL-10升高(P <0.05或 P <0.01)。TP组大鼠心组织Keap1、maf、Nrf2 mRNA和蛋白表达降低（P<0.01）。  结论  TP可改善关节炎大鼠心功能,其机制可能与提高心肌细胞抗氧化能力、减轻氧化应激损伤、抑制异常免疫炎症反应有关。     

不同潮气量通气对大鼠呼吸机相关性肺损伤模型的影响

目的通过建立过度通气导致呼吸机相关性肺损伤（VILI）大鼠模型，评估不同潮气量对肺损伤的影响。方法清洁级SD大鼠随机分成对照组（A组）、正常通气组（B组）、过度通气小潮气量[潮气量（VT）=20ml／kg]组（C组）和过度通气大潮气量（VT=40ml／kg）组（D组）。机械通气组中每只大鼠采用经口气管插管。观察各组通气1、2和4h肺病理学改变、肺含水量、肺泡灌洗液（BALF）中自细胞总数（WBC）、总蛋白（Tp）、乳酸脱氢酶（LDH）含量的变化，以及两组过度通气组大鼠不同时程机械通气后3d内的死亡率。结果与A组和B组相比，两组过度通气组大鼠的肺组织湿／干比值及肺损伤评分均明显升高，BALF中的WBC计数、LDH、Tp含量显著性增加，且D组BALF中WBC计数、LDH、Tp含量较C组更高，并随着通气时间延长而增加。两组过度通气组大鼠生存率无明显差异。结论过度通气会导致严重的VILI。潮气量40ml／kg通气4h更能可靠复制VILI大鼠模型。     

HMGB1/TLRs 信号通路在大鼠机械通气肺损伤中的作用

目的：探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体(TLRs)信号通路在大鼠机械通气肺损伤(VILI)中的作用机制。方法32只健康SD大鼠随机分为4组：正常对照组( N组)不行机械通气,保留自主呼吸;高氧流量组( HN组)氧流量7 L/min;小潮气量机械通气组( LV组)潮气量7 ml/kg;大潮气量机械通气组( HV组)潮气量30 ml/kg。通气4 h后处死动物取肺组织,HE染色观察各组肺组织损伤情况,检测支气管肺泡灌洗液( BALF)中白细胞( WBC)计数、肺湿重干重比值( W/D);ELISA法检测BALF中IL-6、TNF-α、HMGB1水平;Western blot法检测肺组织HMGB1、TLR2、TLR4蛋白的表达。应用单因素方差分析及两样本均数t检验进行不同组间的比较。结果与N组相比,HV组及HN组大鼠肺W/D, BALF中WBC计数,BALF中HMGB1、TNF-α、IL-6水平以及HMGB1、TLR2、TLR4蛋白表达均显著增加,差异有统计学意义(P<0．05);LV组上述各指标与N组相比差异无统计学意义。结论大潮气量机械通气及高氧流量通气均可引起大鼠肺组织急性炎症反应,其机制可能与HMGB1/TLRs信号通路激活有关。     

地塞米松对大鼠通气机所致肺损伤的防护作用

目的：研究地塞米松对大鼠通气机所致肺损伤（VILI）的防护作用。方法：将30只健康雄性SD大鼠随机分为3组，实施麻醉和气管切开术后，接受两种通气策略通气，通气时间均为4h。A组为对照组（n=10,VT=8ml/kg),B组为致伤组，接受大潮气量通气（n=10,VT=40ml/kg),C组（n=10,VT=40ml/kg)为地塞米松防治组。每小时行1次动脉血气分析。行支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞和中性粒细胞计数，测定右肺W／D值、BALF中总蛋白含量、BALF和血中TNF－α、IL－1β水平，并观察肺脏的组织病理学变化。结果：通气4h后，B组动脉血氧分压（PaO2)较A、C组显著下降，BALF中有大量的白细胞浸润。B组BALF中总蛋白含量、右肺W／D值较A、C组显著升高。B组BALF中TNF－α、IL－1β水平显著升高，C组较B组显著降低。组织病理学显示B组较A、C组肺脏内有更多的白细胞浸润和肺泡壁结构的破坏。结论：结果表明一系列炎症和炎症前反应参与了VILI的发生机制，地塞米松通过其抗炎作用对大鼠VILI模型具有较明显的防护作用。     

