rhEPO对光损伤诱导的RPE细胞Caspase-3表达的作用

目的 探讨促红细胞生成素（EPO）抗光损伤的人视网膜色素上皮（RPE）细胞凋亡的具体作用机制.方法 取成人ARPE-19细胞株传代培养的2～5代细胞建立光损伤模型,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）和免疫组织化学法定量检测不同含量EPO干预治疗前后RPE细胞Caspase-3表达的变化,并添加特异性Jak2激酶抑制剂AG490和PKB抑制剂CTMP,检测RPE细胞Caspase-3表达的变化.结果 重组人促红细胞生成素（rhEPO）可明显减少RPE细胞光损伤后Caspase-3的表达,以40 U/ml EPO组结果最明显;加入AG490,EPO对Caspase-3的抑制作用被阻断;加入CTMP,Caspase-3的表达又增强.结论 rhEPO抗光损伤诱导的RPE细胞凋亡作用机制之一可能是抑制Caspase-3的表达,Jak2的PIK3/PKB途径可能是EPO抑制Caspase-3的一条作用途径.     

大鼠视觉发育关键期视网膜相干光断层成像变化与Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达的相关性研究

目的 了解SD大鼠视觉发育关键期内视网膜厚度的变化,探讨细胞凋亡的相关作用.方法 实验研究.选择新生SD大鼠50只,其中10只(20只眼)于生后14、18、21、24及42 d行双眼眼底相干光断层扫描(OCT),测量视网膜厚度.另10只大鼠(20只眼)分别于生后14、18、21、24及42 d各取2只大鼠(4只眼),提取视网膜组织总RNA,实时荧光定量PCR法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平.另20只大鼠(40只眼)于各对应时间点取4只(8只眼),制作眼球石蜡切片行HE染色并行视网膜厚度测量.同时取10只大鼠(20只眼)于各对应时间点取2只(4只眼)制作冰冻切片行TUNEL染色.对不同时间点的视网膜厚度,Bcl-2、Bax及Caspase-3的mRNA相对表达量进行方差分析,对两种方法所测视网膜厚度进行线性回归分析.结果 大鼠生后14、18、21、24及42 d视网膜厚度OCT测量值分别为(243.42±13.83)、(218.78±8.21)、(195.42±8.02)、(195.74±14.85)及(190.79±11.70)μm,差异有统计学意义(F=15.425,P=0.000).在大鼠生后3周内,视网膜厚度逐渐变薄,此后变化不显著.其结果与HE切片视网膜厚度测量呈线性相关(R=0.794,P=0.000).比较不同时间点大鼠视网膜组织Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA相对表达量,差异均有统计学意义(F=18.684,F=47.307,F:49.611;P=0.000).Bax和Caspase-3 mRNA表达呈增加趋势,并在生后24 d呈现峰值,生后42 d表达量明显下降.TUNEL染色结果显示生后18 d至42 d视网膜神经节细胞层、内核层和外核层均可见较多凋亡细胞,生后42 d视网膜细胞凋亡明显减少.结论 视觉发育关键期内大鼠视网膜厚度逐渐变薄.Cirrus HD-OCT可较准确测量大鼠视网膜厚度,是观察视网膜形态学变化的有效检查方法之一.视觉发育关键期内,细胞凋亡参与大鼠视网膜发育,可能影响视网膜厚度的变化.

