一株高产淀粉酶枯草芽孢杆菌的筛选、鉴定及产酶条件的优化

目的：筛选出α-淀粉酶高产菌株,对其发酵特性及分类鉴定进行研究,为丰富产淀粉酶菌种资源和进一步挖掘该菌株的应用价值奠定基础。方法：通过初筛、复筛获得高酶活菌株XW86,利用传统的形态观察、系统生理生化反应并结合16S rDNA的序列分析,经Blast序列比对构建其系统进化树,确定其分类定位。通过单因素选择实验以及进一步的正交实验和多因素交互实验,进行产酶条件优化。结果：XW86与已报道的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis strain QD517）亲缘关系最近,二者的16S rDNA序列相似性为99%,生理生化反应谱与16S rDNA序列分析一致鉴定为枯草芽孢杆菌。XW86最适产酶条件为：在LB基础培养基中添加0.75%吐温、0.5%淀粉,初始pH 6.5,35℃培养120 h。液体发酵得到的粗酶液酶活可高达2 200 U/dL,比优化前提高2.8倍。结论：初步鉴定XW86为枯草芽孢杆菌,产酶因素的最佳组合对其淀粉酶活性有很大的优化空间。该野生型菌株可为淀粉酶发酵工业新备选菌株的开发应用提供资源,也为进一步克隆获得产淀粉酶基因的研究奠定基础。     

产冷活性β-半乳糖苷酶的菌株的筛选、鉴定及酶特性研究

目的 筛选新的产冷活性β-半乳糖苷酶的菌株,为解决目前工业用β-半乳糖苷酶耗能大、pH要求高的难题创造条件.方法 通过含X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)的筛选培养基在油田附近土壤中分离纯化菌株并进行鉴定,以邻硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)为底物测定酶特性.结果 获得了一株新的产冷活性β-...     

473株产超广谱β-内酰胺酶菌的检出与医院感染关系的探讨

菌株来源：所有菌株均来自本院2002年1月～2008年8月住院及门诊病人的痰、尿、血、分泌物等标本,细菌经鉴定种类,其中,大肠埃希氏菌604株,克雷伯菌268株,其他肠杆菌科菌（包括肠杆菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属、沙雷氏菌届、志贺氏菌属等）259株,质控菌株大肠埃希氏菌ATCC25922及肺炎克雷伯氏菌GY2000分别作为产EsBls阴性和阳性对照菌。     

临床分离株中革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶菌的分布

目的 了解临床分离的革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的分布及耐药性. 方法 对临床分离的革兰阴性杆菌,采用CLSI标准检测产ESBLs菌株. 结果 120株革兰阴性杆菌分离出38株产ESBLs菌,阳性率32%,包括大肠埃希菌、克雷伯菌属、阴沟肠杆菌、弗劳地枸椽酸杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌.其中,第一位是大肠埃希菌 (53.8%, 21 /38),其次产酸克雷伯菌(35.3,6/17)、肺炎克雷伯菌(33.3%,7/20);药敏结果显示除对碳青酶烯类抗生素敏感外,ESBLs阳性株对多种抗生素的耐药率均较高,且明显高于ESBLs阴性株. 结论 本院产ESBLs菌分离率较高,主要以大肠埃希菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌为主.