氢溴酸加兰他敏介导AMPKα1/Nrf2/HO-1通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

  目的  研究氢溴酸加兰他敏（galantamine hydrobromide lycoremine,Gal）介导腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）α1/Nrf2/血红素加氧酶 (heme oxygenase-1, HO-1)通路对心肌缺血再灌注（I/R）大鼠内质网应激型凋亡、心肌凋亡和纤维化的影响。  方法  构建心肌I/R损伤大鼠模型,将大鼠随机分为5组:对照组、I/R 模型组、Gal 1 mg/kg组、Gal 2 mg/kg组、Gal 4 mg/kg组进行后续实验。多普勒超声检测各组大鼠左室射血分数（LVEF）、左心室舒张末期容积（LVEDV）、左心室收缩末期容积（LVESV）、左心室壁厚度（LVWT）、左室短轴缩短率（FS）;HE染色检测心肌组织病理损伤程度;免疫组化检测Caspase-3阳性表达率;RT-PCR检测心肌Caspase-3 mRNA表达;蛋白免疫印迹检测内质网应激因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)、cleaved Caspase-12、生长抑制和DNA损伤诱导蛋白(growth arrest and DNA damageinducible protein 34,GADD34)、免疫球蛋白重链结合蛋白(immunoglobulin heavy-chain-binding protein, BiP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA )、Collagen Ⅰ、AMPKα1、Nrf2、HO-1蛋白表达水平;并加入AMPK的抑制剂Compound C进行验证。  结果  与I/R 模型组比较,Gal 各组心肌组织病理损伤程度明显改善,cleaved Caspase-3阳性表达率和Caspase-3 mRNA水平表达降低（P<0.05）;Gal 2 mg/kg、Gal 4 mg/kg组LVWT、FS、LVEF升高（P<0.05）,LVEDV、LVESV降低（P<0.05）,CHOP、cleaved Caspase-12、α-SMA、Collagen Ⅰ、AMPKα1、Nrf2、HO-1蛋白表达降低（P<0.05）,GADD34、BiP蛋白表达升高（P<0.05）。加入AMPK抑制剂Compound C后,与I/R模型组相比较,CC 组AMPKα1、Nrf2、HO-1、BiP蛋白水平降低（P<0.05）,CHOP、α-SMA、Collagen Ⅰ蛋白水平升高（P<0.05）,LVESV、FS降低（P<0.05）,Caspase-3 mRNA水平升高（P<0.05）。与CC组比较,CC+Gal 4mg/kg组AMPKα1、Nrf2、HO-1、BiP蛋白水平升高（P<0.05）,CHOP、α-SMA、Collagen Ⅰ蛋白水平降低（P<0.05）,LVESV、FS升高,Caspase-3 mRNA水平降低（P<0.05）。  结论  氢溴酸加兰他敏介导AMPKα1/Nrf2/HO-1通路可调节心肌缺血再灌注大鼠内质网应激型凋亡、心肌凋亡和纤维化。     