Abstract：

Objective To observe the changes of retinal thickness during critical period plasticity in rat, and to investigate whether apoptosis participates in the structural forming of retina. Methods Experimental research. 50 normal newborn pups of SD rat were randomly selected in the experiment In vivo consecutive scanning of retinal image was taken and the retinal thickness from RPE to ILM was recorded in 10 pups (20 eyes) with spectral domain optical coherence tomography (OCT) at postnatal day 14 (P14), P18, P21, P24 and P42. Bcl-2, Bax, Caspase-3 Mrna was assessed with fluorescent quantitative real-time polymerase chain reaction after total RNA extracted from 4 retinas of 2 pups at each time point from P14 to P42. Histological measurement of retinal thickness of sections with HE staining from 4 pups (8 eyes) at each time point was compared with the results of OCT scanning. TUNEL staining was used to detect the apoptotic cells in retinal cyrosections of 2 pups (4 eyes) at the same time point The data were analyzed by One-way ANOVA and Linear Regression through SPSS 11.5 software. Results There was significant difference between the retinal thickness measured through OCT in pups from P14 to P42 (F = 15.425 ,P = 0. 001). And the values were (243. 42 ± 13. 83) μm at P14, ( 218. 78 ± 8. 21) (μm at P18, (195.42 ± 8. 02) μm at P21, (195. 74 ± 14. 85) μm at P24, (190. 79 ± 11. 70) um at P42. The retinal thickness measured through OCT decreased significantly during the first 3 weeks after birth. The results of OCT measurement had linear correlation with histology measurement ( R = 0. 794, P = 0. 000 ) . There was significant difference between Mrna expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in pups from P14 to P42 ( F = 18.684, F=47. 307,F =49. 611 ;P =0.000). The relative expression of Bax and Caspase-3 peaked at P24 while Bcl-2 was much more stable. There were a lot of apoptotic cells in the ganglion cells layer, the inner nuclear layer and the outer nuclear layer during P18 to P24 by TUNEL staining. And the apoptosis alleviated at P42. Conclusions The retinal thickness decreases when the retina continues to develop during critical period plasticity. Cirrus HD-OCT can be used as an effective instrument to show the layers of retina in rat in vivo. Apoptosis participates in the course of retinal development which possibly leads to the thinning of retina.     

光损伤对大鼠血-视网膜屏障功能的影响

目的：探讨强光对大鼠血－视网膜屏障功能的影响。方法：大鼠随机分为光照组及对照组,光照组大鼠经散瞳后进行10000lx强光照射（12h光照,12h避光,连续1～14d）,对照组只接受自然光线照射。分别于强光照射后第1、3、7、14 d 摘除相应的光照组和对照组大鼠双侧眼球;并用HE染色观察视网膜各层结构变化,用电镜观察视网膜超微结构变化,用伊凡思蓝（Evans blue,EB）灌注后激光共聚焦显微镜下微循环成像及分光光度法定量检测视网膜微循环通透性变化,来评估血－视网膜屏障变化。结果：大鼠在强光照射1d后就出现视网膜光感受器细胞变性、外节膜盘脱落、外核层厚度变薄等超微结构改变,并随着强光照射持续而逐渐加重,3 d后出现光感受器细胞凋亡,至14 d时外核层厚度已明显变薄、细胞数也明显减少。大鼠在强光照射1 d后视网膜血管就出现EB染料渗漏,至14 d时EB染料渗漏最明显。结论：强光照射可导致大鼠视网膜外核层光感受器细胞变性、凋亡,外核层厚度变薄、细胞数减少,血－视网膜屏障结构、功能破坏。     

益气明目丸对视网膜色素变性大鼠视网膜Bax、Caspase-3表达的影响

目的　观察益气明目丸对视网膜色素变性大鼠视网膜中Bax、Caspase-3表达的影响。方法　24只RCS大鼠分为3组,每组8只,雌雄各半,其中,空白组:RCS（rdy+/+,p+/+）大鼠灌胃生理盐水;模型组:RCS（rdy-/-,p-/-）大鼠灌胃生理盐水;益气明目丸组:RCS（rdy-/-,p-/-）大鼠灌胃益气明目丸悬浊溶液。灌胃30 d后,HE染色观察各组视网膜各层结构,免疫组织化学染色法检测各组视网膜组织中Bax、Caspase-3的平均光密度值,Western blot法测定各组视网膜组织中Bax、Caspase-3蛋白的相对表达量。结果　HE染色结果显示,益气明目丸组大鼠视网膜厚度明显高于模型组,感光细胞核数目也较模型组增多,外丛状层、外核层、视杆视锥层较模型组结构更清晰。免疫组织化学染色检测结果显示,益气明目丸组Bax、Caspase-3平均光密度值（0.133±0.030、0.069±0.024）均较模型组(0.211±0.036、0.119±0.027)减少（均为P＜0.01）。Western blot检测结果显示,益气明目丸组Bax蛋白、Caspase-3蛋白相对表达量（0.374±0.051、0.628±0.045）均明显低于模型组(0.768±0.061、0.802±0.074),差异均有统计学意义（均为P＜0.01）。结论　益气明目丸对视网膜色素变性大鼠视网膜的超微结构具有保护作用;益气明目丸通过抑制视网膜上Bax、Caspase-3的表达减轻视网膜感光细胞的凋亡,达到保护视细胞的目的。     

视网膜光损伤中TIMP-1、ERK-1的表达及促红细胞生成素对其影响

目的　研究实验性光损伤小鼠视网膜色素上皮细胞（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ,ＲＰＥ）中金属蛋白酶组织抑制物-１（ｔｉｓ-ｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-１,ＴＩＭＰ-１）及细胞外信号调节蛋白激酶１（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ-１,ＥＲＫ-１）表达的变化,以及促红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ,ＥＰＯ）对其的影响,探讨ＥＰＯ对视网膜光损伤发挥保护作用的机制。方法　建立大鼠视网膜光损伤动物模型,于小鼠光照前腹腔注射重组人促红细胞生成素（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ,ｒｈＥＰＯ）,采用ＨＥ染色观察ＲＰＥ细胞形态学变化,免疫组织化学法检测其ＴＩＭＰ-１、ＥＲＫ-１蛋白的表达。结果　光损伤可以造成小鼠视网膜ＲＰＥ细胞渐进性的破坏。外源性的ＥＰＯ可以促进光损伤后视网膜ＲＰＥ细胞ＴＩＭＰ-１及ＥＲＫ-１表达的增加。随光照时间延长,单纯光照组ＲＰＥ细胞密度逐渐减少,光照后７ｄＲＰＥ细胞密度与正常对照组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。光照后相同时间点,ＥＰＯ处理组的ＲＰＥ细胞密度较单纯光照组稍有增加,光照后７ｄ二者差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。光照后各时间点,ＥＰＯ处理组均较单纯光照组中ＥＲＫ-１的表达明显增强（均为Ｐ＜０．０５）。光照后６ｈ、７ｄ,单纯光照组和ＥＰＯ处理组中ＴＩＭＰ-１的表达差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;自光照后１２ｈ起至光照后９６ｈ,各时间点ＥＰＯ处理组较单纯光照组中ＴＩＭＰ-１的表达增强（均为Ｐ＜０．０５）。ＥＰＯ处理组ＲＰＥ中ＴＩＭＰ-１的表达与ＥＲＫ-１的表达正相关（ｒ＝０．７９,Ｐ＝０．０３）。结论　外源性ＥＰＯ通过增加光损伤后视网膜ＲＰＥ细胞ＴＩＭＰ-１的表达,有利于ＭＭＰｓ／ＴＩＭＰ平衡的恢复,进一步证实ＥＰＯ对视网膜光损伤的保护作用。ＥＰＯ对ＲＰＥ细胞ＴＩＭＰ-１分泌和表达的调节可能经由ＭＡＰＫ途径。     