基于TWEAK/Fn14信号通路探讨大黄酚对OVA诱导哮喘小鼠的保护作用

[目的] 观察大黄酚对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠模型的保护作用,并探讨肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子（TWEAK）/成纤维细胞生长诱导因子14（Fn14）信号通路与其保护作用的关系。[方法] 60只C57BL/6小鼠按体质量随机分为正常对照组（CON组）、模型组（OVA组）、地塞米松阳性对照组（DEX组）、大黄酚低剂量组（RHU-L组）、大黄酚中剂量组（RHU-M组）和大黄酚高剂量组（RHU-H组）,每组10只。实验结束后,对各组小鼠的哮喘症状进行评分;Diff-Quick染色法计量各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数。苏木精-伊红（HE）染色法观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法检测各组小鼠BALF中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量;免疫组化法检测各组小鼠肺组织中TWEAK蛋白的表达水平。蛋白免疫印迹法检测各组小鼠肺组织TWEAK/Fn14信号通路蛋白TWEAK和Fn14的表达水平。[结果] 大黄酚可明显降低哮喘症状评分（P<0.05）,减少哮喘小鼠BALF中总细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量（P<0.05）,改善肺组织的病理学变化,降低BALF中IL-4、IL-5、TNF-α和IL-1β炎症因子的水平（P<0.05）,减少肺组织中TWEAK和Fn14蛋白表达（P<0.05）。[结论] 大黄酚对OVA致哮喘小鼠模型具有较好的保护作用,其可能与调节TWEAK/Fn14信号通路有关。     

参麦注射液对机械通气相关肺损伤大鼠肺炎性反应的影响

目的：探讨参麦注射液对机械通气相关肺损伤（VILI）大鼠肺炎性反应的影响。方法：健康成年雄性SD大鼠30只,体质量300~350 g,随机分为3组（n=10）：常规潮气量通气组（TV组,潮气量8 m L/kg）、大潮气量通气组（HV组,潮气量40 m L/kg）、大潮气量通气＋参麦注射液组（HS组）。HS组于机械通气前30min通过尾静脉注射10 m L/kg参麦注射液。机械通气4 h后抽取股动脉血行血气分析,留取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）,计算大鼠肺湿干重比（W/D值）和肺泡通透性指数（PPI）,测定BALF中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素10（IL-10）浓度,测定肺组织匀浆Na＋-K＋-ATP酶活性,观察肺组织病理学变化。结果：与TV组相比,机械通气4 h后HV组Pa O2下降,W/D值和PPI升高,BALF中TNF-α、IL-1β及IL-10浓度增加,TNF-α/IL-10比值升高,Na＋-K＋-ATP酶活性降低（P〈0.05）,肺组织出现明显损伤;与HV组相比,HS组Pa O2升高,W/D值、PPI及TNF-α/IL-10比值降低,TNF-α及IL-1β浓度降低,IL-10浓度、Na＋-K＋-ATP酶活性增高（P〈0.05）,肺组织损伤程度减轻。结论：参麦注射液可减轻炎性反应,改善肺水代谢,从而减轻VILI。     

雪菊中一种二氢黄酮醇糖苷对小鼠酒精性急性胰腺炎的作用研究

  目的  探讨雪菊中黄酮类化合物(2R, 3R)-二氢槲皮素7-O-β-D-吡喃葡萄糖(C1)可否减轻脂肪酸乙酯诱导的小鼠酒精性急性胰腺炎(FAEE-AP)的损伤。  方法  将30只健康SPF级小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组,每组6只。除对照组外,其他组小鼠均采用2次腹腔注射1.75 g/kg乙醇和200 mg/kg棕榈油酸的混合物,诱导酒精性急性胰腺炎模型。低、中、高3个剂量组在第0 h、4 h和8 h分别予以12.5、25、50 mg/kg C1腹腔注射。造模后24 h,检测其血清淀粉酶、脂肪酶和白细胞介素(IL)-6水平,胰腺组织胰蛋白酶活性,胰腺和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,HE染色观察胰腺组织病理学改变,并进行免疫组织化学染色检测胰腺组织中核因子-E2相关受体2(Nrf2)的表达。  结果  模型组胰腺组织病理评分,血清淀粉酶、脂肪酶和胰腺胰蛋白酶活性,血清IL-6水平、胰腺和肺的MPO活性均高于对照组(P < 0.01)。与模型组相比,低剂量(12.5 mg/kg)组的胰腺组织病理明显改善,评分差异有统计学意义(P < 0.05),且血清淀粉酶、脂肪酶和胰腺胰蛋白酶活性,血清IL-6水平、胰腺和肺的MPO活性降低(P < 0.05),并能上调胰腺组织中Nrf2表达。  结论  12.5 mg/kg C1能够通过增强Nrf2的表达,下调炎性因子IL-6,减轻FAEE-AP的损伤。     

机械通气对小鼠肺损伤的初步研究

目的建立小鼠机械通气肺损伤(VILI)模型,研究大潮气量、高浓度氧疗以及不同机械通气时间对VILI的影响及其可能机制。方法将C57BL/6雄性小鼠随机分为9组,对小鼠进行机械通气,再对小鼠进行支气管肺泡灌洗,采用双抗体夹心法检测肺泡灌洗液中总蛋白含量和炎症因子水平;小鼠肺组织石蜡包埋切片后行HE染色,显微镜下观察肺组织形态变化及损伤程度。结果大潮气量组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低潮气量组(P<0.05);高浓度氧疗组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低浓度氧疗组(P<0.05),并且随着通气时间的延长而升高;与正常对照组相比,各实验组小鼠肺泡灌洗液中蛋白含量明显升高(P<0.01);HE染色显示大潮气量机械通气4 h后,小鼠肺组织肺间隔明显增厚、炎性细胞浸润以及肺泡中出现渗出物,部分肺泡中出现红细胞的渗出等。结论大潮气量、高浓度氧疗均产生了明显的VILI,主要表现为肺组织急性炎症反应、渗透性肺水肿、氧化应激反应。     

α1-抗胰蛋白酶对急性呼吸窘迫综合征大鼠机械通气肺损伤的治疗作用

目的评估α1-抗胰蛋白酶(AAT)是否可减轻急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠接受机械通气后的呼吸机相关肺损伤(VILI)。方法大鼠随机分为假手术组(S组)、机械通气组(V组)和机械通气/AAT组(VA组)。S组大鼠仅接受麻醉,V组和VA组大鼠接受脂多糖模拟ARDS,然后机械通气4 h。在通气开始时,V组大鼠股静脉给予盐水,VA组大鼠接受股静脉给予AAT。测量氧合指数(PaO2/FiO2)、肺湿/干重比(W/D),检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度、弹性蛋白酶浓度、中性粒细胞和巨噬细胞计数,检测BALF中的炎症因子和血清中的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)浓度,测量肺内氧化应激反应,观察肺组织学损伤和细胞凋亡情况。结果与S组比较,V组和VA组大鼠PaO2/FiO2显著降低,BALF中的蛋白质浓度和肺W/D明显升高,BALF和外周血中炎症因子浓度显著升高,BALF中炎症细胞计数增高;丙二醛(MDA)浓度、髓过氧化物酶(MPO)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)活性显著增加;V组和VA组损伤严重,凋亡细胞数明显增加。与V组比较,VA组PaO2/FiO2显著提高,肺W/D和BALF蛋白浓度降低,BALF中的巨噬细胞和中性粒细胞的数量以及弹性蛋白酶的浓度显著降低;BALF中的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6降低,白细胞介素-10升高;外周血中的ICAM-1和MIP-2降低;MDA浓度、MPO和NADPH活性显著降低,组织损伤明显减轻,细胞凋亡数量明显减少;Bax、凝溶胶蛋白和裂解的胱天蛋白酶-3表达降低,但Bcl-2的表达增强(P<0.05)。结论 AAT可减轻ARDS大鼠的VILI。AAT给予的保护作用可能与AAT的抗炎、抗氧化应激反应和抗细胞凋亡作用有关。     

电针预处理对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织中NEK7-NLRP3炎症小体激活的影响

目的 观察电针预处理“足三里”穴和“尺泽”穴对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中NEK7-NLRP3炎症小体激活的影响,探讨电针预处理在脓毒症ALI中发挥的保护效应及可能机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组、电针预处理+对照组、模型组、电针预处理+模型组,每组10只。各模型组采用腹腔注射脂多糖(LPS)的方法建立脓毒症ALI大鼠模型。各电针预处理组于LPS造模前1周进行连续7 d电针预处理,疏密波,频率4 Hz/20 Hz,强度1～2 mA,持续30 min。检测各组大鼠肺功能;HE染色法观察大鼠肺组织病理学变化;测定大鼠肺组织湿/干质量比值(W/D);ELISA法检测大鼠血浆及肺组织中炎症因子IL-1β、IL-18含量;免疫荧光观察大鼠肺组织中ASC蛋白阳性表达;Western blot法检测大鼠肺组织中NEK7、NLRP3、Caspase-1及IL-1β蛋白的表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气量(FEV_0.1)、第0.3秒用力呼气量(FEV_0.3)、FEV_0.1/FVC、...     