香椿叶提取物对高脂大鼠视网膜组织保护作用的研究

目的　探讨香椿叶提取物（toona sinensis leaf extract,TSLE）对高脂大鼠视网膜组织的保护作用及对B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白和Bcl-2相关x蛋白（Bcl-2 associated x protein,Bax）表达的影响。方法　雄性SD大鼠24只,随机分为正常组（N组）、高脂模型组（HF组）和高脂模型+TSLE组（HF+TSLE组）,后两组高脂饮食诱导高脂血症模型;8周后确认造模成功,HF+TSLE组给予TSLE水溶液灌胃4周,N组和HF组给予相同剂量生理盐水。12周末对大鼠进行视觉电生理、血清血脂总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）和高密度脂蛋白-胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）检测,HE染色,免疫组织化学和Western bloting检测Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达,分析凋亡蛋白Bax的表达水平与电生理功能异常的相关性。结果　HF组TC、TG、LDL-C较N组高,HDL-C降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;HF+TSLE组TC、TG、LDL-C较HF组降低,HDL-C明显升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;HF+TSLE组HDL-C较N组降低,TC、TG、LDL-C较N组增加,差异均无统计学意义（均为P>0.05）。三组大鼠a波潜伏期比较,HF组较N组延长,HF+TSLE组较HF组缩短,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;HF+TSLE组较N组延长,差异无统计学意义（P>0.05）。三组大鼠b波潜伏期差异无统计学意义（P>0.05）;三组a波、b波振幅差异均无统计学意义（均为P>0.05）。HF组Bcl-2蛋白表达水平表达水平较N组显著降低,Bax蛋白较N组升高;HF+TSLE组较HF组Bcl-2蛋白表达水平升高、Bax蛋白表达明显下降。各组Bax蛋白表达水平与a波和b波潜伏期均呈正相关（均为P<0.05）,与a波和b波振幅均无相关性（均为P>0.05）。结论　TSLE对脂代谢异常大鼠视网膜具有保护作用,并且可能是通过调节Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达来发挥作用的。     

五花血藤提取物对大鼠视网膜缺血再灌注损伤中凋亡相关因子表达的影响

目的　探讨五花血藤提取物（sargentodoxa cuneata extracts,SCE）对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤（RIRI）中凋亡相关因子Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响。方法　选取健康清洁级成年SD大鼠90只,随机分成对照组、RIRI组与SCE组,每组30只。于RIRI后6 h、12 h、24 h、48 h与72 h时,每组分别随机处死6只大鼠进行相关实验。通过Nissl染色观察各组大鼠视网膜神经细胞形态学的变化,免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜内各细胞层凋亡相关因子Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达。结果　对照组视网膜神经节细胞内Nissl小体丰富,染色较深,呈块状分布;RIRI组Nissl小体较对照组少,染色浅且分布不均;SCE组染色情况均较RIRI组有所改善。Bcl-2蛋白在对照组中几乎不表达,在24 h RIRI组中其阳性表达开始增强,48 h时达到高峰,在SCE组各个时间点上Bcl-2蛋白阳性表达均多于RIRI组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Bax蛋白在对照组中略有表达,在12 h RIRI组中其阳性表达持续增多,24 h时达到高峰,在SCE组各个时间点上Bax蛋白阳性表达均低于RIRI组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Caspase-3蛋白在对照组中几乎不表达,在6 h RIRI组中表达开始升高,12 h时达到高峰,在SCE组各个时间点上Caspase-3蛋白阳性表达均低于RIRI组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　SCE可能通过上调Bcl-2蛋白表达的同时下调Bax、Caspase-3蛋白的表达来发挥抗凋亡作用,从而对大鼠RIRI起到保护作用。     

地塞米松对脂多糖诱导人视网膜色素上皮细胞炎症损伤及NLRP3/Caspase-1通路的影响

目的探究地塞米松(Dex)对脂多糖(LPS)诱导人视网膜色素上皮(HRPE)细胞炎症损伤及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)通路的影响。方法体外培养ARPE-19细胞株,MMT法检测不同浓度Dex处理细胞24 h、48 h、74 h对LPS诱导ARPE-19细胞存活率的影响,确定Dex最佳处理浓度和时间。ARPE细胞随机分为:正常对照组(NC组)、LPS组(5 mg·L^-1 LPS)、Dex组(0.20 mol·L^-1 Dex)、Dex+LPS组(0.20 mol·L^-1 Dex+5 mg·L^-1 LPS),RT-qPCR检测各组细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、NLRP3、Caspase-1 mRNA相对表达量,ELISA法测定TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达水平,Western blot检测NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平。结果同一时间点,与NC组比较,LPS组ARPE-19细...     

可见光对培养的人视网膜色素上皮细胞内碱性成纤维细胞生长因子、成纤维细胞生长因子受体1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因及 caspase-3的影响

目的　观察可见光诱导的培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中 ,RPE细胞内碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)、B细胞淋巴瘤 /白血病 2基因(bcl 2 )及caspase 3的表达变化。方法　建立可见光诱导培养的人RPE细胞凋亡的模型 ,通过细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、酶联免疫测定等方法 ,对培养的人RPE细胞内bFGF和其受体FGFR1的mRNA表达变化、Bcl 2表达改变以及caspase 3的活性变化进行了检测。 结果(1)光照后 6及 12h ,培养的人RPE细胞胞质内Bcl 2蛋白的表达有一定的下降趋势 ,但与无光照组之间差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。光照后 2 4h ,Bcl 2蛋白表达下降明显 (P <0 0 1)。bcl 2mRNA表达与上述蛋白表达变化相似 ,但早在光照 12h后已能检测到其表达下降。 (2 )光照后 6hbFGF及FGFR1的表达尚无明显改变 (P >0 0 5 ) ,随着时间延长 ,其表达增加的差异具有显著意义(P <0 0 5 )。(3)光照后caspase 3活性随时间延长而明显增加 ,与未光照时比较 ,光照结束后 6、12及2 4h活性差异有显著意义 (P <0 0 5 )。 12和 2 4h间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　可见光照诱导培养的人RPE细胞凋亡时 ,RPE细胞内bcl 2表达下降 ,内源性bFGF及FGFR1上调 ,caspase 3     

N-乙酰-5-羟色胺(NAS)对视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响.方法 取健康成年Sprague-Dawley大鼠66只,采用随机数字表法随机分为正常对照组(6只)、缺血再灌注组(30只)与药物组(30只),药物组于造模前30 min腹腔注射5 mg·kg-1NAS,缺血再灌注组腹腔注射同等剂量的生理盐水,缺血再灌注组与药物组按RIRI后时间,分为6h、12 h、24 h、48 h、72 h五个亚组.采用HE染色法观察各组视网膜形态学变化,免疫组织化学染色检测各组大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达.结果 HE染色显示正常对照组大鼠视网膜结构清晰,各层细胞排列紧密;缺血再灌注组大鼠RIRI后6h、12 h视网膜各层高度水肿,24h后水肿逐渐减轻,神经节细胞逐渐减少,分布较紊乱,随着时间延长,视网膜神经节细胞大片缺失;药物组6h、12h较缺血再灌注组细胞水肿明显减轻,24h、48 h、72h组较缺血再灌注组细胞排列规整,神经节细胞数量减少减轻.缺血再灌注组视网膜活性Caspase-3阳性细胞数在灌注后6h开始表达增加,阳性细胞数为(561.15±37.19)个·mm-2,24 h达到较高水平,阳性细胞数为(1522.61±84.36)个·mm-2,随后逐渐下降,药物组视网膜各时间点活性Caspase-3阳性细胞数均显著少于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).正常对照组视网膜可见大量Bcl-2阳性细胞;缺血再灌注组RIRI后6 h Bcl-2阳性细胞开始下降,12h后继续减少,24h降至较低水平;药物组各时间点Bcl-2阳性细胞数均显著多于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).正常对照组大鼠视网膜几乎未见Bax阳性细胞;缺血再灌注组RIRI后6h神经节细胞层及内核层可见Bax阳性细胞,24h达到较高水平,48 h开始下降;药物组各时间点Bax阳性细胞均显著少于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 NAS可促进RIRI大鼠视网膜Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,降低活性Caspase-3蛋白表达,减轻细胞凋亡,具有神经保护作用.     