沙丁胺醇对老年大鼠呼吸机相关肺损伤的干预作用

目的 探讨沙丁胺醇对老年大鼠呼吸机相关肺损伤（VILI）的干预作用.方法 将24只雄性Wistar老龄大鼠随机分为3组：正常对照组（第1组）、VILI未治疗组（第2组）、沙丁胺醇治疗组（第3组）,各接受不同潮气量的通气,通气时间为4h.检测各组大鼠左肺肺组织黄嘌呤氧化酶（XOD）与超氧物歧化酶（SOD）的活性,以及IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α和丙二醛（MDA）的含量,同时观察肺组织HE染色和电镜下的变化.结果 第2组大鼠肺组织SOD与XOD的活性较第1组显著降低,而第3组较第2组明显提高（P均＜0.01）.第2组大鼠肺组织MDA、TNF-α、IL-2和IL-6含量较第1组升高（P均＜0.01）,第3组较第2组则显著降低（P均＜0.01）,各组大鼠肺组织IL-8含量差异无统计学意义（P＞0.05）;第2组大鼠肺组织HE染色显示炎症浸润明显,第3组较第2组明显减轻;电镜下第2组大鼠肺组织细胞及细胞器肿胀,毛细血管大量开放、充血,中性粒细胞激活,肺泡透明膜形成,第3组以上表现较第2组明显减轻.结论 沙丁胺醇能够减轻老年大鼠呼吸机相关肺损伤的炎症反应,提高了多种抗氧化物质的活性,改善微循环,从而减轻肺水肿的程度,对肺组织起到一定的保护作用.     

截断疗法与常规疗法抑制流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎症作用的比较?

目的比较"截断疗法"和"常规疗法"对流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎症反应的作用,以研究"截断疗法"优于"常规疗法"的作用机制,及与病毒感染后机体发生的炎症级联反应间的关系。方法 Balb/c小鼠192只,分为正常组、模型组、常规疗法组和截断疗法组,以50μL 30 LD50流感病毒鼠肺适应株FM1病毒液滴鼻感染后1 h灌胃给药。正常组和模型组以蒸馏水灌胃;常规疗法组第1、2、3天以银翘散水煎剂灌胃,第4、5、6、7天以犀角地黄汤水煎剂灌胃;截断疗法组第1~7天以犀角地黄汤合银翘散水煎剂灌胃;每日给药2次,共给药7 d。以上处理的小鼠分别于第2、4、6、8天摘眼球放血处死并取材、检测。观察肺泡灌洗液(BALF)白细胞总数,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠肺组织匀浆上清中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平,实时荧光定量PCR(Real-Time-PCR)检测小鼠肺组织中NLRP3 mRNA的表达。结果截断疗法组和常规疗法组BALF中白细胞总数、IL-1β和IL-18,及NLRP3 mRNA与模型组比较均有不同程度下降,但截断疗法组在第2天BALF中白细胞总数、IL-1β和IL-18水平与模型组比较有显著降低(P0.01),而常规疗法组尚未显示出明显的作用;第8天截断疗法组白细胞总数明显低于常规疗法组,有显著性差异(P0.01)。感染后第4天,模型组小鼠肺组织中高表达NLRP3 mRNA,截断疗法组NLRP3 mRNA表达明显减少,常规疗法组与模型组比差异不显著。结论截断疗法在感染早期即可抑制固有免疫应答所诱发的炎症反应,有效阻止了随后的炎症级联反应的发生,截断疾病的传变。其机制可能与抑制NLRP3炎性体的形成、干扰IL-1β和IL-18的成熟和分泌有关。