半胱氨酸蛋白酶3、bax和bcl-xl在N-甲基-N亚硝酸脲诱导的大鼠视网膜损伤后的表达

目的 观察N-甲基-N亚硝酸脲（MNU）诱导的大鼠视网膜损伤过程中凋亡相关分子半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、bcl-2相关X蛋白（bax）和B细胞淋巴瘤/白血病-xl（bcl-xl）在视网膜中的时空表达,探讨其在MNU诱导的视网膜损伤中的作用。方法 将鼠龄50 d的30只SPF级雌性SD大鼠随机分为MNU模型组（24只大鼠）和正常对照组（6只大鼠）。模型组按40 mg/kg的剂量腹腔注射MNU建立MNU模型;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水5ml/kg。模型组大鼠根据MNU注射后不同处死时间再分为1、3、7、10 d组,每小组各6只大鼠。正常对照组大鼠注射后3 d处死。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组视网膜中caspase-3、bax和bcl-xl的基因表达情况;免疫荧光技术检测其在视网膜中的表达以及分布的变化,并用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导dUTP 缺口末段标记（TUNEL）法检测视网膜细胞凋亡的变化。结果经病理学检测确定造模成功。RT-PCR检测结果表明,［与正常对照组相比（caspase-3和bax的相对吸光度（RA）值为62.45±7.65、46.53±4.41］,MNU模型1 d 组caspase-3（83.23±8.11,P=0.009）和bax（72.73±9.46,P=0.004）的表达均增强,3 d 组二者表达水平均最高 （caspase-3 RA =140.48±18.40,P=0.000;bax- RA=102.36±13.97,P=0.001）,10 d 组caspase-3的表达水平（RA =47.32±5.37,P=0.027）低于对照组,而10 d bax的表达 （RA=48.27±4.40,P=0.997）基本恢复至对照组水平;bcl-xl在4个造模组中的表达水平（1 d RA =63.29±4.29,P=0.000;3d RA =79.83±5.58,P=0.000;7 d RA=70.19±4.42,P=0.000;10 d RA =66.05±4.97,P=0.000）均高于正常对照组（RA =45.98±3.06）,3 d 组的表达水平最高。MNU诱导后1、3、7 d 组的bax/bcl-xl比值（1 d为1.15±0.14,P=0.143;3 d为1.28±0.16,P=0.001;7 d为1.17±0.08,P=0.079）大于对照组（1.01±0.09）,其中3 d组的比值最大,但10 d 组bax / bcl-xl比值（0.73±0.07,P=0.001）小于对照组。免疫荧光检测结果显示,caspase-3、bax和bcl-xl的表达变化分别与其RT-PCR检测结果一致;正常对照组在视网膜各层均未发现凋亡细胞,MNU 1 d 组的外核层可检测到大量凋亡细胞核［凋亡率（AI）为34.96±3.44,P=0.000］,3 d 组的外核层检测的凋亡细胞最多（AI=76.97±5.83,P=0.000）,10 d 组未检测到凋亡细胞。结论 MNU诱导的视网膜光感受器细胞凋亡可能是通过上调caspase-3及引起bax/bcl-xl表达失衡并明显倾向促进细胞凋亡造成的。     

Autophagy in the eye: Development,degeneration, and aging

Autophagy is a catabolic pathway that promotes the degradation and recycling of cellular components. Proteins, lipids, and even whole organelles are engulfed in autophagosomes and delivered to the lysosome for elimination. In response to stress, autophagy mediates the degradation of cell components, which are recycled to generate the nutrients and building blocks required to sustain cellular homeostasis. Moreover, it plays an important role in cellular quality control, particularly in neurons, in which the total burden of altered proteins and damaged organelles cannot be reduced by redistribution to daughter cells through cell division. Research has only begun to examine the role of autophagy in the visual system. The retina, a light-sensitive tissue, detects and transmits electrical impulses through the optic nerve to the visual cortex in the brain. Both the retina and the eye are exposed to a variety of environmental insults and stressors, including genetic mutations and age-associated alterations that impair their function. Here, we review the main studies that have sought to explain autophagy's importance in visual function. We describe the role of autophagy in retinal development and cell differentiation, and discuss the implications of autophagy dysregulation both in physiological aging and in important diseases such as age-associated macular degeneration and glaucoma. We also address the putative role of autophagy in promoting photoreceptor survival and discuss how selective autophagy could provide alternative means of protecting retinal cells. The findings reviewed here underscore the important role of autophagy in maintaining proper retinal function and highlight novel therapeutic approaches for blindness and other diseases of the eye.